Biorrefinerías

Semana 9: Procesos biológicos

Código: 540571
-2022-
Objetivos de la clase

1. Introducir conceptos generals de bioprocesos y

biotecnología aplicada a biorrefinerías
 BIOTECNOLOGÍA

La biotecnología es un conjunto de técnicas que utilizan las potencialidades de

los organismos vivos o de compuestos procedentes de ellos para la obtención de
productos, bienes y servicios.

Biotecnología tradicional Biotecnología actual

Basada en los logros
Basada en el uso de
obtenidos por la ingeniería
microorganismos.
genética.

1. Alimentos.
2. Farmacia. 1. Agricultura y ganadería
3. Medio ambiente. 2. Aplicaciones biosanitarias.
 Enzimas = biocatalizadores
• Compuestos proteínicos

• Catalizan numerosas reacciones

bioquímicas.

• Tienen estructuras tridimensionales

únicas que encajan con la forma del
reactivo.

• Derivan de plantas, micro-organismos

(levaduras, hongos o bacterias) o de
tejido de animales (pancreas).
 Termites' digestive system could act as biofuel
refinery

Ø 4,500 especies diferentes de bacterias en el estómago

Ø Descubrieron una mezcla de enzimas del estómago de las termitas y de

simbiontes.

Ø Tres enzimas sintéticas:

Ø Dos liberan glucosa y pentosa

Ø La tercera rompe la lignina

https://www.purdue.edu/newsroom/research/2011/110705ScharfTermites.html
Productores de enzimas

• Bacteria, hongos, levaduras y actinomicetos (un grupo de bacteria

unicelular filamentosa)

• Bacterial produce: Bacillus, Clostridium y Pseudomonas

• Hongo: Aspergillus, Trichoderma y Penicillium
• Actinomicetos: Streptomyces y Cellulomonas
• Levadura: maltasa (alfa-betaglucosidasa y invertasa que produce
glucosa y fructosa.
 Degradación de lignina

• Hongos pueden secretar enzimas lingnolíticas que degradan la lignina y

benefician la hidrólisis enzimática.
• Hongos de pudrición blanca pueden producir enzimas como manganesio
peroxidasa (MnP), lignina peroxidasa (LiP), versatile peroxidase versátil (VP),
y lacasa (Lac). Estas enzimas oxidan la lignina y generan los radicales
aromáticos seguido por la rupture de C4-eter, ruptura del anillo aromático,
ruptura del enlace Cα–Cβ y desmetoxilación.
• Los hongos requieren tiempo para crecer y la deslignificación es muy lenta
• Bacterias también deslignifican (Novosphingobium sp. B-7, Cupriavidus
basilensis B-8 y Comamonas sp)
• Ocurre en dos pasos: despolimeración de la lignina extracellular y
degradación de los aromáticos intracelulares.

https://doi.org/10.1186/s13068-018-1146-4
 Hidrólisis Enzimática

Utilización de enzimas celulolíticas

 Características de las Enzimas

• Son efectivas en pequeñas cantidades.

• Pueden catalizar procesos a bajas temperaturas.

• No sufren modificaciones químicas irreversibles durante la

catálisis (aplicable a todos los catalizadores).

• No afectan la condición de equilibrio de la reacción que

catalizan (aplicable a todos los catalizadores).
 Ecuación de Michaelis-Menten
… las reacciones catalizadas enzimáticamente ocurren en dos etapas.

Pero también tienen etapas

de adsorción e interacción
(similar al efecto en
superficie)
 Hidrólisis Enzimática de la Celulosa
Celulasa
Rompen los enlaces glicosídicos b-1,4 de la celulosa.

Liberan glucosa y otros monosacáridos.

endo-b- exo-b-
glucanasas glucanasas

b-
glucosidasa
Hidrólisis Enzimática de la Celulosa

Inhibición

CELULOSA
GLUCOSA

GLUCOSA CELOBIOSA OLIGOSACARIDOS

Inhibición

Inhibición
Access to cellulose limits the
efficiency of enzymatic hydrolysis:
the role of amorphogenesis

Arantes, V., Saddler, J.N

https://doi.org/10.1186/1754-6834-3-4
 Ventajas Desventajas

Opera a condiciones suaves de

temperatura (30 – 50 °C)
Proceso lento debido a la propia
No utiliza agentes químicos estructura de los sustratos
evitando la corrosión de los equipos y celulósicos nativos.
la degradación de los azúcares
producidos.

Dificultad en recuperación de las

Alta especificidad.
enzimas del medio de reacción.
 Hidrólisis enzimática y fermentación

https://www.sciencedirect.com/topics/engineering/simultaneous-saccharification-and-fermentation
 FERMENTACIONES: TERMINOLOGÍA
L. Pasteur la denominó "la vie sans l'air" o la vida sin aire .

En el sentido biológico es un proceso de obtención de energía en condiciones

anaeróbicas que genera ácido láctico o etanol (fermentación láctica o alcohólica).

Fermentación láctica:

Glucosa---------> Ácido Láctico+ energía+ H2O

Fermentación alcohólica:

Glucosa-------> Etanol+ energía+ CO2

Fermentación en biotecnología

En el contexto industrial, fermentación es un proceso microbiano a gran escala, tanto

en condiciones aeróbicas como anaeróbicas.

Fermentador o biorreactor
Selección y producción de
microorganismos

• Aislamiento de microorganismos
• Procedimientos de screening
• Mejoramiento de cepas-Optimización de condiciones
• Producción a pequeña escala (laboratorio)
• Producción a gran escala (Fermentadores) Zeachem
 Biotecnología
Por organismos Ingeniería molecular
Se puede trabajar con organismos Se cambia la información genética
intactos y sus células del organismo
Se utilizan organismos que NO
Se puede alterar la estructura o
tienen modificaciones introducidas
partes de la células
por ingeniería genética.
Se analizan y utilizan las variaciones Involucra técnicas de ingeniería
genéticas naturales. genética
Se optimizan las condiciones de Da como resultado organismos
producción y crecimiento recombinantes
 Ventajas de los microorganismos usados en
bioprocesos

• Degradación de polímeros heterogéneos hasta

azúcares simples.
• Fermentación simultánea de una mezcla de azúcares.
• Tolerancia a los inhibidores producidos durante la
hidrólisis.
• Tolerancia a la concentración creciente del producto
final y a las condiciones del proceso de fermentación.
Producción de etanol
Z. mobilis (bacteria) vs Saccharomyces
spp (levadura)
✓ Alta captura de azúcar y eficiencia a etanol (hasta 2,5
veces mayor)
✓ Baja producción de biomasa (residual)
✓ Alta tolerancia a etanol, hasta 16% v/v
✓ No requiere la adición controlada de oxígeno durante la
fermentación
✓ Fácilmente manipulable genéticamente
✓ Fermenta azúcares C5 (xilosa y arabinosa)
✓ Tolera inhibidores (ácido acético y varios compuestos
fenólicos

x No hay producción industrial, difícil control

https://doi.org/10.1186/1754-6834-7-101
 Nuevas estratégias

• Toleran mejor etanol

Nuevas cepas • Fermentan azúcares rápidamente
Saccharomyces spp • Puedan flocular
• Fermentan pentosas

Mejoras en • fermentación continua

proceso/tecnología • Reciclado de levadura
• Levaduras inmovilizadas
• Enzimas inmovilizadas
doi.org/10.1016/j.biombioe.2014.09.022.