SEP DGTI SEMS

Centro de Bachillerato
Tecnológico Industrial y de
Servicios 166 "Pablo Torres
Burgos"
Laboratorio Clínico
AYFS Transfuccionales
Practica No. 4: Determinación de
Brucella ssp. en Banco de Sangre
(serología)
Alejandra Maldonado Adame
5° "A" Matutino
Los gallos, Tejalpa, Jiutepec,
Morelos, México
Q.B.P. Andraca Sanchez Juan
Equipo 6
 Índice
1.- Índice
2.- Introducción
3.- Objetivos
4.- Material y Equipo
5.- Procedimiento
6.- Resultados
7.- Discusión
8.- Conclusión
9.- Cuestionario
10.- Bibliografía
 Introducción
La brucelosis es una enfermedad infectocontagiosa ocasionada por el
género Brucella, la cual puede adquirirse por ingesta de lacticinios sin
hervir o pasteurizar, o bien por el consumo de alimentos contaminados
como carne y vísceras .El género Brucella oficialmente comprende seis
especies: melitensis, abortus, suis, ovis, canis y neotomae. Las especies
melitensis, abortus y suis, poseen complejos lipolisacáridos en su pared
celular, con antígenos de superficie mayores denominados "A" y "M".Los
hospederos animales, excretan bacterias junto con los tejidos y otros
productos del aborto, así como excreciones genitales que contaminan
los sitios donde se encuentran, pernoctan o abrevan, contaminando el
suelo, los traspatios, corrales, la paja de las camas, el agua de arroyos,
canales y pozos y también la excretan en la leche.
El humano la puede adquirir mediante:
a) Exposición ocupacional.
b) Contacto con ambientes y consumo de alimentos contaminados
c) Transmisión de persona a persona: de mayor importancia es la
infección por transfusiones de sangre o de un trasplante de tejido y el
que representa un riesgo mayores el de médula ósea.
d) Riesgo laboral: el personal de laboratorio encargado de la producción
de vacunas, antígenos y procesadores de especímenes clínicos
encaminados a la detección del agente se encuentran en riesgo de
adquirir la enfermedad a través de aerosoles.
Las técnicas de aislamiento y el PCR que es un método indirecto para
evidenciar el ácido desoxirribonucleico de Brucella spp en la sangre. Las
pruebas de serodiagnóstico que utilizan células completas como
antígeno son: la de RB que se utiliza de escrutinio, por ser la más rápida y
sensible. Los resultados deben ser confirmados con:
1) Aglutinación estándar (AEM).
2) Aglutinación con 2 Mercaptoetanol (2ME) (ambas se realizan en
microplaca).
3) Coombs indirecto.
 Objetivos
1.- Conocer el procedimiento de Brucella spp. en
suero
2.- Identificar e interpretar los resultados
obtenidos

Material Y
equipo
Centrifugas
Tubos de ensaye limpios
Pipetas Pasteur
Gradillas
Pipetas automáticas
Bulbos
Piceta
Material de toma y bioseguridad
Reactivos biológicos
Procedimiento
1.- Tomar una muestra de sangre sin EDTA bajo un
C.C.I

2.- Utilizar una técnica de placa (Aglutinación Ag-

Ac)

Etiquetar una placa de vidrio para

aglutinación
 Antígeno Dilución

Brucella ssp. 0.08 mL, 0.04 mL, 0.02 mL, 0.01mL, 0.005 mL

Volumen del suero:

Corresponde la dilución 1:20, 1:40, 1:80, 1:160, 1:320

Agregar una gota del antígueno

Aguitar con aplicado 1 minuto y leer la

Aglutinación
 resultados
Valores de referencia para determinación de Brucella ssp en suero

Diluciones ( mL)

0.08 0.04 0.02 0.01 0.005 Implicaciones

(1:20) (1:40) (1:80) (1:160) (1:320) Clínicas

Probable infección
+ + - - -
pasada

Infección ligera
+ + + - -
tratada

Inicio de la infección
+ + + + -
o en declive

+ + + + + Infección aguda

0.08 mL (1000/ 1mL) = 80

0.04 mL (1000/ 1mL) = 40
0.02 mL (1000/ 1mL) = 20
0.01 mL (1000/ 1mL) = 10
0.005 mL (1000/ 1mL) = 5

Paciente: Alejandra Maldonado Adame

Edad 17 años
Sexo: Femenino
Tipo de sangre: O-
NEGATIVO A BRUCELLA
 Discusión
Realizamos la practica con los procedimientos correctos
para obtener un buen resultado, primero tomando una
muestra de sangre sin EDTA para que coagule la sangre, de
ahí pusimos a centrifugar para obtener nuestro suero
sanguíneo y así el suero pasarlo a nuestras placas con ayuda
de una pipeta con cada medida que se necesita, procedimos
a poner nuestro antigeno y revolvimos por un minuto y
despuesto de esto podemos observar nuestra muestra, si
se presenta aglutinación el resultado es positivo y si no es
negativo, en nuestro caso es negativo

conclusión
Aprendimos un poco sobre la bacteria brucella encargada de
detonar la enfermedad de brucelosis y aprendimos a hacer
una prueba para detectar esta bacteria y obtuvimos un buen
resultado en nuestra practica

Cuestionario
¿Qué tipo de microorganismo es la Brucella?
una bacteria
¿ Cómo se clasifica la enfermedad causada por la brucella?
Zoonosis
¿Cuántas especies bacterianas se consideran que hay en el
genero Brucella?
Seis
¿Cuáles son las 6 especies de brucella conocidas?
melintensis, abortus, suis, ovis, canis y neotomae
¿Por cuanto tiempo se tiene que agitar la muestra una vez
puesto el antígeno?
1 minuto
¿Qué norma se ha incluido para la prevención y control de la
brucelosis en el hombre?
NOM- 022-SSA2- 1994

Bibliografía
https://www.scielo.org.mx/scielo.php?
script=sci_arttext&pid=S0016-38132004000400004
https://www.google.com/url?
sa=t&source=web&rct=j&url=https://www.anmm.org.mx
/bgmm/1864_2007/2004-140-4-391-
398.pdf&ved=2ahUKEwjI9qHWj-
D6AhUfHEQIHR07CmUQFnoECDAQAQ&usg=AOvVaw0qgu4
87avI6lnKkj6AS54u
https://www.google.com/urlsa=t&source=web&rct=j&url
=https://repository.javeriana.edu.co/bitstream/handle/1
0554/8750/tesis688.pdf%3Fsequence%3D1&ved=2ahU
KEwjI9qHWj-
D6AhUfHEQIHR07CmUQFnoECDIQAQ&usg=AOvVaw2011F5
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