TRABAJO PRÁCTICO DE LABORATORIO Nº 2: DE CÉLULAS SOMOS.

OBJETIVOS:
 Adquirir destreza en el manejo del material de laboratorio, en la realización de preparados
microscópicos y en el uso del microscopio.
 Identificar estructuras celulares.
MATERIALES APORTADOS POR LOS ALUMNOS:
Una cebolla pequeña– pinza de depilar – una cucharita de té de plástico– –una hoja de papel secante o 1
block de dibujo- un gotero o una jeringa descartable sin aguja – alcohol – 2 pañuelos descartables – tijera -
un vasito descartable pequeño - 1 lápiz negro, 1 azul, 1 marrón y 1 morado - 5 Palillos (escarbadientes)- 1
marcador indeleble- 3 tapas de frascos.
MATERIALES APORTADOS POR LA ESCUELA:
Portaobjetos, cubreobjetos; azul de metileno, lugol, microscopio, lupa estereoscópica, mecheros, muestra
de yogurt. Caja de Petri- Metanol.

I) Observación de bacterias del yogurt

Procedimiento I

1. Coloque un portaobjeto sobre una tapa de frasco y con la jeringa deposite una gota de agua sobre
el mismo.
2. Con un palillo limpio, tome una muestra del líquido del yogurt y realiza un frotis extendiendo
completamente la muestra en la gota de agua y por todo el portaobjetos.
3. Fijen la muestra con calor, para ello, pasen el portaobjetos (con la muestra hacia arriba) sobre la
llama del mechero suavemente varias veces hasta que el agua se evapore. El porta nunca debe
quemar si lo ponemos en el dorso de la mano.
4. Coloque nuevamente el porta sobre la tapa del frasco y cubra la preparación con alcohol o metanol
por unos segundos para eliminar la parte grasa. Escurra el alcohol y deje secar al aire. Luego cubra
el extendido con azul de metileno durante 2 minutos.
5. Lave cuidadosamente el exceso de colorante, para ello vierte agua con la jeringa suavemente. Deje
un par de gotas agua.
6. Coloque el cubre objeto intentando que no queden burbujas de aire.
7. Seque la preparación con papel para no manchar la platina del microscopio.
8. Ubiquen el preparado en el microscopio. Observen, primero con el menor aumento y luego con los
siguientes aumentos. Intenten reconocer las estructuras celulares. Realicen un esquema de lo
observado, indiquen el aumento en cada caso (4 X, 10 X, 40 X) y colóquenles referencias.

Análisis de sus observaciones:

1. ¿Qué forma tienen las células que observaron?
2. ¿Qué conclusiones pueden sacar de la observación con diferentes aumentos?
3. ¿Qué tipo de célula observaron en este caso? ¿Porqué?
4. Hay partes de las células que no pudieron observar. ¿Por qué?

II) Observación de células de la epidermis de la cebolla

Procedimiento II

1. Corte un bulbo de cebolla en cuatro partes. Se observa que cada parte se separa por si sola en
capas llamadas catáfilos. Tome uno de estos catáfilos con la superficie cóncava hacia usted y con
 la trincheta realice un corte en V, y con la ayuda de la pinza despeguen un trocito
semitransparente Tome este fragmento de epidermis, y con la tijera corte tres pedacitos de 3 a
4 mm.
2. Con uno de los trozos de epidermis prepare un montaje así: en un portaobjetos coloque una gota
de agua y con ayuda de un escarbadientes limpio extienda sobre ella una porción de epidermis de
modo que la superficie que estaba en contacto con el catáfilo quede hacia arriba, trate que la
muestra no se rompa y que quede sin dobleces. Cubra el preparado con un cubreobjetos (Para ello
apoyen el cubreobjetos sobre el portaobjeto de manera que formen un ángulo de 45 º, y luego
suéltenlo sobre el preparado; así evitarán que se formen burbujas de aire). Rotulen con el
marcador indeleble indicando el nº de grupo y el tipo de muestra.
3. Ubiquen el preparado en el microscopio. Observen, primero con el menor aumento y luego con los
siguientes aumentos. Intenten reconocer las estructuras celulares. Realicen un esquema de lo
observado, indiquen el aumento en cada caso ( 4 X, 10 X, 40 X) y colóquenles referencias.

4. En otro portaobjetos coloquen una gota de agua y coloquen otro trocito de epidermis de la misma
forma que en el ítem 2. Escurran el agua, coloquen la porta sobre la tapa de un frasco y añadan
unas gotas de azul de metileno. Déjenlo tiñendo 10 minutos y, al cabo de ese tiempo, echen agua
con el gotero o con la jeringa sobre la epidermis, hasta que el agua salga limpia.
5. Sequen los restos de agua con el papel secante y cubran la muestra con un cubreobjetos limpio
(Para ello apoyen el cubreobjetos sobre el portaobjeto de manera que formen un ángulo de 45 º, y
luego suéltenlo sobre el preparado; así evitarán que se formen burbujas de aire). Extraigan el
exceso de líquidos con un trozo de papel secante presionándolo suavemente sobre el cubreobjetos.
(deben tener cuidado cuando usen colorantes por que éstos pueden teñir la ropa y la piel).
6. Ubiquen el preparado en el microscopio. Observen, primero con el menor aumento y luego con los
siguientes aumentos. Intenten reconocer las estructuras celulares. Realicen un esquema de lo
observado, indiquen el aumento en cada caso y colóquenles referencias.

7. Repitan los pasos 4 y 5 pero en lugar de azul de metileno, tiñan la muestra con lugol.
8. Ubiquen el preparado en el microscopio. Observen, primero con el menor aumento y luego con los
siguientes aumentos. Intenten reconocer las estructuras celulares. Realicen un esquema de lo
observado, indiquen el aumento en cada caso y colóquenles referencias.
 Análisis de sus observaciones:
1. ¿Qué forma tienen las células que observaron?
2. ¿Qué partes de las células pudieron observar en el preparado sin colorante en 4 X?
3. ¿Qué partes de las células pudieron observar en el preparado sin colorante en 10 X?
4. ¿Qué partes de las células pudieron observar en el preparado sin colorante en 40 X?
5. ¿Qué conclusiones pueden sacar de la observación con diferentes aumentos?
6. Al teñir el preparado con azul de metileno, ¿qué sucedió, qué parte de la célula se tiñó más?
7. Al teñir el preparado con lugol, ¿qué sucedió, qué parte de la célula se tiñó más?
8. ¿Cuál es la ventaja de utilizar colorantes para observar células con el microscopio?
9. Hay partes de las células que no pudieron observar. ¿Por qué?
10. ¿Qué tipo de células observaron en este caso? ¿Por qué?

III) Observación de las células de la mucosa bucal humana

Procedimiento III
1. Froten con una cuchara de plástico la cara interna de la boca de uno de los integrantes del grupo.
Háganlo en una sola dirección, separando la cuchara después de cada movimiento. Aunque no vean el
material habrán obtenido muchas células.
2. Coloquen las células que sacaron en un portaobjetos limpio golpeando suavemente la cuchara sobre
él, agreguen una gota de agua sobre la muestra y extiendan la muestra con un palillo de dientes
limpio.
3. Fijen la muestra con calor, para ello, pasen el portaobjetos (con la muestra hacia arriba) sobre
la llama del mechero suavemente varias veces hasta que el agua se evapore. La porta nunca debe
quemar si lo ponemos en el dorso de la mano.
4. Coloquen el portaobjetos sobre la tapa de un frasco y cubran la muestra con azul de metileno y
déjenlo tiñendo 10 minutos y, al cabo de ese tiempo, echen agua con el gotero o con la jeringa
sobre la muestra, hasta que el agua salga limpia.
5. Pongan el preparado en el microscopio y observen la muestra con diferentes aumentos. Intenten
reconocer las estructuras celulares. Realicen un esquema de lo observado indicando el aumento en
cada caso y colóquenles referencias.

Análisis de sus observaciones:

1. ¿Qué forma tienen las células que observaron?
2. ¿Qué parte de la célula se coloreó más intensamente?
3. ¿Qué tipo de células observaron en este caso? ¿Por qué?
Análisis y conclusiones finales
1. ¿Todas las células que observaron son iguales? ¿Por qué?
2. ¿Qué estructuras celulares pudieron identificar en cada uno de los preparados observados?
3. ¿Cuál es la célula más pequeña que observaron? ¿Cuál es la más grande?
3. El núcleo ¿Está presente y tiene la misma forma y tamaño en todas las células que observaron?
4. ¿Pudieron observar todas las partes de las células con el microscopio óptico? ¿Por qué?