Manejo

Viruela
Símica en el
laboratorio

Instituto Nacional de Salud.

Departamento de Laboratorio Nacional de Salud Pública
Laboratorios de Vigilancia en Salud Publica.
Generalidades del Virus (MonkeyPox Viruela del mono)

Causantes de enfermedades
Virus ADN de doble cadena,
en humanos y animales,
Género orthopoxvirus
lesiones, nódulos de la piel o
(OPXV), familia Poxviridae.
erupción diseminada.

El virus Vaccinia es también

un OPXV que se ha utilizado
Todos los orthopoxvirus están
como una vacuna atenuada y
relacionados
fue una herramienta clave
antigénicamente.
para la erradicación de la
viruela lograda en 1980.

Existen dos grupos geneticos

(Clados) conocidos de MPXV,
uno endémico de África
occidental y otro en la región
de la cuenca del Congo.
 Generalidades del Virus (MonkeyPox Viruela del
mono)
➢Periodo de incubación que puede ir de 6 a 16 días hasta 30
días

➢Inicia con un corto periodo prodrómico febril, seguido del

desarrollo progresivo de erupción clásica con lesiones
induradas y umbilicadas (deprimidas centralmente) que
comienzan en la cabeza o la cara y progresan a
extremidades y el tronco.

➢Las lesiones progresan todas en la misma etapa, desde

máculas, pápulas, vesículas, pústulas y finalmente, costras
que se secan y se caen después de dos a cuatro semanas.

➢Las lesiones pueden afectar boca, ojos y/o el área genital.

Generalidades del Virus (MonkeyPox Viruela del
mono)
Debido a la variedad de afecciones que causan erupciones cutáneas y debido a que la
presentación clínica puede ser más atípica en este brote, puede ser difícil diferenciar
la viruela del mono únicamente en función de la presentación clínica.

Por lo tanto, la decisión de realizar una prueba

de laboratorio debe basarse en factores clínicos
y epidemiológicos, vinculados a una evaluación
de la probabilidad de infección
TOMA Y GESTIÓN
DE MUESTRAS
 Procedimientos de bioseguridad
Se debe garantizar el uso de procedimientos operativos estándar apropiados y el personal de debe estar capacitado
para el uso y retiro adecuado del equipo de protección personal (EPP), este debe incluir:

➢Bata desechable antifluido

➢ Guantes de látex
➢ Gafas o cubierta facial completa
➢ Gorro
➢ Cubrecalzado
➢ Mascarilla N95

Adicionalmente, el personal debe estar entrenado para la

recolección, almacenamiento, el embalaje y el transporte de
muestras.
Gestión de riesgo biológico en el procesamiento
❑Desinfectantes efectivos: amonio cuaternario al 0,5% (o 200 ppm) y/o desinfectantes
a base de cloro (0,5%).
❑Se recomienda que todas las manipulaciones de especímenes procedentes de casos
sospechosos, probables o confirmados de viruela símica en el laboratorio se realicen
de acuerdo con un enfoque basado en el riesgo. Cada laboratorio debe realizar una
evaluación de riesgos local (es decir, institucional).
❑El laboratorio debe cumplir requisitos básicos de un ambiente de bioseguridad nivel
2.
❑Una infección puede ocurrir en el laboratorio por vía respiratoria durante el
procesamiento de muestras, material contaminado o prácticas inadecuadas
❑Las muestras deben manejarse en cabina de seguridad biológica (CSB) nivel II
revisada o certificada antes de la inactivación de la muestra.
Gestión de riesgo biológico en el
procesamiento
➢ El personal de laboratorio debe usar el EPP adecuado
(Nivel II o superior), especialmente para manipular las
muestras antes de la inactivación.

➢ Cuando se requiera el uso de una centrífuga para un

procedimiento, se deben usar recipientes de seguridad o
rotores sellados

➢ Deben considerarse medidas de control adicionales para

procedimientos específicos, incluidos los procedimientos de
formación de aerosoles
Tipos de muestras para la confirmación de laboratorio (PCR)

El tipo de muestra recomendada para la confirmación de laboratorio de la viruela del

mono es el material de la lesión cutánea, que incluye:

Hisopado de la Bordes superiores

superficie de la de mas de una Costras de la
lesión y / o el lesión (superficie lesión.
exudado de las lesiones)

Además de una muestra de lesión, se recomienda la recolección de un hisopado

orofaríngeo (la utilidad de esta muestra para el diagnóstico es limitado)
 Recolección y envío de muestras
➢ Frote la lesión vigorosamente (esto garantiza la recolección de ADN viral
adecuado)

➢Material de recolección y envio:

◦ Se pueden usar hisopos secos (en tubo estéril sin aditivo)

◦ Hisopos colocados en medios de transporte viral (VTM)

➢ Dos lesiones del mismo tipo deben recogerse en un solo tubo preferiblemente de
diferentes lugares del cuerpo y que difieren en apariencia.

➢ Las lesiones, costras y fluidos vesiculares no deben mezclarse en el mismo tubo.

 Almacenamiento de las muestras
➢ Posterior a la toma de muestra, esta debe refrigerarse (2 a 8°C) o congelarse (-20°C) dentro del

lapso de una hora después de la recolección.

➢ Transportarse al laboratorio tan pronto como sea posible después de la recolección “NO exceder

los 2 días desde la toma de muestra y envío.”

➢Transportar garantizando el sistema de triple embalaje, etiquetado y documentación adecuados

“Solicitud de prueba a través del sistema de vigilancia que las autoridades designen”

NOTA: El manejo y almacenamiento correctos de las muestras durante el transporte es

esencial para realizar un diagnóstico preciso y de calidad.
Almacenamiento en el Laboratorio
que procesa
➢ Las muestras deben refrigerarse (2 a 8 °C) o congelarse (-20 °C o menos)
durante el lapso de una hora después de la recolección.

➢Se recomienda el almacenamiento de muestras a largo plazo (>60 días

desde la recolección) a -70 ° C.

➢ Evitar los ciclos repetidos de congelación y descongelación porque

pueden reducir la calidad de los especímenes.
Pruebas de diagnostico
para Viruela símica
 Pruebas de diagnostico recomendadas (OPS)
➢ Pruebas de amplificación de ácidos nucleicos (NAAT):
◦ Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) convencional o en tiempo real para la detección de secuencias
especificas de ADN viral. La PCR se puede usar sola o en combinación con la secuenciación.

➢Algunos protocolos implican dos pasos, en los que la primera reacción de PCR detecta el género OPXV, pero no
identifica la especie. Este puede ser seguido por un segundo paso, que puede estar basado en PCR o utilizar
secuenciación para identificar específicamente MPXV, además de información genómica adicional.

➢ Otros protocolos (recomendados) están basados en la detección inicial genérica de MXPV (confirmando la
etiología), seguido de otros ensayos de PCR adicionales para diferenciación de los clados

➢Los kits de PCR que detectan OPXV o específicamente MPXV están en desarrollo; kits comerciales validados
para PCR no están ampliamente disponibles.

NO SE RECOMIENDA EL AISLAMIENTO VIRAL EN CULTIVO

 Extracción de ADN
➢En general, la etapa de lisis de la muestra en la extracción de ADN inactiva cualquier virus vivo.

➢Para costras, se debe utilizar un kit de extracción de ADN para tejidos (asegura una adecuada lisis
de la muestra)

➢El protocolo existente se basa en detección inicial de MXPV a través de una PCR en tiempo real.
➢ Si es positivo, se realiza una PCR dirigida para: Clado de MPXV de África Occidental y Clado de la Cuenca
del Congo

➢Se utilizaran dos posibles algoritmos (depende de la accesibilidad de las pruebas)

Los países sin protocolo de diagnóstico molecular deben enviar muestras

clínicas sospechosas (definición de caso estrictamente ajustada) a un
laboratorio de referencia designado por la OPS.
 Interpretación de resultados y reporte de los
datos
➢La confirmación de la infección por MPXV debe considerar la información clínica y
epidemiológica.
➢Si bien es preferible realizar pruebas confirmatorias específicas de MPXV, la detección
positiva mediante el ensayo de PCR OPXV se considera suficiente para la confirmación
de laboratorio de casos sospechosos en países no endémicos.
➢Los datos de secuenciación genómica también pueden proporcionar información valiosa
para ayudar a comprender los orígenes, la epidemiología y las características del virus,
por ejemplo, si los casos surgen de una sola introducción o de múltiples introducciones de
otros lugares.

De acuerdo con el Reglamento Sanitario Internacional (RSI), todos los casos

confirmados de viruela símica deben notificarse dentro de las 24 horas
a través de los canales oficiales del RSI.
Pruebas diferenciales a
Viruela símica
CONSIDERAR EL DESCARTE DE ENFERMEDADES
DIFERENCIALES
Muestras, material de recolección y temperatura de almacenamiento
para detección de MPXV y diagnóstico diferencial
 Muestra Clínica (según
Enfermedad Manejo de la muestra Diagnostico Laboratorio de destino
capacidad de laboratorio)

Envió en condiciones de triple

embalaje y cadena de frio.
Material de la lesión cutánea
Hisopos de la superficie de la Vigepes-02 con información Laboratorio Nacional de Salud
lesión completa, importante incluir: Publica "para envió a través
Diagnostico clínico
Exudado de la lesión -Definición de caso del RSI“
Nexo epidemiológico
Viruela del Mono Costras de la lesión. - Fechas de inicio de síntomas,
(MonkeyPox) toma de muestra y envío Según disposición de reactivo
Confirmación:
Estas muestras deben estar -Antecedente de viaje a países con de PCR :
PCR o Secuenciación
contenidas en medio de circulación de la enfermedad Hospital Nacional Santa Ana
transporte viral o hisopo seco - Firma y sello de unidad de Hospital Nacional San Miguel
en tubo estéril sin aditivo epidemiologia
-Mas toda la información necesaria
para conocimiento del caso

Diagnostico Clínico
Nexo epidemiológico
Varicela Abordaje Sindrómico N/A N/A
Método de confirmación por
laboratorio NO DISPONIBLE
 Muestra Clínica
Enfermedad (según capacidad de Manejo de la muestra Diagnostico Laboratorio de destino
laboratorio)
Envió de muestras debe realizarse
cumpliendo condiciones de triple Diagnostico clínico
Suero, Orina e
embalaje y cadena de frio. Nexo epidemiológico
Hisopado
Laboratorio Nacional de Salud
Sarampión Nasofaríngeo
Vigepes-02 con información completa Confirmación por laboratorio Publica
(enviar las tres
según al vigilancia de esta enfermedad (IgM Sarampión; confirmación de la
muestras)
"Importante incluir historial de vacunas IgM: IgG Sarampión y PCR )
para esta enfermedad"
Diagnostico Clínico
Nexo epidemiológico
Sarna Abordaje Sindrómico N/A N/A
Método de confirmación por
laboratorio NO DISPONIBLE

Envió de muestras debe realizarse Diagnostico clínico

cumpliendo condiciones de triple Nexo epidemiológico
Suero Laboratorios del red de salud
embalaje y cadena de frio.
Sífilis Minsal y Laboratorio Nacional
Confirmación por laboratorio
de Salud Publica
Vigepes-02 con información completa RPR Sífilis (según indicación de DVS y
según al vigilancia de esta enfermedad disposición de pruebas)
 Muestra Clínica (según
Enfermedad Manejo de la muestra Diagnostico Laboratorio de destino
capacidad de laboratorio)
Diagnostico clínico
Región Occidental (Hospital Nacional San
Hisopado Cervicouterino o Envió de muestras debe realizarse Nexo epidemiológico
Juan de Dios Santa Ana)
Uretral, de lesión de piel o cumpliendo condiciones de triple
Región Oriental (Hospital Nacional San
mucosas de área genital y embalaje y cadena de frio. Confirmación por
Juan de Dios San Miguel)
Herpes 1 perineo en Medio de laboratorio
Región Paracentral (Hospital Nacional
transporte Viral (prueba Vigepes-02 con información Disponible solamente en
Zacatecoluca)
PCR realizada en clínicas completa según al vigilancia de clínicas Vicits para
Región central y paracentral (Laboratorio
Vicits) esta enfermedad población clave
Nacional de Salud Publica)

Diagnostico clínico
Región Occidental (Hospital Nacional San
Hisopado Cervicouterino o Envió de muestras debe realizarse Nexo epidemiológico
Juan de Dios Santa Ana)
Uretral, de lesión de piel o cumpliendo condiciones de triple
Región Oriental (Hospital Nacional San
mucosas de área genital y embalaje y cadena de frio. Confirmación por
Juan de Dios San Miguel)
Herpes 2 perineo en Medio de laboratorio
Región Paracentral (Hospital Nacional
transporte Viral (prueba Vigepes-02 con información Disponible solamente en
Zacatecoluca)
PCR realizada en clínicas completa según al vigilancia de clínicas Vicits para
Región central y paracentral (Laboratorio
Vicits) esta enfermedad población clave
Nacional de Salud Publica)
 Referencias.
➢Directrices de laboratorio para al detección y el diagnostico de la infección por el virus de la viruela del mono.
https://www.paho.org/es/documentos/directrices-laboratorio-para-deteccion-diagnostico-infeccion-por-virus-viruela-mono

➢Organización Panamericana de la Salud. Alerta Epidemiológica Viruela símica en países no endémicos - 20 de mayo de
2022. Washington, DC: PAHO;2022. Available at: https://www.paho.org/es/documentos/alertaepidemiologica-viruela-
simica-paises-no-endemicos-20-mayo-2022

➢Organización Mundial de la Salud. Pruebas de laboratorio para el virus de la viruela del mono. Ginebra: OMS; 2022.
Disponible en: https://www.who.int/publications/i/item/WHO-MPX-laboratory-2022.1

➢Organización Mundial de la Salud. Guidance on regulations for the transport of infectious substances 2021- 2022.
Ginebra: OMS; 2021. Disponible en: https://www.who.int/publications/i/item/9789240019720 Li Y, Zhao H, Wilkins K,
Hughes C, Damon IK. Real-time PCR assays for the specific detection of monkeypox virus West African and Congo Basin
strain DNA. J Virol Methods. 2010 Oct;169(1):223-7. doi: 10.1016/j.jviromet.2010.07.012. Disponible en: doi:
10.1016/j.jviromet.2010.07.012

➢Organización Panamericana de la Salud. Manual de mantenimiento para equipo de laboratorio. Disponible en:
https://www.paho.org/es/documentos/manual-mantenimiento-para-guias-laboratorio World Health Organization.
Laboratory biosafety manual, 4th edition. Geneva: WHO; 2022. Available from:
https://www.who.int/publications/i/item/9789240011311 Organización Mundial de la Salud. Reglamento Sanitario
Internacional (2005) Tercera edición. Ginebra: OMS; 2016. Disponible en:
https://www.who.int/publications/i/item/9789241580496
Alameda Roosevelt, Edificio Laboratorio Central “Dr. Max Bloch” frente a parque Cuscatlán,
San Salvador, El Salvador, C.A MINSAL-Laboratorio Nacional de Salud Publica.
Teléfono Teléfonos (503) 2205-1605; Parasitología: 2205-1631; Conmutador PBX (503)
2594-8520
www.salud.gob.sv