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UNIVERSIDAD NACIONAL SAN LUIS GONZAGA

FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA Y PETROQUÍMICA
LABORATORIO DE ANÁLISIS INTRUMENTAL
“AÑO DEL FORTALECIMIENTO DE LA SOBERANÍA NACIONAL”
Práctica No10
Nombre de la práctica: Determinación de la concentración de cobre en
pisco por espectroscopia de absorción atómica en llama (EAA- llama)

Nombre del Docente: Ing. Armando Tataje Montalván

Integrantes del Grupo:

 De la Cruz Chahuayo, Greisi Silvia

 De la Cruz, Cavero Ray Anderson
 Huarcaya Lujan, Lilian Camila
 Luzquiños Huamaní, Yisela Paola
 Núñez Santiago, Alessandra
 Tori Ccoillo, Jason Italo
 Zea Ortiz, Alberto Oliver

Ciclo: V
Sección: “A”
Fecha de la práctica: 4 de febrero de 2022

Ica- 2022
Perú

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ÍNDICE

I. Título de la práctica: .................................................................................................. 3

II. Objetivos: .................................................................................................................. 3
III. Introducción: .......................................................................................................... 3
IV. Parte teórica: .......................................................................................................... 4
ESPECTROSCOPIA DE ABSORCIÓN ATÓMICA: Límite de detección (LOD),
límite de cuantificación (LOQ) y ámbito lineal ............................................................ 4
Evaluación de la digestión idónea para método:........................................................... 4
Precisión y exactitud del método: ................................................................................. 5
¿Qué cuantifica la espectroscopia de absorción atómica? ............................................ 5
¿Cómo funciona la Fotometría de llama? ..................................................................... 5
V. Detalles Experimentales: ........................................................................................... 6
EXPERIENCIA 1: ESPECTRÓMETRO DE ABSORCIÓN ATÓMICA ................... 6
EXPERIENCIA 2: DETERMINACIÓN DE COBRE POR
ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN ATÓMICA DE LLAMA ................. 8
VI. Cálculos: .............................................................................................................. 10
1. Procesar los siguientes datos, para la elaboración de la curva de calibración: 10
2. Según los datos obtenidos, determinar si dicha recta cumple con la ley de Beer.
10
3. La determinación de r y r2 en la curva de calibración en que nos ayudan. ..... 10
4. ¿Para qué sirve la determinación de Cu en pisco? ........................................... 12
5. ¿Cuáles son los valores permitidos de cobre en pisco? ................................... 12
6. Para que nos sirve usar el método de adición estándar. ................................... 12
VII. Conclusiones: ...................................................................................................... 13
VIII. Recomendaciones: ............................................................................................... 13
IX. Referencias Bibliográficas ................................................................................... 14

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 INFORME TÉCNICO

I. Título de la práctica:
Determinación de la concentración de cobre en pisco por espectroscopia de absorción
atómica en llama (EAA- llama).

II. Objetivos:
Objetivo General:
 Determinación de la concentración de cobre en pisco por espectroscopia de
absorción atómica en llama (EAA-Llama).
Objetivo Específico:
 Realizar la curva de calibración para cobre por EAA-Llama.
 Medir la absorbancia del Cu en las muestras de pisco
 Determinar la concentración de Cu en la muestra de pisco.

III. Introducción:
El estudio de tiosemicarbazonas (TSC) como reactivos analíticos ha sido en los
últimos años un campo muy fecundo de investigación sobre el que se han publicado
varias revisiones, bien desde el punto de vista inorgánico o en relación con sus
aplicaciones analíticas. Estos compuestos se comportan como buenos reactivos
analíticos de los cationes de los metales de transición, y en muchos casos son
comunes sus reacciones con iones Ag (I), Hg (II), Cu (II) y Pd (II). Si bien, la
mayoría de los métodos espectrofotométricos para la determinación del ión Cu (II),
utilizan una etapa de extracción y separación del complejo TSC-Metal en un
disolvente adecuado, registrando el espectro de absorción del extracto orgánico y
midiendo en éste su absorbancia a determinada longitud de onda. En medio
homogéneo, son pocos los métodos que permiten la determinación por debajo de 6
µg/mL del ion cobre utilizando como reactivo cromogénico alguna tiosemicabazona.
El 2-carboxibenzaldehido (2CB) tiene un equilibrio tautomérico como se muestra en
la figura, provocando que los productos de la reacción de condensación entre este
aldehído y una amina primaria normalmente siempre reaccionarán formando un
ftaluro; sin embargo, al realizar la reacción de condensación entre el 2CB y la
tiosemicarbacida en disolución de ácido clorhídrico 0,1 M, se logró desplazar el
equilibrio a la derecha obteniéndose la respectiva base de Schiff (Tiosemicarbazona
del 2-carboxibenzaldehído, 2CBTSC).

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 IV. Parte teórica:

ESPECTROSCOPIA DE ABSORCIÓN ATÓMICA: Límite de detección (LOD),

límite de cuantificación (LOQ) y ámbito lineal

Al comparar los coeficientes de correlación se obtuvo que el rango lineal para el zinc
se vea afectado por el estándar de 0,2mg/L. Aunque la respuesta lineal a esa
concentración no decrece en el caso del cobre y el hierro, el zinc también excede el
máximo de aceptación para el límite de detección (LOD) y cuantificación (LOQ).
Por tal motivo se modificó el intervalo de trabajo de 0,4 a 1,6mg/L; tomando en
consideración la concentración máxima permitida de los tres metales para ambos
tipos de muestra, según lo refiere la norma NCR 126: 1991. Vodka y el Reglamento
para la Calidad del Agua Potable vigente en Costa Rica.

Evaluación de la digestión idónea para método:

La evidencia la comparación del porcentaje de recuperación tanto en las muestras
digeridas, como en las no digeridas para el alcohol destilado y el agua potable,
empleando HNO3-HCl y solamente HNO3 durante el proceso de digestión.
Obteniendo como resultado el incumplimiento del criterio de aceptación para
exactitud según la recuperación de metal añadido para hierro y cobre, en las muestras
de alcohol destilado digerido con HNO3-HCl, pues como lo indica el Codex
Comittee on Methods of Analysis and Sampling (2009) este debe ser de 90-110%.

En el caso del hierro y el zinc, tampoco se cumple con el criterio de aceptación para
precisión, según lo establecido por Clesceri, Greenberg y Eaton (1999), debido a que
la desviación estándar relativa supera el 10%. Además, se evidencia que en el caso
del hierro y el zinc para las muestras de agua digeridas con HNO3-HCl, se incumple
en exactitud, y según los datos obtenidos para este último metal, también en
precisión. No obstante, se observa una mejoría en las muestras de alcohol al realizar
el proceso de digestión empleando únicamente HNO3, ya que los tres metales
implicados se encuentran dentro del criterio establecido tanto para exactitud, como
para precisión. Con respecto a las muestras de agua digeridas solamente con HNO3,
de igual manera presentan un comportamiento más estable, sin embargo, en el caso

4
del hierro no se cumple con el criterio de aceptación para precisión.

Se estima que existe aleatoriedad en el análisis de los residuos, como lo refiere

Magnusson y Örnemark (2014), la distribución aleatoria de residuales en torno a cero
confirma la linealidad, mientras que las tendencias sistemáticas indican la no
linealidad o un cambio de varianza con el nivel. Por último, cabe destacar que el
coeficiente de variación de los factores de respuesta es inferior a 10%, tal como lo
indica el Codex Comittee on Methods of Analysis and Sampling (2009), por lo tanto,
en términos generales, es posible afirmar que en el análisis de cobre se cumple con el
criterio de linealidad.

Precisión y exactitud del método:

Para determinar la precisión del método, se evaluó la repetibilidad de las mediciones
en el análisis de cobre, hierro y zinc, a partir de seis muestras fortificadas con 1mg/L
de cada metal. El coeficiente de variación para cada análisis de agua y alcohol es
inferior al coeficiente de variación porcentual de Horwitz, ya que para la
concentración de 1mg/L, dicho coeficiente no debe superar el 8%, lo cual indica que
se cumple con el criterio establecido para repetibilidad a esa concentración.

¿Qué cuantifica la espectroscopia de absorción atómica?

La Espectrometría de Absorción Atómica y la Espectrometría de Emisión Atómica
son dos técnicas de laboratorio que permiten la identificación y cuantificación de
elementos químicos (átomos). Por lo tanto, estas técnicas se utilizan en la evaluación
del desgaste de la máquina, la contaminación y los aditivos lubricantes.

¿Cómo funciona la Fotometría de llama?

La fotometría de llama es una técnica óptica espectroscópica basada en la interacción
entre la REM y el estado atómico de la materia. Este método se basa en la
espectroscopia de emisión atómica, por lo tanto, mide la radiación que emite un
átomo cuando este pasa del estado excitado al estado fundamental.

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V. Detalles Experimentales:

EXPERIENCIA 1: ESPECTRÓMETRO DE ABSORCIÓN ATÓMICA

Funcionamiento de un espectro fotómetro con horno de grafito

1. Principalmente para el espectro fotómetro

necesitaremos un cilindro con gas acetileno
(grado AA- 10 psi), otro con gas de argón y
un motor de aire (32psi), ambos necesitan
están calibrado para la presión necesaria para
el equipo.

2. En la parte izquierda de nuestro equipo en la

cual encontraremos una puerta circular, que
al retirar encontraremos 8 espacios para
ubicar las lámparas de elementos a analizar.
Para tener el correcto funcionamiento del
equipo antes de encenderlo debemos tener
dos lámparas como mínimo para obtener una
buena calibración.

3. Ingresaremos al software y esperemos la comprobación del equipo para

comenzar a hacer nuestras lecturas, acabado la comprobación se nos mostrará
una ventana para seleccionar los elementos de las lámparas con las cuales
trabajaremos.
El programa nos dirá cuál será la longitud de onda en cual trabajaremos en
este caso será “Cobre”.

NOTA RESALTANTE: Nos indica la longitud de onda (mayor concentración de

energía) al 99.99% a frecuencia de 324.79nm

PROCEDIMIENTO

1. Nos pedirá indicar con que método

trabajaremos en este caso será curva
de calibración en ppm, luego nos
aparecerá otra ventana para indicar
cuantas muestras irán en nuestra
curva de calibración, luego
configuraremos la forma de

6
 medición que en este caso será serial, trabajaremos la concentración en ppm
el tiempo de integración depende de nuestra muestra a calcular, el factor de
filtro es recomendable que este en 1.00 es cuando este en llama.

2. Procederemos a configurar la energía

de la lámpara, se recomienda que el
voltaje sea menor a 350 y el valor de
porcentaje que sea lo más cercano a
100%.

3. Luego de configurada nuestra maquina

procedemos a encender los cilindros
con acetileno y el de aire para poder
encender nuestra llama buscaremos el
siguiente botón (Flamee) luego nos
mostrará la siguiente ventana. En la
cual podremos configurar la cantidad
(ml/min) de acetileno que quemará en
este caso 1300, procederemos a
presionar el botón (fire) para que
nuestra llama se encienda.

4. Una vez encendido comenzaremos con la medición, podremos observar en

tiempo real la medición de la absorbancia. Comenzaremos a medir 1ppm,
introduciremos el capilar en el agua destilada, presionaremos el botón
(STAR), como tenemos configurada la máquina para que haga 3 veces
análisis de nuestra muestra. Obteniendo el siguiente resultado:

5. Introduciremos el capilar en la botella de nuestra solución en la cual

mediremos en 2ppm, podemos observar los análisis de la absorbancia en
tiempo real:

7
 6. Una vez finalizado los análisis, el
programa nos mostrará nuestra curva de
calibración.

7. Repetiremos el mismo procedimiento

con nuestra solución para corroborar
que los datos tomados sean certeros.
Terminado la obtención de nuestros
datos necesarios procederemos a apagar
nuestro equipo.

OBSERVACIONES

a) Debemos tener mucho cuidado con la calibración de nuestra maquinaría tanto

por seguridad y para obtener resultados precisos.
b) Trabajaremos con gas de acetileno que es inflamable una vez terminado de
utilizar el equipo cerrar la llave de nuestro gas utilizado.
c) Trabajar con la tabla de parámetros que nos da el manual de la máquina para
datos precisos.

EXPERIENCIA 2: DETERMINACIÓN DE COBRE POR

ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN ATÓMICA DE LLAMA

Se realizó la determinación de cobre en aguas residuales. Se tuvo un digestor

automático, allí se colocan las muestras líquidas. En caso de haberse tenido una
muestra sólida, se hubiera hecho una digestión previa en un microondas con ácidos
fuertes. Se precisa que pueden emplearse o un espectrofotómetro de absorción de
llama o mediante un horno de grafito. Para el caso de la EAA a la llama, se trabajan
en partes por millón las muestras de aguas residuales; mientras que las muestras de
agua potable requieren del horno de grafito y así conseguir límites bajos de detección.

PROCEDIMIENTO

1. Se colocó la lámpara de cátodo hueco en

la torreta y se verificó el haz, con ello se
aseguró que se pueda encender la llama
correspondiente de aire-acetileno. Luego,
se procedió a estabilizar la llama, así
como la señal roja y azul: la línea roja
representa la señal de la lámpara de
cátodo hueco y la línea azul, la lámpara de
deuterio. Una vez estabilizadas las
lámparas, se comenzó a muestrear
introduciendo los líquidos en la llama.

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2. Se realizó una muestra en blanco mediante la inyección de agua para así
registrar que el nivel de cobre en el agua de laboratorio es 0. Luego de ello, se
evaluaron las muestras y los patrones, donde el equipo registra 3 mediciones
de absorbancia por cada muestra analizada. Se destaca que entre cada muestra
se hizo un lavado con agua destilada y que se pudieron realizar hasta 5
mediciones para así escoger 3 mediciones en función de la concentración
frente a la absorbancia.

3. Con las 3 medidas se tuvo una desviación

de 2,3% lo cual es menor a 10%, con lo
cual se comprobó la fiabilidad de la
medición y que no hubo necesidad de
tomar 4 o 5 mediciones. Con el transcurso
de las mediciones de las muestras y
patrones, el software va graficando las
absorbancias y ajustando una curva de
calibración con la concentración en ppm,
es decir un miligramo de cobre en un litro de agua. Al cabo de haberse
analizado un mínimo de 3 patrones, el programa empleado provee un
coeficiente de determinación de 1, lo cual significa que está ajustada
perfectamente. Así se continuó evaluando los patrones 4 y 5 para finalizar la
determinación de cobre.

OBSERVACIONES

a) Cabe precisa la importancia de la pendiente de la recta, lo cual permite

interpretar cuán sensible es el equipo; en este caso, se trató del
espectrofotómetro de absorción atómica de llama. A mayor valor en la
pendiente, se obtienen menores concentraciones y viceversa, lo cual permite la
estimación de valores y de la conducta de la recta.

b) Tras analizar el cuarto patrón, se percibió que la recta seguía ajustada a un

coeficiente de determinación de 1. No obstante, al adicionarse la medición del
quinto patrón, la recta comenzó a disminuir su coeficiente de determinación a
0,9995. Tras ello, se podrían analizar las muestras de aguas residuales.

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VI. Cálculos:

1. Procesar los siguientes datos, para la elaboración de la curva de

calibración:

Muestra Concentración Absorbancia

(ppm)
1 0.1 0.022
2 0.5 0.045
3 1 0.08
4 2 0.13
5 3 0.18
6 4 0.24
7 5 0.3

2. Según los datos obtenidos, determinar si dicha recta cumple con la ley de
Beer.

Podemos observar que la representación gráfica de la ley de Lambert y Beer

es una recta es decir que la gráfica hallada si cumple con la ley ya que en el
eje de las ordenadas (eje Y) se representan los valores de Absorbancia y en el
eje de las abscisas (eje X) se representan las concentraciones formando una
recta. La pendiente de la recta corresponde al producto ε x b, con la recta de
regresión, muestra que, por cada ppm de cobre presente en la muestra, la
lectura de absorbancia se incrementará en 0.0558 unidades. El valor de R2
(0,9987) indica que existe una alta relación entre las variables consideradas,
casi el total de la variación queda explicado por este modelo y que la recta se
ajusta al comportamiento de los puntos en el segmento considerado (0.1 a 5
ppm).

3. La determinación de r y r2 en la curva de calibración en que nos ayudan.

Mediante la ayuda del programa Microsoft Excel, se pudo graficar la siguiente

curva de calibración. Se calculó el valor del coeficiente de determinación
representado por R2 el cual es 0,9987. Esto indica que se encuentra muy

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cercano a (0) y que es un coeficiente aceptable como parte del ajuste de
regresión lineal.

Gráfica N° 01. Curva de calibración

Asimismo, se realizó un procedimiento adicional para conocer los valores del

coeficiente de correlación de Pearson (r) y el coeficiente de determinación
(R2). Mediante los datos obtenidos en la tabla, se aprecia que ambos
coeficientes se encuentran lo suficientemente cercano a 1 como para ser
valores aceptables y fiables, dado que r = 0,9994 y R2 = 0,9987
aproximadamente. A su vez, precisan que se tienen valores de coeficientes
seguros y que, tras ello, se pueden realizar determinaciones de cobre en
muestras residuales u otras.

Tabla N°01. Estadísticas de la regresión

Estadísticas de regresión
Coeficiente de correlación múltiple 0.99936164
Coeficiente de determinación R2 0.99872368
R2 ajustado 0.99846842
Error típico 0.00403582
Observaciones 7

Sabemos que el coeficiente de correlación de Pearson (r) es una prueba

estadística que permite analizar la relación entre dos variables medidas en un
nivel por intervalos o de razón, donde r mide el grado de asociación lineal
entre dos variables X e Y. Por su parte, el R-cuadrado o coeficiente de
determinación es una medida estadística de qué tan cerca están los datos de la
línea de regresión ajustada.

El coeficiente de determinación es la proporción de la varianza total de la

variable explicada por la regresión, refleja la bondad del ajuste de un modelo a
la variable que pretender explicar y el coeficiente de correlación de Pearson
indica la existencia de una relación lineal o no entre tales variables. Ambos
coeficientes nos ayudan a tener cierta fiabilidad de la cercanía de los datos

11
 frente a otros y de que se tiene una relación altamente fuerte en cuanto a
correlación, por lo cual el modelo de recta que se obtiene se podría considerar
como correcto.

4. ¿Para qué sirve la determinación de Cu en pisco?

Debido a que las características físicas y químicas del aguardiente son

esencialmente dependientes del medio ambiente geográfico en el que sea
elaborado y puede estar afectado por factores naturales y humanos que dan
lugar a un producto único que puede contener considerables de cobre (Cu)
como contaminantes. (Magdalena, Reyes, Blanco, & Vasallo, 2010)
Aproximadamente el 50% de los Piscos producidos en el país están
contaminados con Cu. Destacan que la oxidación de este metal del alambique
de destilación es un problema que afectaba la duración, composición y calidad
organoléptica del Pisco.
Lo cierto es que este metal en altas concentraciones es un contaminante con
efectos muy tóxicos; de ahí, la importancia que debe prestársele en el proceso
de producción del Pisco.
Por lo que sirve determinar la concentración para que no se sobrepasen los
valores establecidos por las normas técnicas peruanas en las que tienen un
máximo y mínimo valor de Cu determinado, de tal forma a que, si no se
cumplen ya que son evaluados mediante análisis de laboratorio, pueden causar
problemas toxicológicos cuando sus niveles exceden los índices tolerables,
sobre todo, para las personas en las edades entre 25 y 40 años, que son las de
mayor consumo. (Isabel M, 2021)

5. ¿Cuáles son los valores permitidos de cobre en pisco?

Los valores de contaminantes como metales pesados, que son perjudiciales en

grandes cantidades, deben estar presentes hasta un valor de:

Contenido de cobre Mínimo Máximo

Cobre (ppm) --- 2,0

Fuente: (Isabel M, 2021)

6. Para que nos sirve usar el método de adición estándar.

La adición estándar se utiliza con frecuencia en análisis instrumental químico,

como la espectroscopia de absorción atómica y la cromatografía de gases.

Suponga que la concentración de plata en muestras de desechos fotográficos

se determina mediante espectrometría de absorción atómica. Usando el
método de la curva de calibración, un analista podría calibrar el espectrómetro
con algunas soluciones acuosas de una sal de plata pura y usar el gráfico de
calibración resultante en la determinación de la plata en las muestras de
prueba. Sin embargo, este método solo es válido si una solución acuosa pura
de plata y una muestra de desecho fotográfico que contiene la misma
concentración de plata dan los mismos valores de absorbancia.

12
 En otras palabras, al usar soluciones puras para establecer el gráfico de
calibración, se asume que no hay "efectos de matriz", es decir, no hay
reducción o mejora de la señal de absorbancia de plata por otros componentes.
En muchas áreas de análisis, tal suposición es frecuentemente inválida. Los
efectos de la matriz ocurren incluso con métodos como la espectrometría de
plasma, que tienen la reputación de estar relativamente libres de
interferencias.

Por lo general, se sigue el método de adiciones estándar para eliminar los

efectos de la matriz. Experimentalmente, se toman volúmenes iguales de la
solución de muestra, todos menos uno se 'enriquecen' por separado con
cantidades conocidas y diferentes del analito, y luego todos se diluyen al
mismo volumen.

VII. Conclusiones:

 La técnica de espectroscopia de absorción atómica en llama se basa en que los

átomos del analito presentes en una solución son convertidos a su estado
atómico mediante el uso de una llama donde la intensidad de luz absorbida
puede ser medida contra una curva de calibración patrón, siendo la cantidad
de energía absorbida (a una longitud de onda característica) proporcional a
la concentración del elemento en la muestra cómo se vio en el segundo video
de la práctica de laboratorio.

 La espectroscopia de absorción atómica se puede decir que es una técnica con

calidad en la detección de elementos como en el caso del cobre en el pisco,
nos permite obtener datos cuantitativos mediante cálculos además de ser de
amplio uso por la facilidad del manejo de este en el campo de investigación,
como en obtener la cantidad de metales que hay en un analito como el del
pisco que se mencionó antes, en los suelos e incluso en los alimentos y
medicamentos.

 El método de adición estándar puede utilizarse para minimizar efectos de

matriz en las señales de medición. Esto se realiza mediante la adición de
volúmenes precisa de una solución conocida de analito a la muestra.

VIII. Recomendaciones:

 Dentro de este trabajo se recomienda mantener los datos estadísticos en orden,

a fin de evitar respuestas alteradas o valores anormales.
 Se recomienda el uso de bata de laboratorio, mascarilla y campana extractora
y lentes de seguridad a razón de manejar sustancias altamente volátiles.
 Se debe tratar con cuidado al espectrómetro y evitar en lo posible tener
contacto directo con las muestras a analizar.
 Seguir las indicaciones del docente a cargo.

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IX. Referencias Bibliográficas
1. GEO Tutoriales. (2015, 21 de junio). Cómo se relaciona el Coeficiente de
Correlación de Pearson (r) y el Coeficiente de Determinación r Cuadrado (r2).
APA Style Blog. https://bit.ly/3uyDKmS
2. López, J. F. (2017, 02 de octubre). Coeficiente de determinación (R
cuadrado). Economipedia. https://bit.ly/33dGDyc
3. Minitab Blog Editor. (2019, 18 de abril). Análisis de Regresión: ¿Cómo puedo
interpretar el R-cuadrado y evaluar la bondad de ajuste?. APA Style Blog.
https://bit.ly/3GEuEY6
4. Isabel M, G. F. (2 de Mayo-Agosto de 2021). Metales Pesados en la Bebida
Alcohólica “Pisco” como predictor de riesgo en la salud. Panorama Cuba y
Salud 2021. Cuba.
5. M., O., P., R., A., G., R., F., E., D., & J., C. (21 de octubre de 2015). Diseño,
construcción y puesta en funcionamiento de un alambique modificado de
acero inoxidable a nivel de laboratorio.
6. Magdalena, L., Reyes, A., Blanco, I., & Vasallo, M. (Setiembre de 2010).
Determinación de Ca, Cu, Fe y Pb por espectrofotometría de absorción
atómica en aguardientes de caña. Obtenido de ICIDCA:
https://www.redalyc.org/pdf/2231/223120684001.pdf

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