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MORFOLOGIA BACTERIANA
ULTRAESTRUCTURA BACTERIANA
Las bacterias son seres unicelulares procariotas, es decir que no poseen un material genético
envuelto por una membrana nuclear, que poseen elementos estructurales obligados y
elementos facultativos. Son elementos obligados aquellos de los que no puede prescindir para
vivir (pared celular, membrana citoplasmática, citoplasma, ribosomas y genoma) y elementos
facultativos, los cuales están presentes sólo en algunas especies bacterianas y aún en las que los
poseen, si desaparecen las bacterias pueden seguir viviendo, aunque pierdan ciertas capacidades
fisiológicas y patogénicas (flagelos, fimbrias, esporas, cápsula).
De adentro hacia fuera las bacterias poseen las siguientes estructuras: citoplasma o citosol,
membrana citoplasmática, pared (excepto los micoplasmas) y cápsula (sólo algunas especies)
Las bacterias pueden presentar diversos tamaños y formas, pero existen tres formas básicas:
esféricas (cocos), bastoncitos o cilíndricas (bacilos) y helicoidales (espirilos).
Los cocos libres aparecen como células esféricas aisladas, pero luego de la división celular,
pueden originar distintos agrupamientos. Según el plano de división se pueden distinguir los
cocos en pares (diplococos), en cadenas, en tétradas y/o en racimos.
Los bacilos pueden ser muy cortos (cocobacilos) o tener una longitud de 2 a 10 veces su
diámetro. Sus extremos pueden ser redondeados, cuadrados o agudizados. La mayor parte de las
bacterias tienen una longitud media de 2 a 5 µm.
ENVOLTURAS CELULARES
LA MEMBRANA CITOPLASMÁTICA
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Funciones de la membrana citoplasmática:
o Actúa como una barrera física entre el citoplasma y el medio ambiente y ejerce un
control selectivo del movimiento de diversas sustancias desde y hacia la célula.
o Es el lugar donde se ubican las proteínas nacientes destinadas a la excreción (toxinas y
otros factores de virulencia).
o Es además el sitio donde se ubican los citocromos y donde se realiza el metabolismo
oxidativo.
o En la superficie externa de la membrana citoplasmática existen enzimas que participan
de la síntesis de la pared bacteriana y se denominan Proteínas Ligadoras de Penicilina
(PLP o PBP, en inglés) a los cuales se unen algunos antibióticos inhibiéndolas e
impidiendo la síntesis de la pared.
o En la superficie interna encontramos proteínas involucradeas en la transformación de la
energía.
o Existen proteínas que atraviesan la membrana de lado a lado implicadas en el transporte
activo de diversas sustancias.
PARED CELULAR
Por fuera de la membrana citoplasmática se encuentra una pared celular rígida que está presente
en todas las bacterias, con excepción de los micoplasmas. La pared da forma a la célula, la
protege de las influencias ambientales adversas e impide la entrada de cierto tipo de moléculas.
Consiste en una cadena lineal de dos azúcares alternados, N-acetilglucosamina (NAG) y ácido
N-acetilmurámico (NAM), con enlaces (1-4). A cada residuo de NAM se halla ligado un
tetrapéptido. Estos tetrapéptidos intervienen en la unión de las cadenas adyacentes de mureína
mediante un puente peptídico intermediario. Estas fibras se entrelazan entre sí dando como
resultado una estructura muy rígida y estable (Figura 2 y 3).
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Fig. 4: M: Ac. N-acetimurámico. G: N-acetilglucosamina. Estructura del peptidoglicano en
bacterias grampositivas.
Existen dos tipos de pared bacteriana lo que permitió dividir a las bacterias en dos grupos en
base a la coloración de Gram: aquellas capaces de retener el colorante cristal violeta luego de la
decoloración con alcohol acetona (bacterias grampositivas) y aquellas que pierden el
decolorante por decoloración (gramnegativas).
Grampositivas Gramnegativas
L-Alanina L-Alanina
D-glutámico D-glutámico
L-Lisina Meso diaminopimélico
D-Alanina D-Alanina
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Envolturas celulares de las bacterias grampositivas
Las bacterias grampositivas poseen una gruesa pared celular que recubre a la membrana
citoplasmática. Está formada por una capa ancha de peptidoglicano y ácidos teicoicos, que son
los dos componentes fundamentales. También están presentes otros carbohidratos y proteínas
que varían de acuerdo a la especie (Figura 4).
El principal componente es el peptidoglicano o capa de mureína que es muy gruesa. El segundo
componente de importancia en la pared celular de las bacterias grampositivas son los ácidos
teicoicos que constituyen los mayores determinantes antigénicos que definen la individualidad
inmunológica de estas bacterias, actúan como receptores para bacteriófagos e inhiben la
fagocitosis.
Los ácidos lipoteicoicos no están unidos a la pared celular, sino que están enlazados
covalentemente a los glicolípidos de la membrana citoplasmática.
Otras moléculas presentes en la pared de las bacterias grampositivas son los carbohidratos
como los carbohidratos C de Streptococcus que definen la especificidad de grupos o proteínas
como la proteína M del estreptococo del grupo A o la proteína A del Staphylococcus aureus.
Ácidos teicoicos
Carbohidratos
Capa de mureína
Membrana
citoplasmática
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Envolturas celulares de las bacterias gramnegativas
Lipopolisacárido
Porina
Membrana externa
Proteína de
membrana externa
Periplasma
Mureína
Membrana celular
Membrana externa:
Está formada por dos semicapas, la interior, compuesta por fosfolípidos y la exterior compuesta
por Lipopolisacárido (LPS) que tiene actividad de endotoxina.
Los fosfolípidos difieren cualitativamente de los de la membrana citoplasmática. Contiene el
lipopolisacárido (LPS) y proteínas únicas que difieren de las de la membrana plasmática.
El LPS consta de tres regiones:
o Región I: Antígeno somático O; región polisacárida variable y antigénica. Es altamente
antigénico. Hay muchas variedades de antígeno O y cada uno define una especie o
subespecie bacteriana.
o Región II: Polisacárido del centro.
o Región III: Lípido A; Lípido complejo y tóxico. Posee propiedades endotóxicas:
pirogenicidad, letalidad, necrosis de tejidos, activación del complemento, etc.
La especificidad serológica reside en la región I y la toxicidad en la región III.
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Espacio periplásmico
Se encuentra entre la membrana citoplasmática y la membrana externa. En este espacio
encontramos: una delgada capa de peptidoglicano, diversas proteínas, y lipoproteínas de unión.
La cantidad de mureína es mucho menor y forma una delgada pero resistente capa que protege a
la bacteria. Además, carece de ácidos teicoicos. Solo unas pocas cadenas de mureína están
unidas a otras cadenas paralelas por medio de tetrapéptidos y son suficientes como para formar
una malla de mureína. El resto de las cadenas permanecen sueltas y sumergidas en un fluido que
contiene agua y moléculas libres, para formar un gel periplásmico que aparece a ambos lados de
la pared celular. El espacio periplásmico no es un espacio lleno de fluido, sino que es un
verdadero gel que define el periplasma. Las lipoproteínas de unión se hallan unidas
covalentemente en un extremo al peptidoglicano, e insertan en forma no covalente su extremo
lipídico en la membrana externa. Sirven para anclar la membrana externa a la célula.
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En contacto con los ácidos micólicos se halla una capa de glicolípidos específicos de especie,
formando una superficie antigénica con factores de virulencia que participan en la interacción
con el huésped.
Esta pared permite que estos microorganismos resistan a la acción de muchas sustancias
químicas, así como al sistema inmune del huésped. Pero también debido a esta pared estos
microorganismos crecen con mucha lentitud, quizás por la menor tasa de captación de
nutrientes.
Glicolípidos
específicos de especie
Acidos micólicos
Arabinogalactano
Peptidoglicano
Fosfatidilinositol
manósidos
Membrana citoplasmática
Lipoarabinomananos
Fig. 10.: Esquema de la ultraestructura de la pared celular de las bacterias ácido-alcohol resistentes
Estas bacterias necesitan de una coloración especial para ser observadas al microscopio
(coloración de Ziehl-Neelsen) y debido a que los ácidos grasos retienen el colorante cuando
son decoloradas con alcohol y ácido, se denominan bacterias ácido alcohol resistentes.
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BIOSÍNTESIS DE PÉPTIDO GLICANO
La síntesis del peptidoglicano consta de varias fases, que brevemente consisten en:
- Síntesis de precursores en el citoplasma
- Ensamblaje parcial en membrana
- Transporte a la cara externa externa de la membrana
- Ensamblaje final en el exterior, mediante reacciones que no precisan energía
-
Pueden diferenciarse cuatro etapas:
1. Síntesis de precursores solubles en el citoplasma.
2. Estos precursores son transferidos a un transportador lipídico situado en la membrana
citoplásmica (un poliisoprenol fosfatado llamado undecaprenil-fosfato), donde se forman las
unidades disacarídicas con el pentapéptido.
3. Las unidades disacarídicas se polimerizan en cadenas lineales fuera de la membrana, pero
aún unidas al undecaprenil-fosfato de la membrana.
4. Unión del polímero lineal así formado al peptidoglucano preexistente en la pared celular,
por entrecruzamiento de (al menos) parte de sus péptidos respectivos.
A estas etapas hay que añadir una fase adicional de regeneración del transportador lipídico, una
vez que ha cumplido su misión, para que pueda ser operativo en un nuevo ciclo de síntesis.
Fase 1:. Los monosacáridos que luego van a constituir la unidad disacarídica repetitiva del
esqueleto del peptidoglucano (NAM y NAG) se activan al unirse a uridín difosfato (UDP).
(En general, los monosacáridos que han de incorporarse a polímeros de pared celular bacteriana
se activan mediante su unión con nucleósidos-fosfato.)
Por lo tanto, en esta fase se sintetizan por separado:
NAG-UDP
NAM-UDP
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Luego se va produciendo la adición secuencial y ordenada de los distintos aminoácidos al
NAM (en reacciones que requieren energía e iones Mn ++):
1. L-ala
2. D-glu
3. m-DAP (u otro diaminoácido; p. ej. L-lys en Staphylococcus aureus)
4. D-ala-D-ala
Observar que no se produce un tetrapéptido, sino un pentapétido. El último paso de adición de
aminoácidos es la unión del dipéptido D-alanil-D-alanina, que se ha sintetizado en dos fases:
una racemasa convierte la L-ala a D-ala;
creación de enlace peptídico entre dos D-ala.
Fase 4: El polímero surgido de la fase anterior es una cadena lineal de PG sin entrecruzar, y
unido aún al transportador lipídico de membrana. Ahora este polímero naciente (con sus
pentapéptidos) reacciona, por transpeptidación, con un PG aceptor preexistente. En esta
reacción se ven implicados el grupo C=O de la D-ala (4) del PG naciente y el grupo -NH 2 libre
del diaminoácido (3) del PG aceptor (o del último aminoácido del puente peptídico).
Esto es lo mismo que decir que el enlace peptídico entre D-ala (4) y D-ala (5) del PG naciente
se ve sustituido por otro enlace peptídico, entre dicha D-ala (4) y el diaminoácido del PG
naciente.
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Fig. 12. Transpeptidación
La energía para esta reacción la suministra la hidrólisis concomitante del enlace peptídico entre
las dos D-ala terminales. Es decir, en cada reacción de transpeptidación se libera una D-ala,
correspondiente a la que ocupaba la posición (5).
Ya dijimos en el capítulo anterior que no todos los tetrapéptidos participan en
entrecruzamientos. Las D-ala terminales (en 5) de los péptidos no implicados en tales
entrecruzamientos son eliminadas por una enzima llamada D-D-carboxipeptidasa. Esta enzima
explica no sólo que en el PG maduro existan tetrapéptidos (y no los pentapéptidos originales),
sino también la existencia de tripéptidos.
Muchas bacterias controlan el grado de entrecruzamiento de su PG maduro. Incluso algunas
pueden eliminar totalmente muchos de los péptidos originalmente unidos al NAM, mediante
enzimas conocidas genéricamente con el nombre de autolisinas.
Estos antibióticos tienen un efecto bactericida sobre bacterias en crecimiento. Ello se debe a
que, al inhibir determinados pasos del ciclo de síntesis y ensamblaje del PG, provocan la
acumulación de precursores de dicho PG, lo que a su vez desencadena la activación de las
autolisinas de la bacteria, que degradan el PG y que finalmente provoca la lisis celular (en
medios hipotónicos), por entrada masiva de agua a la célula.
1. Fosfomicina: actúa inhibiendo la formación del 3-O-D-lactil-éter de la NAG (o sea, del
NAM). Parece ser que la base molecular estriba en la semejanza estructural entre el este
antibiótico y el PEP (es decir, la fosfomicina es análogo estructural del PEP, lo que lleva a
la inactivación de la enzima correspondiente a esta reacción).
2. Cicloserina: Se comporta como análogo estructural de la D-alanina, por lo que inhibe la
actuación de la racemasa que convierte la L-ala a D-ala, así como de la reacción de unión de
dos D-ala.
3. Tunicamicina: inhibe la traslocasa que cede el NAM unido hasta entonces al UDP y lo
pasa al bactoprenol (fase 2ª).
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4. Vancomicina y ristocetina: inhiben la segunda transglucosidación (fase 3ª), es decir, la
unión de diversas unidades disacarídicas.
Fig 13. Mecanismo de acción de los antibióticos que inhibhen la síntesis de la pared bacteriana.
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CITOPLASMA
GENOMA BACTERIANO
RIBOSOMAS
Los ribosomas bacterianos existen libres en el citoplasma y rara vez están unidos a membranas.
Poseen un tamaño de 70s y poseen una estructura diferente a la de los ribosomas de las células
eucariotas (80s) y por ello han podido desarrollarse antimicrobianos que actúen sobre los
ribosomas bacterianos y no sobre los ribosomas del hombre y los animales. Están formados por
dos subunidades: 50s y 30s.
GRANULOS CITOPLASMATICOS
El citosol además posee gránulos citoplasmáticos, de diferente naturaleza que casi siempre
tienen función de almacenamiento, y pueden estar formados por polifosfatos, glucógeno o
ácido polibetahidroxibutírico (PHB). Estos últimos se consideran depósitos de energía y
carbono reutilizable. Los gránulos de glucógeno constituyen reservas de carbohidratos. Los
gránulos de polifosfatos se conocen también como gránulos metacromáticos.
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CÁPSULA Y MATRICES EXOPOLISACÁRIDAS
Por fuera de la pared, algunas bacterias presentan una capa de polisacáridos o de proteínas que
puede ser gruesa o delgada, rígida o flexible, que es una cubierta continua formada por un gel
hidrofílico. Cuando la estructura es firme y tiene bordes definidos, se habla de cápsula. Esta
está organizada en una matriz muy compacta que excluye las partículas como las de tinta china.
Cuando la estructura es amorfa y de bordes poco
definidos e irregulares se habla de glicocálix o
matriz exopolisacárida; en este caso no
excluiría a las partículas y sería más difícil de
ver. Aunque la mayoría de las cápsulas son
polisacáridas, existen algunas que son
polipeptídicas como las de Bacillus anthracis.
La cápsula es un determinante de patogenicidad
para la bacteria ya que le da resistencia a la
fagocitosis y a la lisis intracelular y le permite la
adherencia a las mucosas del huésped. Tal es su
importancia en la virulencia que se ha visto que
Fig 16.: Tinción con tinta china mostrando la bacterias que pierden su cápsula se vuelven
cápsula (incolora) que rodea a las bacterias avirulentas o no patógenas. La cápsula es un
importante determinante antigénico que sirve en
algunas bacterias para preparar vacunas (Haemophilus influenzae y Neisseria meningitidis)
FLAGELOS
Muchas bacterias son móviles y esta capacidad para desplazarse independientemente, en general
es debida a la presencia de organelas especiales para la motilidad: los flagelos. Son largos
filamentos proteicos que pueden medir varias veces el largo de los bacilos. Existen bacterias que
carecen de flagelos; los cocos por ejemplo, no son flagelados, y alrededor de la mitad de los
bacilos tampoco.
Las bacterias pueden presentar distinto número de flagelos que pueden distribuirse de diferente
manera. Algunas poseen un solo flagelo polar (Monotricas), otras que poseen varios flagelos
en un polo (Lofotricas) o en ambos polos (Anfitricas) y otras poseen flagelos alrededor de toda
la célula (Peritricas)(Fig. 8). Algunas bacterias presentan flagelos sólo cuando crecen en
medios líquidos mientras que carecen de ellos si crecen en medios sólidos.
Los flagelos bacterianos están compuestos por tres
partes: el filamento (externo con respecto a la célula),
el gancho (en la superficie celular) y el cuerpo basal
(anclado en la membrana citoplasmática).
Químicamente el filamento está constituido por
subunidades de una proteína denominada flagelina. El
gancho está constituido por una única proteína. El
cuerpo basal está formado por anillos que rodean al
filamento. El anillo M está embebido en la membrana
citoplasmática, permitiendo la rotación del flagelo y los
Fig. 17: Microscopía electrónica de anillos exteriores coinciden con la capa de
una bacteria con flagelos peritricos. peptidoglicano y la membrana externa (en los
gamnegativos). El cuerpo basal está constituido por 10
a 13c proteínas. La estructura de los flagelos en grampositivos es similar, excepto que el cuerpo
basal contiene solo dos anillos, uno embebido en la membrana citoplasmática y otro asociado al
peptidoglicano. (Fig. 15)
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Fig. 18. Estructura del flagelo en gramnegativas (a) y en grampositivas (b).
Los flagelos bacterianos son portadores del antígeno H, el cual es un determinante antigénico
de importancia en la identificación de las bacterias y de aplicación en pruebas diagnósticas.
El flagelo es un importante determinante de patogenicidad pues permite a la bacteria avanzar a
través del mucus y además puede actuar como elemento de adherencia a la célula del huésped.
FIMBRIAS y PILIS
PILI SEXUALES
Los pili (plural de pilus) sexuales son microfibrillas huecas que participan en el intercambio de
material genético entre bacterias mediante un proceso llamado conjugación y pueden actuar
como receptores para bacteriófagos. Las bacterias que los poseen se denominan masculinas
(F+) o donantes y las que carecen de ellos se denominan femeninas (F -) o aceptoras (Figura 17).
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PS
F-
F+
Fig. 20: Bacteria donadora (F+) en proceso de conjugación con una bacteria
aceptora (F-) a través de un pilus sexual (PS)
ESPORAS BACTERIANAS
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Fig 21: Proceso de esporulación y germinación de una bacteria esporulada.
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Membrana
externa
BIBLIOGRAFIA
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