UNIVERSIDAD RICARDO PALMA

FACULTAD DE MEDICINA HUMANA

LABORATORIO DE BIOQUÍMICA Y NUTRICIÓN

PRÁCTICA Nº 07

CETOACIDOSIS DIABÉTICA. DETERMINACIÓN DE HCO3- SÉRICO. CETONEMIA Y

CETONURIA. INTERRELACIÓN METABÓLICA.

SEMESTRE 2022-II
 Rector 

DR. ELIO IVÁN RODRÍGUEZ CHÁVEZ

Vicerrector Académico 

DR. FÉLIX ROMERO REVILLA

 Decano

Dra. María Socorro Alatrista de Bambarén

 
Autores:

Dra. Nancy Jo Vargas

(Coordinadora General del Curso)

Q.F. Cecilia Katherine Rojas Guerrero

(Coordinadora de Laboratorio)

Lima - Perú

2022-II

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 PRÁCTICA Nº 07

El sujeto diabético se caracteriza por presentar alteración del metabolismo de los carbohidratos,
proteínas y de los lípidos. La lipólisis produce una elevación de los ácidos grasos libres y
consecuentemente el incremento de cuerpos cetónicos. La cetonemia ocasiona una disminución del
pH sanguíneo lo cual ocasiona una disminución de la concentración del HCO3- sanguíneo. (Acidosis
diabética)

A.- DETERMINACIÓN DEL BICARBONATO

FUNDAMENTO:
El HCO3- sérico o plasmático es neutralizado con HCl desprende CO2. El ácido que no reacciona se
determina a través de una titulación con NaOH, obteniéndose por diferencia la concentración de
HCO3-

PROCEDIMIENTO
Se usa suero o plasma obtenido en anaerobiosis , empleando aceite mineral en el momento de su
obtención.

NEUTRALIZACIÓN DEL BICARBONATO

Colocar en un beaker o matraz los siguientes componentes:
a) 5 ml de HCl 0.01N
b) 1 ml de suero ó plasma
c) 1 gota de alcohol caprílico.
d) Agitar suavemente por rotación por 2’
e) Incubar 15’ a 37°C
f) Añadir 20 ml agua destilada hervida y fría.
g) Añadir 3 gotas del colorante fenosulfonthaleina (PSP).

TITULACIÓN
Usando una bureta, agregar solución de NaOH 0.01 N hasta que el color del colorante cambie de
color amarillo (ph 6.8) al rosado (ph 8.2)

EXPRESIÓN
Calcular los mEq/L del sujeto normal y compararla con un sujeto diabético descompensado

VN= 26-32 m Eq/L

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B.- DETERMINACIÓN DE GLUCOSA SÉRICA

Determinar la concentración de glucosa sérica siguiendo el siguiente esquema:

N° Tubo Blanco Standard Muestra

Problema
ST. Glucosa: 100 mg/dl: (ul) - 10 -
Suero : 0' (ul) - - 10
Reactivo enzimático de glucosa: ml 1 1 1
Mezclar. Incubar 37° C x 10' o 20 minutos a T° ambiente. Leer Abs en el espectrofotómetro a 505
nm, frente al Bl

CÁLCULO.- Haciendo uso del factor de calibración expresar la glucosa en mg/dl

VN = <100 mg/dl

C.- DETERMINACIÓN DE GLUCOSURIA

Para determinar la presencia de glucosa en orina, seguir el siguiente esquema:

Tubo N° Muestra
Problema
Orina ml 0.5
React. Benedict. ml 2.0

Mezclar. Colocar a 100° C x 5'. Enfriar ( hielo). Observar la formación de precipitado.

D.- DETERMINACIÓN DE CETONURIA

FUNDAMENTO

La presencia de cuerpos cetónicos se determina por el test de Rothera, frente al reactivo de

nitroprusiato de Na forma un anillo púrpura rojizo.

PROCEDIMIENTO:

En un tubo de prueba colocar

a) 1 ml orina
b) 1 gr de SO4(NH4)2
c) 3 gotas de nitroprusiato de Na al 10%
d) Mezclar
e) 1 ml de NH4OH en zona

Observar:
Aparición de un anillo púrpura o morado = (+)

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REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:

1. Jo, N., Rojas, C. Guía de Laboratorio de Bioquímica y Nutrición. Universidad Ricardo Palma.
(2021).https://sites.google.com/urp.edu.pe/facultad-de-medicina-humana/inicio
2. Cetoacidosis Diabética - CAD. Instituto Med. https://youtu.be/bTMmn7FeDwE
3. Mecanismo de la Reacción de Benedict - Formación del reactivo. Organic Tube.
https://youtu.be/hDJlSHM5U4s

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