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Tema 7

Expresión génica:
transcripción

Dr. Antonio Barbadilla

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Objetivos tema 7
Expresión génica: transcripción
Deberán quedar bien claros los siguientes puntos:

•El “dogma” central del flujo de la información genética ->


el RNA como intermediario
•Propiedades del RNA
•Clases de RNA
•El mRNA, el mensajero
•La transcripción: iniciación, elongación y terminación
•La transcripción en eucariotas: modificaciones
(procesamiento) transcripcionales, intensificadores
•Transcripción inversa y todas las posibles direcciones del
transferencia de información genética
•Actividad enzimática del RNA
•RNA de interferencia (RNAi)
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El “dogma” central del flujo de la
información genética

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Propiedades del RNA

Una cadena, no doble hélice.


Apareamiento intramolecular -> RNA
contorsionista molecular
Azúcar ribosa (OH en el carbono 2’)
Esqueleto azúcar-fosfato en posiciones
5’-3’ del azúcar como DNA
Uracilo en vez de Timina, se empareja
con Adenina, y también con Guanina
cuando se pliega (no en la transcripción).
Catalizador biológico -> Ribozima

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RNA: contorsionista molecular
El emparejamiento intramolecular de nucleótidos produce un
plegamiento de la molécula de RNA

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RNA vs DNA

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Tipos de RNA

RNA mensajero (mRNA)

RNA funcional

RNA de transferencia (tRNA)


RNA ribosómico (rRNA)
RNA nuclear pequeño (snRNA)
MicroRNA (miRNA)
RNA de interferencia pequeño (siRNA)

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TRANSCRIPCIÓN
Función: la formación del transcrito de RNA
mediante la catálisis de la unión de
nucleótidos libres a la cadena molde del
DNA formando una monohebra de RNA.

Propiedades que hacen posible la síntesis del transcrito de RNA

1. COMPLEMENTARIEDAD ENTRE BASES


A-U, C-G, G-C, T-A

2. UNIÓN DE PROTEÍNAS ESPECIFICAS AL DNA (RNA


Polimerasa y otras proteínas que actúan como factores de
transcripción).

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Nomenclatura de las
cadenas en relación
a la transcripción

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Orientación y nomenclatura de las cadenas en
relación a la transcripción

(5)’ CGCTATAGCG (3’)  cadena codificadora del DNA


(3’) GCGATATCGC (5’)  cadena molde del DNA

(5’) CGCUAUAGCG (3’)  transcrito de RNA

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¿Qué cadena de la doble hélice es la
codificadora?

Depende de cada gen, no es un


propiedad del cromosoma.

Orientación de la transcripción

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Orientación de la transcripción

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Orientación de la
transcripción de
los genes del
cromosoma 13
humano alrededor
del gen BRCA2

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RNA polimerasa
•Enzima compleja, no requiere primer
(cebador), no funciona la corrección de
errores

•Procariotas: sólo un tipo. Con múltiples


subunidades.
E. Coli :

factor sigma iniciación + CORE


(holoenzima)

Eucariotas: 3 tipos
I -> rRNA
II -> mRNA
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III -> tRNA, snRNA, rRNA 5S
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RNA polimerasa
PROCARIOTAS
• En procariotas una sola polimerasa (RNA
Polimerasa) se encarga de transcribir el DNA en
las diferentes clases de RNA

ESTRUCTURA (E. coli)


• Se compone de 5 subunidades: 2 subunidades 
idénticas, , ’, ω, más el cofactor .
• El cofactor  tiene la propiedad de disociarse del
resto de subunidades durante el proceso dejando
el núcleo central de la enzima al descubierto.
• HOLOENZIMA = 5 subunidades (con cofactor )
 ACTIVA
• APOENZIMA = 4 subunidades ( el cofactor 
disociado)  INACTIVA
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RNA polimerasa
PROCARIOTAS
•2 subunidades  = ensamblan el enzima
y promueven interacciones
• = actividad catalítica
APOENZIMA = 4 subunidades
•’ = se une al DNA
•ω = ensamblaje y regulación expresión
• = Se une a las regiones promotoras y
posicional a la holoenzima en el sitio de
inicio

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RNA polimerasa
Ciclo de la RNA pol bacteriana

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Etapas de la transcripción
•Iniciación:
•Secuencias promotoras (se une la RNA polimerasa)
•Procariotas: Secuencias consenso Pribnow (-10
pb aguas arriba) y región -35 pb

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Etapas de la transcripción
•Iniciación:
•Secuencias promotoras (se une la RNA polimerasa)
•Procariotas: Secuencias consenso Pribnow (-10
pb aguas arriba) y región -35 pb

•Eucariotas: Caja TATA (-25 pb) y CAAT (-70


pb)
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Etapas de la transcripción
•Iniciación:
•Secuencias promotoras (se une la RNA polimerasa)
•Procariotas: Secuencias consenso Pribnow (-10
pb) y región -35 pb
•Eucariotas: Caja TATA (-25 pb) y CAAT (-70
pb)

•Elongación:
•5’->3’
•Enrollamiento aguas arriba (5’) y desenrollamiento
aguas abajo (3’) del DNA

•Terminación:
•Dependiente del factor Rho
•Independiente de Rho
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Etapas de la transcripción
•Iniciación:
•Secuencias promotoras (se une la RNA polimerasa)
•Procariotas: Secuencias consenso Pribnow (-10
pb) y región -35 pb
•Eucariotas: Caja TATA (-25 pb) y CAAT (-70
pb)

•Elongación:
•5’->3’
•Enrollamiento aguas arriba (5’) y desenrollamiento
aguas abajo (3’) del DNA

•Terminación:
•Dependiente del factor Rho
•Independiente de Rho
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Terminación: DNA Palíndrome
estructura secundaria

Palíndrome:

“dabale arroz a
la
zorra el abad”

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Terminación:
mecanismo intrínseco ->
DNA Palíndrome,
estructura tallo-bucle

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Región 3’ no traducida de ~ 40 bases (3’UTR)


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Estructura del gen y el mensajero
procariota

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Transcripción Eucariotas
RNAs Polimerasa en Eucariotas
• 1- Existen tres tipos de RNA polimerasa

La I, la II y la III

• RNA polimerasa I, 13 subunidades. Se localiza en el


núcleo y en el nucleolo. -> Síntesis de rARN 45S.

• RNA polimerasa II, 12 subunidades. Se localiza en el


nucleoplasma. -> Síntesis de los hnRNA (transcrito
primario), los precursores de los mRNA.

• RNA polimerasa III, 17 subunidades. Se localiza en el


nucleoplasma. -> Síntesis rRNA 5S y tRNA.

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Transcripción Eucariotas

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Transcripción
Eucariotas

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29
Transcripción
Eucariotas

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Transcripción Eucariotas

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Transcripción Eucariotas

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Eliminación de intrones por corte y empalme (splicing)

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Reacción transesterificación
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Regla GU-AG

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34
Empalmosoma
(Spliceosome)

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35
Autosplicing en Tetrahymena (Tom Cech 1981)

RIBOZIMA
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36
Estructura mensajero eucariota

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37
Flujo de la
información en
eucariotas

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Diferencias eucariotas - procariotas

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Diferencias eucariotas - procariotas

Característica Procariota Eucariota

Promotor Cajas y zona operadora Solo cajas

Cistrón Policistrones Monocistrones

RNA polimerasa una sola, con 5 subunidades


3 RNA polimerasas.
distintas

El RNA recién transcrito, no Contiene, al comienzo de la cadena, 7-metil-


Estabilización tiene. guanosina o CAP, y al final de la cadena, una
secuencia poli A.

RNA pol, se autoacopla al RNA pol, necesita la presencia de proteínas de


Comienzo
promotor iniciación, que se unan antes que ella al ADN.

Tiene y se eliminan mediante splicing (corte y


Intrones No tiene
empalme).

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Lugar de acción Inmediatamente, al ser creado En el citoplasma.

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Transcripción inversa

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El “dogma” central revisado

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RNA World

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RNA de interferencia

RNA interference

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44
MicroRNAs

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Links de interés

 DNA, RNA, protein


 Image Library of Biological Macromolecules - DNA
DNA berkeley
 DNA Learning Center
 Beginner's guide to Molecular Biology
 Glosario de Genética molecular
 Central Dogma
 Animación de la transcripición
 Animación del splicing
 Animación del RNA de interferencia

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