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PROBLEMAS ESPECTROFOTOMETRIA
3. El hexano puro apenas presenta absorbancia en el ultravioleta por encima de 200 nm, Una disolución
preparada disolviendo 25,8 mg de benceno (C6H6, MF 78,11) en hexano, y diluyendo a 250,0 ml.,
presenta un pico de absorción a 256 nm, y una absorbancia de 0,266 en una cubeta de 1,000 cm. Hallar
la absortividad molar del benceno a dicha longitud de onda.
6. El cromóforo A posee bandas de extinción cuyos máximos se encuentran a 300 nm y a 550 nm. El
cromóforo B no absorbe en la región visible. ¿Cómo podría Ud. determinar la concentración de A en
presencia de B? ¿Podría Ud. determinar la concentración de A y B en mezcla si B posee una banda de
absorción en el UV que se superpone a la banda de A.?
7. Se adjunta el espectro visible del cromóforo C. El espectro se realizó con una solución de
concentración 12,4 mg/l en una cubeta de 1 cm. PM de C: 882. Describa las propiedades
espectroscópicas del cromóforo C, según este espectro (tabla: máx, ). Describa cómo se puede
efectuar la determinación absorciométrica de C. Haga una estimación del límite inferior
para la concentración de C determinable por espectrofotometría.
Concentración (mM) A
0,2 0,105
0,4 0,209
0,6 0,300
0,8 0,355
1,0 0,370
En base a estos datos indique en que rango de concentraciones se puede utilizar este método. Sabiendo
que una muestra problema tiene una concentración aproximadamente igual a 0,9 mM ¿Cómo
determinaría su concentración exacta?
10. Con el objetivo de determinar la concentración de proteínas de una muestra se efectuó el ensayo de
Biuret, como se describe a continuación. Se diluyó la muestra mezclando 0,5 ml con 4,5 ml de agua.
Posteriormente se mezcló en tubos de ensayo lo indicado en la tabla. Se esperó el tiempo requerido
para el desarrollo del color y se midió la absorbancia a 540 nm, calibrando con el blanco (tubo 0).
Calcule la concentración de la muestra usando los datos y resultados de la tabla. La concentración de la
solución estándar de BSA (albúmina de suero bovino) era 5 mg/ml.