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Informe Práctica No.

2: Identificación de biomoléculas

•Jonathan Rojas Contreras

•Ana Citlalli Tolentino Tapia

•Allison Saory Gómez Ríos

•Andrea Gonzales Sanciprian

Actividad Experimental diseñada por la Profa. Ma. Eugenia Colmenares.


Grupo: 308B
INSTRUCCIONES. Lee toda la práctica antes de iniciar las pruebas químicas a realizar
OBJETIVO. Identificar en alimentos los diferentes tipos de biomoléculas (carbohidratos,
lípidos y proteínas) a través de reacciones químicas sencillas.

HIPÓTESIS

•Salchicha y aceite: que se coloren de rojo usando el colorante sudan lll esto por contener
gran cantidad de lípidos.
•Huevo: Las proteínas de la clara del huevo creen soluciones coloidales que pueden formar
coágulos al calentarse en mayores temperaturas a 70 C.
•Pan y papa: se tornaran de un color azul-morado de la presencia de la amilosa, del yodo
debido a la absorción o fijación en la amilosa.
•Jugo: Reacción redox con sulfato de cobre ll y el carácter reductor de monosacáridos y formar
óxido de cobre, por lo que se muestra que si hay monosacáridos.

INFORMACIÓN IMPORTANTE:

⮚ USA TODO EL TIEMPO DE LA PRÁCTICA TU BATA Y NO TE DISTRAIGAS O JUEGUES


CON TUS COMPAÑER@S MIENTRAS REALICES LAS REACCIONES, RECUERDA, ES POR
TU SEGURIDAD.
⮚ REALIZA EN EQUIPO LAS ACTIVIDADES INDICADAS EN ORDEN Y CON LA PRECAUCION
CORRESPONDIENTE.
⮚ TOMA NOTAS DE TUS OBSERVAICONES EN TU CUADERNO Y OBTEN FOTOGRAFIAS DE
EL PROCESO, PRINCIPALMENTE ANTES Y DESPUÉS DE LAS REACCIONES PARA EL
INFORME QUE REALIZARÁN EN EQUIPO POSTERIORMENTE.
⮚ TAPA CADA SUSTANCIA AL TOMARLA CON EL GOTERO O CON LA PIPETA, SEGÚN SEA
EL CASO. (NO LAS DEJES DESTAPADAS PORQUE LA MAYORÍA SE EVAPORA
RÁPIDAMENTE Y CONTIENEN ÁCIDOS Y ÁLCALIS)
⮚ NO PIPETEES CON LA BOCA LAS SUSTANCIAS, INTRODUCE LA PIPETA Y PERMITE QUE
SUBA POR CAPILARIDAD. O USA EL GOTERO.
⮚ NO INTRODUZCAS UNA PIPETA YA USADA EN EL MATRAZ DE OTRA SUSTANCIA
PORQUE CONTAMINARÁS LAS MISMAS, ENJUAGA LAS PIPETAS CADA VEZ QUE LAS
USES. HAY ESCOBILLONES Y DETERGENTE PARA ESTE FIN.
⮚ NO COMAS NI BEBAS NINGÚN ALIMENTO DURANTE LA PRÁCTICA, ASÍ NO TE
ARRIESGAS A UNA QUEMADURA O INTOXICACIÓN.
⮚ MANTEN EL ORDEN AL INTERIOR DE TU EQUIPO, SOLO ASÍ PODRÁS CULMINAR
ADECUADAMENTE LA PRÁCTICA Y EVITARÁS ACCIDENTES.

PARTE A. Reconocimiento de glúcidos: glucosa y almidón.

MATERIALES
● Tubos de ensayo
● Gradilla
● Pinzas
● Parrilla eléctrica
● Pipetas o goteros
● Solución de Fehling A y B.
Actividad Experimental diseñada por la Profa. Ma. Eugenia Colmenares.
● Solución de Lugol
● Soluciones de glucosa al 5% y almidón al 10%.

ESTUDIO DE AZÚCARES REDUCTORES


     FUNDAMENTO
Los monosacáridos y la mayoría de los disacáridos poseen poder reductor, que deben al grupo
carbonilo que tienen en su molécula. Este carácter reductor puede ponerse de manifiesto por
medio de una reacción redox llevada a cabo entre ellos y el sulfato de Cobre (II). Las soluciones
de esta sal tienen color azul. Tras la reacción con el glúcido reductor se forma óxido de Cobre
(I) de color rojo. De este modo, el cambio de color indica que se ha producido la citada
reacción y que, por lo tanto, el glúcido presente es reductor.
     TÉCNICA
1. Coloca en un tubo de ensayo 3ml de la solución de glucosa (prueba testigo).
2. Añade al mismo tubo de ensayo 1ml de solución de Fehling A (contiene CuSO 4) y 1ml
de Fehling B (lleva NaOH para alcalinizar el medio y permitir la reacción). Observa el color
inicial que se presenta al mezclar las sustancias.
3. Calienta los tubos en baño maría durante 5 minutos. (Antes de iniciar las pruebas pon
a calentar agua de la llave en el vaso de precipitado de 250 ml sobre la parrilla eléctrica).
4. La reacción será positiva si la muestra se vuelve de color rojo ladrillo y será negativa si
queda azul o cambia a un tono azul-verdoso.
5. Realiza el mismo procedimiento con una solución o maceración diluida con agua
destilada de cada alimento en el que sospeches tenga carbohidratos reductores
(monosacáridos).
6. Observa y anota los resultados de los diferentes alimentos con las distintas muestras
de glúcidos en la tabla elaborada.

RESULTADOS: PRUEBA DE FEHLING

SUSTANCIA FOTOGRAFIAS DE LAS FOTOGRAFIAS DURANTE FOTOGRAFIAS DESPUES


O ALIMENTO REACCIONES ANTES (En caso de haber fotografiado DE LA REACCIÓN
durante el calentamiento)
GLUCOSA
(TESTIGO)

Observacion Al mezclar glucosa, con Mientras esta mezcla de Al terminar el tiempo


es Fehling A y Fehling B prueba testigo estaba en en el que se calienta,
este se torna de color calentamiento se cambio termina de un tono rojo
azul. primero a un color verde ladrillo. Lo que indica
y a la vez, este tono verde que tiene
a anaranjado. monosacáridos

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JUGO DE
FRUTA

Observacion Al mezclar el jugo de Mientras se calentaba Al terminar, este de


es frutas con Fehling A y este paso a un verde más igual forma se torno de
Fehling B este se torna claro y se veía un tono color rojo ladrillo;
de verde oscuro amarillo al fondo indicando que también
tiene monosacáridos

CONTESTEN CADA PREGUNTA DE CADA SECCIÓN:


7. ¿Qué alimentos presentaron azúcares reductores (monosacáridos)?
El jugo de frutas
8. ¿Resultaron correctas las hipótesis? Explica.
Si, ya que se indicó que se encontrarían monosacáridos en el jugo de frutas, y en
efecto, fue lo que sucedió

INVESTIGACIÓN DE POLISACÁRIDOS (ALMIDÓN)

FUNDAMENTO
El almidón es un polisacárido vegetal formado por dos componentes: la amilosa y la
amilopectina. La primera se colorea de azul violáceo o morado en presencia de yodo debido,
no a una reacción química sino a la adsorción o fijación de yodo en la superficie de la molécula
de amilosa, lo cual sólo ocurre en frío. Como reactivo se usa una solución denominada Lugol
que contiene yodo y yoduro potásico. Como los polisacáridos no tienen poder reductor, la
reacción de Fehling da negativa.
    
 TÉCNICA
1. Coloca en un tubo de ensayo 3ml de la solución de almidón.
2. Añade 3 gotas de la solución de Lugol. (esta reacción no se requiere calentar)
3. Observa y anota los resultados.
4. Realiza el mismo procedimiento con una solución o maceración diluida en agua
destilada de cada alimento en el que sospeches tenga carbohidratos de tipo polisacáridos
(papa y pan).
5. Observa y anota los resultados de los diferentes alimentos en la tabla.

RESULTADOS: PRUEBA CON LUGOL

SUSTANCIA O FOTOGRAFIAS ANTES DE LAS FOTOGRAFIAS DESPUES DE LAS


ALIMENTO REACCIONES REACCIONES

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ALMIDON (TESTIGO)

Observaciones Solo se nota el liquido al Al echarle Lugol este se torna


almidón con un color bruscamente de un color negro
transparente totalmente oscuro
PAPA

Observaciones Se nota el color del jugo de la Al agregar el Lugol, al igual que el


papa triturada de un color café Almidón se torna de un color negro
PAN

Observaciones Es el “jugo” del pan triturado Al igual que los demás este se
con un poco de agua y queda torna de color oscuro al echarles
con un color cremoso amarillo Lugol
SALCHICHA

Observaciones Solo se machacó la salchicha y Al echarle Lugol, como todos los


siguió con su mismo color demás sete se torna de color negro
oscuro, lo cual comprueba que este
y todos los anteriores contiene
polisacáridos

6. ¿Qué alimentos presentaron polisacáridos?


La papa, el pan y la salchicha
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7. ¿Corresponden los resultados a tus hipótesis?
No, solo en la papa y el pan se pensó que se tornaran de azul-morado, pero se torno
negro completamente

PARTE B. Reconocimiento de lípidos

MATERIALES
● Tubos de ensayo
● Gradilla de metal
● Varillas de vidrio
● Vasos de precipitados 500 ml o de 1000 ml.
● Pipetas de 5 ml o Probeta de 10 ml.
● Solución de Sudán III
● acetona
● Aceite de oliva o comestible
● 1 salchicha

TINCIÓN
     FUNDAMENTO
Los lípidos se colorean selectivamente de rojo-anaranjado con el colorante Sudán III.
     TÉCNICA
1. Disponer en una gradilla 1 tubo de ensayo colocando 2ml de aceite.
2. Añadir al tubo 4 gotas de solución alcohólica de Sudán III.
3. Agitar el tubo y dejar reposar.
4. Observar los resultados: con Sudán III todo el aceite tiene que aparecer teñido.

TABLA DE RESULTADOS DE LÍPIDOS: TINCIÓN CON SUDÁN III:

SUSTANCIA O FOTOGRAFIAS ANTES DE LAS FOTOGRAFIAS DESPUES DE LAS


ALIMENTO REACCIONES REACCIONES
ACEITE (TESTIGO)

Observaciones El aceite se nota de un color Al agregar el sudán, este se queda


transparente arriba pero al mezclarse hace que
la mezcla tome un color rosado
salmón.

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SALCHICHA

Observaciones La salchicha está de un color Al mezclarse como el sudán, hace


rosado. que los pedazos de salchicha
queden separados del resto de la
mezcla.
YEMA DE HUEVO
Observaciones La yema del huevo es amarilla Al agregarse el sudán comienza a
a simple vista teñirse de un tono anaranjado
OTRO ALIMENTO
(CUAL)
Observaciones

SOLUBILIDAD
     FUNDAMENTO
Los lípidos son insolubles en agua. Cuando se agitan fuertemente en ella se dividen en
pequeñísimas gotas formando una emulsión de aspecto lechoso, que es transitoria, pues
desaparece en reposo por reagrupación de las gotitas de grasa en una capa que, por su menor
densidad, se sitúa sobre el agua.
Por el contrario, las grasas son solubles en disolventes orgánicos, como el éter, cloroformo,
acetona, benceno, etc.
    
RESULTADOS DE SOLUBILIDAD DE LÍPIDOS EN AGUA:

SUSTANCIA O FOTOGRAFIAS ANTES DE FOTOGRAFIAS DESPUES DE LAS


ALIMENTO LAS REACCIONES REACCIONES
ACEITE (TESTIGO)

Observaciones El aceite es transparente y Al agregar el agua, por más que se


limpio intenten de mezclar, esta se irá al
fondo, haciendo que el aceite quede
arriba como una capa
SALCHICHA

Actividad Experimental diseñada por la Profa. Ma. Eugenia Colmenares.


Observaciones La salchicha simplemente Al no ser soluble, la salchicha se ha
se encuentra en reposo en quedado al fondo del tubo sin
el tubo mezclarse con el agua

YEMA DE HUEVO

Observaciones La yema está al fondo del Al mezclarse con agua, el agua toma
tubo sin reacción un color más claro que la yema, pero
no se juntan
OTRO ALIMENTO
(CUAL)
Observaciones

RESULTADOS DE SOLUBILIDAD DE LÍPIDOS CON ACETONA.

SUSTANCIA O FOTOGRAFIAS ANTES DE FOTOGRAFIAS DESPUES DE LAS


ALIMENTO LAS REACCIONES REACCIONES
ACEITE (TESTIGO)

Observaciones El aceite se encuentra sin Al mezclarse con la acetona al


ningún tipo de reacción principio parece que se mezclan, pero
después de unos segundos es como si
comenzase a burbujear para después
quedar separados la cetona sobre el
aceite

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SALCHICHA

Observaciones La salchicha se encuentra Con la acetona la salchicha queda


sin ninguna alteración hasta abajo y el líquido se vuelve más
transparente, dejando ver los pedazos
de salchicha solida
YEMA DE HUEVO

Observaciones La yema se encuentra sin Al agregarse la acetona, la yema toma


cambios una textura diferente, haciendo que
simplemente la acetona se pinte de
amarillo pero que no se mezclen
OTRO ALIMENTO
(CUAL)
Observaciones

 TÉCNICA
1. Poner 2ml de aceite en dos tubos de ensayo.
2. Añadir a uno de ellos 2ml de agua y al otro 2ml de acetona,
3. Agitar fuertemente ambos tubos y dejar reposar.
4. Observar los resultados: Se verá cómo el aceite se ha disuelto en el ACETONA y, en
cambio no lo hace en el agua y el aceite subirá debido a su menor densidad.
5. Realizar la misma técnica con una maceración diluida de alimentos que consideres
tienen lípidos.

CUESTIONES
1. ¿Qué ocurre con la emulsión de agua en aceite transcurridos unos minutos de reposo?
El agua y el aceite vuelven a separarse debido a la densidad de cada uno

2. ¿Y que sucede con la de acetona y aceite?


Sucede lo mismo que con el aceite, trascurridos algunos minutos la acetona y el aceite
se separan
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3. ¿A qué se deben las diferencias observadas entre ambas emulsiones?
A las propiedades de cada sustancia, como lo es la densidad que impide que se
mezclen

PARTE C. Reconocimiento de proteínas.

MATERIALES
● Tubos de ensayo
● Gradilla
● Mechero
● Vasos de precipitados
● Pipetas
● Alcohol etílico
● Clara de huevo o leche
● Alimentos con proteínas

COAGULACIÓN (DESNATURALIZACIÓN) DE LAS PROTEÍNAS


     FUNDAMENTO
Las proteínas debido al gran tamaño de sus moléculas forman con el agua soluciones
coloidales que pueden precipitar formándose coágulos al ser calentadas a temperaturas
superiores a 70ºC o al ser tratadas con soluciones salinas, ácidos, alcohol, etc.
La coagulación de las proteínas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalización por
los agentes indicados que al actuar sobre la proteína la desordenan por destrucción de sus
estructuras secundaria y terciaria.
     TÉCNICA
1. Coloca en tres tubos de ensayo una pequeña cantidad de clara de huevo (puede
diluirse en un poco de agua) y/o 2-3 ml de leche.
2. Calienta durante 1 o 2 minutos uno de los tubos a baño María con clara de huevo y
observa lo que sucede.
3. A un tercer tubo de ensaye con clara de huevo, agregar 2 o 3ml de alcohol etílico.
4. Agita ligeramente en cada caso, el tubo de ensaye correspondiente.
5. Observa los resultados y anotarlos en la tabla.

RESULTADOS DE LA PRUEBA DE DESNATURALIZACIÓN POR CALENTAMIENTO EN PROTEÍNAS:

SUSTANCIA O FOTOGRAFIAS ANTES DE FOTOGRAFIAS DESPUES DE LAS


ALIMENTO LAS REACCIONES REACCIONES

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CLARA DE HUEVO

Observaciones Antes de la reacción la clara Al realizarse las reacciones por una


de huevo tiene una parte tenemos a la clara de huevo
consistencia viscosa y cuando se le agrega alcohol que al
trasparente momento de agitarlo comienza a
volverse un solido mas viscoso que
incluso se adhiere al tuvo de ensayo,
su color se vuelve mas blanco y tiñe de
blanco ala alcohol. Por otra parte al
calentar la clara de huevo esta
comienza a solidificarse y tomar un
color mas blanco
SALCHICHA

Observaciones

YEMA DE HUEVO

Observaciones

LECHE

Observaciones

2. REACCIONES COLOREADAS ESPECÍFICAS (BIURET)

     FUNDAMENTO
Entre las reacciones coloreadas específicas de las proteínas, que sirven por tanto para su
identificación, destaca la reacción del Biuret. Esta reacción la producen los péptidos y las
proteínas, pero no los aminoácidos ya que se debe a la presencia del enlace peptídico CO-NH
que se destruye al liberarse los aminoácidos.
El reactivo del Biuret lleva sulfato de Cobre (II) y sosa, y el Cu, en un medio fuertemente
alcalino, se coordina con los enlaces peptídicos formando un complejo de color violeta (Biuret)

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cuya intensidad de color depende de la concentración de proteínas.

     TÉCNICA
1. Coloca en un tubo de ensayo 3ml de solución de clara de huevo.
2. Agrega 4-5 gotas de reactivo de Biuret.
3. Agita para que se mezcle bien.
4. Observa los resultados y anótalos en la tabla.
5. Realiza la misma técnica para aquellos alimentos que consideres tengan proteínas.
6. Anota los resultados en la tabla.

RESULTADOS DE PRUEBA DE BIURET PARA PROTEÍNAS:

SUSTANCIA O FOTOGRAFIAS ANTES DE FOTOGRAFIAS DESPUES DE LAS


ALIMENTO LAS REACCIONES REACCIONES
CLARA DE HUEVO

Observaciones Antes de la reacción la clara Al agregar los químicos la clara de


de huevo es algo viscosa y huevo pasa a tener una consistencia
de color trasparente aun mas viscosa casi como gel por las
burbujas que quedan en su interior, su
color no cambia
SALCHICHA

Observaciones

YEMA DE HUEVO

Observaciones Tiene consistencia liquida y Después de la reacción comienzan a


su color es amarillo formarse pequeñas partes solidas y su
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color no cambia
LECHE

Observaciones

CUESTIONES
1. ¿Qué sustancia proteínica tiene la clara de huevo?
Un huevo contiene aproximadamente 6gr de proteína, repartida entre la clara y la
yema. En la clara se encuentran las proteínas ovoalbúmina, ovomucina y lisozima

2. ¿Cómo se manifiesta la desnaturalización de la proteína de la clara de huevo?


Si freímos, cocemos o agitamos la clara de un huevo esta sustancia pasa de un estado
casi líquido a sólido o semisólido y su color transparente se convierte en blanco. Este
cambio de estructura se debe a la desnaturalización de una proteína, la ovoalbúmina.

3. ¿Cuál de los tres agentes utilizados tiene mayor poder de desnaturalización?


Con el ácido nítrico se tiene mayor poder de desnaturalización ya que tiene mayor
pérdida de conformación nativa por ser un ácido fuerte y provocar cambios en sus
propiedades.

4. ¿Cómo podríamos saber que una sustancia desconocida es una proteína?


Para saber si una sustancia desconocida, es una proteína se utiliza el reactivo de Biuret
es aquel que detecta la presencia de proteínas, péptidos cortos y otros compuestos
con dos o más enlaces peptídicos en sustancias de composición desconocida.

5. ¿Qué coloración da la reacción del Biuret?


La coloración que presenta es el color violeta, indicando la presencia de proteínas.

6. ¿Una proteína coagulada podría dar la reacción del Biuret?


Una proteína coagulada, sí podría dar la reacción de Biuret, porque el reactivo
reacciona con cualquier proteína, liquida o sólida

7. Si se realiza la reacción del Biuret sobre un aminoácido como la Glicina ¿es positiva o
negativa? ¿Por qué?
La reacción de Biuret es positiva sólo con péptidos y proteínas. Esto se debe a la
presencia del enlace peptídico (-CO-NH), el cual no estaría presente en la glicina ya que
está sola como un aminoácido.

CONCLUSIONES:

•Salchicha y aceite: Como se esperaba de estos dos alimentos, al colocar sudan III podemos
observar como comienzan a teñirse de un color rojo

•Huevo: Al realizar las reacciones podemos observar como este alimento comienza a modificar
sus propiedades físicas volviéndose más solido pero no solo en presencia de altas
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temperaturas como se estimaba sino que también al mezclarse con otras sustancias como lo es
el sudan III o el alcohol, mismos que provocaron el cambio mas notable al cambiar la
viscosidad del alimento

•Pan y papa: Como se esperaba la coloración de estos alimentos debido a su almidón fue de
un tono morado- azul demostrando que en estos dos alimentos se encuentra esta sustancia
especialmente en la salchicha de la cual se esperaría la coloración fuera menor

•Jugo: En es6ta reacción los resultados no fueron como los esperábamos pues no habíamos
previsto que la sustancia comenzaría a colorearse de un amarillo inicial por el jugo a un azul
posteriormente por la sustancia de Felling para concluir en un anaranjado oscuro

Para finalizar concluimos que:

Jugo: Presenta azucares reductores

Papa: Presenta almidón

Pan: Presenta almidón

Salchicha: Presenta almidón y lipidos

Aceite: Presenta lípidos

Yema de huevo: Presenta lípidos y proteínas

Clara de huevo: Presenta proteínas

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS Y/O CIBERGRÁFICAS:

https://es.wikipedia.org/wiki/Desnaturalizaci%C3%B3n_(bioqu%C3%ADmica)

https://ec.europa.eu/health/scientific_committees/opinions_layman/es/glosario/abc/
biomolecula.htm

https://concepto.de/biomoleculas/

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