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MACROPROCESO CÓDIGO: IN-P13-POE20

INVESTIGACIÓN
PROCESO VERSIÓN: 1
EJECUCIÓN Y SEGUIMIENTO
FECHA: junio de 2021
DELPROYECTO DE INVESTIGACIÓN

PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESTÁNDAR (POE)

Reproducción de Animales de Laboratorio

REVISADO POR APROBADO POR


Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales Responsable Institucional
CICUA Decana Facultad de Ciencias

Aviso Legal: La información contenida en este documento, será para el uso exclusivo de la
Pontificia Universidad Javeriana, quien será responsable por su custodia y conservación en
razón de que contiene información de carácter confidencial o privilegiada. Esta información
no podrá ser reproducida total o parcialmente, salvo autorización expresa de la Oficina de
Secretaría General de la Pontificia Universidad Javeriana.
PROCEDIMIENTO OPERATIVO CÓDIGO: IN-P13-POE20

ESTÁNDAR
VERSIÓN: 1
Reproducción de animales de
laboratorio FECHA: junio de 2021

1. OBJETIVO
Describir el procedimiento del sistema de reproducción, cría, levante y reemplazo de
las líneas o cepas de roedores, garantizando la producción de animales homogéneos
con buenas características fenotípicas y genotípicas, que no alteren los posibles
resultados de un proceso de investigación.

2. ALCANCE
Inicia con la selección de animales para reproducción, el manejo reproductivo de los
animales resultantes desde su nacimiento, incluyendo el destete, sexaje, hasta el uso
de los animales.

Consideraciones especiales para otras especies se agregan en la sección de Anexos.

3. DEFINICIONES
 Animal de laboratorio: animal usado para la investigación científica, ensayos
normalizados, producción y/o docencia, que para el caso se constituirá únicamente
por animales vertebrados.
 Apareo: unión sexual de un macho y una hembra con el fin de permitir la
reproducción.
 Ciclo estral: ciclo que comprende cambios fisiológicos inducidos por hormonas
reproductivas, inicia con la pubertad en hembras sexualmente maduras y se
interrumpe por fases de anestro o preñez. En roedores consta de 4 etapas:
proestro, estro, metaestro y diestro.
 Citología vaginal: técnica reproductiva que permite la detección de las diferentes
fases del ciclo estral tras exfoliación de la pared vaginal y puede ser utilizada como
estrategia para definir el momento de apareo a través de la determinación del
proestro y de esta forma disminuir agresiones por falta de receptividad de la
hembra.
 Colonia fundación: animales utilizados como reproductores para la producción
del pedigrí de la colonia, hacen parte del pedigrí más valioso debido a que es la
fuente de animales puros controlados genéticamente.
 Colonia producción: animales provenientes de la colonia fundación utilizados
para diferentes fines de investigación: experimentos, prácticas o expansión de
cría, entre otros.
 Diestro: fase del ciclo estral de regresión en la que el cuerpo lúteo completa su
desarrollo y el útero se prepara para recibir al embrión con predominancia de la
progesterona.
 Endocría: apareamiento entre individuos que se encuentran más emparentados
que el promedio de parentesco de una población. Se trata de un apareamiento
dirigido.
 Estro: momento del ciclo reproductivo en que la hembra acepta el macho, permite
la monta y la cópula. Esta conducta de apareamiento es inducida por la acción de
estrógenos que explican los cambios comportamentales y en el tracto reproductor.
 Exocría: apareamiento entre grupos de individuos genéticamente distantes, que
pueden ser razas, líneas, familias o variedades distintas.

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 Gestación: desarrollo del zigoto de los mamíferos en su etapa intrauterina, desde


la fecundación hasta el nacimiento.
 Habituación o acostumbramiento: proceso por el cual el animal aprende a
través de un estímulo repetitivo para así adaptarse y dejar de reaccionar ante este.
 Impedanciometría: técnica de diagnóstico reproductivo que a través de la
recepción de ondas eléctricas permite la detección de ciertas fases del ciclo estral
(p.ej., proestro).
 Macroambiente: todo lo relacionado al ambiente físico de la sala de alojamiento
de los animales (encierro secundario).
 Metaestro: período de recuperación posterior al estro (fase luteogénica –
formación del cuerpo lúteo), en el cual se produce una disminución de estrógenos
y aumento progresivo de la progesterona.
 Microambiente: ambiente físico inmediato que rodea al animal, que contiene
todos los recursos con los que el animal tiene contacto directo (encierro primario).
 Proestro: período anterior al estro en el que ocurren grandes cambios endocrinos
por efecto de la progesterona, inicia la regresión del cuerpo lúteo simultánea con
el crecimiento folicular como consecuencia de la acción de la FSH (hormona folículo
estimulante).

4. FUNDAMENTOS
Las prácticas reproductivas se realizan para lograr producir animales homogéneos
fenotípica y genotípicamente, optimizando el desarrollo de los proyectos de
investigación, así como los resultados de estos, garantizando la uniformidad genética
requerida para las diferentes especies de animales de laboratorio.
La información genealógica (pedigrí) permite la selección apropiada de parejas
reproductoras y de animales de experimentación que no tengan relación de
parentesco o con relación de parentesco conocida para el caso se cruces endogámicos
o exogámicos.
Las estrategias de reproducción implican la identificación correcta del genotipo,
favoreciendo al mínimo animales con genotipos no deseados. Por tal motivo la
evaluación de cada parto, la presencia de camadas de baja talla o defectos genéticos
visibles son indicadores para no usar los animales en reproducción.

4.1. Roedores
4.1.1. Características reproductivas
- Las hembras alcanzan su madurez sexual a las 7-8 semanas de vida.
- La vida sexual de las hembras se prolonga hasta una edad muy avanzada (7 a
10 meses de vida).
- El ciclo estral dura de 4 a 6 días. Durante el estro, las hembras están receptivas
y aceptan la monta del macho.
- Las hembras de estas especies pueden entrar en estro dentro de las 24 h
posteriores al parto.
- En la orina del macho, y en menor grado de la hembra, existen compuestos
odoríferos muy fuertes que sirven para marcar el territorio y regular la actividad
sexual y social del grupo.

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- Los machos de la mayoría de las líneas de ratones de laboratorio son púberes


(con actividad espermática establecida) entre 6 y 8 semanas y mantienen la
fertilidad prácticamente toda la vida.
- La reproducción puede verse considerablemente afectada por diferentes factores
macro y microambientales, por ejemplo:
 Alteraciones en el fotoperiodo se relacionan con problemas ováricos
(ovarios poliquísticos, mala maduración folicular, deterioro luteal o atrofia
ovárica).
 Cambios bruscos de temperatura y ruidos fuertes se relacionan con estrés
y problemas derivados que pueden afectar las tasas reproductivas (p.ej.,
barbering).
 Condiciones de alojamiento indeseables que se relacionan con estereotipias
y problemas comportamentales que afectan la reproducción.

4.1.2. Esquemas reproductivos


Normalmente se usan tres tipos de esquemas reproductivos: las parejas, los
tríos y el harén. Las parejas pueden ser de por vida (monogámicas), los tríos están
formados por un macho y dos hembras y el harén consiste en un macho con dos o
más hembras. En el caso de machos transgénicos (o mutantes), donde se quiere
propagar el genotipo, o durante el desarrollo de líneas congénicas, se suele rotar al
macho una vez por semana (mínimo 4 días) con distintas hembras (generalmente en
tríos) para optimizar la reproducción. Se aconseja dejar al macho en su jaula y rotar
las hembras. Como regla general, no es aconsejable colocar más de un macho en la
misma jaula con fines reproductivos, ya que normalmente se pelean por razones de
dominio territorial.

4.1.3. Determinación del sexo o sexaje de los animales:


Se realiza por simple observación de la zona perianal a partir de las 3 semanas.
Para dicho propósito se evalúa la distancia entre la papila genital y la apertura anal,
la cual es casi el doble en los machos. El tamaño de la papila genital es también
ligeramente mayor en los machos. Como una alternativa, es posible observar la parte
ventral de las crías, entre los días 9 y 15, y distinguir a las hembras por la falta de
pelo alrededor de los pezones, también es posible observar una pequeña mancha
negra en el escroto de los machos pigmentados desde el primer día de vida.

4.1.4. Sistema de endocría (endogámico):


Sistema de cruzamiento riguroso por cruces entre hermanos por más de 20
generaciones. Este esquema reproductivo aumenta el grado de homocigosis y genera
animales genéticamente idénticos (isogénicos). En la UBC se prefieren los
apareamientos monogámicos y se maneja un sistema basado en un núcleo
reproductor o colonia de fundación (a la que se le realiza un control genético
periódico) del que se deriva la colonia de producción o expansión para obtener los
animales utilizados en experimentación.

4.1.5. Sistema de exocría (exogámico):

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Sistema de apareamiento dirigido entre individuos cuyo grado de parentesco


es menor a la media de parentesco de la población a la cual pertenecen. La exogamia
consiste en el apareamiento entre grupos de individuos genéticamente distantes, que
pueden ser razas, líneas, familias o variedades distintas. Este sistema de
apareamiento aumenta la heterocigosis y en consecuencia las F1 híbridas presentarán
menor uniformidad de caracteres exteriores. La utilidad práctica es que aumenta la
variabilidad genética de los animales para los caracteres como tamaño, vigor y
fertilidad. Para el mantenimiento de stocks de animales exocriados (no
consanguíneos) es necesario establecer sistemas de cruzamiento especiales que
eviten el aumento de los niveles de consanguinidad en el grupo.
Para colonias exocriadas pequeñas (con menos de 25 parejas de reproducción),
como es el caso de la UBC, se indica el uso de sistemas de cruzamiento que eviten el
máximo índice de consanguinidad para mantener el índice por debajo de 1% por
generación y no superar 10-20% de consanguinidad acumulada (ver Tabla 1).

Tabla 1. Esquema de cruzamiento para evitar la consanguinidad en colonias pequeñas (8


parejas)
Hembra Nueva caja Macho
1 1 2
2 2 4
3 3 6
4 4 8
5 5 1
6 6 3
7 7 5
8 8 7

5. CONDICIONES GENERALES
 Toda decisión sobre la selección, caracterización o reproducción de los animales
debe ser aprobada por el coordinador de la UBC.
 Al seleccionar los animales reproductores debe verificarse su buen estado de salud
y que cumplan con las características de un reproductor de alta calidad para
facilitar la expresión de su potencial genético y el mejoramiento de características
específicas en la colonia de la UBC.
 Las acciones que involucren manipulación de los animales deben ser supervisadas
y realizadas por personal entrenado y capacitado para garantizar el bienestar de
los animales.
 La observación diaria de los animales incluye evidenciar la presencia de partos o
mortalidades y su correspondiente registro.
 En todos los procesos que impliquen manipulación se indica realizar
acostumbramiento o habituación de los animales a la sujeción y al manejo por lo
menos durante 3 días.
 Es necesario establecer sistemas de manejo periódicos para minimizar la
contaminación genética en colonias endocriadas resultante de mutaciones y de
apareamientos indebidos.

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 Los genotipos recientemente generados, deben ser monitoreados y lo nuevos


fenotipos que afecten negativamente el bienestar deben ser reportados ante el
CICUA realizando un manejo que no afecte la salud y bienestar.

6. MATERIALES Y/O EQUIPOS


 Citología vaginal
- Agua destilada estéril
- Colorante Wright
- Goteros
- Hisopos estériles
- Láminas cubre objetos
- Láminas porta objetos
- Marcadores
- Metanol
- Microscopio óptico
- Papel secante
- Pipeta Pasteur
- Puntas de micropipeta
- Riñonera o recipiente de tinción
- Solución bufferada
 Balanza dinámica
 Esferos
 Formatos y fichas de identificación
 Gasas estériles
 Impedanciómetro

7. DESCRIPCIÓN DEL PROCEDIMIENTO


7.1. Sistema de reproducción, cría y levante de roedores
RESPONSABLES
No. DESCRIPCIÓN
UNIDAD CARGO
Selección de parejas:
a. Seleccione los animales a utilizar antes del
apareamiento:
Profesional,
- Animales endocriados: verifique que el apareo se
técnico o
1. haga entre hermanos. UBC
auxiliar
- Animales exocriados: evite la consanguinidad en la
entrenado
medida de lo posible verificando el sistema de
cruzamiento a emplear.
b. Realice una revisión completa de los individuos.
Selección de técnica reproductiva:
Elija y lleve a cabo la técnica reproductiva de
Profesional,
sincronización o determinación del ciclo estral de los
técnico o
2. animales: UBC
auxiliar
- Citología Vaginal.
entrenado
- Impedanciometría.
- Sincronización hormonal.

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RESPONSABLES
No. DESCRIPCIÓN
UNIDAD CARGO
- Sincronización por exposición previa a viruta del
macho (efecto Whitten), de preferencia tres días
antes de la monta.
Apareamiento:
a. Aparee los animales cuando hayan alcanzado la
madurez sexual (7-10 semana: 60 a 70 días en
machos y 90 días en hembras) o el peso ideal
(ratones: macho: 25,6±1,7 g / hembra:
19,8±1,3 g; ratas: macho mínimo 190 g y
hembra mínimo 150 g).
b. Al momento de realizar un apareo, introduzca
a la hembra a la caja del macho o permita que
este sea ubicado en la caja antes que la
hembra.
c. Si lo requiere, aplique metodologías para la
confirmación del apareo o confirmación de la
preñez:
- Presencia de esperma en el canal vaginal (24 h
posteriores a la monta a través de citología
Profesional,
vaginal).
técnico o
3. - Seguimiento riguroso del peso de la hembra UBC
auxiliar
durante la gestación por lo menos una vez a la
entrenado
semana.
- Evaluación y palpación abdominal suave para
determinar la presencia de fetos (segundo y tercer
tercio de la gestación).
d. Registre todos los apareos y las técnicas
reproductivas utilizadas en el formato
Procedimientos Reproductivos en Animales de
Laboratorio.
e. Evite alojar o permitir contacto con machos
genéticamente diferentes dentro de los
primeros días de gestación (cinco), para evitar
la posibilidad de que detenga la preñez en
forma prematura (efecto Bruce).
Nota: tenga en cuenta que ninguno de estos
métodos garantiza la confirmación de gestación
en un 100%.
Gestación y parto:
a. Confirmada la preñez monitoree
periódicamente el peso de la hembra para
Profesional,
determinar la evolución de la gestación y
técnico o
4. diligencie el registro correspondiente (formato UBC
auxiliar
Pesaje de animales).
entrenado
b. Realice la mínima manipulación posible de la
hembra gestante, pero monitoree
frecuentemente para identificar el inicio del

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RESPONSABLES
No. DESCRIPCIÓN
UNIDAD CARGO
trabajo de parto y poder reaccionar en caso de
presentación de distocia.
Nota: se asume un parto distócico cuando una
hembra lleva más de 18 a 24 horas en trabajo de
parto y/o hay signos de incomodidad y pérdida
de bienestar.
c. Una vez detectado el parto realice la mínima
manipulación posible de la caja, la hembra y/o
de las crías.
d. En los ratones, realice el conteo de crías al
tercer día posparto, evitando en la medida
posible la manipulación directa.
e. Consigne el parto en la ficha de identificación
de la caja, en el formato de Partos y Destetes
y en el formato de Reporte de novedades del
alojamiento.
Destete:
a. Realice el destete de los animales entre los 18
y 21 días de vida de los animales, siendo ideal
hacerlo a los 21 días.
b. Pese la camada al destete y registre este peso
en la ficha de identificación.
c. Separe a los animales de la madre y llévelos a
una caja limpia con alimento y agua ad libitum.
d. Si lo considera necesario, deje alimento fuera
del comedero para facilitar el acceso o
suministre dietas blandas de alta palatabilidad. Profesional,
e. Durante el destete realice el sexaje de los técnico o
5. UBC
animales y confírmelo al momento de la auxiliar
marcación. entrenado
f. Registre todos los procedimientos en las fichas
correspondientes, el formato de Partos y
Destetes y en el formato de Reporte de
novedades del alojamiento.
g. Identifique la nueva caja de animales destetos
con la ficha correspondiente y en un período no
mayor a 10 días marque los animales con el
sistema de elección (p.ej., muescas en las
orejas). Ver POE Manejo de población de
animales.

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7.2. Citologías vaginales


RESPONSABLES
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UNIDAD CARGO
Selección de hembras:
Seleccione cuidadosamente las hembras a las que se les Profesional,
realizará el procedimiento reproductivo garantizando su técnico o
1. UBC
edad (70-90 días), peso (ratas: 160-240 g), procedencia auxiliar
(adecuada para el apareamiento) y estado de salud óptimo. entrenado

Toma de citología vaginal:


a. Coloque una punta de micropipeta en un extremo
de una pipeta Pasteur (Figura 1) o coloque el
capuchón del gotero en el extremo de una punta
de micropipeta estéril (50 a 1000 µl para ratas y
0,5 µl a 20 µl para ratones).
b. Cargue la micropipeta (presionando la pipeta
Pasteur o el capuchón del gotero) con agua
destilada estéril (volumen aproximado de 10 a 30
µl).
c. Sujete firmemente al animal haciendo una pinza
con la piel del cuello (ver POE Sujeción de animales
de laboratorio) e inclínelo suavemente hacia
craneal para exponer más fácilmente la región
inguinal.
d. Coloque el extremo de la micropipeta previamente
cargada con agua destilada en la abertura del canal
vaginal, teniendo cuidado de no penetrar el orificio
vaginal (o cervical) porque se puede generar Profesional,
seudopreñez. técnico o
2. UBC
Nota: no introduzca la punta de la micropipeta más auxiliar
de 0,5-1 cm de profundidad. entrenado
e. Presione suavemente la bomba del gotero para
expulsar de un cuarto a la mitad del volumen de
agua destilada en la apertura del canal vaginal.
f. Una vez se observe el líquido aspirado de forma
espontánea en la punta de inserción, libere
lentamente la presión ejercida sobre el bulbo.
Nota: evite liberar la presión demasiado rápido.
g. Repita los pasos de las etapas anteriores entre 2 y
3 veces (de preferencia sin retirar la micropipeta
de la vagina) para obtener un número suficiente de
células en una sola muestra.
h. Coloque el fluido sobre un portaobjetos de vidrio
de preferencia en una única gota.
i. Marque la lámina con la identificación del animal.
j. Deje secar la lámina al aire o sobre una plancha
térmica o superficie caliente.
k. Una vez seca, realice la tinción de la lámina y
proceda a leerla.

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RESPONSABLES
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UNIDAD CARGO
Tinción y lectura de citología vaginal (determinación
de las fases del ciclo estral):
a. Una vez la lámina portaobjeto se encuentre seca,
colóquela sobre una gradilla.
b. Aplique el colorante de Wright cubriendo la lámina
de forma homogénea durante 2 minutos.
c. Pasado este tiempo, aplique la solución de buffer
fosfato (PBS) sobre el colorante y deje actuar
durante otros 2 minutos.
d. Descarte el colorante y lave cuidadosamente con
agua de la llave sin permitir la caída directa del
agua sobre el área teñida para evitar el deterioro
del material.
e. Con una toalla de papel impregnada en alcohol
70%, retire el exceso de colorante que haya
quedado en el respaldo y bordes de la lámina.
f. Deje secar la lámina al aire o sobre una plancha
térmica o superficie caliente.
Profesional,
g. Realice la lectura de la lámina utilizando un
técnico o
3. microscopio óptico identificando la fase según la UBC
auxiliar
celularidad observada:
entrenado
- Proestro: las células típicas son epiteliales nucleadas,
encontrándose también leucocitos en la fase
temprana. Estos finalmente desaparecen, y las células
nucleadas, mayores en número, son reemplazadas
gradualmente por otras no nucleadas cornificadas (ver
Figura 2).
- Estro: se caracteriza por la presencia de células 75%
nucleadas y un 25% cornificadas, siendo estas a veces
las únicas presentes. En el transcurso del estro
aparecen células epiteliales planas nucleadas; el flujo
vaginal se hace más abundante y caseoso (ver Figura
3).
- Metaestro: esta etapa se caracteriza por la presencia
de abundantes leucocitos y células intermediarias y
disminución de las células cornificadas (ver Figura 4).
- Diestro: se caracteriza por la presencia de células
epiteliales y leucocitos (ver Figura 5).

Confirmación de esperma:
La citología vaginal también puede ser utilizada para
confirmar el apareamiento a través de la identificación de
Profesional,
esperma en el canal vaginal:
técnico o
4. - Colecte la muestra de la misma forma en que se UBC
auxiliar
describió anteriormente.
entrenado
- Lea la lámina inmediatamente (en fresco) o espere a
que la muestra esté seca y realice la lectura en el
microscopio con la lámina sin teñir (ver Figura 6).

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7.3. Impedanciometría
RESPONSABLES
No. DESCRIPCIÓN
UNIDAD CARGO
Recomendaciones generales:
a. Utilice la técnica de impedancia o impedanciometría
para detectar de forma objetiva el proestro y facilitar el
apareamiento de los animales.
b. Habitúe el animal a la manipulación por lo menos 3 días
antes del procedimiento para garantizar mejores Profesional,
resultados (ver POE Sujeción en animales de técnico o
1. UBC
laboratorio). auxiliar
c. Realice esta medición únicamente entre las 13:00 y entrenado
15:00 horas del día para poder reconocer de forma
eficiente el momento propicio para el apareamiento.
d. Siga los pasos del instructivo Uso del impedanciómetro
para realizar la medición.

- Figuras

Fig 1. Demostración de micropipeta Fig 2. Proestro en rata Wistar.


insertada en pipeta Pasteur para toma de
citología vaginal.

Fig 3. Imagen microscópica del estro en rata Fig 4. Imagen microscópica del metaestro
Wistar. en rata Wistar.

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Fig 5. Imagen microscópica del diestro de Fig 6. Imagen microscópica de presencia de


rata Wistar. espermatozoides en el frotis vaginal.

- Cálculos:
Número de reproductores para una cantidad solicitada de animales, se calcula con el
promedio de crías por camada de la UBC en apareamientos monogámicos, con datos
del 2018 es:

 Rata: Wistar: promedio 11 crías/camada.


Lewis: promedio 9 crías/camada.

 Ratón: C57BL/6: promedio 6 crías/camada.


BALB/c: promedio 5,6 crías/ camada.

8. RELACIÓN DE REGISTROS
NOMBRE CÓDIGO
Registro de partos y destetes F-AV-001-11-01
Registro de procedimientos reproductivos en
F-AV-001-11-02
animales

9. DOCUMENTOS ASOCIADOS
IDENTIFICACIÓN DEL
NOMBRE
DOCUMENTO
F – Registro de peso de modelos animales
F – Reporte de novedades
F – Registro de marcación de animales
I – Marcación de animales
INTERNO
I – Densidad de Alojamiento
I – Uso impedanciómetro
POE – Sujeción en animales de laboratorio
POE – Población de animales
EXTERNO Guía cuidado y uso de animales de laboratorio

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10. DOCUMENTOS DE REFERENCIA


 Andrade, A. et al. (2006). Classificação dos animais de laboratorio quanto a status
genético. Animais de laboratório: criação e experimentação. pg. 67. ISBN
8575413864, 9788575413869
 CTI Reviews (2016). Foundations of Physiological Psychology. 7th edition. ISBN
1490267212, 9781490267210
 Charles river (2019). Lewis Rat Details. Disponible en:
https://www.criver.com/products-services/find-model/lewis-rat?region=3616
(consulta 23/01/2019).
 Ferré, L. (2010). Sistema Reproductor- Cambios en la fisiología ovárica por
estímulos hormonales. Recuperado de
http://www.dbbe.fcen.uba.ar/old/materias/fac/TPSistemaReproductor2010.pdf
(consulta 20/04/2018).
 Fuentes, F. et al. (2008). Guía de manejo y cuidado de animales de laboratorio:
Ratón. Ministerio de Salud, Instituto Nacional de Salud. Lima, Perú. Disponible en:
http://www.ins.gob.pe/insvirtual/images/otrpubs/pdf/GUIA_ANIMALES_RATON.p
df (consulta 20/04/2020).
 Galassi Geréz PF, Gullace FA. (s.f.). Reproducción en animales de laboratorio (1ª
parte: rata – ratón). Universidad de Buenos Aires. Disponible en:
http://dpd.fvet.uba.ar/cartelera/00010199.pdf (consulta 21/04/2020).
 Guénet, F. J.-L. (2003). Manual de Genética de roedores de laboratorio. España:
Universidad de Alcalá de Henares y la SECAL. Obtenido de Manual de Genética
de roedores de laboratorio.
 Husvéth, F. (2011). Phases of the estrous cycle. Physiological and Reproductional
aspects of animal production. Disponible en:
http://www.tankonyvtar.hu/en/tartalom/tamop425/0010_1A_Book_angol_05_te
rmeleselettan/ch12s02.html (consulta 15/04/2018).
 Jax laboratory (2019). Body Weight Information for C57BL/6J (000664).
Disponible en: https://www.jax.org/jax-mice-and-services/strain-data-sheet-
pages/body-weight-chart-000664 (consulta 21/04/2020).
 ILAR (2011). Environment, Housing, and Management. Guide for the care and use
of laboratory animals. 8 ed. National Academies Press (US). Disponible en:
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK54046/ (consulta 21/04/2020).
 Plant, T., Zeleznik, A. (2014). Neuroendocrine control of the ovarian cycle of the
rat- Overview of the estrous cycle. Physiology of Reproduction. pg. 1200. ISBN
012397769X, 9780123977694
 Ramírez, L. (2006). El ciclo estral. Mundo Pecuario, Vol. II, N°2, 30-31.
Recuperado de
http://www.saber.ula.ve/bitstream/123456789/21955/2/articulo_3.pdf (consulta
20/04/2018).
 Robledo, G. (2016). Genética técnicos para bioterio. Disponible en:
https://geneticabioterio.wordpress.com/apareamientos/ (consulta (30/04/2018).

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11. ANEXOS

ANEXO NOMBRE DEL ANEXO


Anexo 1 Sistema de reproducción, cría y levante de cobayos

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PROCEDIMIENTO OPERATIVO CÓDIGO: IN-P13-POE20

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ANEXO 1. SISTEMA DE REPRODUCCIÓN, CRÍA Y LEVANTE DE COBAYOS


(Cavia porcellus)

Fundamentos y Consideraciones generales


 Los sistemas de reproducción pueden emplear cruces monogámicos y
poligámicos (un macho para dos hembras aproximadamente) según las
necesidades.
 La madurez sexual en los machos se da a los 56 a 70 días de edad y en las
hembras a los 67 días de edad.
 El ciclo estral tiene una duración promedio de 16 días con un rango de 13 a 22
días.
 La cópula se reporta en la noche, después de la cópula la hembra expulsa un
tapón vaginal de moco, que sirve para evitar el reflujo del semen depositado
en la vagina. Su presencia es un signo evidente de que se ha producido la
cópula. Sin embargo, es difícil encontrarlo porque los animales suelen ingerirlo
inmediatamente.
 El período de gestación es relativamente largo (aproximadamente 68 días). El
parto ocurre generalmente en la noche con una duración entre 10 y 30 minutos
con intervalos de 7 minutos entre las crías (fluctuación entre 1 a 16 minutos).
 Las crías nacen maduras debido al largo período de gestación de las madres.
Nacen con los ojos y oídos funcionales provistos de incisivos y cubiertos de
pelos. Pueden desplazarse al poco tiempo de nacidas.
 El número y tamaño de las crías nacidas varía con la línea genética y nivel
nutricional de la madre. El número de crías por parto puede ser 1 a 6. El número
de camadas por año está entre 4 a 5.
 En esta especie se presenta celo posparto 2 a 3 horas después del parto, siendo
fértil en un 85% de los casos.
 El destete de estos animales se realiza alrededor de los 20 días de vida.
 Sexaje: a simple vista no es posible diferenciar los sexos, por lo que debe
manipularse al animal y hacerse revisión genital. Una presión en la zona
inguinal permite la salida del pene en el macho y de una hendidura en las
hembras.

Condiciones generales
 La selección de las parejas debe hacerse una vez se haya completado su
desarrollo fisiológico, pero de forma previa al apareo para reducir errores.

Procedimiento

RESPONSABLES
No. DESCRIPCIÓN
UNIDAD CARGO
Apareamiento:
Profesional,
a. Introduzca a la caja o bandeja de alojamiento el
técnico o
1. macho y seguido a la(s) hembra(s). UBC
auxiliar
b. Diligencie la Ficha de identificación, el formato de
entrenado
Registro de procedimientos reproductivos en

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RESPONSABLES
No. DESCRIPCIÓN
UNIDAD CARGO
animales y el Reporte de Novedades del
alojamiento.
c. Monitoree de forma quincenal el peso del animal
para evaluar el tiempo de preñez del animal (ver
formato Registro de peso de modelos animales).

Destete
a. Realice el destete a los 20 días de vida.
b. Realice el pesaje de la camada completa y regístrelo
(ver formato Registro de peso de modelos
animales).
c. Traslade los animales a una nueva jaula o bandeja.
d. Identifique la nueva Ficha de identificación.
Profesional,
e. Diligencie el formato de Registro de Partos y
técnico o
destetes y el Reporte de novedades. UBC
auxiliar
f. Proceda a marcar los animales a los 25 días de vida
entrenado
utilizando preferiblemente muescas en las orejas o
el método indicado por el CICUA o por Atención
Veterinaria (instructivo Marcación de animales y
formato Registro de marcación de animales).
g. Realice descarte temprano de animales que no
vayan a ser utilizados.

Referencias
 Fuentes, F. et al. (2008). Guía de manejo y cuidado de animales de laboratorio:
Ratón. Ministerio de Salud, Instituto Nacional de Salud. Lima, Perú. Disponible
en:
http://www.ins.gob.pe/insvirtual/images/otrpubs/pdf/GUIA_ANIMALES_RATO
N.pdf (consulta 20/04/2018).
 Guénet, F. J.-L. (2003). Manual de Genética de roedores de laboratorio.
España: Universidad de Alcalá de Henares y la SECAL. Obtenido de Manual de
Genética de roedores de laboratorio.
 ILAR (2011). Environment, Housing, and Management. Guide for the care and
use of laboratory animals. 8 ed. National Academies Press (US). Disponible en:
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK54046/ (consulta 20/04/2018).
 Plant, T; Zeleznik, A. (2014). Neuroendocrine control of the ovarian cycle of
the rat- Overview of the estrous cycle. Physiology of Reproduction. pg. 1200.
ISBN 012397769X, 9780123977694.

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