Presentación del informe

Laboratorio de Bioquímica y metabolismo microbiano.

Práctica 1: Transporte de Glucosa en levaduras.
Sección 2
 INFORME
EQUIPO #5
Martínez Vázquez Andrea Matlacueyatl
Melgoza Melendez Ricardo
Nicólas Cruz Zuric Lizbeth
HIPÓTESIS
Saccharomyces cerevisiae tendrá un mejor desempeño a una
temperatura ambiente y sin ningún agregado ya que el
Dinitrofenol(DNF) y la N-Etilendiamina(NEM) actuaran como
inhibidores del proceso de incorporación de la glucosa haciendo
que los matraces donde estén presentes estos compuestos tengan
menor glucosa transportada.
OBJETIVOS
General: Concluir qué mecanismo de transporte utiliza Saccharomyces cerevisiae
para incorporar la glucosa.

Específicos:

● Observar comportamiento de la levadura cuando haya presencia de

inhibidores.
● Observar a qué temperatura es óptima para que se realice el transporte de
glucosa.
● Realizar cálculos para conocer la concentración de glucosa que se transportó
en cada matraz.
RESULTADOS
RESULTADO CURVA TIPO
A partir de la curva tipo, calcular la ecuación de la recta.
ug Glucosa A (540nm)
0 0

y = ax + b 100
200
0.125
0.3
A=1.99x10-3 (µg de glucosa)-0.05533 300 0.5
400 0.75
Para calcular los µg de glucosa, despejar de la 500 0.978
ecuación de la recta.

µg de glucosa= (A 540 nm - b)/1.99x10-3

Cálculo de la Glucosa residual en (µg)
Para calcular la glucosa residual, se utilizan los datos proporcionados en los
resultados:

Matraz 2 (T Matraz 4 Matraz 5

Tiempo (min) Matraz 1 (4°C) amb) Matraz 3 (DNF) (NEM) (S/Glu)
0 0.780 0.790 0.750 0.740 0.004
10 0.775 0.550 0.300 0.738 0.001
20 0.760 0.200 0.120 0.732 0.002
30 0.730 0.003 0.009 0.730 0.001

Para el matraz #1 en t= 0 min

µg de glucosa= 0.780 + 0.05533__ =
1.99x10-3

µg de glucosa= 419.7 µg de glucosa residual

Cálculo de [Glucosa] residual
[Glucosa]residual= μg glucosa residual

alícuota (ml)

Considerar:

+ alícuota para matraces de 1-4 = 0.2ml

+ alícuota para matraz #5= 0.5ml

Para el matraz #1 en t= 0 min

[Glucosa] residual= 419.7 μg glucosa residual = 2098.5 μg glucosa residual

0.2ml ml

[Glucosa]*FD
Para el matraz #1 a t= 0 min, tenemos:

(2098.5 μg glucosa/ml)(1.5) = 3147.75 μg glucosa/ml

Expresando [Glucosa] en mg/ml 3147.75 ug/ml 1 mg =
3.14775 mg
glucosa
1000 ug ml

Datos del matraz #1 en t= 0min

MATRAZ 5 (S/GLUCOSA)
ug glucosa [Glucosa]residu [Glucosa [Glucosa]residu
Tiempo (min) A (S/Glu) residual al (ug/ml) residual] * FD al (mg/ml)
0 0.004 29.81407035 59.6281407 89.44221106 0.08944221106
10 0.001 28.30653266 56.61306533 84.91959799 0.08491959799
20 0.002 28.80904523 57.61809045 86.42713568 0.08642713568
30 0.001 28.30653266 56.61306533 84.91959799 0.08491959799
PROMEDIO 0.08642713568

[Glucosa] corregida
[Glucosa]residual= mg glucosa residual- [Glucosa] promedio

alícuota (ml)

Para el matraz #1 en t=0 min

[Glucosa]residual= 3.14775mg glucosa - 0.08642 mg glucosa

ml ml
Cálculo [Glucosa] transportada en mg/ml
[Glucosa] transportada = [Glucosa] inicial - [Glucosa] residual

∴ [Glucosa]inicial = [Glucosa] corregida en t= 0 min

Para el matraz #1 en t= 10 min

[Glucosa] transportada = 3.06133 mg/ml - 3.04295 mg/ml= 0.01838 mg/ml

 Resultados de [Glucosa] transportada
MATRAZ 1 (4°C)

ug glucosa [Glucosa]residu [Glucosa [Glucosa]residu [Glucosa]corre [Glucosa]transp

Tiempo (min) A (4°C) residual al (ug/ml) residual] * FD al (mg/ml) gida (mg/ml) ortada (mg/ml)
0 0.780 419.7638191 2098.819095 3148.228643 3.148228643 3.061801508 0
10 0.775 417.2512563 2086.256281 3129.384422 3.129384422 3.042957286 0.01884422111
20 0.760 409.7135678 2048.567839 3072.851759 3.072851759 2.986424623 0.07537688442
30 0.730 394.638191 1973.190955 2959.786432 2.959786432 2.873359296 0.1884422111

MATRAZ 2 (T ambinte)

ug glucosa [Glucosa]residu [Glucosa [Glucosa]residu [Glucosa]corre [Glucosa]transp

Tiempo (min) A (T amb) residual al (ug/ml) residual] * FD al (mg/ml) gida (mg/ml) ortada (mg/ml)
0 0.790 424.7889447 2123.944724 3185.917085 3.185917085 3.100997487 0
10 0.550 304.1859296 1520.929648 2281.394472 2.281394472 2.194967337 0.9060301508
20 0.200 128.3065327 641.5326633 962.298995 0.962298995 0.8758718593 2.225125628
30 0.003 29.31155779 146.5577889 219.8366834 0.2198366834 0.1334095477 2.96758794
 Resultados de [Glucosa] transportada
MATRAZ 3 (DNF)

ug glucosa [Glucosa]residu [Glucosa [Glucosa]residu [Glucosa]corre [Glucosa]transp

Tiempo (min) A (DNF) residual al (ug/ml) residual] * FD al (mg/ml) gida (mg/ml) ortada (mg/ml)
0 0.750 404.6884422 2023.442211 3035.163317 3.035163317 2.948736181 0
10 0.300 178.5577889 892.7889447 1339.183417 1.339183417 1.252756281 1.695979899
20 0.120 88.10552764 440.5276382 660.7914573 0.6607914573 0.5758718593 2.372864322
30 0.009 32.32663317 161.6331658 242.4497487 0.2424497487 0.1560226131 2.792713568

MATRAZ 4 (NEM)

ug glucosa [Glucosa]residu [Glucosa [Glucosa]residu [Glucosa]corre [Glucosa]transp

Tiempo (min) A(NEM) residual al (ug/ml) residual] * FD al (mg/ml) gida (mg/ml) ortada (mg/ml)
0 0.740 399.6633166 1998.316583 2997.474874 2.997474874 2.911047739 0
0.00753768844
10 0.738 398.6582915 1993.291457 2989.937186 2.989937186 2.90351005 2
20 0.732 395.6432161 1978.21608 2967.324121 2.967324121 2.880896985 0.03015075377
30 0.730 394.638191 1973.190955 2959.786432 2.959786432 2.873359296 0.03768844221
DISCUSIONES DE
RESULTADOS
 En el matraz 1 (temperatura a 4°C) se
notó la mayor cantidad de glucosa
residual además de mantenerse
constante en la cantidad de residuo
que dejaba en los intervalos de 10
minutos.

Para el matraz 2 se observa un

transporte de glucosa mucho más
óptimo debido a que no tiene ningún
inhibidor y la temperatura a la cual
se encuentra es la óptima para que
realice el transporte de glucosa.
 ● Para el matraz 3 se observa que la
[Glucosa] transportada fue aumentando
respecto al tiempo. En este matraz se
agregó DNF el cual es un desacoplante
de la cadena de transporte de
electrones, por lo que no va a producir
ATP y disipara el gradiente de H+,
debido a esto vamos a ver que
transportará más glucosa.

● Para el caso del matraz 4 con

n-etilmaleimida se nota que es un inhibidor
para el transporte de glucosa e inactiva a las
proteínas, aunque este tuvo un mejor
rendimiento que el matraz 1.
● Para el matraz 5 aunque no tenía glucosa añadida tuvo una reacción de
transportación de glucosa se observa que la glucosa que se produce no
llega a realizar el transporte debido a que Saccharomyces cerevisiae no es
capaz de realizar este proceso.
CONCLUSIONES
Al término de la práctica observamos que la levadura Saccharomyces
cerevisiae tuvo un resultado favorable a temperatura ambiente con
un mayor transporte de glucosa en el matraz 2 que en el resto de los
matraces, en los otros casos se observó que las condiciones de los
matraces no favorecen este mecanismo de acción por la inclusión de
inhibidores o de una condición ambiental (en este caso, a la baja
temperatura que se encontraba el matraz 1).
Bibliografía
+ FIQ. Mundo microscópico I: Las levaduras. Recuperado el 8 de septiembre de 2021 de:
https://www.fiq.unl.edu.ar/culturacientifica/extension-fiq/mundo-microscopico-i-la-levadura/
+ Casas R. S. (2018). Saccharomyces cerevisiae y Aspergillus oryzae: estimuladores y modificadores de
la fermentación y crecimiento microbiano ruminal. Recuperado el 8 de septiembre de 2021 de:
http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S2224-79202018000200001
+ Transporte activo primario. Recuperado el 8 de septiembre de 2021 de:
https://www.jove.com/science-education/10706/el-transporte-activo-primario?language=Spanish
+ Universidad de Alcalá de Henares, España. (2004). Problemas de metabolismo. Recuperado el 8 de
septiembre de 2021 de:
http://www.biologia.arizona.edu/biochemistry/problem_sets/metabolism/04t.html
+
INFORME EQUIPO 6
Nieto Avila Daniela
Pacheco Carmona Abril Itzel
Pompa Francisco Mariana Lourdes
HIPÓTESIS

Si, el inhibidor N-etilmaleimida puede bloquear la función de las

proteínas acarreadoras entonces no se podrá llevar a cabo el transporte
de la glucosa por difusión facilitada
 OBJETIVO GENERAL

Determinar el tipo de mecanismo de transporte que utiliza la levadura

(Saccharomyces cerevisiae), para poder incorporar glucosa.

OBJETIVOS PARTICULARES
1. Evaluar el efecto del parámetro como la Temperatura a 4ºC en el
transporte de glucosa por S. cerevisiae.
2. Identificar y analizar cómo afecta la adición de inhibidores (2, 4
dinitrofenol y N-etil maleimida) en el transporte de glucosa.
RESULTADOS
Curva tipo de la recta

µg de A(540nm)
glucosa

0 0

100 0.125

200 0.3

300 0.5
A=1.99x10-3 (µg de glucosa)-0.05533
400 0.75
y = ax + b Calculamos los µg de glucosa,
500 0.978
despejando de la ecuación de la recta.

µg de glucosa= (A 540 nm - b) /1.99x10-3

 [Glucosa]residual= μg glucosa residual
Cálculo de [Glucosa] residual
alícuota (ml)
Alícuota

Para matraces de 1-4 = 0.2ml

Para matraz No.5= 0.5ml

Para el matraz No. 1 en t= 0 min

419.7654 μg glucosa residual 1mg

[Glucosa] residual= = 2.0988 mg glucosa residual
0.2ml 1000 μg mL

[Glucosa]*FD 2.0988 mg glucosa 1.5

= 3.1482 mg glucosa/mL
mL
 Tiempo A(540 nm) µg de glucosa [Glucosa] [Glucosa] *F.D
(min) residual RESIDUAL (mg/mL)
(mg/mL

0 0.004 29.8157 0.0596 0.0894471

10 0.001 28.3082 0.0566 0.0849246

20 0.002 28.8107 0.0576 0.0864321

30 0.001 28.3082 0.0566 0.0849246

Promedio= 0.0864321

Tabla 1. Matraz 5

[glucosa]Residual =mg glucosa residual - [glucosa]promedio /alícuota(mL)

Para el matraz 1 en t=0min
[glucosa]Corregida =3.1482mg - 0.0864mg = 3.0618mg/mL
mL
[glucosa]transportada= 3.0618mg/mL- 3.0618mg/mL= 0 mg/mL

Tiempo A(540nm) µg de glucosa [Glucosa] [Glucosa]Residual [Glucosa]

(min) residual RESIDUAL Corregida Transportada
(mg/mL)

0 0.004 419.7654 3.1482 3.0618 0.0000

10 0.001 417.2529 3.1294 3.0430 0.0188

20 0.002 409.7152 3.0729 2.9865 0.0753

30 0.001 394.6398 2.9598 2.8734 0.1884

Tabla 2. Sistema 1
Tiempo (min) Matraz 1 Matraz 2 Matraz 3 Matraz 4
(mg/mL) (mg/mL) DNF NEM
(mg/mL) (mg/mL)

0 0 0 0 0

10 0.0188 1.8279 1.8844 2.1677

20 0.0798 2.2802 2.5626 2.4874

30 0.1885 2.94 2.8906 2.8606

Tabla 3. Cálculo de Glucosa Transportada.

Gráfica 1. Transporte de glucosa de Saccharomyces cerevisiae a diferentes factores
fisicoquimicos.
CONCLUSIÓN
● Se determinó que el tipo de transporte que realiza Saccharomyces cerevisiae
es por difusión simple.
● Se demostró que la levadura a 4°C no puede realizar el transporte de
manera correcta.
● El DNS reacciona con los azúcares reductores mediante una reacción redox,
con lo cual se pueden cuantificar gracias a las distintas coloraciones,
espectrofotometría visible, a la longitud de onda de máxima absorbancia de
540 nm
● El reactivo como DNF bloquea de manera precisa una función que es de
suma importancia para llevar a cabo cierto tipo de transporte pero eso no
impide que Saccharomyces cerevisiae de alguna manera transporte la glucosa
que requiere.
BIBLIOGRAFÍA
◉ Madigan T., Michael. Martinko M., John. Parker, Jack. Brock. Biología
de los microorganismos. 10a edición. Editorial Pearson. Pág. 152.

◉ Rawn, J.D 1989. Bioquímica 1° Ed. Interamericana. Mc Graw Hill.

Madrid. Pág 1023-1248.
INFORME
EQUIPO 7
 INTEGRANTES:
RAMÍREZ JIMÉNEZ INGRID ALEXANDRA

RODRÍGUEZ LOZA MARGARITA DE JESÚS

ROSAS HERNÁNDEZ URIEL ALEJANDRO

VALERIO NAVA CITLALI

 HIPÓTESIS
Si la levadura Saccharomyces cerevisiae lleva a cabo el transporte
de glucosa con un mecanismo de difusión facilitada, entonces dicho
proceso:
● Se verá afectado negativamente por la temperatura.
● No se verá afectado por el 2,4 dinitrofenol (DNF).
● La N-etilmaleimida (NEM) bloqueará las proteínas
transportadoras de glucosa.
OBJETIVO GENERAL

● Concluir cuál es el mecanismo de transporte que la levadura

utiliza para incorporar la glucosa.

OBJETIVOS PARTICULARES

● Determinar cuál es el efecto de la temperatura sobre el

transporte.
● Verificar cuál es el efecto que produce el 2,4 dinitrofenol y
la N-etilmaleimida en el transporte.
RESULTADOS
RESULTADOS
DISCUSIÓN DE RESULTADOS
 CONCLUSIONES

● La hipótesis planteada, sobre el transporte de glucosa en

Saccharomyces cerevisiae, fue verificada en cada uno de sus
supuestos, como sigue:
○ Temperaturas cercanas al punto de congelación del agua (4°C)
detuvieron el transporte.
○ El DNF afectó el transporte.
○ El transporte se vio inhibido con la presencia de N-etilmaleimida
(NEM).
○ El transporte llevado a cabo es activo.
● Las condiciones a las que se somete Saccharomyces cerevisiae en su
medio ambiente, afectarán su transporte de glucosa y por lo tanto su
sobrevivencia.
 REFERENCIAS

● Rawn, J. D.1989. Bioquímica. 1a Ed. Interamericana. Mc Graw Hill. Madrid.

● Stryer, L. 1995 Biochemistry. 4a. Ed. W. H. Freeman and Co. San Francisco.
● López, C;Infante, J. & Trejos, M. 1986. La membrana plasmática.(La relación Estructura - Función). Revista de la
Universidad de La Salle, pp 25-50. Recuperado de:
https://ciencia.lasalle.edu.co/cgi/viewcontent.cgi?article=1906&context=ruls
● Suárez, C; Garrido, N; Guevara, C. 2016. Levadura Saccharomyces cerevisiae y la producción de alcohol. Sobre los
Derivados de la Caña de Azúcar, vol. 50, pp. 20-28 Instituto Cubano de Investigaciones de los Derivados de la Caña de
Azúcar Ciudad de La Habana, Cuba. Recuperado de: https://www.redalyc.org/pdf/2231/223148420004.pdf
● AEPSAD. 2015. 2,4 Dinitrofenol. España. Recuperado de:
https://aepsad.culturaydeporte.gob.es/dam/jcr:63e9eb5b-b38b-4fcb-a3cd-966bbe9aa488/alerta-dinitrofenol.pdf
● ACE. Revista de enología 28.10.03. España. Recuperado de: http://www.acenologia.com/noticia64_02.htm
INFORME EQUIPO 8
-Sánchez Ávila Julio David
-Sánchez Mendoza Jesús Alfonso
-Torres Torres Michelle
Presentación del informe
Laboratorio de Bioquímica y metabolismo microbiano.
Práctica 1: Transporte de Glucosa en levaduras.
Sección 2
 INFORME
EQUIPO #5
Martínez Vázquez Andrea Matlacueyatl
Melgoza Melendez Ricardo
Nicólas Cruz Zuric Lizbeth
HIPÓTESIS
Saccharomyces cerevisiae tendrá un mejor desempeño a una
temperatura ambiente y sin ningún agregado ya que el
Dinitrofenol(DNF) y la N-Etilendiamina(NEM) actuaran como
inhibidores del proceso de incorporación de la glucosa haciendo
que los matraces donde estén presentes estos compuestos tengan
menor glucosa transportada.
OBJETIVOS
General: Concluir qué mecanismo de transporte utiliza Saccharomyces cerevisiae
para incorporar la glucosa.

Específicos:

● Observar comportamiento de la levadura cuando haya presencia de

inhibidores.
● Observar a qué temperatura es óptima para que se realice el transporte de
glucosa.
● Realizar cálculos para conocer la concentración de glucosa que se transportó
en cada matraz.
RESULTADOS
RESULTADO CURVA TIPO
A partir de la curva tipo, calcular la ecuación de la recta.
ug Glucosa A (540nm)
0 0

y = ax + b 100
200
0.125
0.3
A=1.99x10-3 (µg de glucosa)-0.05533 300 0.5
400 0.75
Para calcular los µg de glucosa, despejar de la 500 0.978
ecuación de la recta.

µg de glucosa= (A 540 nm - b)/1.99x10-3

Cálculo de la Glucosa residual en (µg)
Para calcular la glucosa residual, se utilizan los datos proporcionados en los
resultados:

Matraz 2 (T Matraz 4 Matraz 5

Tiempo (min) Matraz 1 (4°C) amb) Matraz 3 (DNF) (NEM) (S/Glu)
0 0.780 0.790 0.750 0.740 0.004
10 0.775 0.550 0.300 0.738 0.001
20 0.760 0.200 0.120 0.732 0.002
30 0.730 0.003 0.009 0.730 0.001

Para el matraz #1 en t= 0 min

µg de glucosa= 0.780 + 0.05533__ =
1.99x10-3

µg de glucosa= 419.7 µg de glucosa residual

Cálculo de [Glucosa] residual
[Glucosa]residual= μg glucosa residual

alícuota (ml)

Considerar:

+ alícuota para matraces de 1-4 = 0.2ml

+ alícuota para matraz #5= 0.5ml

Para el matraz #1 en t= 0 min

[Glucosa] residual= 419.7 μg glucosa residual = 2098.5 μg glucosa residual

0.2ml ml

[Glucosa]*FD
Para el matraz #1 a t= 0 min, tenemos:

(2098.5 μg glucosa/ml)(1.5) = 3147.75 μg glucosa/ml

Expresando [Glucosa] en mg/ml 3147.75 ug/ml 1 mg =
3.14775 mg
glucosa
1000 ug ml

Datos del matraz #1 en t= 0min

MATRAZ 5 (S/GLUCOSA)
ug glucosa [Glucosa]residu [Glucosa [Glucosa]residu
Tiempo (min) A (S/Glu) residual al (ug/ml) residual] * FD al (mg/ml)
0 0.004 29.81407035 59.6281407 89.44221106 0.08944221106
10 0.001 28.30653266 56.61306533 84.91959799 0.08491959799
20 0.002 28.80904523 57.61809045 86.42713568 0.08642713568
30 0.001 28.30653266 56.61306533 84.91959799 0.08491959799
PROMEDIO 0.08642713568

[Glucosa] corregida
[Glucosa]residual= mg glucosa residual- [Glucosa] promedio

alícuota (ml)

Para el matraz #1 en t=0 min

[Glucosa]residual= 3.14775mg glucosa - 0.08642 mg glucosa

ml ml
Cálculo [Glucosa] transportada en mg/ml
[Glucosa] transportada = [Glucosa] inicial - [Glucosa] residual

∴ [Glucosa]inicial = [Glucosa] corregida en t= 0 min

Para el matraz #1 en t= 10 min

[Glucosa] transportada = 3.06133 mg/ml - 3.04295 mg/ml= 0.01838 mg/ml

 Resultados de [Glucosa] transportada
MATRAZ 1 (4°C)

ug glucosa [Glucosa]residu [Glucosa [Glucosa]residu [Glucosa]corre [Glucosa]transp

Tiempo (min) A (4°C) residual al (ug/ml) residual] * FD al (mg/ml) gida (mg/ml) ortada (mg/ml)
0 0.780 419.7638191 2098.819095 3148.228643 3.148228643 3.061801508 0
10 0.775 417.2512563 2086.256281 3129.384422 3.129384422 3.042957286 0.01884422111
20 0.760 409.7135678 2048.567839 3072.851759 3.072851759 2.986424623 0.07537688442
30 0.730 394.638191 1973.190955 2959.786432 2.959786432 2.873359296 0.1884422111

MATRAZ 2 (T ambinte)

ug glucosa [Glucosa]residu [Glucosa [Glucosa]residu [Glucosa]corre [Glucosa]transp

Tiempo (min) A (T amb) residual al (ug/ml) residual] * FD al (mg/ml) gida (mg/ml) ortada (mg/ml)
0 0.790 424.7889447 2123.944724 3185.917085 3.185917085 3.100997487 0
10 0.550 304.1859296 1520.929648 2281.394472 2.281394472 2.194967337 0.9060301508
20 0.200 128.3065327 641.5326633 962.298995 0.962298995 0.8758718593 2.225125628
30 0.003 29.31155779 146.5577889 219.8366834 0.2198366834 0.1334095477 2.96758794
 Resultados de [Glucosa] transportada
MATRAZ 3 (DNF)

ug glucosa [Glucosa]residu [Glucosa [Glucosa]residu [Glucosa]corre [Glucosa]transp

Tiempo (min) A (DNF) residual al (ug/ml) residual] * FD al (mg/ml) gida (mg/ml) ortada (mg/ml)
0 0.750 404.6884422 2023.442211 3035.163317 3.035163317 2.948736181 0
10 0.300 178.5577889 892.7889447 1339.183417 1.339183417 1.252756281 1.695979899
20 0.120 88.10552764 440.5276382 660.7914573 0.6607914573 0.5758718593 2.372864322
30 0.009 32.32663317 161.6331658 242.4497487 0.2424497487 0.1560226131 2.792713568

MATRAZ 4 (NEM)

ug glucosa [Glucosa]residu [Glucosa [Glucosa]residu [Glucosa]corre [Glucosa]transp

Tiempo (min) A(NEM) residual al (ug/ml) residual] * FD al (mg/ml) gida (mg/ml) ortada (mg/ml)
0 0.740 399.6633166 1998.316583 2997.474874 2.997474874 2.911047739 0
0.00753768844
10 0.738 398.6582915 1993.291457 2989.937186 2.989937186 2.90351005 2
20 0.732 395.6432161 1978.21608 2967.324121 2.967324121 2.880896985 0.03015075377
30 0.730 394.638191 1973.190955 2959.786432 2.959786432 2.873359296 0.03768844221
DISCUSIONES DE
RESULTADOS
 En el matraz 1 (temperatura a 4°C) se
notó la mayor cantidad de glucosa
residual además de mantenerse
constante en la cantidad de residuo
que dejaba en los intervalos de 10
minutos.

Para el matraz 2 se observa un

transporte de glucosa mucho más
óptimo debido a que no tiene ningún
inhibidor y la temperatura a la cual
se encuentra es la óptima para que
realice el transporte de glucosa.
 ● Para el matraz 3 se observa que la
[Glucosa] transportada fue aumentando
respecto al tiempo. En este matraz se
agregó DNF el cual es un desacoplante
de la cadena de transporte de
electrones, por lo que no va a producir
ATP y disipara el gradiente de H+,
debido a esto vamos a ver que
transportará más glucosa.

● Para el caso del matraz 4 con

n-etilmaleimida se nota que es un inhibidor
para el transporte de glucosa e inactiva a las
proteínas, aunque este tuvo un mejor
rendimiento que el matraz 1.
● Para el matraz 5 aunque no tenía glucosa añadida tuvo una reacción de
transportación de glucosa se observa que la glucosa que se produce no
llega a realizar el transporte debido a que Saccharomyces cerevisiae no es
capaz de realizar este proceso.
CONCLUSIONES
Al término de la práctica observamos que la levadura Saccharomyces
cerevisiae tuvo un resultado favorable a temperatura ambiente con
un mayor transporte de glucosa en el matraz 2 que en el resto de los
matraces, en los otros casos se observó que las condiciones de los
matraces no favorecen este mecanismo de acción por la inclusión de
inhibidores o de una condición ambiental (en este caso, a la baja
temperatura que se encontraba el matraz 1).
Bibliografía
+ FIQ. Mundo microscópico I: Las levaduras. Recuperado el 8 de septiembre de 2021 de:
https://www.fiq.unl.edu.ar/culturacientifica/extension-fiq/mundo-microscopico-i-la-levadura/
+ Casas R. S. (2018). Saccharomyces cerevisiae y Aspergillus oryzae: estimuladores y modificadores de
la fermentación y crecimiento microbiano ruminal. Recuperado el 8 de septiembre de 2021 de:
http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S2224-79202018000200001
+ Transporte activo primario. Recuperado el 8 de septiembre de 2021 de:
https://www.jove.com/science-education/10706/el-transporte-activo-primario?language=Spanish
+ Universidad de Alcalá de Henares, España. (2004). Problemas de metabolismo. Recuperado el 8 de
septiembre de 2021 de:
http://www.biologia.arizona.edu/biochemistry/problem_sets/metabolism/04t.html
+
INFORME EQUIPO 6
Nieto Avila Daniela
Pacheco Carmona Abril Itzel
Pompa Francisco Mariana Lourdes
HIPÓTESIS

Si, el inhibidor N-etilmaleimida puede bloquear la función de las

proteínas acarreadoras entonces no se podrá llevar a cabo el transporte
de la glucosa por difusión facilitada
 OBJETIVO GENERAL

Determinar el tipo de mecanismo de transporte que utiliza la levadura

(Saccharomyces cerevisiae), para poder incorporar glucosa.

OBJETIVOS PARTICULARES
1. Evaluar el efecto del parámetro como la Temperatura a 4ºC en el
transporte de glucosa por S. cerevisiae.
2. Identificar y analizar cómo afecta la adición de inhibidores (2, 4
dinitrofenol y N-etil maleimida) en el transporte de glucosa.
RESULTADOS
Curva tipo de la recta

µg de A(540nm)
glucosa

0 0

100 0.125

200 0.3

300 0.5
A=1.99x10-3 (µg de glucosa)-0.05533
400 0.75
y = ax + b Calculamos los µg de glucosa,
500 0.978
despejando de la ecuación de la recta.

µg de glucosa= (A 540 nm - b) /1.99x10-3

 [Glucosa]residual= μg glucosa residual
Cálculo de [Glucosa] residual
alícuota (ml)
Alícuota

Para matraces de 1-4 = 0.2ml

Para matraz No.5= 0.5ml

Para el matraz No. 1 en t= 0 min

419.7654 μg glucosa residual 1mg

[Glucosa] residual= = 2.0988 mg glucosa residual
0.2ml 1000 μg mL

[Glucosa]*FD 2.0988 mg glucosa 1.5

= 3.1482 mg glucosa/mL
mL
 Tiempo A(540 nm) µg de glucosa [Glucosa] [Glucosa] *F.D
(min) residual RESIDUAL (mg/mL)
(mg/mL

0 0.004 29.8157 0.0596 0.0894471

10 0.001 28.3082 0.0566 0.0849246

20 0.002 28.8107 0.0576 0.0864321

30 0.001 28.3082 0.0566 0.0849246

Promedio= 0.0864321

Tabla 1. Matraz 5

[glucosa]Residual =mg glucosa residual - [glucosa]promedio /alícuota(mL)

Para el matraz 1 en t=0min
[glucosa]Corregida =3.1482mg - 0.0864mg = 3.0618mg/mL
mL
[glucosa]transportada= 3.0618mg/mL- 3.0618mg/mL= 0 mg/mL

Tiempo A(540nm) µg de glucosa [Glucosa] [Glucosa]Residual [Glucosa]

(min) residual RESIDUAL Corregida Transportada
(mg/mL)

0 0.004 419.7654 3.1482 3.0618 0.0000

10 0.001 417.2529 3.1294 3.0430 0.0188

20 0.002 409.7152 3.0729 2.9865 0.0753

30 0.001 394.6398 2.9598 2.8734 0.1884

Tabla 2. Sistema 1
Tiempo (min) Matraz 1 Matraz 2 Matraz 3 Matraz 4
(mg/mL) (mg/mL) DNF NEM
(mg/mL) (mg/mL)

0 0 0 0 0

10 0.0188 1.8279 1.8844 2.1677

20 0.0798 2.2802 2.5626 2.4874

30 0.1885 2.94 2.8906 2.8606

Tabla 3. Cálculo de Glucosa Transportada.

Gráfica 1. Transporte de glucosa de Saccharomyces cerevisiae a diferentes factores
fisicoquimicos.
CONCLUSIÓN
● Se determinó que el tipo de transporte que realiza Saccharomyces cerevisiae
es por difusión simple.
● Se demostró que la levadura a 4°C no puede realizar el transporte de
manera correcta.
● El DNS reacciona con los azúcares reductores mediante una reacción redox,
con lo cual se pueden cuantificar gracias a las distintas coloraciones,
espectrofotometría visible, a la longitud de onda de máxima absorbancia de
540 nm
● El reactivo como DNF bloquea de manera precisa una función que es de
suma importancia para llevar a cabo cierto tipo de transporte pero eso no
impide que Saccharomyces cerevisiae de alguna manera transporte la glucosa
que requiere.
BIBLIOGRAFÍA
◉ Madigan T., Michael. Martinko M., John. Parker, Jack. Brock. Biología
de los microorganismos. 10a edición. Editorial Pearson. Pág. 152.

◉ Rawn, J.D 1989. Bioquímica 1° Ed. Interamericana. Mc Graw Hill.

Madrid. Pág 1023-1248.
INFORME
EQUIPO 7
 INTEGRANTES:
RAMÍREZ JIMÉNEZ INGRID ALEXANDRA

RODRÍGUEZ LOZA MARGARITA DE JESÚS

ROSAS HERNÁNDEZ URIEL ALEJANDRO

VALERIO NAVA CITLALI

 HIPÓTESIS
Si la levadura Saccharomyces cerevisiae lleva a cabo el transporte
de glucosa con un mecanismo de difusión facilitada, entonces dicho
proceso:
● Se verá afectado negativamente por la temperatura.
● No se verá afectado por el 2,4 dinitrofenol (DNF).
● La N-etilmaleimida (NEM) bloqueará las proteínas
transportadoras de glucosa.
OBJETIVO GENERAL

● Concluir cuál es el mecanismo de transporte que la levadura

utiliza para incorporar la glucosa.

OBJETIVOS PARTICULARES

● Determinar cuál es el efecto de la temperatura sobre el

transporte.
● Verificar cuál es el efecto que produce el 2,4 dinitrofenol y
la N-etilmaleimida en el transporte.
RESULTADOS
RESULTADOS
DISCUSIÓN DE RESULTADOS
 CONCLUSIONES

● La hipótesis planteada, sobre el transporte de glucosa en

Saccharomyces cerevisiae, fue verificada en cada uno de sus
supuestos, como sigue:
○ Temperaturas cercanas al punto de congelación del agua (4°C)
detuvieron el transporte.
○ El DNF afectó el transporte.
○ El transporte se vio inhibido con la presencia de N-etilmaleimida
(NEM).
○ El transporte llevado a cabo es activo.
● Las condiciones a las que se somete Saccharomyces cerevisiae en su
medio ambiente, afectarán su transporte de glucosa y por lo tanto su
sobrevivencia.
 REFERENCIAS

● Rawn, J. D.1989. Bioquímica. 1a Ed. Interamericana. Mc Graw Hill. Madrid.

● Stryer, L. 1995 Biochemistry. 4a. Ed. W. H. Freeman and Co. San Francisco.
● López, C;Infante, J. & Trejos, M. 1986. La membrana plasmática.(La relación Estructura - Función). Revista de la
Universidad de La Salle, pp 25-50. Recuperado de:
https://ciencia.lasalle.edu.co/cgi/viewcontent.cgi?article=1906&context=ruls
● Suárez, C; Garrido, N; Guevara, C. 2016. Levadura Saccharomyces cerevisiae y la producción de alcohol. Sobre los
Derivados de la Caña de Azúcar, vol. 50, pp. 20-28 Instituto Cubano de Investigaciones de los Derivados de la Caña de
Azúcar Ciudad de La Habana, Cuba. Recuperado de: https://www.redalyc.org/pdf/2231/223148420004.pdf
● AEPSAD. 2015. 2,4 Dinitrofenol. España. Recuperado de:
https://aepsad.culturaydeporte.gob.es/dam/jcr:63e9eb5b-b38b-4fcb-a3cd-966bbe9aa488/alerta-dinitrofenol.pdf
● ACE. Revista de enología 28.10.03. España. Recuperado de: http://www.acenologia.com/noticia64_02.htm
INFORME EQUIPO 8
-Sánchez Ávila Julio David
-Sánchez Mendoza Jesús Alfonso
-Torres Torres Michelle
OBJETIVO GENERAL
Analizar cuál es el mecanismo de transporte que utiliza Saccharomyces cerevisiae para
transportar a la glucosa.

OBJETIVOS PARTICULARES Y ESPECÍFICOS.

1.-Observar el efecto que producen la temperatura y el tiempo en nuestros resultados.
2.- Elaborar una curva tipo de cantidad de glucosa vs absorbancia, y mediante la ecuación
obtenida interpolar los datos de absorbancia y calcular la concentración de glucosa residual.
3.- Analizar los resultados para determinar cuál es el mecanismo de transporte utilizado por
(Saccharomyces cerevisiae) para incorporar la glucosa.
4.- Comparar las diferencias que existen en los 5 sistemas, los cuales contienen diferentes
sustancias, y analizar cuál es el efecto que produce cada una de ellas en el transporte de
glucosa.
HIPÓTESIS
Si la temperatura óptima de crecimiento de un mesófilo como Saccharomyces cerevisiae es de 37-40 °
c. El transporte de glucosa no se llevará a cabo a temperaturas cercanas a cero.

Si el transporte de glucosa en S. cerevisiae es pasivo, entonces no intervendrá la síntesis de ATP y por

tanto la presencia de un agente desacoplante como el 2,4-Dinitrofenol no intervendrá en el transporte
de glucosa.

Por otro lado, si la glucosa en S. cerevisiae se transporta de forma mediada, es decir, depende de la
presencia de proteínas acarreadoras, entonces los cambios conformacionales de estas proteínas
provocados por la presencia de N-etil maleimida inhibirán el transporte de glucosa.
RESULTADOS

Esta curva se realizó haciendo

uso de los resultados medidos de
absorbancia proporcionados.

Posteriormente se hizo una

regresión lineal y se obtuvo la
ecuación de la recta, la cual será
de utilidad en los cálculos
siguientes.

Gráfica 1. Curva tipo de glucosa

 Ejemplo de cálculos empleando el matraz 1 al tiempo cero minutos

Sabiendo que:
•Hay 40 mg de glucosa en cada sistema
•En cada matraz la [Glucosa]= 2 mg de glucosa/ mL
•En el sobrenadante al tiempo cero la [Glucosa]= 4 mg de glucosa
•Después de ser diluida con NaOH [Glucosa]= 1.3333 mg/mL
•Factor de dilución (FD)= 1.5
•Tamaño de la alícuota: 0.2 mL (excepto para el sistema 5 que es 0.3 mL)

A partir de la curva tipo elaborada se obtuvo la siguiente ecuación:

De la cual se puede despejar a los µg de Glucosa, quedando:


1. La absorbancia obtenida en el matraz 1 al
tiempo de 0 minutos fue: 0.870, sustituyendo
en la ecuación obtenida anteriormente
tenemos:
5. Se corrige la concentración restando lo
obtenido en el promedio de las concentraciones
del matraz 5

6. Se calcula la glucosa transportada

2. La [Glucosa] se calcula dividiendo los μg
obtenidos entre la alícuota

3. Se multiplica por el factor de dilución

4. Convirtiendo a mg
Gráfica 2. Glucosa Transportada

Testigo

DNF

4 °C

NEM
Conclusiones

Saccharomyces cerevisiae es un mesófilo cuya temperatura óptima de crecimiento es de 37-40°C. Al disminuir

la temperatura en condiciones cercanas a cero, el transporte de glucosa no se lleva a cabo.

La glucosa en S. cerevisiae se lleva a cabo por transporte pasivo, independiente de la cantidad de ATP
presente, comprobado mediante el 2,4-Dinitrofenol. Por otro lado, es un transporte mediado, dependiente de la
estructura de las proteínas del sistema PTS, comprobado con el N-etil maleimida.

Al ser un transporte pasivo y mediado, se concluye que el transporte de glucosa en Saccharomyces cerevisiae
se realiza por difusión facilitada.
Bibliografía

García, M. C. (2012). Biología de los hongos. Bogotá: Universidad de los Andes.

Castrejón, V., Carbó, R., & Martinez, M. (2007). Mecanismos moleculares que intervienen en el transporte de
glucosa. Obtenido de
http://www.facmed.unam.mx/publicaciones/ampb/numeros/2007/02/e_TranspoGlucosa.pdf
OBJETIVO GENERAL
Analizar cuál es el mecanismo de transporte que utiliza Saccharomyces cerevisiae para
transportar a la glucosa.

OBJETIVOS PARTICULARES Y ESPECÍFICOS.

1.-Observar el efecto que producen la temperatura y el tiempo en nuestros resultados.
2.- Elaborar una curva tipo de cantidad de glucosa vs absorbancia, y mediante la ecuación
obtenida interpolar los datos de absorbancia y calcular la concentración de glucosa residual.
3.- Analizar los resultados para determinar cuál es el mecanismo de transporte utilizado por
(Saccharomyces cerevisiae) para incorporar la glucosa.
4.- Comparar las diferencias que existen en los 5 sistemas, los cuales contienen diferentes
sustancias, y analizar cuál es el efecto que produce cada una de ellas en el transporte de
glucosa.
HIPÓTESIS
Si la temperatura óptima de crecimiento de un mesófilo como Saccharomyces cerevisiae es de 37-40 °
c. El transporte de glucosa no se llevará a cabo a temperaturas cercanas a cero.

Si el transporte de glucosa en S. cerevisiae es pasivo, entonces no intervendrá la síntesis de ATP y por

tanto la presencia de un agente desacoplante como el 2,4-Dinitrofenol no intervendrá en el transporte
de glucosa.

Por otro lado, si la glucosa en S. cerevisiae se transporta de forma mediada, es decir, depende de la
presencia de proteínas acarreadoras, entonces los cambios conformacionales de estas proteínas
provocados por la presencia de N-etil maleimida inhibirán el transporte de glucosa.
RESULTADOS

Esta curva se realizó haciendo

uso de los resultados medidos de
absorbancia proporcionados.

Posteriormente se hizo una

regresión lineal y se obtuvo la
ecuación de la recta, la cual será
de utilidad en los cálculos
siguientes.

Gráfica 1. Curva tipo de glucosa

 Ejemplo de cálculos empleando el matraz 1 al tiempo cero minutos

Sabiendo que:
•Hay 40 mg de glucosa en cada sistema
•En cada matraz la [Glucosa]= 2 mg de glucosa/ mL
•En el sobrenadante al tiempo cero la [Glucosa]= 4 mg de glucosa
•Después de ser diluida con NaOH [Glucosa]= 1.3333 mg/mL
•Factor de dilución (FD)= 1.5
•Tamaño de la alícuota: 0.2 mL (excepto para el sistema 5 que es 0.3 mL)

A partir de la curva tipo elaborada se obtuvo la siguiente ecuación:

De la cual se puede despejar a los µg de Glucosa, quedando:


1. La absorbancia obtenida en el matraz 1 al
tiempo de 0 minutos fue: 0.870, sustituyendo
en la ecuación obtenida anteriormente
tenemos:
5. Se corrige la concentración restando lo
obtenido en el promedio de las concentraciones
del matraz 5

6. Se calcula la glucosa transportada

2. La [Glucosa] se calcula dividiendo los μg
obtenidos entre la alícuota

3. Se multiplica por el factor de dilución

4. Convirtiendo a mg
Gráfica 2. Glucosa Transportada

Testigo

DNF

4 °C

NEM
Conclusiones

Saccharomyces cerevisiae es un mesófilo cuya temperatura óptima de crecimiento es de 37-40°C. Al disminuir

la temperatura en condiciones cercanas a cero, el transporte de glucosa no se lleva a cabo.

La glucosa en S. cerevisiae se lleva a cabo por transporte pasivo, independiente de la cantidad de ATP
presente, comprobado mediante el 2,4-Dinitrofenol. Por otro lado, es un transporte mediado, dependiente de la
estructura de las proteínas del sistema PTS, comprobado con el N-etil maleimida.

Al ser un transporte pasivo y mediado, se concluye que el transporte de glucosa en Saccharomyces cerevisiae
se realiza por difusión facilitada.
Bibliografía

García, M. C. (2012). Biología de los hongos. Bogotá: Universidad de los Andes.

Castrejón, V., Carbó, R., & Martinez, M. (2007). Mecanismos moleculares que intervienen en el transporte de
glucosa. Obtenido de
http://www.facmed.unam.mx/publicaciones/ampb/numeros/2007/02/e_TranspoGlucosa.pdf