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QUÍMICA ANALÍTICA

CROMATOGRAFÍA DE CAPA FINA


La cromatografía en capa fina (en inglés Thin Layer Chromatography o TLC) es una técnica analítica rápida y sencilla, muy utilizada en los laboratorios
químicos. Sirve para separar mezclas de sustancias y para identificar/caracterizar o para determinar semicuantitativamente componentes individuales.

Aparatos y materiales:
Cerrado herméticamente Frente del - Cubeta transparente cromatográfica (con tapa hermética).
disolvente - Placas de cromatografía: preparadas por uno mismo o ya fabricadas.
Muestra Referencia
(Fase Móvil) - Pipetas (jeringa) de microlito.
- Recipiente de vidrio con pulverizador.
- Probeta o matraz Erlenmeyer con tapón (para preparar y mezclar la fase móvil).
- Secador.
a Posición final - Plantilla para TLC o regla.
b del compuesto
- En caso necesario (Reveladores): lámpara UV para comprobar la fluorescencia o la
disminución de la misma. Vapores de yodo, entre otros.
Y
Xa Xb
Punto de inicio del Los dos adsorbentes (fase estacionaria) más ampliamente utilizados son la gel de sílice
compuesto (línea) (SiO2) y la alúmina (Al2O3), ambas de carácter polar. La alúmina anhidra es el más activo
de los dos, es decir, es el que retiene con más fuerza a los compuestos; por ello se utiliza
Puntos de siembra
para separar compuestos relativamente apolares (hidrocarburos, haluros de alquilo,
éteres, aldehidos y cetonas). El gel de sílice, por el contrario, se utiliza para separar
Fase Móvil sustancias más polares (alcoholes, aminas, ácidos carboxílicos).
CROMATOGRAFÍA PLANAR TÍPICA

Gel de sílice
Utilizar fase móvil idónea
El proceso de adsorción se debe a
Placa soporte de aluminio
(Fase Estacionaria)

interacciones intermoleculares de Esta técnica de cromatografía líquida de adsorción en capa fina,


tipo dipolo-dipolo o enlaces de corresponde a la modalidad analítica, esto es, sirve sólo con

El orden de elución de un compuesto se incrementa al aumentar la


polaridad de la fase móvil o eluyente. El eluyente puede ser un
hidrógeno entre el soluto y el fines analíticos. Si se desea obtener muestras de los compuestos
adsorbente. El adsorbente debe ser separados, hay que recurrir a otra modalidad llamada
inerte con las sustancias a analizar “preparativa” en la que la única diferencia con la descrita es que
y no actuar como catalizador en la cantidad que se deposita de mezcla es mucho mayor y,

disolvente único o dos miscibles de distinta polaridad.


naturalmente, el espesor de la capa de la fase estacionaria
reacciones de descomposición.
también es mayor (entre 0,5mm y 1,0 mm).

a+b
a

a+b
b

Rf = 0,1 Rf = 0,9 Mezcla de 1 y 2.


Eluyente 1 Eluyente 2 Se observan los dos
componentes.
Iguales condiciones de preparación

Determinación del Rf (Rate factor o hRf): Disolvente idóneo para la separación de una mezcla de dos
La retención se puede explicar en base a componentes.
la competencia que se establece entre el
soluto a separar y la fase móvil por
adsorberse a los centros activos polares Y: Recorrido del disolvente X: Recorrido de la muestra (compuesto)
de la fase estacionaria. Así, las moléculas
de soluto se encuentran adsorbidas en la
fase estacionaria y a medida que se
X
Entre los factores que influyen en el valor de Rf a Rf =
produce la elución van siendo
están: el envejecimiento y composición del Y
desplazadas por la fase móvil. b
disolvente; la naturaleza, humedad y tratamiento Y
La distancia recorrida por el compuesto
de la placa; el flujo de aire en la cámara; la Xa Xa Xb
se mide desde el centro de la mancha. Si
temperatura, condiciones de equilibrio, cambio Xb R f(a) = R f(a) =
ésta es excesivamente grande, se Y Y
obtendrá un valor erróneo del Rf. en la composición del disolvente al fluir sobre la
placa; las dimensiones de la cámara de desarrollo; Puntos de siembra
Rf (a) > Rf (b)
las impurezas de la muestra.
Entonces B es más polar que A.
Cálculo del factor de retención (Rf)
Cuando son visibles, se puede determinar para cada una de las
manchas el valor de Rf (factor de retención), o la distancia que
Visítanos en Facebook: cada compuesto se desplaza en la placa. Cada compuesto tiene
@Paracelsoquimica un Rf característico que depende del disolvente empleado y del
tipo de placa de CCF utilizada, pero es independiente del
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS: recorrido del disolvente. De esta manera se puede ayudar a
- Uso de técnicas cromatográficas en la identificación de residuos de antibióticos identificar un compuesto en una mezcla al comparar su Rf con el
veterinarios (Tesis – UNMSM, 2016). de un compuesto conocido (preferiblemente cuando se hacen
- Análisis químico cuantitativo (Daniel C. Harris – 3ra edición). eluir en la misma placa de CCF).
- USP 42: <201>, <621> (Prueba de Identificación por Cromatografía en Capa Delgada).