UNIVERSIDAD NACIONAL DE

TRUJILLO

ESCUELA DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

PREGUNTA SEMINARIO 01

ESTUDIANTE:

✓ Avelino Caro Yulisa Maribel

DOCENTE:
Jaime Gustavo Espinoza Carbajal

CICLO: IX - A

TRUJILLO – PERÚ

2022
¿PORQUÉ ES IMPORTANTE LA VERIFICACIÓN DE CALIBRACIÓN DE LA
MICROPIPETA EN UN LABORATORIO DE BIOLOGÍA MOLECULAR?
Para comprobar la calibración de la micropipeta es un procedimiento simple que puede ahorrar
tiempo considerable, trabajo y reactivos.
El uso de micropipetas de tamaños diversos, para medir su exactitud, precisión y calibración, en
el que las micropipetas se debe revisar el porcentaje de exactitud (E%) y el coeficiente de
variación (CV%) en todo el rango usando al menos dos volúmenes diferentes para obtener
resultados los más exactos posibles.

EN UN PROCEDIMIENTO BÁSICO, ¿CUÁLES SON LOS PROCEDIMIENTOS

PARA LA EXTRACCIÓN DE ADN?
1. Ruptura de las células: los métodos de lisis más utilizados son los detergentes, enzimas y
agentes desnaturantes.
2. Eliminación de proteínas: mediante el uso de enzimas proteolíticas tales como la
proteinasa K. Algunos protocolos de extracción realizan la lisis con detergentes como el
SDS en presencia de la proteinasa K en un solo paso.
3. Eliminación de ARN: mediante digestión de ARN con RNAsas como la ribonucleasa A
de páncreas b.
4. Desproteinización: se lleva a cabo con solventes orgánicos tales como el fenol y el
cloroformo, los cuales tienen la propiedad de desnaturalizar las proteínas.
5. Concentración del ADN: Se logra mediante precipitación con etanol en presencia de
cationes monovalentes a concentraciones de 0.1 a 0.5 M. El etanol en la presencia de
estos cationes induce un cambio estructural en el ADN que causa la agregación y
precipitación del mismo.

¿EN QUÉ CONSISTE EL PROTOCOLO TRADICIONAL PARA LA

SEPARACIÓN DE PROTEÍNAS Y LÍPIDOS?
En esta etapa que consiste básicamente en la separación del ADN de las proteínas y lípidos, el
que se realiza mediante solventes orgánicos y ciclos de centrifugación.
Se hace uso de la fuerte tendencia hidrofílica de los grupos fosfato para separarlos en medios
acuosos, mientras que las proteínas y los lípidos se separan en solventes orgánicos.
La fase acuosa y la orgánica se separan al someterse a una centrifugación lo que permite aislar al
ADN.
Los solventes que se usan habitualmente son el fenol, el cloroformo y el alcohol isoamílico, ya
que estos reactivos contaminan fácilmente el ADN, por lo que se debe evitar implicarlos en el
proceso de purificación.
REFERENCIAS:
Burbano R., Caetano A., Otero R. y Álvarez L. (2017). MANUAL DE BIOLOGÍA
MOLECULAR PROCEDIMIENTOS BÁSICOS. UNIVERSIDAD DE NARIÑO FACULTAD
DE CIENCIAS EXACTAS Y NATURALES DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA.
COLOMBIA. https://www.researchgate.net/profile/Edith-Burbano-
Rosero/publication/326905291_Manual_de_Biologia_Molecular-
Procedimientos_Basicos/links/5b7de35292851c1e12291a22/Manual-de-Biologia-Molecular-
Procedimientos-Basicos.pdf

Alejos V., Aragón M. y Cornejo R. (2014). Extracción y purificación de ADN. Unidad de

Biotecnología y Prototipos. México.
http://www2.inecc.gob.mx/publicaciones2/libros/710/extraccion.pdf