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INSTITUTO TECNOLÓGICO
SUPERIOR DE XALAPA

DIVISIÓN DE INGENIERÍA BIOQUÍMICA

EVALUACIÓN DE UNA CREMA ELABORADA A BASE

DE Aloe Vera, Equisetum arvense Y Thymus PARA EL
TRATAMIENTO TÓPICO DEL ACNÉ VULGAR.

TALLER DE INVESTIGACIÓN II

PRESENTA:
LÓPEZ BAUTISTA RODRIGO ENRIQUE

ASESOR:
GONZÁLEZ DE LA TIJERA MARÍA MARGARITA

XALAPA ENRÍQUEZ, VER. ENERO 2021

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Agradecimientos

Doy gracias al Instituto Tecnológico Superior de Xalapa

por todo el aprendizaje y formación en esta última etapa
estudiantil que requiere de la integración de conocimientos que a
lo largo de la carrera obtuve para poderlos aplicar en este
proyecto afín. Es de destacarse el apoyo de la doctora María
Margarita González de la Tijera, como asesora, quien me orientó
durante la realización de este proyecto, cuando lo necesitaba.
Así mismo quiero exaltar la labor del maestro Francisco Javier
tanto en la revisión del presente trabajo, como en las clases de
varias materias que él me ha impartido, valoro el interés que
tiene este docente por transmitir de la mejor manera posible los
conocimientos a sus alumnos, los cuales reconocemos que a
veces su exigencia es de destacar con la del resto de docentes,
sin embargo, sabemos que después de todo eso nos ayuda a
formarnos mejor como profesionales.

Por último, pero no menos importante, me es grato

reconocer el apoyo incondicional de mis padres durante toda mi
vida, sin ellos todo esto no sería posible. Al igual quiero
agradecer el apoyo de mis amigos, que durante esta etapa de la
vida han amenizado momentos un poco complicados con las
experiencias compartidas dentro y fuera de la escuela.
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Índice
13.Resumen………………………. ......................................................................................................... 5

1.Introducción al problema …………………………………. ................................................................... 6

2.Planteamiento y formulación del problema ........................................................................................ 7
3.Justificación………………………………………………… ................................................................... 8
4.Objetivos……………………………………………………. ................................................................. 10
5.Hipótesis……………………………………………………. ................................................................. 11
6.Marco referencial…………………………………………… ................................................................. 11
6.1. Antecedentes…… ................................................................................................................. 11
6.2. Marco contextual ................................................................................................................. 13
6.3. Marco teórico…… ............................................................................................................... 144
6.3.1. Acné vulgar ................................................................................................................. 14
6.3.2. Tratamientos antiacné………………………………………………………………………...15
6.3.3. Crema corporal............................................................................................................ 16
6.3.4. Normas…... ................................................................................................................. 17
6.3.5.Cola de caballo (Equisetum Arvense) ........................................................................... 18
6.3.5.1. Propiedades de la cola de caballo .................................................................... 18
6.3.6. Sábila (Aloe vera) ....................................................................................................... 19
6.3.6.1.Propiedades de la sábila ................................................................................... 19
6.3.7. Tomillo (Thymus) ........................................................................................................ 20
6.3.7.1.Propiedades del tomillo ..................................................................................... 20
6.4. Marco conceptual ................................................................................................................. 21
7.Metodología………………………………………………… ............................................................. 2222
7.1. Formulación... ................................................................................................................ 24
7.2. Elaboración ................................................................................................................. 26
7.2.1. Obtension de tinturas……………………………………………………26
7.2.2. Elaboracón de crema …………………………………………………..27
7.3.Pruebas microbiológicas ..................................................... ¡Error! Marcador no definido.8
7.4.Tratamiento topico con la crema antiacné ............................. ¡Error! Marcador no definido.9
7.5.Evaluación de la crema antiacné ......................................................................................... 31
8.Cronograma…………….. ............................................................................................................. 3434
9.Pesupuesto………………………………………………… ................................................................. 35
10.Resultados…………….. ................................................................................................................. 36
11.Conclusiones………….. ................................................................................................................. 36
12.Anexos………………….................................................................................................................. 37
13.Referencias bibliográficas .............................................................................................................. 40
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Índice de figuras

Figura 1. Aspecto del acné en el rostro.................................................................................. 14

Figura 2. Cola de caballo ....................................................................................................... 17
Figura 3. Sábila ...................................................................................................................... 19
Figura 4. Tomillo .................................................................................................................... 20
Figura 5. Metodología por etapas de la elaboración de la crema. antiacné ........................... 22
Figura 6. Metodología en elaboración y evaluación de la crema antiacné. ............................ 23
Figura 7. Tintura de Aloe vera ................................................................................................ 26
Figura 8. Autoclave ................................................................................................................ 27
Figura 9. Medidor digital de pH .............................................................................................. 28
Figura 10. Pruebas microbiológicas NOM-089-SSA1-1994 ................................................... 29

Índice de tablas

Tabla 1. Composición química de la cola de caballo. (García et al, 2012) ............................. 18

Tabla 2. Formulación 1 de la crema antiacné. ........................................................................ 24
Tabla 3. Formulación 2 de la crema antiacné ......................................................................... 25
Tabla 4. Formulación 3 de la crema antiacné ......................................................................... 25
Tabla 5. Diseño de experimentos ........................................................................................... 32
Tabla 6. Variables dependientes ............................................................................................ 32
Tabla 7. Cronograma de actividades ...................................................................................... 34
Tabla 8. Presupuesto en la elaboración de la crema.............................................................. 35

Índice de Anexos

Anexo 1 .................................................................................................................................. 37
Anexo 2 .................................................................................................................................. 39
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Resumen

Si bien es cierto que actualmente hay diversos productos para remediar el

acné, la realidad es que aún no existe una opción que solucione está problemática
de manera satisfactoria, puesto que muchos de los productos antiacné traen
consigo una serie de efectos colaterales por su consumo. Es en este sentido que
se ha propuesto elaborar una alternativa más natural y que contribuya a la
disminución del acné. Es por ello que en el presente trabajo de investigación se
aborda el desarrollo y evaluación de una alternativa natural que coadyuve en la
disminución de acné vulgar leve o moderado, por medio de una crema con un pH
de 3, elaborada a base de extractos herbales provenientes del Aloe vera,
Equisetum arvense y Thymus, como principios activos.
Para lograr el objetivo de esta investigación se inició el trabajo metodológico
con la realización de tres formulaciones con una concentración baja, media y alta
de los principios activos. Posteriormente se elaboró la crema de acuerdo a las tres
formulaciones. Con el fin de garantizar que la crema elaborada fuera inocua en su
consumo humano, se realizaron una serie de pruebas microbiológicas de acuerdo
a la normativa mexicana para determinar si este producto desarrolla crecimiento
de microorganismos patógenos. De esta manera se continuó con la prueba de la
crema en sus tres formulaciones en un grupo de personas que presentaban acné
leve o moderado durante un periodo de 10 semanas con dos aplicaciones diarias.
Al finalizar el tratamiento se hizo un análisis cualitativo de los efectos que tuvo está
crema frente al acné, por medio de evidencia fotográfica de la evolución del acné
que tuvieron las personas durante el tratamiento y un cuestionario sobre su
experiencia. Se realizó un ANOVA que ayudará a determinar que formulación fue
más efectiva, así como conocer en qué medida se disminuyó el acné en las
personas con esta alternativa natural.
De ser efectiva la crema en la reducción del acné se concluiría que
correlación de los factores de la fórmula es adecuada para disminuir la inflamación
de la piel, la cantidad de granos y de la actividad bacteriana de la
Propionibacterium acnés.
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Evaluación de crema elaborada a base de Aloe vera, Equisetum

arvense y Thymus para el tratamiento tópico del acné vulgar

1. Introducción

En el presente trabajo se aborda la problemática del acné desde un enfoque

teórico-práctico para darle tratamiento de forma natural a esta enfermedad por
medio de la elaboración de una crema a base de extractos herbáceos tales como
el de la cola de caballo, sábila y tomillo; así como de otros componentes de origen
orgánico, con el fin de disminuir los daños dermatológicos generados por el acné.
Todo ello con el propósito de abarcar un tratamiento tópico global que consista en
la erradicación de la actividad bacteriana causante de la formación de granos y
espinillas, así como en la reestructuración del tejido dérmico afectado, y además
de una forma natural que no genere varios efectos secundarios como los que
ocasionan otros productos convencionales antiacné.

Es por su numerosa presencia en personas alrededor del mundo que el

impacto social negativo que tiene el acné ha sido objeto de investigación, lo cual
se ve reflejado en una ampliación en el mercado de diversos productos antiacné
para darle solución a este problema de salud. Es así que la selección y estudio de
las propiedades bioquímicas de los componentes de la crema se hicieron en base
a la información obtenida de diversas fuentes como libros, revistas, artículos,
trabajos de investigación e internet; los cuales no solo abordan en que consiste
esta enfermedad sino también brindan otros datos importantes en el análisis de
correlación entre los agentes patógenos y las propiedades bioquímicas benéficas
de los componentes a usar en la crema antiacné, para que de esta manera se
ayude a contrarrestar los daños de esta enfermedad.

Se espera obtener buenos resultados y evaluar qué tan eficaz es este

método no solo en inhibir los efectos del acné sino también en la disminución o
nula presencia de efectos secundarios durante el tratamiento con esta crema.
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2. Planteamiento del problema

El acné vulgar, también conocido simplemente como acné, es una

enfermedad crónica inflamatoria debido a un desorden de las glándulas
pilosebáceas de la piel. Este problema dermatológico afecta a personas de
cualquier edad, pero habitualmente se presenta en adolescentes de todo el
mundo, debido a la alta actividad hormonal que se da durante esta etapa de la
vida (Sendra, 2019). Se estima que el 9.4% de la población a nivel mundial
padece de acné, es decir, esta enfermedad afecta aproximadamente a cerca de
726 millones de personas (Miranda, 2017). Uno de los efectos que ha conllevado
esta problemática se ven reflejados en la diversidad de productos y
medicamentos antiacné que se pueden encontrar y ver en anuncios publicitarios
dirigido a aquellas personas que presentan esta enfermedad. Actualmente se
tienen a disponibilidad desde métodos tópicos como jabones, cremas y geles
para el acné leve y moderado, hasta la administración oral de medicamentos con
químicos sintéticos para tratar casos severos, estos últimos, generalmente
provocan más efectos secundarios en las personas que los consumen. Tan solo
en Estados Unidos se gastan más de 2.2 mil millones de dólares al año en el
tratamiento del acné (Greydanus, 2015).

La elaboración o creación productos de composición orgánica que puedan

reducir la actividad bacteriana de la Propionibacterium acné e inducir la
regeneración de tejido celular dañado, de una forma natural, así como reducir de
manera importante la cantidad de efectos secundarios como los que ocasionan
los productos antiacné convencionales, son una alternativa para reducir estas
afecciones.
 8

3. Justificación

Sin duda, se ha vuelto importante la atención y objeto de estudio el acné

para el desarrollo de tratamientos más efectivos y sobre todo menos agresivos
para las personas que presentan esta afección. Una de las problemáticas de
someterse a un tratamiento antiacné está en el consumo de productos,
generalmente químicos, que comúnmente ocasionan una serie de efectos
secundarios. Es por ello que en el presente trabajo, se optó por elaborar una
alternativa natural que ayude a disminuir los daños dermatológicos del acné, sin
generar algún impacto que incida negativamente por su consumo.

El acné vulgar no solo repercute en la salud fisiológica de quien lo padece,

puesto que también tiene efectos a nivel emocional que pueden derivar en
depresión y por consiguiente en una baja autoestima que puede provocar
complicaciones en las relaciones sociales. Esto se ejemplifica en los frecuentes
casos de bullying hacia aquellas personas que tienen acné y que normalmente
sufren de tratos despectivos como los apodos o la crítica hacia su aspecto físico,
lo anterior se presenta frecuentemente en la adolescencia. Es así que el acné a
pesar de no tener un nivel alto de peligro en la salud en comparación con otras
enfermedades, ha representado ser una enfermedad que predomina en gran parte
de la población mundial y que además tiene un impacto social por los efectos
físicos que conlleva.

Viabilidad

La realización de este proyecto está dentro de las posibilidades de quien

realiza la investigación, sin embargo una las principales limitantes del presente
trabajo está en la disponibilidad del tiempo necesario para poder llevar a cabo el
proyecto en un lapso de pocos meses. Otra limitante está en el ámbito económico
y tecnológico por no disponer de equipo especializado en el análisis molecular y
microbiano que permitirían un mayor desarrollo, entre otros instrumentos de
 9

laboratorio, equipos y reactivos que son necesarios en alguna de las etapas del
trabajo; así mismo se complica el acceso a estas herramientas por el contexto
actual de la pandemia de COVID-19, ante la necesidad de mantener el
distanciamiento social. Por otra parte se pretende llegar hasta la fase de
elaboración y evaluación de la crema, ya que de ser efectiva y rentable, se
necesita de recurso humano y de un estudio en el campo industrial y comercial
para su producción y distribución

Consecuencias de la investigación

Con base a lo planteado, se tiene que el desarrollo de este proyecto incidirá

de manera positiva en el ámbito de la salud al tener una alternativa natural y con
bajas probabilidades de ocasionar algún efecto no deseado por su consumo,
debido a que la crema se compone solo de ingredientes naturales. El impacto
social lo tiene en la disminución de casos de acné y por consiguiente una
disminución de complicaciones sociales tales como el acoso o bullying hacia
aquellas personas que presentan daños dermatológicos por acné, o aquellos
problemas de baja autoestima por los efectos físicos que conlleva el padecer esta
enfermedad.
 10

4. Objetivos

Objetivo general:

Evaluar una crema elaborada a base de Aloe vera, Equisetum arvense y

Thymus para el tratamiento tópico del acné vulgar.

Objetivos específicos:

• Extraer los componentes del Aloe vera, Equisetum arvense y Thymus por
medio de tinturas.
• Formular la crema antiacné con base a una proporción convencional en la
fase acuosa, oleosa y de principios activos; y ajustarla a un pH de 4.
• Realizar pruebas microbiológicas de acuerdo a la NOM-089-SSA1-1994
para garantizar el uso seguro de la crema en personas.
• Evaluar la efectividad la crema frente al acné cualitativamente acorde a los
efectos que tenga en personas que lleven a cabo el tratamiento.

Preguntas de investigación

¿Existe una buena correlación entre cada una de las propiedades bioquímicas de
los componentes y principios activos de la Equisetum arvense, Aloe vera y
Thymus que posee la crema para combatir la actividad bacteriana y reparación
del tejido celular dañado causado por el acné?
¿Qué tan efectiva es la crema a base de Equisetum arvense, Aloe Vera y
Thymus en el tratamiento tópico del acné vulgar?
¿En qué medida se disminuyen los efectos secundarios con este tratamiento
natural?
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5. Hipótesis

Con las propiedades antiinflamatorias, de regeneración celular y antiséptica

que poseen la Equisetum arvense, Aloe vera y Thymus, respectivamente; se induce la
inhibición de la actividad bacteriana de la Propionibacterium acné, así como la
desinflamación y reestructuración del tejido dérmico afectado por el acné.

6. Marco referencial

6.1. Antecedentes

En una investigación titulada Actividad antibacteriana in vitro de diecinueve

aceites esenciales frente a bacterias asociadas al acné, se hizo un análisis de la
actividad antibacteriana de forma in vitro de diecinueve aceites esenciales, para
combatir a aquellas bacterias que comúnmente generan acné, esto con el objetivo
de obtener productos farmacéuticos que combaten el acné vulgar. En esta
investigación se observó que los aceites de tomillo (Thymus vulgaris L.), canela
(Cinnamomum verum J. Presl) y clavo (Eugenia caryophyllata T.), en ese orden,
alcanzaron las más bajas de concentración mínima inhibitoria, además de tener
actividad antiinflamatoria por lo que estos compuesto son factibles en el uso de
productos farmacéuticos para el tratamiento del acné. Cabe destacar que la
presencia de aceites en la elaboración de una crema es fundamental ya que es
gracias a estos aceites que se le da consistencia y a su vez principios activos
(Criba, 2015)

En otro estudio titulado Thyme for a more natural cure to acné, se

demostró que las propiedades bioquímicas que tiene el extracto de tomillo
(Thymus) puede ser más efectivo en la actividad antibacteriana que el peróxido
de benzoílo, un compuesto químico que a menudo se usa en los productos
antiacné pero que normalmente ocasionan efectos secundarios tales como la
 12

sensación de ardor e irritación en la piel. Esto se hizo mediante tinturas a base de

tomillo (concentrados o extractos producto de sumergir partes de plantas en
soluciones alcohólicas) que posteriormente fueron adicionadas a cultivos de la
bacteria Propionibacterium acné. Lo mismo se hizo proporcionando el peróxido
de benzoílo a los cultivos de la bacteria responsable de la infección celular
observada en el acné Finalmente se hizo un conteo de la población bacteriana de
la P. acné y se observó que la tintura de tomillo resulto ser efectiva para combatir
a la actividad bacteriana incluso mejor que el mencionado peróxido de benzoílo
que se usa frecuentemente en los productos convencionales de antiacné
(Escalada, 2013).

De acuerdo con (UG, 2017) por medio del estudió de plantas medicinales
utilizadas en el tratamiento de enfermedades de la piel. Se identificaron 10
especies de plantas y sus aplicaciones terapéuticas en enfermedades como acné,
quemaduras, prurito, sarpullido, dermatitis, ulceraciones de la piel (llagas),
manchas y cuidado de la piel. El 100% de la población utilizó plantas medicinales
para el tratamiento de afecciones de la piel, siendo las más usadas la Aloe vera
(Sábila), Chamaemelum nobile (manzanilla), Melissa officinalis (toronjil) y Scoparia
dulcis (teatina).

Así también para comprender en qué consiste el acné más detalladamente

concorde a (Sendra, 2019) se sabe que esta enfermedad de la piel es crónica y
se presenta en la cara, cuello, espalda y pecho debido a una sensibilidad más
acentuada de estas partes a hormonas como los andrógenos. Se da por la
infección e inflamación de la unidad pilo sebácea. El aumento de la producción de
sebo junto con la queratinización excesiva de la capa externa de la piel (con más
cantidad de células muertas y carnificadas), da lugar a la colonización y
multiplicación de ciertas bacterias en los folículos pilosos que ocasionan la
inflamación del poro y formando de esta manera espinillas y granos.
 13

Es en referencia a los trabajos anteriormente mencionados, que se ha

podido tener una idea crear un producto natural que tenga la capacidad de tratar
adecuadamente el acné vulgar, cubriendo tres aspectos característicos de este
trabajo, los cuales son combatir la principal causa de esta enfermedad (bacterias)
por medio de las propiedades antisépticas de compuestos orgánicos empleados
en la elaboración de la crema; así como la remediación de los daños cutáneos
ocasionados por el acné al reestructurar y desinflamar de forma natural el tejido
dérmico por medio del aloe vera y la cola de caballo. Finalmente es probable
disminuir los posibles efectos secundarios por contener agentes naturales en la
formulación de la crema.

6.2. Marco contextual

El acné es un problema extendido a nivel mundial, puesto que es una

enfermedad crónica para la cual no hay una cura definitiva, es por ello que ha
sido objeto de investigación en varias partes del mundo sobre todo en países
europeos y de Norteamérica, lo anterior ha ocasionado una generación diversa
de productos antiacné, lo anterior se ve reflejado en los miles de dólares gastados
a nivel mundial por los productos que combaten el acné vulgar (Greydanus,
2015). Es un fenómeno con un impacto en el ámbito de la salud, social y
económico por el creciente mercado de los productos y tratamientos contra el
acné. Como ejemplo están tanto productos químicos como naturales que se
presentan en jabones, cremas e incluso medicamentos de administración oral que
son los principales causantes de efectos secundarios por la presencia de químicos
sintéticos en su formulación. En respuesta a lo anterior se ha desarrollado
últimamente una tendencia por los tratamientos naturales que no ocasionen la
misma problemática en cuestión. Es así que en el presente trabajo se va por una
línea de investigación de una nueva alternativa con productos de origen cien por
ciento natural en base a sus propiedades bioquímicas que permitan combatir los
daños por el acné.
 14

6.3. Marco teórico

6.3.1. Acné vulgar

El acné vulgar, también conocido simplemente como acné, es una

enfermedad crónica inflamatoria dérmica causada por un desorden de las
glándulas pilosebáceas de la piel. Los efectos de esta enfermedad se presentan
en la cara, cuello, espalda y pecho debido a una sensibilidad más acentuada de
estas partes a hormonas androgénicas. Se da por la infección e inflamación de la
unidad Pilosebácea. El aumento de la producción de sebo junto con la
queratinización excesiva de la capa externa de la piel (con más cantidad de
células muertas y carnificadas), da lugar a la colonización y multiplicación de
ciertas bacterias en los folículos pilosos y la inflamación del mismo que ocasionan
la inflamación del poro y formando de esta manera espinillas y granos (Sendra,
2019).

Fuente: Acné resuelto. 2020

2019
Figura 1. Aspecto del acné en el rostro

El acné vulgar habitualmente se presenta en la etapa de la adolescencia

puesto que en este periodo de vida es cuando se experimentan los niveles más
altos en la actividad hormonal, que son factor en el desarrollo de la enfermedad
(Secretaría de Salud, 2016).
 15

6.3.2. Tratamientos antiacné.

En los últimos años como consecuencia del constante aumento de

casos de acné alrededor del mundo y al no disponer en el mercado con un
tratamiento totalmente eficaz que remedie el acné, han surgido diversas
investigaciones que tratan de solucionar la enfermedad desde distintos enfoques
tales como el tratamiento local y de tratamiento sistémico. En los primeros se
administran antibióticos de forma tópica, es decir directamente sobre el tejido
enfermo, tales como el peróxido de benzoílo, treotinoína, ericromicina o
clindamicina, generalmente. En los del tipo sistémico podemos encontrar la
administración vía oral de antiandrógenos, estrógenos y retinoides, que tienen un
enfoque hacia combatir el factor hormonal de la enfermedad (OMS, 2012).

En la investigación de esta enfermedad y búsqueda por el remedio

definitivo, no solo involucra la síntesis química de diversos compuestos sino que
trasciende más allá con terapias en las que incluso se ven implicados dispositivos
como láseres entre otras fuentes de luz con diferentes longitudes de onda, con el
fin de inhibir el desarrollo del acné (Barbaric et al., 2016). Así también podemos
mencionar la terapia criogénica que se basa en la exposición del tejido infectado a
condiciones de enfriamiento fuertes (menores a los 0°C) por un periodo de pocos
minutos, esto se hace para logar efectos antiinflamatorios en la piel.

Se puede seguir mencionando más tratamientos, para ello solo basta

con ir al supermercado o farmacias para poder encontrar varias opciones para el
tratamiento del acné tales como jabones, geles, pomadas y cremas. Así también al
acudir a establecimientos de medicamentos naturista podemos encontrar otro
grupo de tratamientos alternativos que remedian el acné de una forma más natural
y no tan invasiva como lo hacen los productos químicos que generalmente
ocasionan una serie de efectos secundarios y que además tienen restricciones
durante su consumo (OMS,2012).
 16

6.3.3. Cremas

Una crema corporal es un preparado de consistencia espesa y homogénea

(semisólido) para el tratamiento tópico, es decir, se suministra untando este
producto en el sitio del cuerpo que se desea tratar. Se compone de agua, aceites y
principios activos. Cabe destacar que una crema es menos espesa que una
pomada, lo cual facilita su dispersión en la piel (UNAM & Torres, 2017).

Hay diferentes tipos de cremas por el uso que se les pueda dar,
generalmente en el mercado se encuentran para el cuidado de la piel con
funciones de hidratación, aclarado, de protección solar, entre otros usos
cosméticos. En este trabajo se elabora una crema con fines medicinales para
tratar de forma natural el acné vulgar.

Una de las características de esta crema antiacné es su pH con un valor de

3. Se ha decidido asignarle este valor para desarrollar un ambiente un poco más
ácido al que se presenta de manera natural en la piel (pH=5.5), pero que tampoco
resulte demasiado acido como para desarrollar síntomas de irritación en la piel, de
este modo se estaría inhibiendo la actividad enzimática productora de sebo de la
Propionibacterium acnés, la cual presenta un pH óptimo para su actividad similar
al que tiene la piel (Jaramillo & Bazalar, 2006). Es decir, con estas condiciones no
solo se combatiría a la bacteria con agentes antisépticos del tomillo, sino también
se modificarían las condiciones de su medio que le serian menos favorables para
su adaptación y normal funcionamiento.

6.3.4. Normas

Actualmente las normas aplicadas a la producción de productos y servicios,

son una serie de lineamientos que van encaminados a tener un producto final de
calidad y no perjudicial para la salud del consumidor. Estas normas incluyen
estándares en los procesos de producción de los productos.

La elaboración de esta crema antiacné está apegada a la NORMA Oficial

 17

Mexicana NOM-248-SSA1-2011, Buenas prácticas de fabricación para

establecimientos dedicados a la fabricación de remedios herbolarios y la NOM-
089-SSA1-1994 Métodos para la determinación del contenido microbiano en
productos de belleza.

A continuación se describen los tres principales componentes de la crema,

describiendo sus propiedades farmacológicas enfocadas al tratamiento del acné
vulgar.

6.3.5. Cola de caballo (Equisetum arvense)

La Equisetum arvense, comúnmente conocida como cola de caballo, es una

planta, especie de arbusto, que pertenece a la familia de las equisetáceas. Se
caracteriza por ser una planta articulada que está estructurada por nódulos, los
cuales se pueden desprender (Meuninck, 2013). Este tipo de hierba crece en
praderas y campos, en ambientes húmedos y arenosos.

Fuente: Enríquez. 2019

Figura 2. Cola de caballo

 18

6.3.5.1. Propiedades de la cola de caballo

La cola de caballo posee varias aplicaciones medicinales, pero

para efectos de este trabajo, interesan las propiedades antiinflamatorias
que ayudan en el tratamiento local del acné (García et al. 2012).

En la siguiente tabla se muestra la composición química de la Equisetum

arvense.

Tabla 1. Composición química de la cola de caballo. (García et al, 2012)

Familia Compuesto químico

Silícico
Oxálico
Málico
Ácidos
Equisético
Gálico

Glucosídico saponinico Equisetonósido

Alcaloides Nicotina

Óxido Sílice
Apigenina 5-O-glucósido
Metil-esteres de
protocatecuico 5-O-
Ácidos fenólicos
cafeoilshikímico
Ácido meso tartárico monocafeoil
Ácido meso tartárico dicafeoil
Quercetina
Isoquercetina
Quercetina 3-O-glucósido
Flavonoides Quercetina 3-O- (6″-O-alonilglucósido)
Kaempferol 3-O-glucosido

1,8 Cineol
Linalool
Terpenos
Timol
Alcanfor
 19

Tradicionalmente se ha ocupado la cola de caballo como agente coagulante para

tratar hemorragias, ulceras y heridas debido a que contiene oxido de silicio y acido
silícico, como se muestra en la tabla, esta planta también se ha usado como
agente antiinflamatorio.

6.3.6. Sábila (Aloe vera)

El segundo componente natural, no menos importante, empleado como

principio activo para la elaboración de la crema es el Aloe vera, también conocido
como sábila, la cual es una planta perteneciente a la familia de las Liliáceas,
posee hojas largas y carnosas (Ortis, 2010). Se conoce ampliamente alrededor del
mundo por sus numerosas aplicaciones medicinales que tiene su extracto o gel, el
cual se encuentra dentro las hojas que se caracterizan por tener en sus bordes
pequeñas espinas aserradas.

Fuente: Fundación Mundo Silvestre.2020

Figura 3. Sábila

6.3.6.1. Propiedades de la sábila

Es efectiva en el tratamiento de distintas enfermedades de la piel, es por

ello que se ha optado por usar su extracto por tener varios beneficios como
antiinflamatorios, de protección y regeneración celular; que coadyuvaría en la
reestructuración de los tejidos dérmicos afectados por el acné; bactericida que se
vuelve también importante en el tratamiento del acné puesto que es causado
 20

principalmente por la actividad bacteriana de la Propionibacterium acné, y agentes

desintoxicantes. Todas estas propiedades medicinales son debido a que el gel de
aloe vera contiene minerales, aminoácidos esenciales y polisacáridos que ayudan
en el cuidado del tejido celular (Domínguez, 2006).

6.3.7. Tomillo (Thymus)

El último componente importante ocupado para elaborar la crema antiacné

es el Thymus, generalmente conocido como tomillo, es una hierba aromática
perteneciente a la familia de las Lamiáceas. Es comúnmente usada para fines
culinarios y medicinales para tratar asmas y heridas (efloras.org, s. f.).

Fuente: Ecocosas.2021
Figura 4. Tomillo

6.3.7.1. Propiedades del tomillo (Thymus)

Sin duda, el principal agente antiséptico que tiene la crema antiacné del
presente trabajo, es dado por el tomillo, puesto que en el trabajo de Thyme for a
more natural cure to acne, realizado en la Leeds Beckett University, se demostró
que puede ser más efectivo en la actividad antibacteriana que el peróxido de
benzoílo, un compuesto químico que a menudo se usa en los productos antiacné
pero que ocasiona efectos secundarios tales como la sensación de ardor e
 21

irritación en la piel (Escalada, 2013). Esto se hizo mediante tinturas a base de

tomillo (soluciones de alcohol) que posteriormente se combinaron con los cultivos
de la bacteria Propionibacterium acné. Finalmente se hizo un conteo de la
población bacteriana y se observó que la tintura de tomillo resulto ser muy efectiva
para combatir a la actividad bacteriana incluso mejor que el mencionado peróxido
de benzoílo que se usa frecuentemente en los productos convencionales
antiacné.

6.4. Marco conceptual

Las tinturas son proceso efectivo en la extracción de las propiedades de las

plantas, por lo general, tiene una duración de dos semanas, a este periodo se le
denomina macerado, en el cual la mezcla de alcohol etílico con las hojas de las
plantas, debe dejarse almacenada en un recipiente, a una temperatura ambiente.
Finalmente se somete la mezcla a un proceso de prensado y filtrado para obtener
el extracto de interés que posteriormente es utilizado en diversos tratamientos. En
el caso de este trabajo, las tinturas se agregan a la crema como principios activos.
Este método de extracción de las propiedades herbáceas ha demostrado ser uno
de los más efectivos en diversos trabajos de investigación y a lo largo del tiempo
en la medicina tradicional (Escalada, 2013).

Así mismo otro término que cabe destacar es el antiséptico, que hace
referencia a aquella propiedad de ciertas sustancias para destruir
microorganismos patógenos o para inhibir los efectos de alguna infección. Esta
definición se ve implicada en el estudio y análisis de la actividad bacteriana que
dan origen a determinadas infecciones, como en el caso del acné, que uno de los
principales factores en la generación de granos y espinillas está dado por la ya
mencionada Propionibacterium acné. Es de esta manera que se vuelve importante
la búsqueda de agentes antisépticos o antibacterianos presentes en plantas como
el tomillo, que se ha comprobado ser muy eficaz en inhibir a la bacteria del acné.
 22

7. Metodología

En el presente proyecto se engloba en las siguientes etapas mostradas en

la figura 5, en la primer etapa se da la obtención del producto, en la segunda se
asegura que sea inocuo para su consumo humano, en la tercera se pone a
prueba la crema y finalmente se evalúa la efectividad de la crema reduciendo el
acné vulgar.

• Formulación de la crema antiacné.

• Elaboración de la crema.
Etapa 1

• Puebas microbiológicas NOM-089-SSA1-1994.

Etapa 2

• Prueba de la crema en personas con acné.

Etapa 3

• Evaluación de la efectividad de la crema reduciendo el acné.

Etapa 4

Figura 5. Metodología por etapas de la elaboración de la crema.

antiacné

En el siguiente diagrama se muestra de una forma más detallada los pasos

que se llevaron a cabo para la culminación de este proyecto, se abarca desde la
etapa de pre elaboración, la elaboración y su consiguiente prueba en personas
que tienen acné para evaluar que tan efectiva es esta alternativa combatiendo
esta enfermedad de la piel.
 23

Metodología en la
elaboración de la
crema antiacné

Formulación

Selección y lavado
de materia
Elaboración de las
tinturas
Preparación de
las tinturas

Macerado de 4
semanas
Esterilización Elaboración de la
del material crema
Almacenamiento
de las tinturas
Preparación de
la crema

Ajuste del pH a Pruebas NOM-089-SSA1-1994

3 en la crema microbiológicas

Prueba de la crema
en personas con
acné

Evaluación de la
eficacia de la
crema frente al
acné

Figura 6. Metodología en elaboración y evaluación de la crema antiacné.

mulación
 24

7.1. Formulación

Se realizaron tres formulaciones de la crema antiacné. En las siguientes

tablas se muestran la cantidad y porcentaje de cada una de las fases que
componen a toda crema corporal, con sus respectivos ingredientes en una
producción de 500 gramos.

Tabla 2. Formulación 1 de la crema antiacné.

Componentes Porcentaje Cantidad

Fase acuosa Agua destilada 250 g.

50 %

Aceite de jojoba
15 % 75 g.
Fase oleosa
Aceite de onagra 15% 75 g.

Olivem 1000 4% 20 g.
Emulsionante

Tintura de cola de caballo 5% 25 g.

Principios activos Tintura de sábila 5% 25 g.
Tintura de tomillo 5% 25 g.

1% 5 g.
Conservador Sharomix 705
 25

Tabla 3. Formulación 2 de la crema antiacné

Componentes Porcentaje Cantidad

Fase acuosa Agua destilada 175 g.

35 %

Aceite de jojoba
15 % 75 g.
Fase oleosa
Aceite de onagra 15% 75 g.

Olivem 1000 4% 20 g.
Emulsionante

Tintura de cola de caballo 10 % 50 g.

Principios activos Tintura de sábila 10 % 50 g.

Tintura de tomillo 10 % 50 g.

1% 5 g.
Conservador Sharomix 705

Tabla 4. Formulación 3 de la crema antiacné

Componentes Porcentaje Cantidad

Fase acuosa Agua destilada 175 g.

20 %

Aceite de jojoba
15 % 75 g.
Fase oleosa
Aceite de onagra 15% 75 g.

Olivem 1000 4% 20 g.
Emulsionante

Tintura de cola de caballo 15 % 75 g.

Principios activos Tintura de sábila 15 % 75 g.
Tintura de tomillo 15 % 75 g.

1% 5 g.
Conservador Sharomix 705
 26

7.1. Elaboración

7.1.1. Obtención de las tinturas de cola de caballo, sábila y tomillo

La extracción de los principios activos del Aloe vera, Equisetum arvense y

Thymus, se llevó a cabo preparando tinturas con las hojas de estas plantas.
Primero se seleccionó, desinfectó con hipoclorito de sodio y lavó cuidadosamente
las hojas con agua y jabón, seguidamente se cortó la materia prima en pequeños
trozos de aproximadamente 2 cm.

El siguiente procedimiento se realizó por separado para cada una de las tres
plantas. En un recipiente de vidrio que contenía un litro de alcohol etílico 70°, se
depositaron 250 g de hoja, pesados con una balanza granataria. Se prosiguió
tapando herméticamente y etiquetando cada uno de los tres recipientes, los cuales
se colocaron en un lugar fresco y oscuro durante 5 semanas de macerado. En
este periodo, los recipientes se agitaron diariamente. Finalmente, la mezcla
macerada se filtró con una malla coladora y la materia orgánica que quedó por
encima de la malla se prensó para obtener la mayor cantidad posible de
concentrado con las propiedades de las plantas. Las tinturas se almacenaron a
temperatura ambiente en frascos oscuros con tapa de gotero.

Fuente: Tomás. 2019

Figura 7. Tintura de Aloe vera
.
 27

7.1.2. Elaboración de la crema antiacné de acuerdo a las

formulaciones

Antes de la preparación de la crema, se realizó un proceso de esterilización del

material empleado. Para ello primero se lavaron con detergente líquido y se
secaron los materiales de vidrio y metal ocupados. Posteriormente se esterilizaron
en autoclave que operó a una presión de 15 lb y una temperatura de 121°C,
durante 15 minutos.

Fuente: Lorderan instruments. s.f

Figura 8. Autoclave

El siguiente procedimiento de elaboración de la crema se aplicó para las tres

formulaciones. Se comenzó con la preparación de la fase oleosa, para ello se
agregaron y mezclaron los aceites de jojoba y onagra en un recipiente resistente al
calor, se procedió calentándolos al baño maría a una temperatura de 75ºC, la cual
fue medida por un termómetro de laboratorio.

Para la formación de la fase acuosa, se vertió el agua destilada en un

recipiente de vidrio. Se calentó al baño maría hasta que alcanzó la misma
temperatura que la fase oleosa (75ºC).
 28

Cuando ambas fases alcanzaron los 75ºC, en otro recipiente, se vació el agua
destilada (fase acuosa) sobre los aceites (fase oleosa) y se mezclaron
homogéneamente junto con el emulsionante que favoreció el proceso de
miscibilidad entre el agua y los aceites. La adición de la fase acuosa sobre la
oleosa se realizó lentamente mientras se mezclaba, hasta que se enfrió la crema.

Luego de que la mezcla resultante alcanzó una temperatura de 30ºC, se

añadieron los principios activos (tinturas de sábila, cola de caballo y tomillo), una
vez más se mezcló hasta que se obtuvo una mezcla homogénea.

Posteriormente se midió el potencial de hidrógeno (pH) de la crema, por medio

de un medidor digital de pH. Éste se sumergió por su parte inferior y se movió
realizando movimientos circulares dentro de la crema para tomar la medida de pH.
El valor de pH para esta crema se estableció en un valor de 3. De no haber estado
en ese punto de la escala, se pudieron presentar dos casos para ajustar al valor
deseado: el primero con un pH superior a 3, en donde fue necesario disolver ácido
cítrico en agua destilada, hasta formar una solución saturada. Posteriormente, con
una pipeta Pasteur, se añadió poco a poco unas gotas de la solución a la crema y
se volvió a mezclar, hasta que el pH bajó al nivel indicado. En el caso contrario en
el que el pH de la crema hubiera sido menor a 3, muy ácida, se disolvería
bicarbonato de sodio en agua destilada hasta formar una solución saturada y se
volvió a repetir el mismo procedimiento cuando se hizo la corrección de pH con
ácido cítrico.

Fuente: Altronics. 2016

Figura 9. Medidor digital de pH

Finalmente, se almacenó la crema antiacné en un recipiente plástico con tapa.

De esta manera la elaboración de cada una de las formulaciones quedaron listas
 29

para someterse a las pruebas microbiológicas de la siguiente etapa del proyecto.

7.2. Pruebas microbiológicas

En esta etapa, la crema se expuso a una serie de procedimientos

microbiológicos apegados a la NOM-089-SSA1-1994, con el fin de asegurarse de
que la crema estuviese libre de algún microorganismo patógeno, de este modo se
pudo garantizar un consumo humano seguro.

Fuente: NYCE Laboratorios. s.f.-b

Figura 10. Pruebas microbiológicas NOM-089-SSA1-1994

.
Se incubaron muestras de la crema en distintos medios de cultivo,
posteriormente se observó si en estos cultivos se habían desarrollado colonias de
microorganismos patógenos como bacterias y hongos.

Se inició desinfectando la superficie del recipiente que contenía la crema con

un algodón estéril impregnado de una solución de etanol al 70% (v/v) y ácido
clorhídrico 1% (v/v). Luego se secó con una gasa estéril la superficie.

Posteriormente, se abrió el recipiente y se mezcló la crema con una espátula

estéril, se midió con balanza analítica 1 gramo de crema, la cual que se adicionó a
dos frascos: uno que contenía 90 ml de CLM (caldo Letthen modificado) y otro que
 30

contenía 90 ml de CDS (caldo dextrosa Sabouraud). A cada frasco se le vertieron

0.5 ml de Tween 80 estéril, se prosiguió mezclando homogéneamente la mezcla
en cada uno de los frascos que contenían la muestra. Se continuó poniendo a
baño maría los dos frascos a una temperatura de 45°C durante 12 minutos. Se
etiquetó cada frasco y se agregaron 90 ml de CLM y 90 ml de CDS,
respectivamente, y al final se agitó la mezcla.

Se inocularon los medios de cultivo a una temperatura de 30°C durante 7

días. Durante este periodo no se observó crecimiento microbiano, finalmente se
reportaron menos de 10 UFC/ml (Unidad formadora de colonias/ml) de muestra.

7.3. Tratamiento tópico con la crema

Se puso a prueba cada formulación de la crema en un grupo de 15

personas, de ambos sexos, con una edad de entre 12 a 25 años de edad y que
presentaban acné leve o moderado. El tratamiento tuvo una duración de 10
semanas.

Se les indicó a las personas que se aplicaran la crema dos veces al día,
preferentemente en la mañana y en la noche, después de lavar su cara con agua y
jabón. Así mismo se les recomendó, de forma opcional, que exfoliaran su cara 2
veces a la semana con el fin de potenciar aún más la reducción del acné.
 31

7.4. Evaluación de la crema antiacné

En la última etapa del presente proyecto, se dio seguimiento y observación

a aquellos casos de personas que llevaron a cabo el tratamiento antiacné con esta
alternativa natural. Se mantuvo en contacto con aquellas personas tuvieron algún
efecto secundario o inquietud durante el tratamiento.

Cada semana, se hizo una reunión con los participantes en este

tratamiento, para registrar y observar los efectos de la crema frente al acné por
medio de la toma de fotografías digitales en el rostro de forma frontal y de perfil.
Las fotografías se realizaron con una cámara digital a un metro de distancia de los
individuos, con fondo blanco y dentro de una sala con iluminación artificial.

En la décima semana del tratamiento, se hizo una última reunión para el

registro fotográfico, así también, a las personas que concluyeron el tratamiento, se
les proporcionó un cuestionario que contestaron de acuerdo a su experiencia con
la aplicación de la crema. Fue así, que en referencia a la evidencia fotográfica
como de la valoración de los participantes plasmada un cuestionario (Anexo 1), se
evaluó la efectividad de la crema para reducir el acné.

7.5. Diseño de experimentos

El diseño de experimentos se realizó con el software estadístico de

STATGRAPHICS Centurion XVI.I, se utilizó la herramienta de Asistente de Diseño
de experimentos.

Se tomaron como variables independientes a la concentración de cada uno de

los principios activos y la concentración del agua dentro de la formulación de la
crema antiacné. No se incluyó a la fase oleosa (aceites), puesto que se debió
mantener constante su concentración para que el producto final obtuviera una
consistencia adecuada, a diferencia de la fase de los principios activos (tinturas) y
concentración de agua que tienen una viscosidad similar (1.2 y 1 cP,
 32

respectivamente) (CENAM, s. f.)., y que para efectos de la esta investigación se

pretendió conocer el efecto que tienen los extractos de las plantas empleadas
(principios activos), por lo que la variación en la concentración de esas dos fases,
como factores, no afectó en la calidad final de la crema y de este modo se cumplió
con el objetivo principal del proyecto que estuvo enfocado al efecto que tienen las
propiedades de las plantes de Aloe vera, Equisetum arvense y Thymus.

De esta manera se tomaron tres factores (concentraciones de Aloe vera,

Equisetum Arvense y Thymus), los cuales cuentan con tres niveles cada uno con
respecto a su nivel de concentración (bajo, medio y alto), con sus respectivas tres
replicas.

Tabla 5. Diseño de experimentos

Factores Niveles Número de réplicas

Concentración de Aloe
Bajo, medio y alto 3
vera
Concentración de
Bajo, medio y alto 3
Equisetum Arvense
Concentración de
Bajo, medio y alto 3
Thymus

Como variable dependiente se tomó una escala de evaluación clínica dada en

cuatro niveles de acuerdo a los efectos que tuvo la crema frente al acné:

Tabla 6. Variables dependientes

Nivel Criterio
0 Empeoró el acné
1 Sin cambios en el acné
2 Se redujo el acné
3 Se remedió por completo el acné
 33

En el Anexo 2 se muestran los pasos de la herramienta asistente de diseño de

experimentos de STATGRAPHICS que se llevaron a cabo para este proyecto

Para el análisis de resultados, se realizó una moda de los niveles

experimentados por los participantes en este tratamiento, con el fin de conocer
cuál fue el efecto que se dio con mayor frecuencia. Así también se determinó su
media y desviación estándar para determinar hacia que valores tendía
mayormente la variable respuesta. Lo anterior se hizo para cada formulación de la
crema.

Se hizo un análisis de varianza (ANOVA) con respecto a tres tratamientos

(tres formulaciones), para conocer si existían diferencias significativas en sus
efectos frente al acné.
 34

8. Cronograma

Tabla 7. Cronograma de actividades

Fecha Septiembre Octubre Noviembre Diciembre Enero Febrero Marzo Abril

Semana Semana Semana Semana Semana Semana Semana Semana

Actividades 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4

Revisión
bibliográfica

Elaboración y
obtención de las
tinturas de las
plantas

Elaboración de la
crema y ajuste en
pH

Pruebas
microbiológicas

Envasado y
etiquetado

Tratamiento con la
crema en
personas con acné

Evaluación y
análisis de
resultados

Escrito de informe
final

Fuente: Elaboración propia

 35

9. Presupuesto

Tabla 8. Presupuesto en la elaboración de la crema.

Coste en
Tipo de recurso Descripción pesos
mexicanos

El proyecto lo estaré llevando a cabo

Recursos humanos 0$
individualmente.

250 g Hoja de cola de caballo $ 50

250 g Hoja de sábila $ 60

250 g Hoja de tomillo $ 40

3 L Alcohol etílico 70° $ 300

3 Frasco con cierre hermético de 1.5 L $ 450

1 Colador $ 60

3 Frascos de vidrio color ámbar $ 45

1 L Agua destilada $ 30

125 ml Aceite de jojoba $ 200

100 ml Aceite de onagra $ 400

Recursos materiales
250 g Olivem 1000 $ 500

30 ml Sharomix 705 $ 100

500 ml Ácido cítrico $ 20

500 mg Bicarbonato de sodio $ 50

Medido digital de pH $ 500

Reactivos y material de laboratorio

$ 1000

5 envases de plástico con tapa 125 ml $ 25

5 etiquetas $ 100
 36

Computadora personal $5000

Otros gastos Servicio de transporte $150

Impresiones $ 50

Coste total en pesos mexicanos $ 9130

10. Resultados esperados

Se espera que con el tratamiento de está crema se disminuya el acné,

principalmente. Se tiene la expectativa de que se induzca una desinflamación y
reparación del tejido dañado, acompañado de una disminución de la cantidad de
granos por la inhibición de la actividad bacteriana. Así también se prevé que esta
crema no cause efectos colaterales durante su consumo.

11. Conclusiones

En el caso de que la aplicación de la crema logre disminuir el acné leve o

moderado, se deberá a qué los ingredientes de la formulación se correlacionan de
manera adecuada junto con los principios activos que cuentan con la propiedad
regeneradora de tejido celular proveniente de la tintura del Aloe vera,
desinflamatoria por parte de la tintura de Equisetum arvense y el agente inhibitorio
de la actividad bacteriana de la Propionibacterium acnés que posee tanto la tintura
de Thymus como el pH que tiene la crema al ser ligeramente más ácida que la piel
humana.
La ausencia de efectos secundarios en las personas que lleven a cabo el
tratamiento se deberá a qué la crema se compone únicamente por componentes de
origen natural.
 37

12. Anexos

Anexo 1
Cuestionario:
Instrucción. Responda y/o Seleccione la opción que más se adecúe a su experiencia
con esta crema.

1.- ¿Cuál fue el efecto que tuvo al terminar este tratamiento?

A) Empeoró el acné B) No hubo cambios C) Se redujo el acné D)

Se remedió completamente el acné

2.- En un nivel del 1 al 10, considerando al nivel 10 como el mejor, ¿cómo calificaría
este tratamiento contra el acné?

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

3.- ¿Se disminuyó la cantidad de granos y espinillas?

A) Sí B) No

4.- ¿Notó desinflamación en el tejido afectado por el acné?

A) Sí B) No

5.- ¿Tuvo algún efecto secundario durante el tratamiento? En caso afirmativo

especifique o descríbalo.

A) Sí B) No

Describa el efecto secundario:

 38

6.- ¿Qué tipo de tratamientos ha probado para remediar el acné? Puede seleccionar
más de una opción.

A) Químicos/Sintéticos B) Naturales C) Jabones, geles, pomadas, etc.

D) Ninguno

7.- En el caso de que ya haya usado un producto antiacné, ¿Considera a esta crema
como el mejor tratamiento que ha probado?

A) Sí B) No C) Me parece igual de efectiva que otros productos

8.- Seleccione su género:

A) Femenino B) Masculino

9.- ¿Cuál es su edad?

 39

Anexo 2
Diseño de experimentos en STATGRAPHICS Centurion XVI.I

Paso 1: Definir las variables respuesta a ser medidas

Nombre Unidades Analizar Objetivo Destino Impacto Sensibilidad Bajo Alto
Efecto de la Nivel Media Maximizar 3.0 Alto 0.0 4.0
crema frente
al acné

Paso 2: Definir los factores experimentales que van a variar

Nombre Unidades Tipo Papel Bajo Alto Niveles
A:Concentracion % Continuo Controlable 5.0 15.0
de cada principio
B:Concentracion % Continuo Controlable 20.0 50.0
de agua

Paso 3: Seleccione el diseño experimental

Tipo of Diseño Puntos Punto Central Diseño es Número de Total
Centrales
Factores Tipo Por Bloque Colocación Aleatorizado Replicacione Ejecuciones
s
Proceso Factorial 0 Aleatorio Sí 2 27
multinivel

Total Error
Bloques D.F.
3 19
Número de muestras por ejecución: 1

Paso 4: Indicar el modelo inicial a ajustar a los resultados del experimento

Factores Modelo Coeficientes Efectos excluidos
Proceso cuadrático 8
 40

13. Referencias bibliográficas

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