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INMUNOLOGÍA Y GENÉTICA
PRÁCTICA N° 1
CÓDIGO GENÉTICO Y MUTACIONES

La información genética se encuentra almacenada en el núcleo (y también las mitocondrias) de

nuestras células, dentro de una cadena de ADN. Este almacén debe ser copiada en cadenas de
ARN, las cuales llevan la información de un solo gen, el cual permitirá que en el citoplasma se
sintetize una proteína específica. La secuencia de aminoácidos de la proteína final, por tanto,
corresponde a la secuencia de nucleótidos en el gen. Si uno de los nucleótidos del gen cambia de
alguna forma, este cambio se verá reflejado en la secuencia de aminoácidos de la proteína, lo que
podría alterar su estructura (es decir, la forma) y por tanto su función. Consideremos que incluso
para construir un automóvil, cada pieza necesariamente debe ocupar un sitio específico, y si falta
o es reemplazada por una pieza diferente (por ejemplo, un radiador por un radio), eso podría afectar
la función del auto.
Para demostrar esto, construiremos al azar una secuencia nucleotídica de 16 tripletes, siendo
necesariamente el segundo triplete uno de los siguientes: TTA, CTA o TCA y el penúltimo
forzosamente debe ser CAT. Por ejemplo, nuestra secuencia construida es:
5’ - GGC-CTA-TAA-CGC-CAA-GCA-GCT-CCA-ATT-CCC-TGC-GGC-AAG-CCT-CAT-ACC – 3’
 dirección de la transcripción

Al realizar la transcripción directa de esta secuencia, debe recordarse que, si éste es el molde de
ADN, debe ser leído de manera antiparalela y complementaria; es decir, en dirección 3’ → 5’ y
reemplazando A por U, T por A, C por G y G por C. De esta forma, la secuencia de ARN debe
quedar escrita en dirección 5’ → 3’, de izquierda a derecha:
5’ - GGU-AUG-AGG-CUU-GCC-GCA-GGG-AAU-UGG-AGC-UGC-UUG-GCG-UUA-UAG-GCC -
3’
ARNm MADURO: AUG-AGG-CUU-GCC-GCA-GGG-AAU-UGG-AGC-UGC-UUG-GCG-UUA-UAG

Podemos observar que, de esta forma, ahora el segundo triplete es AUG, que según el código
genético es el codón de inicio (a partir de este codón comenzará la síntesis de la proteína), y el
penúltimo codón en este caso es UAG (uno de los tres codones sin sentido o “Stop”, señal de
término de la traducción). Usando la Tabla del Código Genético, entonces podemos transformar
todos los tripletes en aminoácidos.

Tomado de: http://4.bp.blogspot.com/-

98MgkTEfQzs/VCTICEc47tI/AAAAAAAA6FQ/E2bVdkmPQR0/s1600/Codigo%2Bgenetico.jpg
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INMUNOLOGÍA Y GENÉTICA
Por tanto, la secuencia de aminoácidos que obtendríamos en nuestro caso sería:
Met – Arg – Leu – Ala – Ala – Gly – Asn – Trp – Ser – Cys – Leu – Ala – Leu – Stop
Esta cadena de unidades permitirá un enrollamiento específico, lo que dará una forma específica
de la proteína, facilitando su función.

Efecto de las mutaciones:

Para considerar el efecto de la mutación, usaremos dos monedas que permitirán realizar un cambio
aleatorio. Vamos a considerar el nucleótido número 35 de nuestra secuencia de ADN inicial como
una posición fija en la cual ocurrirán las mutaciones que explicamos a continuación:
5’ - GGC-CTA-TAA-CGC-CAA-GCA-GCT-CCA-ATT-CCC-TGC-GGC-AAG-CCT-CAT-ACC – 3’

a) Sustitución: En este caso, lanzaremos una moneda, y si sale cara el cambio de este nucleótido
será por uno del mismo tipo (o purina o pirimidina) y si sale sello, entonces lo cambiaremos por un
nucleótido del otro tipo. En nuestro caso, la G que debemos cambiar es purina, lo que implica que
si sale cara lo cambiaremos directamente por A, que es la otra purina. En cambio, si sale sello
tendríamos que lanzar la segunda moneda para decidir entre las dos pirimidinas (A si es cara, T si
es sello). Una vez realizado el cambio, hacer la transcripción y la traducción de la secuencia y
observar qué pasa con los aminoácidos en la proteína. Señalando qué tipo de mutación ocurrió
(mutación sin sentido si es que apareció un codón STOP debido al cambio, silenciosa si la
secuencia de aminoácidos sigue siendo la misma, o de sentido equivocado si el aminoácido que
se esperaba en la secuencia normal fue reemplazado por otro diferente). Por ejemplo, en nuestro
caso salió una sustitución G por T:

5’ - GGC-CTA-TAA-CGC-CAA-GCA-GCT-CCA-ATT-CCC-TGC-GTC-AAG-CCT-CAT-ACC – 3’
La transcripción nos dará una secuencia:
5’ - GGU-AUG-AGG-CUU-GAC-GCA-GGG-AAU-UGG-AGC-UGC-UUG-GCG-UUA-UAG-GCC -
3’
Y la secuencia de aminoácidos será:
Met – Arg – Leu – Ala – Asp – Gly – Asn – Trp – Ser – Cys – Leu – Ala – Leu – Stop
Lo que significa que hubo una mutación de sentido equivocado, en el cual se cambió el aminoácido
de la secuencia normal (Gly en nuestro caso) por otro totalmente diferente.

b) Deleción o Inserción: En este caso, lanzamos la moneda una vez para seleccionar el tipo de
mutación que ocurre (si sale cara será una deleción y retiramos el nucleótido 35, si
sale sello será una inserción, agregando un nucleótido más en la posición 36).

Si salió cara, decíamos que se retira el nucleótido 35, en nuestro caso quedaría así:

Cuando ocurra la transcripción, la secuencia cambiaría, y la formación de tripletes a partir del lugar
de la deleción sería totalmente diferente, incluso la secuencia de término UAG se perdería:
5’ - GGU-AUG-AGG-CUU-GCG-CAG-GGA-AUU-GGA-GCU-GCU-UGG-CGU-UAU-AGG-CC - 3’
La cadena de aminoácidos sería:
Met-Arg-Leu-Ala-Gln-Gly-Ile-Gly-Ala-Ala-Trp-Arg-Tyr-Arg-…

Si al lanzar la moneda se considera una inserción en la posición 36, entonces debemos lanzar la
moneda una vez más para decidir si el nuevo nucleótido será del mismo tipo (si sale cara,
automáticamente pondremos el otro nucleótido de ese tipo) o será diferente (si sale sello, lanzar
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por tercera vez la moneda para elegir qué nucleótido colocaremos). Por ejemplo, nuestra secuencia
original era:
5’ - GGC-CTA-TAA-CGC-CAA-GCA-GCT-CCA-ATT-CCC-TGC-GGC-AAG-CCT-CAT-ACC – 3’
Al lanzar la primera moneda nos indica que se trata de una inserción o también llamada adición,
por lo que lanzamos una vez más la moneda y nos sale sello, lo que implica que el nucleótido que
se va a insertar debe ser una pirimidina (opuesto a G que es purina). El resultado final es que
debemos insertar T en la posición 37:

5’ - GGC-CTA-TAA-CGC-CAA-GCA-GCT-CCA-ATT-CCC-TGC-GGTC-AAG-CCT-CAT-ACC – 3’
Al realizar la transcripción, a partir del lugar de la mutación, el marco de lectura de 3 en 3 se correrá
una posición:

5’ - GGU-AUG-AGG-CUU-GAC-CGC-AGG-GAA-UUG-GAG-CUG-CUU-GGC-GUU-AUA-GGC-C
- 3’
La traducción de la proteína quedará alterada de la siguiente manera:
Met-Arg-Leu-Asp-Arg-Arg-Glu-Leu-Glu-Leu-Leu-Gly-Val-Ile-Gly-…

Los puntos suspensivos indican que la secuencia puede seguir creciendo hasta encontrar un codón
STOP o hasta que termine la secuencia del ARN mensajero. Como se ve, desde el punto en el
cual ocurre la deleción o inserción, la secuencia de todos los codones quedará afectada, lo que se
llama cambio en el marco de lectura (frameshift en inglés).

RESPONDA:
a) ¿Cuál será la secuencia del ARN y de los aminoácidos obtenidos a partir de la información
de la siguiente cadena que será usada como molde? ¿Qué pasará con la cadena de
aminoácidos si sucede una deleción en el lugar señalado con color rojo?
3’-ATCGATTACGAGTCCCATGCGCTAGCTATCGACGTCATCTTACCTGCGACCGTAGCCG-5’
b) ¿Por qué razones se considera que el efecto de las mutaciones queda disminuido en seres
humanos?
c) ¿Por qué a los codones UAA, UAG y UGA se les denomina codones sin sentido?
d) ¿Por qué se dice que el código genético es degenerativo?

MATERIALES
1. https://youtu.be/6b9oj85SI70
2. https://youtu.be/kdiA58VsFyo
3. https://youtu.be/wX5oonMMOzI
4. https://youtu.be/t4s6T1Gj32o
5. https://youtu.be/iqvDYvHcn8A
6. https://youtu.be/gD80Lku2tMo
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INMUNOLOGÍA Y GENÉTICA
PRÁCTICA N° 2
REGULACIÓN DEL CICLO CELULAR

El ciclo celular es un proceso altamente complejo en el cual una célula crece y se divide para crear
una copia de sí misma. Este proceso requiere de una alta precisión en los puntos de control, para
evitar duplicaciones innecesarias del ADN, así como impedir que una célula que presente un daño
en el ADN continúe duplicándose, ya que esto puede conducir a una transformación maligna.
La secuencia de eventos que se producen cuando se estimula una célula para crecer y dividirse
constituye el ciclo celular. Inicia con células en reposo (fase G0), las cuales tienen que ser
estimuladas por factores de crecimiento con el fin de entrar en el ciclo celular, lo que comienza con
el primer período de crecimiento (fase G1) en el que se prepara para un período de síntesis de ADN
(fase S). Hacia el final de G1, hay un punto de restricción (R), en que se repara el ADN en caso de
estar dañado. De no ser así, sigue adelante el ciclo. Una vez que se han duplicado sus
cromosomas, la célula entra a un segundo período de crecimiento (fase G2), cuando se prepara
para dividirse en dos células hijas durante el período de la mitosis (fase M). Esta fase M se divide
en una serie de pasos discretos que comienzan con la profase y luego pasan a través de la
metafase, anafase, telofase y, finalmente, el proceso de la citocinesis, que divide la célula en dos
iguales. Es importante conocer los puntos de restricción de cada fase del ciclo celular, ya que de
este modo podemos dilucidar su importancia y usarlos como posibles blancos en el uso y desarrollo
de fármacos dirigidos contra células tumorales y poder minimizar el efecto sobre células normales.
El campo de investigación de ciclo celular es amplio, y se interrelaciona con otros fenómenos
biológicos como la senescencia y la apoptosis, aunque esta relación es difusa en el caso de
senescencia, por lo que se requiere ahondar más en esta relación.

CICLO CELULAR
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INMUNOLOGÍA Y GENÉTICA
PROFASE. En esta fase, los cromosomas duplicados se preparan para la separación y la
maquinaria mitótica se ensambla. El material genético se condensa permitiendo observar los
cromosomas como filamentos dobles (cromátidas hermanas) unidos por un estrangulamiento
(centrómero). Al final de la profase han desaparecido la membrana nuclear y el nucléolo.

METAFASE. Los cromosomas están alineados en la placa ecuatorial de la célula (placa

metafásica), en la parte media entre los dos polos. Las cromátidas de cada cromosoma están
conectadas por su cinetocoro con las fibras del huso, los cuales son jalados hacia los extremos.

ANAFASE. La anafase comienza cuando las cromátidas hermanas de cada cromosoma se

separan e inician su movimiento hacia los polos opuestos de la célula. El acortamiento de las fibras
del huso y la división del cinetocoro contribuye a la separación de los cromosomas. La anafase
constituye una fase importante de la división celular porque en ella se debe realizar la correcta
distribución de las dos copias de la información genética original.

TELOFASE. Durante la telofase las células hijas regresan a la condición de Interfase. Las
cromátidas llegan a los polos y comienzan a descondensarse, en esta fase donde se reconstruye
la membrana nuclear alrededor de cada conjunto cromosómico lo cual definirá los nuevos núcleos
hijos.

Tomado de:
https://www.abc.com.py/resizer/7n0jzxeBYNLQL50Lj5wZJ255- Tomado de:
so=/910x590/smart/arc-anglerfish-arc2-prod- https://i.ytimg.com/vi/M0IexeOVb2E/maxresdefault.jpg
abccolor.s3.amazonaws.com/public/ET4A4EM5WJHBDPJWI4XIMUCTIY.jpg

RESPONDA
a) ¿Es posible que una planta presente cáncer?
b) ¿Es posible que un mamífero presente más cdK que regulen su ciclo?
c) ¿Cuál es la función de las cdK?
d) ¿Existen cdK en plantas?

MATERIALES
1. https://youtu.be/cb6_GKsAn4U
2. https://youtu.be/WY0QJY0BHpI
3. https://youtu.be/baCoZKNfm7M
4. https://youtu.be/M0IexeOVb2E
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INMUNOLOGÍA Y GENÉTICA
PRÁCTICA N° 3
DEMOSTRACIÓN INDIRECTA DE LAS LEYES DE MENDEL

Las leyes de Mendel tratan de explicar cómo los caracteres hereditarios se distribuyen en la
siguiente generación. La primera ley, o LEY DE LA SEGREGACION, plantea que, en individuos
diploides, cada progenitor contribuye con un alelo, y sólo uno, en cada uno de los loci que
componen el genoma. Además, la probabilidad de transmisión a la descendencia de cualquiera de
los dos alelos de uno de los padres es la misma que la del otro alelo. La segunda ley, o LEY DE
LA DISTRIBUCION INDEPENDIENTE, nos dice que la probabilidad que tiene un descendiente
para recibir un alelo de un gen a partir de uno de los progenitores en particular es independiente a
la probabilidad de que reciba alguno de los alelos de cualquiera de los padres para otro locus
diferente. Como se ve, la distribución de los caracteres hereditarios tiene una base netamente
estadística. Esto significa que presentan un comportamiento probabilístico, por lo que se espera
que, en una población de datos, no se cumplan exactamente, sino tengan una fuerte tendencia a
verificar las premisas dadas por Mendel.
Existen dos formas de analizar las leyes de Mendel.
1. La forma directa es realizando cruces entre animales o plantas de ciclo vital corto y
concentrándose en uno o dos caracteres somáticos fáciles de reconocer; por ejemplo, forma
de las alas en Drosophila melanogaster (“mosca de la fruta”) o alguno de los caracteres
analizados por Mendel en Pisum sativum (“arveja”).
2. La forma indirecta de estudiar las leyes de Mendel se basa en el juego de las probabilidades
de que ocurra un evento con reposición para no alterar la frecuencia inicial.

Demostración Indirecta
MONOHÍBRIDO
Cada estudiante tomará una bolsa de papel donde colocará los 10 botones negros junto con
los 10 botones blancos. Para fines prácticos los botones negros representan el carácter dominante,
y los blancos el carácter recesivo. Por turnos cada estudiante agitará la bolsa y comenzará a sacar
dos botones por vez. Luego de cada extracción, repondrá los dos botones y realizará una nueva
extracción (siempre agitando y con 20 botones en la bolsa). Reportará el resultado al docente de
mesa y anotará el resultado en la Tabla. Realizará este proceso hasta acumular 16 eventos.

DIHÍBRIDO
Cada estudiante tomará una bolsa de papel donde colocará los 10 botones negros junto con
los 10 botones blancos, y 10 botones azules junto con 10 botones rojos. Para fines prácticos los
botones negros y azules representan los caracteres dominantes, y los blancos y rojos los caracteres
recesivos. Por turnos cada estudiante agitará la bolsa y comenzará a sacar cuatro botones por vez.
Luego de cada extracción, repondrá los dos botones y realizará una nueva extracción (siempre
agitando y con 40 botones en la bolsa). Reportará el resultado al docente de mesa y anotará el
resultado en la Tabla. Realizará este proceso hasta acumular 16 eventos.
Aquí debe considerar que el máximo número de botones por color que puede extraer es dos,
si extrae tres botones de un mismo color deberá repetir el proceso las veces que sea necesario.

Para el análisis estadístico de los resultados utilizar la prueba de Chi-cuadrado (χ2)

La prueba de Chi-cuadrado (χ2) es una herramienta estadística que permite estimar la probabilidad
de las discrepancias entre proporciones fenotípicas observadas y aquellas esperadas para
determinado patrón de herencia, y si estas discrepancias son significativas o si son tan pequeñas que
se puede adjudicar al azar o la casualidad.
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INMUNOLOGÍA Y GENÉTICA

χ2 =  (Fenotipo Observado - Fenotipo Esperado)2

Fenotipo Esperado

NOTA: La prueba de Chi-cuadrado no debe utilizarse con porcentajes que se deriven de estas
frecuencias para calcular las proporciones esperadas.
TAMAÑO DE LA MUESTRA PROPORCIÓN χ2 SIGNIFICANCIA
75% 25%
10 7.5 2.5 0.1333 N.S.
100 75 25 1.3333 N.S.
1000 750 250 13.333 **

TABLA DE LA PRUEBA DE CHI-CUADRADO (χ2)

*g.l. NIVEL DE SIGNIFICANCIA
0.99 0.5 0.1 0.05 0.01
-----------------------------------------
1 0.02 0.46 2.71 3.84 6.64
2 0.21 1.39 4.60 5.99 9.21
3 0.58 2.37 6.25 7.81 11.34
* Grados de Libertad = Número de fenotipos diferentes - 1

RESULTADOS:
MONOHIBRIDO DIHIBRIDO
Genotipo Fenotipo
PRUEBAS AA Aa aa A_B_ A_bb aaB_ aabb
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
Observado
Esperado 4 8 4 9 3 3 1
TOTAL 16 16

RESPONDA
a) Según los datos obtenidos, ¿se cumplen las leyes de Mendel?
b) ¿Realmente se cumplen las leyes de Mendel? Justifique su respuesta
c) ¿Qué le dice la prueba de Chi-cuadrado en cuanto a ambas leyes de Mendel?
d) ¿Las leyes de Mendel se cumplirán independientemente del sexo del individuo?
Demuéstrelo.
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INMUNOLOGÍA Y GENÉTICA
CARACTERES GENÉTICOS ANALIZADOS POR Gregor Mendel

Tomado de: https://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/2/2c/Mendel_seven_characters_es.svg/400px-

Mendel_seven_characters_es.svg.png

Tomado de: https://leyesdemendel.net/wp-content/uploads/2019/05/ejemplos-de-las-leyes-de-mendel.png

MATERIALES
1. https://youtu.be/2osH33Ballk
2. https://youtu.be/EvJWEBFrkH0
3. https://youtu.be/O06GTdO4x6k
4. https://youtu.be/ww3noMdEq9A
5. https://youtu.be/LIFG5p5AeXk
6. https://youtu.be/fUbuLcXsQUA
 PRÁCTICA N° 4
POLIMORFISMOS GENÉTICOS Y MARCADORES MOLECULARES

*El presente material es una recopilación de varios textos universitarios y artículos (review o
research) disponibles libremente en internet. Los autores sólo han tomado extractos de
dichos documentos y los han compilado en esta guía de prácticas.

POLIMORFISMO GENÉTICO

El polimorfismo es una variación genética en la secuencia del ADN entre individuos de una
misma especie, por la existencia de distintos alelos de origen materno y paterno para un
locus determinado, esta variación de dos o más formas discontinuas llamada por ello
polimorfismo corresponde al 0,1% de la secuencia del ADN y es responsable de la
variabilidad genética, de las diferencias fenotípicas o en las susceptibilidades a ciertas
enfermedades y en la respuesta diferente a un mismo tratamiento;
Los polimorfismos son caracteres estables y se transmiten por herencia, se forman por el
intercambio recíproco de los nucleótidos en la cadena de ADN, originados por
recombinación homóloga, por segregación de cromosomas, mutaciones, duplicaciones y por
transposiciones, la mayoría de ellos no tienen efecto sobre la información genética
hereditaria; pueden ser Génicos o Genéticos.
P. Génicos: cuando se encuentran en regiones codificantes del genoma y codifican para una
proteína con alteración fenotípica (patología) o sin alteración fenotípica (ejemplo la
diversidad genética de las inmunoglobulinas)
P. Genéticos: ubicados en regiones no codificantes por lo tanto no codifican ningún
producto génico, su función es reguladora o estructural.

Los polimorfismos se clasifican en:

Polimorfismos de nucleótido sencillo (SNP): afectan solo a un nucleótido y pueden ser
sinónimos (o silenciosos, no altera la composición del gen: sSNP) o No sinónimos (ubicados
en regiones codificantes, provocan un cambio en un aminoácido y afectan la función de la
proteína: nsSNP). Por su ubicación los SNP pueden ser iSNP(en regiones intrónicas), cSNP(en
regiones codificantes o exones), rNSP(regiones reguladoras) y gNSP(regiones
intergenómicas)

Polimorfismos de secuencias repetidas, que pueden ser VNTR Microsatélites (SRT

repeticiones cortas en tamdem) de 2 a 5 nucleótidos, están distribuidos en todo el genoma
y son útiles en el diagnóstico genético o VNTR Minisatélites de pocas decenas de
nucleótidos repetidos en tándem, no están distribuidos en todo el genoma y son útiles en
pruebas de paternidad, huella dactilar de ADN e investigación criminal.
El estudio de polimorfismo es útil en investigaciones criminales, en la expresión diferencial
de proteínas fisiológicas, en el análisis de ligamiento para el mapeo genético, en pruebas de
paternidad, en el diagnóstico prenatal genético, en huellas dactilares del ADN, en la
compatibilidad de trasplantes, para conocer el riesgo a determinadas enfermedades o la
respuesta a fármacos.

MARCADORES GENÉTICOS
Son caracteres o genes que debido al ligamiento puede usarse para indicar la presencia de
otro gen; sigue las leyes mendelianas, pueden ser de tipo morfológicos o moleculares.

Marcadores morfológicos: dado por los caracteres (fenotipo) de un individuo que se

expresan influenciados por el ambiente en que se desarrollan, se evalúan en el estadio
adulto.
Marcadores moleculares: dado por genes, se evalúan en el individuo desde los primeros
estadios de desarrollo, si se trasmite por las leyes de Mendel serán de tipo genético; puede
ser Marcadores moleculares bioquímicos que son polimorfismos de proteínas, isoenzimas o
aloenzimas, son menos influenciados por el ambiente. (Las isoenzimas son variantes de una
enzima que desempeñan la misma actividad y las aloenzimas son codificadas por distinto
alelos en un mismo locus) y Marcadores moleculares de ADN que son polimorfismos de
ADN, son los marcadores de elección.

Detección de los polimorfismos: se pueden identificar por diferentes técnicas:

- Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) por la cual se amplifica una secuencia de
ADN de interés mediante varios ciclos.
- RFLP (polimorfismos de longitud de los fragmentos de restricción) requiere de
enzimas de restricción obteniendo fragmentos de diferente tamaño en función de los
alelos que presente
- ASO (Oligonucleótidos específicos de Alelo) utiliza sondas específicas para el alelo
mutado y para el alelo nativo, utilizando oligonucleótidos amplificado mediante una
PCR se deposita en membranas de nylon haciendo un "dot-blot", se hibridan con
(oligonucleótidos marcados con radioactividad o con fluorescencia).
- Hibridación in situ con Fluorescencia (FISH): Analiza células con ADN en metafase
que se hibrida con sondas de DNA marcadas con un fluoróforo y se visualiza en el
microscopio de fluorescencia.
- Hibridación tipo Southern Blot: Esta técnica tiene varias etapas: Digestión del ADN
con enzimas de restricción, Separación de los fragmentos por electroforesis en gel de
agarosa, Denaturación, Transferencia a una membrana de nitrocelulosa o nylon y
fijación de estas por medio de calor (80ºC), Prehibridación con sondas de ADN,
Marcaje de la sonda con nucleótidos radioactivos, Hibridación, lavado y Revelado e
interpretación de los resultados.

Mapa de restricción: Cuando una molécula de ADN es cortada con una enzima de restricción
y los fragmentos generados se separan por electroforesis en un gel de agarosa, se puede
determinar el número de sitios de restricción y la distancia entre ellos a partir del número y
la posición de las bandas en el gel, En el mapa se representan las distancias entre dichas
dianas y miden en pares de bases (o en kilobases) en forma ordenada.
 RESPONDA:

1. Un gen clonado muestra el siguiente mapa de restricción bajo la acción de las

enzimas EcoRI y HindIII

a) Dibujar los patrones de los fragmentos de ADN esperados con cada enzima al
separar los fragmentos mediante electroforesis en gel de agarosa.
b) Hacer lo mismo para el caso de la digestión doble (con las dos Enzimas actuando
a la vez)
c) Dibujar el patrón esperado para una copia mutante del gen que ha perdido el
primero de los cortes de EcoRI
d) Dibujar el patrón esperado para una copia mutante del gen en la que ha
aparecido una nueva diana para HindIII en el centro del fragmento de 2Kb.

2. Juan tiene VIH y toma el medicamento EFAVIRENZ (fármaco NNRTI), al realizarse un

estudio de genotipo del virus su resultado indicaba que presentaba la variación
genética 103R.

Después de ingresar el resultado al programa responda las siguientes preguntas:

https://hivdb.stanford.edu/hivdb/by-mutations/

Escriba ahí la
variación genética

De click en
analizar
a) Qué tipo de variación genética presenta Juan
b) Luego de conocer el resultado debe Juan continuar tomando el medicamento o no.
 3. Se realizó el siguiente analisis molecular a la muestra encontrada en la escena del
crimen(E) y a las muestras de saliva de dos sospechosos S1 y S2.
Indique cual sospechoso es inocente

4. Cuatro hombres se disputan la paternidad de un niño. Los forenses deciden utilizar el

método de la huella genética para resolver el caso, analizando el ADN de la madre
(M), del hijo (H) y de los cuatro posibles padres (P1 a P4).
Indique quien es más probable que sea el padre. (Atribuir el mayor número de
bandas al padre y a la madre)

5. Dé ejemplos de polimorfismos que afectan la salud o enfermedad.

6. ¿Es posible utilizar marcadores moleculares en una planta?

7. ¿Es posible utilizar un mismo marcador para dos especies diferentes?

MATERIALES:

1. https://youtu.be/Nf2GMuVYcyc
2. https://youtu.be/to8yRSYkVNI
3. https://youtu.be/tJjXpiWKMyA
4. https://youtu.be/to8yRSYkVNI
5. https://youtu.be/061fFulkKDU
6. https://youtu.be/enipRp6NGp4
 MO013
INMUNOLOGÍA Y GENÉTICA
PRÁCTICA N° 5
GENES HOX

Los genes homeóticos (Antenapedia y Bitórax) participan en el desarrollo de los segmentos

individuales a lo largo del eje anteroposterior del embrión de la mosca. Los genes Antenapedia
controlan la identidad de los segmentos de la cabeza y tórax del embrión, mientras que los genes
Bitórax controlan los segmentos del tórax y abdomen. Los genes homeóticos de la mosca de la
fruta tienen sus contrapartes en los mamíferos y son conocidos como genes HOX. Estos genes
juegan un papel fundamental durante el desarrollo embrionario; constituyen una familia de factores
de transcripción que controlan el patrón de formación anterior-posterior y participan en procesos de
proliferación y diferenciación celular.

Los genes HOX contienen una secuencia de 183 pares de nucleótidos denominada homeobox, que
codifica para una proteína de 61 aminoácidos, denominada homeodominio. Desde su descripción
inicial, 39 genes Hox han sido identificados en mamíferos y clasificados en cuatro grupos
denominados A, B, C y D. Estos genes se localizan en los humanos, en las regiones cromosómicas
7p15.3, 17q21.3, 12q13.3 y 2q31, respectivamente.

Cada grupo HOX contiene entre 9 y 11 genes alineados en 13 grupos parálogos de acuerdo con la
similitud de sus secuencias nucleotídica y aminoacídica y su posición dentro del cromosoma. El
ordenamiento de los genes dentro de cada complejo HOX es esencialmente el mismo que el del
complejo HOM de Drosophila, lo cual sugiere que los cuatro grupos completos de los vertebrados
se originaron por duplicaciones de un solo complejo primordial, el cual ha preservado su
organización básica.

Además de las estructuras embrionarias, los genes HOX se expresan en diversos tejidos adultos,
donde al parecer están implicados en una variedad de rutas biológicas que incluye homeostasis,
diferenciación celular y el mantenimiento de la función orgánica; sin embargo, su papel no ha sido
totalmente definido.

Tomado de: https://cdn.kastatic.org/ka-perseus-images/a26bbd99ff294f0f9f674214076b3a5a3d9e0259.png

 MO013
INMUNOLOGÍA Y GENÉTICA

Tomado de: https://cdn.kastatic.org/ka-perseus-images/246c4e463742aff36271e57e91329c14622e0008.png

Sin embargo, la duplicación de genes ha permitido que algunos genes Hox asuman roles más
especializados. Por ejemplo, muchos genes Hox que están cerca del final del cúmulo actúan
específicamente en el desarrollo de las extremidades de los vertebrados —brazos, piernas o alas.
Mutaciones en HoxD13 en seres humanos pueden causar un trastorno genético llamado
sinpolidactilia, en el que las personas nacen con dedos adicionales en manos o pies que también
pueden ser fusionados.

El cúmulo Hox es un gran ejemplo de cómo los genes del desarrollo pueden ser tanto conservados
como modificados con el paso de la evolución, en particular cuando se copian por una duplicación.
Los genes Hox también muestran cuán poderoso puede ser un gen del desarrollo, especialmente
cuando es un factor de transcripción que activa o desactiva muchos genes blancos para ejecutar
un determinado "programa" genético.

RESPONDA
a) ¿Es posible que una planta exprese los genes HOX humanos?
b) ¿Es posible que un mamífero exprese los genes HOX humanos?
c) ¿Cuál es la función de los genes Bithorax?
d) ¿Existen genes homeóticos en plantas?

MATERIALES:
1. https://youtu.be/3-b0IloWe-k
2. https://youtu.be/fu8MPgj3tfs
3. https://youtu.be/jvBAywVS06U
4. https://youtu.be/1K-zIq9cHZI
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INMUNOLOGÍA Y GENÉTICA
PRÁCTICA Nº 6
GENÉTICA DE LOS GRUPOS SANGUÍNEOS

Actualmente se conocen cientos de antígenos en los glóbulos rojos. Algunos están relacionados
entre sí, por genes allelomórficos comunes en un locus genético, generalmente, conformándose
Sistemas de Grupos Sanguíneos.

En 1667, Jean-Baptiste Denis inyectó tres gotas de sangre de carnero a una persona sin observar
ninguna reacción adversa, pero al querer repetir este experimento, no pudo obtener los mismos
resultados, sugiriéndose así que debía existir una incompatibilidad sanguínea entre individuos de
especies diferentes, lo cual fue demostrado por Landois en 1873 y por Ponfick en 1874.

A finales del siglo XIX, gracias a los trabajos de Ehrlich, Bordet, Behring y otros inmunólogos, se
comenzó a pensar que los responsables de los accidentes durante la transfusión de sangre eran
las reacciones inmunológicas. En 1900, Karl Landsteiner, médico austriaco, observó que al mezclar
la sangre de dos personas había ocasiones en que los glóbulos rojos se aglutinaban formando
grumos visibles. Analizó la sangre de un total de 22 personas, incluyendo la suya y la de cinco
colaboradores de su laboratorio, separando primero el suero y lavando después los glóbulos rojos
en suero fisiológico. Luego, ensayaba cada suero con los diferentes glóbulos rojos obtenidos. Así
descubrió tres tipos distintos de hematíes, denominados A, B y O, que daban lugar a reacciones de
aglutinación. Dos años más tarde, dos discípulos suyos, Alfredo de Castello y Adriano Sturli,
analizando 155 muestras (de 121 pacientes y 34 controles sanos), descubren un cuarto grupo, al
que llaman AB, que no tenía capacidad aglutinante.

En 1908, Epstein y Ottenberg sugieren que los grupos sanguíneos son hereditarios, y en 1910, E.
von Dungern y L. Hirszfeld descubren que la herencia de estos grupos sanguíneos sigue las leyes
de Mendel con un patrón dominante para los tipos A y B, siendo esto reafirmado en 1924 por el
matemático Bernstein. Ottenberg, en 1911 acuñó el término de “donante universal” para el grupo O
por carecer de antígenos en los eritrocitos.

La base del sistema ABO es la fucosa, la cual se encuentra en los individuos con grupo sanguíneo
O. En los individuos de grupo A, la fucosa tiene adicionalmente un azúcar N-acetil galactosamina.
Los individuos de grupo B poseen en la fucosa un azúcar D-galactosamina. En los individuos de
grupo AB, se encuentran los dos azúcares asociados a la fucosa. Estos dos azúcares adicionales
son antigénicos, por lo que el cuerpo genera anticuerpos – antiguamente denominados
aglutinógenos – contra los antígenos que no le son propios, generándose así la incompatibilidad
sanguínea.

Landsteiner comprobó que una persona con grupo sanguíneo O producía anticuerpos contra los
antígenos A y B, por lo que, en una transfusión, la sangre de tipo A, B o AB serían rechazados por
ellos. Por tanto, un individuo de grupo O no podía recibir sangre de nadie más que de otro tipo O,
pero en cambio sí podían donar sangre (si se dona como volumen celular, libre de Ac, o si el
volumen es reducido) a individuos de cualquier otro grupo al no tener antígeno A ni B. De ahí la
denominación “donante universal”. Una persona de grupo B contenía anticuerpos contra el antígeno
A, por lo que, en una transfusión, rechazaría este tipo de sangre, y viceversa. Una persona de
grupo AB no genera anticuerpos, por lo que en una transfusión puede recibir sangre de cualquier
grupo (receptor universal), pero no puede ser donador a individuos de cualquier otro grupo. Como
en el caso anterior, no habrá reacción si la persona de grupo AB receptora solo recibe paquete
globular de eritrocitos A, B o O.
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INMUNOLOGÍA Y GENÉTICA

En 1939, Levine y Stetson encontraron una aglutinina nueva en el suero de una mujer embarazada
cuyo hijo nació muerto antes de término. Esta mujer había recibido 500 ml de sangre de su marido,
de grupo O, que parecía compatible. La aglutinina no afectaba a los glóbulos rojos de la mujer, pero
aglutinaba a los glóbulos rojos del padre (marido) y cerca del 80% de los eritrocitos de otras sangres
del grupo O. Levine y Stetson supusieron de inmediato, y con razón, que la madre se había
inmunizado durante el embarazo por el paso a través de la placenta de un antígeno que el feto
había heredado del padre. Más o menos al mismo tiempo, Landsteiner y Wiener estaban realizando
experimentos con antisueros preparados inyectando en conejos la sangre de una especie de monos
(Macaccus rhesus). Landsteiner y Wiener encontraron que su suero anti-rhesus no solamente
aglutinaba a los glóbulos rojos de mono sino también los glóbulos rojos del 85% de personas de
raza blanca de Nueva York. Este 85% fue clasificado como Rh +, y el 15% restante como Rh –,
tomando como referencia al suero anti-rhesus.

En la actualidad, se han identificado un mayor número de grupos sanguíneos, de los cuales

aproximadamente 10 son los más importantes. Además, se han ido descubriendo variantes alélicas
dentro de cada grupo. Todos estos grupos sanguíneos se heredan de acuerdo con las leyes
genéticas de Mendel, en vista que están gobernados cada uno por un diferente locus. Por ejemplo,
el locus del gen que expresa el sistema ABO se ubica en el cromosoma 9. Existen importantes
implicaciones en medicina, tales como: las transfusiones sanguíneas, la relativamente frecuente
aparición de enfermedades hemolíticas en fetos y recién nacidos, las aplicaciones medico legales
y su conexión con otros genes cuya repercusión más inmediata se puede evidenciar en los
trasplantes de órganos.

Exclusión de paternidad por Sistema ABO

Fenotipos de Madre, Padre. En las intersecciones colocar los grupos que NO puede
presentar el niño de la pareja.

Madre Padre
O A B AB
O
A
B
AB

Fenotipos de Madre, Padre y en las intersecciones colocar los grupos que SI puede presentar
el niño de la pareja.

Madre Padre
O A B AB
O
A
B
AB
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INMUNOLOGÍA Y GENÉTICA

Complete los datos de su encuesta (10 familias)

F1 F2 F3 F4 F5 F6 F7 F8 F9 F10
O
A
B
AB

%0 =
%A =
%B =
%AB =

RESPONDA
1. ¿Es práctico realizar exclusión de paternidad por el Sistema ABO? Justifique
2. ¿Por qué en las poblaciones hay algunos grupos sanguíneos con mayor frecuencia que los
otros?
3. ¿Cuáles son los otros grupos sanguíneos en humanos?
4. Dos hombres (Padre 1 y Padre 2) reclaman en un juzgado la paternidad de un niño, cuyo grupo
sanguíneo es 0. La madre es del grupo A, mientras que el posible padre 1 es del B y el posible
padre 2 es del AB. Razone si puede servir esta información para indicar cuál de ellos no es su
padre. Proponga posibles genotipos para el niño, la madre y los padres.

MATERIALES
1. https://youtu.be/73SRKgmRYos
2. https://youtu.be/XVAHhv3JVQk
3. https://www.youtube.com/watch?v=yUAkRBp5XMI
4. https://www.youtube.com/watch?v=A_7eRhzWN1E