PRÁCTICA N°2

TÍTULO DE LA PRÁCTICA: CÓDIGO

GENÉTICO Y MUTACIONES
Logro del aprendizaje: Determina la secuencia de aminoácidos en función de la secuencia
de nucleótidos en el ADN.
Identifica los efectos de los diferentes tipos de mutaciones sobre la
estructura de proteínas
MATERIALES
Materiales de laboratorio: Materiales del estudiante :
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Guía de Prácticas 1 Cuaderno de notas 1
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denominación
PROCEDIMIENTO:
La información genética se encuentra almacenada en el núcleo (y también las mitocondrias) de nuestras células, dentro de
una cadena de ADN. Este almacén debe ser copiada en cadenas de ARN, las cuales llevan la información de un solo gen, el
cual permitirá que en el citoplasma se sintetiza una proteína específica. La secuencia de aminoácidos de la proteína final, por
tanto, corresponde a la secuencia de nucleótidos en el gen. Si uno de los nucleótidos del gen cambia de alguna forma, este
cambio se verá reflejado en la secuencia de aminoácidos de la proteína, lo que podría alterar su estructura (es decir, la forma)
y por tanto su función. Consideremos que incluso para construir un automóvil, cada pieza necesariamente debe ocupar un
sitio específico, y si falta o es reemplazada por una pieza diferente (por ejemplo un radiador por un radio), eso podría afectar
la función del auto.
Para demostrar esto, construiremos al azar una secuencia nucleotídica de 16 tripletes, siendo necesariamente el segundo
triplete uno de los siguientes: TTA, CTA o TCA y el penúltimo forzosamente debe ser CAT. Por ejemplo, nuestra secuencia
construida es:

5’ - GGC-CTA-TAA-CGC-CAA-GCA-GCT-CCA-ATT-CCC-TGC-GGC-AAG-CCT-CAT-ACC – 3’
 dirección de la transcripción

Al realizar la transcripción directa de esta secuencia, debe recordarse que si éste es el molde de ADN, debe ser leído de
manera antiparalela y complementaria; es decir, en dirección 3’  5’ y reemplazando A por U, T por A, C por G y G por C. De
esta forma, la secuencia de ARN debe quedar escrita en dirección 5’  3’, de izquierda a derecha:

5’ - GGU-AUG-AGG-CUU-GCC-GCA-GGG-AAU-UGG-AGC-UGC-UUG-GCG-UUA-UAG-GCC - 3’

Podemos observar que, de esta forma, ahora el segundo triplete es AUG, que según el código genético es el codón de inicio
(a partir de este codón comenzará la síntesis de la proteína), y el penúltimo codón en este caso es UAG (uno de los tres
codones sin sentido o “Stop”, señal de término de la traducción). Usando la Tabla del Código Genético, entonces podemos
transformar todos los tripletes en aminoácidos.
 GUÍA DE LABORATORIO GENÉTICA 2021

Tomado de: http://4.bp.blogspot.com/-

98MgkTEfQzs/VCTICEc47tI/AAAAAAAA6FQ/E2bVdkmPQR0/s1600/Codigo%2Bgenetico.jpg

Por tanto, la secuencia de aminoácidos que obtendríamos en nuestro caso sería:

Met – Arg – Leu – Ala – Ala – Gly – Asn – Trp – Ser – Cys – Leu – Ala – Leu – Stop

Esta cadena de unidades permitirá un enrollamiento específico, lo que dará una forma específica de la proteína, facilitando su función.

Efecto de las mutaciones:

Para considerar el efecto de la mutación, usaremos dos monedas que permitirán realizar un cambio aleatorio. Vamos a
considerar el nucleótido número 35 de nuestra secuencia de ADN inicial como una posición fija en la cual ocurrirán las
mutaciones que explicamos a continuación:

5’ - GGC-CTA-TAA-CGC-CAA-GCA-GCT-CCA-ATT-CCC-TGC-GGC-AAG-CCT-CAT-ACC – 3’

a) Sustitución: En este caso, lanzaremos una moneda, y si sale cara el cambio de este nucleótido será por uno del mismo
tipo (o purina o pirimidina) y si sale sello, entonces lo cambiaremos por un nucleótido del otro tipo. En nuestro caso, la
G que debemos cambiar es purina, lo que implica que si sale cara lo cambiaremos directamente por A, que es la otra
purina. En cambio, si sale sello tendríamos que lanzar la segunda moneda para decidir entre las dos pirimidinas (A si es
cara, T si es sello). Una vez realizado el cambio, hacer la transcripción y la traducción de la secuencia y observar qué
pasa con los aminoácidos en la proteína. Señalando qué tipo de mutación ocurrió (mutación sin sentido si es que apareció
un codón STOP debido al cambio, silenciosa si la secuencia de aminoácidos sigue siendo la misma, o de sentido
equivocado si el aminoácido que se esperaba en la secuencia normal fue reemplazado por otro diferente). Por ejemplo,
en nuestro caso salió una sustitución G por T:

5’ - GGC-CTA-TAA-CGC-CAA-GCA-GCT-CCA-ATT-CCC-TGC-GTC-AAG-CCT-CAT-ACC – 3’

La transcripción nos dará una secuencia:

5’ - GGU-AUG-AGG-CUU-GAC-GCA-GGG-AAU-UGG-AGC-UGC-UUG-GCG-UUA-UAG-GCC - 3’

Y la secuencia de aminoácidos será:

Met – Arg – Leu – Asp – Ala - Gly – Asn – Trp – Ser – Cys – Leu – Ala – Leu – Stop

Lo que significa que hubo una mutación de sentido equivocado, en el cual se cambió el aminoácido de la secuencia normal (Ala
en nuestro caso) por otro totalmente diferente.

b) Deleción o Inserción: En este caso, lanzamos la moneda una vez para seleccionar el tipo de mutación que ocurre (si sale
cara será una deleción y retiramos el nucleótido 35, si sale sello será una inserción, agregando un nucleótido más en la
posición 36). Entonces, nuevamente comenzamos con la secuencia original:

Autor: Ramsés Salas Asencios

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5’ - GGC-CTA-TAA-CGC-CAA-GCA-GCT-CCA-ATT-CCC-TGC-GTC-AAG-CCT-CAT-ACC – 3’

Si salió cara, decíamos que se retira el nucleótido 35, en nuestro caso quedaría así:

Cuando ocurra la transcripción, la secuencia cambiaría, y la formación de tripletes a partir del lugar de la deleción sería totalmente
diferente, incluso la secuencia de término UAG se perdería:

5’ - GGU-AUG-AGG-CUU-GCG-CAG-GGA-AUU-GGA-GCU-GCU-UGG-CGU-UAU-AGG-CC - 3’

La cadena de aminoácidos sería:

Met-Arg-Leu-Ala-Gln-Gly-Ile-Gly-Ala-Ala-Trp-Arg-Tyr-Arg-…

Si al lanzar la moneda se considera una inserción en la posición 36, entonces debemos lanzar la moneda una vez más para
decidir si el nuevo nucleótido será del mismo tipo (si sale cara, automáticamente pondremos el otro nucleótido de ese tipo) o será
diferente (si sale sello, lanzar por tercera vez la moneda para elegir qué nucleótido colocaremos). Por ejemplo, nuestra
secuencia original era:

5’ - GGC-CTA-TAA-CGC-CAA-GCA-GCT-CCA-ATT-CCC-TGC-GGC-AAG-CCT-CAT-ACC – 3’

Al lanzar la primera moneda nos indica que se trata de una inserción o también llamada adición, por lo que lanzamos una vez
más la moneda y nos sale sello, lo que implica que el nucleótido que se va a insertar debe ser una pirimidina (opuesto a G
que es purina). El resultado final es que debemos insertar T en la posición 37:

5’ - GGC-CTA-TAA-CGC-CAA-GCA-GCT-CCA-ATT-CCC-TGC-GGTC-AAG-CCT-CAT-ACC – 3’

Al realizar la transcripción, a partir del lugar de la mutación, el marco de lectura de 3 en 3 se correrá una posición:

5’ - GGU-AUG-AGG-CUU-GAC-CGC-AGG-GAA-UUG-GAG-CUG-CUU-GGC-GUU-AUA-GGC-C - 3’

La traducción de la proteína quedará alterada de la siguiente manera:

Met-Arg-Leu-Asp-Arg-Arg-Glu-Leu-Glu-Leu-Leu-Gly-Val-Ile-Gly-…

Los puntos suspensivos indican que la secuencia puede seguir creciendo hasta encontrar un codón STOP o hasta que termine
la secuencia del ARN mensajero. Como se ve, desde el punto en el cual ocurre la deleción o inserción, la secuencia de todos
los codones quedará afectada, lo que se llama cambio en el marco de lectura (frameshift en inglés).

ACTIVIDADES:

1.- Realice la práctica, construyendo su cadena de ADN de 48 nucleótidos. Luego, realizará la transcripción y la traducción
de esta secuencia, ADN:

ARN:

Proteína:

2.- Utilizando la secuencia original que construyó, realizará por separado dos sustituciones , una deleción y una adición,
obteniendo la secuencia de ARN y la de proteínas para cada una de ellas. Primera Sustitución ADN:

ARN:

Autor: Ramsés Salas Asencios

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Proteína:

Segunda Sustitución:
ADN:

ARN:

Proteína:

Deleción:
ADN:

ARN:

Proteína:

Adición:
ADN:

ARN:

Proteína:

3.- Responda:
a) ¿Cuál será la secuencia del ARN y de los aminoácidos obtenidos a partir de la información de la siguiente cadena
que será usada como molde?¿Qué pasará con la cadena de aminoácidos si sucede una deleción en el lugar
señalado con color rojo?
ATCGATTACGAGTCCCATGCGCTAGCTATCGACGTCATCTTACCTGCGACCGTAGCCG

b) ¿Por qué razones se considera que el efecto de las mutaciones queda disminuida en seres humanos?.

c) ¿Por qué a los codones UAA, UAG y UGA se les denomina codones sin sentido?

d) ¿Por qué se dice que el código genético es degenerativo?

REFERENCIAS
- Stansfield, W. Genética. Colombia: McGraw-Hill Latinoamericana; 2001. (Código UCSUR 576.5/S78).
- Gardner, E., Simmons, M. & Snustad, P. Principios de Genética. México: Limusa-Wiley; 1996. (Código UCSUR
576.5/G25).

Autor: Ramsés Salas Asencios