Carbohidratos

Pruebas de identificación de carbohidratos y

extracción de glucosa de la miel

• Clasificar los diferentes carbohidratos de importancia en diversas

áreas.
1

• Comprender los fundamentos de las pruebas de los carbohidratos.

2

• Verificar las propiedades físicas y químicas de los carbohidratos.

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Los carbohidratos, también conocidos como glúcidos, hidratos de
carbono o sacáridos son moléculas orgánicas, específicamente,
polihidroxialdehídos y polihidroxicetonas derivados de alcoholes,
que representan la forma biológica primaria de almacenamiento y
consumo de energía. Son los compuestos orgánicos más
abundantes en la naturaleza y también los más consumidos por
los humanos; en muchos países constituyen entre 50 y 80% de la
dieta de la población. En general los carbohidratos que provienen
del reino vegetal son más variados y abundantes que los del reino
animal.

Fuente: https://www.diariamenteali.com/articulo/la_importancia_de_los_carbohidratos
Existen diversas formas para clasificar o agrupar a los
carbohidratos y cada una de ellas se basa en un criterio distinto:

Poder Estructura
edulcorante química

Ubicación del
Uso en
grupo
alimentos
carbonilo

Numero de
Abundancia en carbonos que
la naturaleza contiene la
cadena
Por lo general se prefiere el criterio de la estructura química, que
hace referencia al número de monómeros que posea la molécula:
monosacáridos, oligosacáridos y polisacáridos).

Fuente: https://sites.google.com/site/grubioquimicaclinica/bases-bioqu/carbohidratos
 Funciones de los carbohidratos

Fuente: https://espanol.babycenter.com/thread/3433348/funciones-de-los-carbohidratos-
Pruebas de identificación de carbohidratos
 Prueba de Molish
Esta prueba plantea la reacción de identificación de cualquier carbohidrato en
disolución, se basa en la hidrolización de los enlaces glicosidicos para dar
monosacáridos, para posteriormente ser deshidratados dando furfural y sus
derivados, estos productos luego se combinan con α-naftol sulfonato originando
un complejo purpúra, como se muestra en la figura 1.

Fuente: https://sites.google.com/site/bioquia9/reaccion-de-molish

Fig. 1. Reacción de identificación de carbohidratos generales según

prueba de molish
 Prueba de Seliwanoff
Esta prueba plantea la reacción de identificación de aldosas y cetosas. Se
basa en el hecho de que, al calentarlas, las cetosas son deshidratadas más
rápido que las aldosas. Las cetosas se deshidratan más rápido dando
derivados de furfural que se condensan con el resorcinol para formar un
complejo rojo de acuerdo a la siguiente reacción. Por lo anterior expuesto,
esta prueba es específica para la identificación de cetosas.

Fuente: https://baixardoc.com/preview/prueba-de-seliwanoff-5dc32d7a4b000
Fig. 2. Reacción de identificación de aldosas y cetosas según la prueba de
Seliwanoff.
 Prueba de Bial
Cuando se calientan las pentosas con HCl concentrado se forma furfural que
se condensa con orcinol en presencia de iones férricos para dar un color
verde-azul. La reacción no es absolutamente específica para las pentosas, ya
que el calentamiento prolongado de algunas hexosas produce hidroximetil
furfural que también reacciona con orcinol dando complejos coloreados.

Fuente: https://www.uco.es/dptos/bioquimica-biol-mol/pdfs/20%20REACCIONES%20COLOREADAS%20DE%20AZUCARES.pdf
Fig. 3. Reacción de identificación de monosacáridos según la prueba de Bial
 Fuente: https://www.uco.es/dptos/bioquimica-biol-mol/pdfs/20%20REACCIONES%20COLOREADAS%20DE%20AZUCARES.pdf

Fig. 4. Reacciones coloreadas de los furfurales con α-naftol (prueba de

Molish), resorcinol (prueba de Selliwanoff) y orcinol (prueba de Bial).
 Prueba de Benedict
Esta prueba sirve para el reconocimiento de azúcares reductores. Se basa en
la reducción de Cu2+ a Cu+ en medio básico débil. Aunque es similar a la
reacción de Fehling, el medio básico débil (NaHCO3) y el estabilizante (citrato
sódico) usados hacen que este test sea más sensible y estable que el de
fehling.

Fuente: https://actuaciencia.blogspot.com/2018/05/test-de-benedict.html

Fig. 5. Reacción de identificación de azúcares reductores según la prueba

de Benedict
 Prueba de Fehling
Esta prueba plantea la reacción de identificación de azucares reductores. Se
fundamenta en el poder reductor del grupo carbonilo de un aldehído. Este
aldehído se oxida a un ácido carboxílico y reduce el sulfato de cobre en medio
alcalino a óxido cuproso, que forma un precipitado de color rojo. Lo importante
de la reacción es que el aldehído del carbohidrato puede detectarse
fácilmente, aunque exista en muy pequeña cantidad. Si el grupo carbonilo se
encuentra combinado no puede presentar este poder reductor.

Fuente: https://sites.google.com/site/laboratoriosbioquimica/bioquimica-i/carbohidratos/reaccion-de-fehling

Fig. 6. Reacción de Fehling

 Prueba de Barfoed
Esta prueba plantea la reacción de identificación de monosacáridos, debido
a que el reactivo de Barfoed es débilmente ácido y solo puede ser reducido
por monosacáridos. Se fundamenta como muestra la figura en la reducción
de cobre 2+ que hace parte del acetato cúprico a cobre 1+ en forma de
Oxido cuproso, formando un precipitado color rojo ladrillo.

Fig. 7. Reacción de identificación de monosacáridos según la prueba de

Barfoed
 Prueba de Tollens
La prueba de Tollens es un procedimiento de laboratorio usado para distinguir
un aldehído de una cetona: se mezcla un agente oxidante suave con un
aldehído o una cetona desconocida; si el compuesto se oxida, es un aldehído, si
no ocurre reacción, es una cetona. El complejo de plata amoniacal [Ag(NH3)2]+
en solución básica es el agente oxidante utilizado en la prueba de Tollens. Si hay
un aldehído presente, éste se oxida a la sal del ácido RCOO-. Al mismo tiempo,
se produce plata metálica Ag(s) por la reducción del complejo de plata
amoniacal.

Fuente: https://www.youtube.com/watch?v=W3ZELGXWGcs

Fig. 8. Reacción de Tollens

 Prueba de Lugol o Yodo
Esta prueba plantea la reacción de identificación de polisacáridos como el
almidón. Una solución de yodo - diyodo disuelto en una solución acuosa de
yoduro de potasio forma complejos coloreados por adsorción con los
polisacáridos. Con el almidón reacciona para dar una coloración azulada o negra
gracias a la formación de hélices donde la cadena lineal del almidón se une con
las moléculas de yodo. El glucógeno forma una coloración pardo rojiza, debido a
que es parcialmente hidrolizada.

Fuente: https://sites.google.com/site/laboratoriosbioquimica/bioquimica-i/prueba-del-almidon

Fig. 9. Reacción de una muestra de carbohidrato con Lugol

  Prueba de difenilamina:
Los 2-desoxiazúcares pueden detectarse con difenilamina en condiciones
acídicas, ya sea en forma aislada o formando parte de otras
macromoléculas (2-desoxi-β-D-ribofuranosa en DNA). La combinación de
este ensayo con la prueba de Bial permite detectar y diferenciar entre
DNA y RNA. De haber 2-desoxiazúcares se formará complejo azul-verde.

Fuente: http://www.aulavirtual-
exactas.dyndns.org/claroline/backends/download.php?url=L1RyYWJham9zX1ByYWN0aWNvcy9UUDZfUWNhX0Jpb2zzZ2ljYV9
QVUJfMjAxOS5wZGY%3D&cidReset=true&cidReq=QUIMBIO

Fig. 10. Reacción de Difenilamina