Practica 3 y 4. Toma de muestras para estudios microbiológicos.

PROPOSITOS:

 Aislamiento del agente causal.

 Identificación del microorganismo.
 Susceptibilidad del microorganismo a antimicrobianos.

CONDICIONES PARA REALIZAR UN ANALISIS:

 Oportuna.
 Antes de usar antimicrobianos.
 Que la muestra sea representativa del proceso infeccioso.
 El material a usar debe ser estéril.
 Suficiente cantidad de la muestra.
 Usar un medio de transporte adecuado.
 Envío rápido al laboratorio.

SOLICITUD DEL EXAMEN MICROBIOLÓGICO

Debe tener toda la información importante a la hora de solicitar un examen

microbiológico.

1. Numero de historia.
2. Servicio
3. Nombre del Paciente
4. Edad
5. Sexo
6. Teléfono
7. Ocupación: Importante, porque hay infecciones asociadas a la esto.
8. Médico tratante: Colocar nombre y especialidad.
9. Dirección actual del paciente.
10. Diagnostico presuntivo: Ejemplo: Neumonía, sepsis, posible
tuberculosis, posible bacteriemia, etc.
11. Tratamiento: Administrado antes y después de la toma de muestras.
12. Antecedentes epidemiológicos de importancia.
13. Datos clínicos: Breves
14. Tipo de muestra.
15. Examen solicitado: Importante saber que examen se debe pedir para
cada tipo de muestra.

RECOLECCION DE MUESTRAS

o Por hisopado: Utilizamos los hisopos.

o Por punción aspiración: Se utilizan
jeringas.

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o Por aspiración con sondas.

o En envases: recolector de orina, recolector de esputo, frascos de
hemocultivo, recolector de heces y otros.

Frascos para hemocultivos

(aerobios y anaerobios)

LESIONES CERRADAS.

Son aquellas que no tienen vía de salida salida, por ejemplo una celulitis o
cualquier otra que esté cerrada, brillante y roja.

Muestras cerradas obtenidas por punción.

 Líquidos naturalmente estériles (LCR, pericárdico, pleural, etc)

 Erisipela
 Celulitis no abscedada
 Secreción de:
 Abscesos cerrados
 Ganglios linfáticos fluctuantes (sobre todo los que
salen a nivel de la axila, periné, glúteos)
 Nódulos fluctuantes: son masitas cerradas muy
superficiales

Para extraer las secreciones de estos sitios cerrados, se realiza por punción.
Para ello, se debe preparar esa zona.

Si en paciente no es alérgico al yodo, se coloca solución yodada durante un

minuto y posteriormente se aplica alcohol al 70% también durante un minuto.

Pero si el paciente es alérgico al yodo, se procede a limpiar de dos a tres veces

solo con alcohol al 70% la zona que vamos a punzar.

Si es una celulitis o una erisipela con una zona enrojecida, delimitada, que no
tiene orificio de salida, es preferible colocarle a la jeringa de 0.5 a 1cc de
solución salina fisiológica estéril, lo colocamos, esperamos un momento y
extraemos, esto se hace porque el material puede estar muy espeso y es

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necesario diluirlo un poco para poder extraer la muestra, no habrá alteración

porque la solución salina esta estéril.

Si es una muestra de líquido articular, recordemos que ese líquido tiende a

coagular por lo cual se deben utilizar jeringas heparinizadas. Solo este líquido
necesita heparina, los demás NO.

Muestras para lesiones abiertas

Si es una lesión abierta, puede ser una lesión por una infección aguda o por
una infección crónica, por ejemplo una herida quirúrgica, una herida traumatica,
una mordedura o una quemadura, ejemplo de unas crónicas, una ulcera
decúbito por presión, una ulcera vascular e infección de pie diabético, en estos
casos cuando la lesión esta abierta

* debemos eliminar todos los medicamentos tópicos,

* Increiblemente debemos eliminar todo el tejido muerto, y ustedes diran ahí

esta la sustancia pues no, no esta la sustancia,

*lavar bien con solución salina fisiológica, no se les ocurra usar yodo o alcohol
al 70% porque van a terminar de matar al paciente

* tomar muestra de las tejidos que se ven afectados

Ustedes diran si le vamos a quitar todo ese tejido muerto y ese tejido afectado
de donde vamos a agarrar ese microorganismo, cuando hay una herida abierta
y uno limpia y saca todo ese pus y ese material muerto el tiende a segregar un
liquido que uno lo llama la asaguaza el cual es un liquido que no es sangre es
un liquido transparente ceroso y esa es la sustancia créanlo que esa es la
sustancia, ustedes no quieren entender que en el pus no esta, (oye me dijeron
que reportaste leucocitos polimorfonuclerares, obvio si me mandaste puro pus)
no nos interesa el pus, no se preocupen y piensen que al quitar el pus se van a
llevar lo que necesiten NO!! Crean que cuando saquen ese pus ese tejido
muerto ustedes verán como drena ese liquido ceroso, ahí esta lo que necesito.

Tomas de muestras para infeciones agudas

Si es una infección aguda que si una mordedura una herida o quemadura

si la vamos a tomar con un hisopo dependiendo de la lesión bueno frotamos

el hisopo en un área de 1 cm evitar el sangrado xq con sangre no hacemos
nada

Si a herida es seca pero esta fea es decir esta seca no impregna ni sangre,
bueno tomamos el hisopo lo majamos con solución fisiológica y lo volvemos a
pasar en esa zona seca y júrenlo que ahí va a ir la infección. Ahora si la
cuestión es mas grande mas profunda y vemos que no cura bueno tomamos

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biopsis de donde del fondo de la lesión por que? Porque entre mas en el
fondo este entonces menos riesgo que este contaminado con los
microorganismos de la piel que ocurre bastante

Ahora si la infección aguda esta supurando entonces aspiramos con una

jeringa de la parte mas profunda por lo mismo para minimizar los organismos
de la piel porque donde ustedes van a tomar la muestra no tienen un mechero
al lado en cambio nosotros si trabajamos con un mechero al lado y ustedes no,
entonces para evitar contaminación después de la limpieza pues tomamos de
la zona mas profunda

Ok ahora si es una quemadura y eso que es infección aguda tienen su

detallito

Si la vamos a tomar con hisopo eso depende de lo jugosa o no jugosa que

esta la herida, pues igual tomamos el hisopo y lo tomamos por 1cm pero si esta
seca pues lo mojamos con solución salina y lo pasamos por 1cm,

Hay momentos donde hay que hacer biopsia de la zona, hay algo novedosa
ahorita la biopsia la podeos tomar con el punch o incisional ya la vamos a
ver. Esto es con punch, llega al sitio y arranca un pedacito y deja las capas
intactas en cambio el incisional es como rebanar un pedazo de carne
entonces podemos tomarla de ambas maneras con todo el material obviamente
esteril.

Infecciones crónica toma de muestra

Ok ahora pasamos a las crónicas: a las ulceras de decúbito, pie de diabético, si

es una ulcera de decubito o por presión o es una ulceras vasculares

*Ulceras vasculares que es cuando hay insuficiencia de irrigación bueno

podemos hacer aspiración percutánea cerca cerca de la zona que esta
afectada no vamos a punzar el sitio que esta afectado sino un poquito antes no
directamente en la zona sino un poco antes porque recuerden que es una
lesión decubto eso esta abierto vamos a ir desde piel sana hasta el sitio que
nos interesa porque recuerden que como eso esta abierto esta super
contaminado, obvio limpiamos la zona muerta la piel muerta, punzamos y
aspiramos manteniendo la jeringa 45 grados de inclinación.

Y en infecciones no supurada inyectar solución fisiológica es decir humedecer

el área porque de repente esta muy seca y no va a fluir

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Podemos hacer biopsia del tejido que esta afectado e incluso podemos tomar
muestra con hisopos del área donde se vea subjetiva la lesión, ya que todo
esta bien, pero usted debe ver cual zona esta tomando una coloración que no
es la adecuada que no lo vemos al rojo vivo que este supurando

* pie de diabético no se recomienda hisopo, solo por biopsia y por aspiración,

biopsia desde el fondo de la lesión para evitar la contaminación y para pescar

las bacterias anaeróbicas, un pie de diabético es la casa favorita de una
bacteria anaeróbica y una anaeróbica estricto entonces el anaeróbico estricto
no va a estar por encima sino por la parte mas profunda, si la infección es
purulenta entonces aspiramos con jeringa si es posible e igual inyectamos .05
o 1 cc de solución fisiológica y aspiramos.

Transporte

*Ok una vez obtenida la muestra por puncion si no tenemos el recolector

adecuado para introducir la muestra, amigo déjelo en la jeringa, no use los
tubos de química ni de hematología mejor déjelo en la jeringa, si no tiene el
recolector adecuado o no sabe entonces déjelo en la jeringa, eso si por favor
con el agua y la tapa insertadas.

*Colocar si tiene el envase adecuado en su respectivo transportador

*Guardar en temperatura ambiente hasta llevar al laboratorio y que sea rápido,

*Todas las muestras deben ser enviadas y procesadas inmediatamente, y no

invente si extrajo en la jeringa y la muestra estaba toda espesita purulenta y
feita entonces para que la licenciada no sepa que yo no se entonces no se la
mando, en la jeringa sino en el medio de transporte que traje la semana pasa,
no sea ridículo (dense cuenta que la semana pasada yo traje dos tubos con
medio de transporte uno que era liquido y otra que era como un gelsito, ese
gel es cuando tomo la muestra con hisopo y el va incrustado en ese gel para
mantener ese microorganismo en coma, pero si ese gel yo le hecho esa
secreción purulenta y el gel queda abajo ese gel no hace nada) mándelo en la
jeringa.

Hay excepciones por ejemplo mas que todo ocurre en las noches o los fines
de semanas que llego un paciente y hay que tomar liquido cefalorraquídeo y el
laboratorio de microbiología no esta trabajando o una secreción purulenta es
muy importante entonces

*Lo colocamos en un frasco de cultivo

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*Lo colocamos a temperatura corporal y eso aguanta hasta el lunes, no es lo

adecuado pero se puede resolver.

Si es un liquido cefalorraquídeo y falta mucho para el lunes entonces

*Tomamos, 1 ml si tenemos un frasquito de hemocultivo y lo colocamos a

temperatura corporal y eso aguanta hasta el lunes,

si es otro tipo de liquido como por ejemplo el peritoneal en un frasco grande

de hemocultivo y colocamos 10cc. No usemos tubos de tapa roja ni azules
ni morados eso son los que se usan en los laboratorios, no los usen
porque los tubos tienen anticoagulantes.

Si es una biopsia de un ganglio,

*colocalo en un envase de orina que es esteril

* Un poquito de solución salina que es esteril y lo mandan al laboratorio y debe

ser rápido.

Osteomelitis

Si sospechamos que el paciente tiene una afección a nivel oseo entonces se

usa realiza biopsia por trocar

*Limpiamos la zona afectada, no la abierta sino la peri a la zona afectada

*Con una aguja bastante grande lo introducimos, no sirve pus ni secreccion

de los trayecto lo único que sirve es parte de los huesos ahí es donde vamos
a ver si hay ese agente infeccioso y una osteomielitis no es fácil de tratar.

Muestra de orina

Ahora si es la muestra de orina puede ser

*una muestra de chorro medio,

*vesical

* puncion suprapubica

Orina chorrro medio

Lo mas que llega es orina de chorro medio

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* un envase esteril y ojo porque hay dos tipos de envases que se parecen el de
bk y el recolector de orina, el de orina siempre viene en una bolsita y siempre
dice esteril y el bk se parece pero el envase viene separada por lo tanto no es
esteril, (el envase de orina lo van a abrir que viene con tapa de rosca ya
cuando vaya a orinar)

* lavarse y con el jabon de uso cotidiano que usted siempre use y no se

seque

*Empiece a orinar antes lo abre, pero apenas vaya a empezar a orinar, no lo

haga antes.

*sin detener el flujo tome la muestra y cierre el envase

* Primera orina de la mañana preferiblemente, no es que no se puede en otras

horas del dia, yo castigo al paciente y le digo de aquí a las 4 de la tarde no vas
a orinar para que esa orina se asiente para que se concentre y no mandar a
tomar al paciente mucha agua porque asi no sirve, preferiblemente la orina de
la mañana

Entonces nos lavamos los genitales con el jabon que siempre usamos y sin
secarse y sin tocar los genitales con el borde de los envases y van a empezar a
orinar y en lo que estén orinando a los 3 seg que estén orinando y sin parar
meten el envase y lo sacan, lo que queremos es ni lo primero ni lo ultimo
porque queremos que se lave bien esa cañería y en caso de los hombres no
queremos lo ultimo porque tienen secreciones prostática que es bacterisida,
que quede claro que no se debe tocar la boca del envase con los genitales.

Personas que no controlan esfinter

Si son niños que no controlan los esfínteres usamos la bolsa recolectora es

decir las bolsitas, estas bolsitas debemos cambiarlas, no lavar, ni quitar lavar y
volver a colocar NO, esa bolsa se cambia y si el niño no hizo pipi se vuelve a
cambiar hasta que el niño haga pipi, es importante y la bolsa no cuesta nada.

Por medio de sondas

Si la toma es a través de una sonda la sonda no puede ser la que estaba

colocada la que tiene unos días, tiene que ser cuando se cambie la sonda, se
coloca sonda nueva ustedes están pendientes. Le colocan una sonda nueva,
están pendiente cuando el paciente vaya a orinar, en la porción distal de la
sonda se toma la muestra o se pinza o se hace un estrangulamiento de la
sonda desde la porción distal esperamos a que se llene, limpiamos
(preferiblemente eso lo podemos limpiar con alcohol porque es la materia como
tal), punzamos, extraemos y lo podemos colocar en un recolector de orina.

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Cuando se camia la sonda para poder discriminar si es una contaminación o

sino es una contaminación y la zona que vayan a punzar la zona de la
manguera se debe de limpiar

Puncion supra pubica.

Si la orina se toma por punción supra-púbica yo prefiero esto que una muestra
por sonda debido a que la muestra por sonda trae mucha contaminación, trae
más contaminación que una orina por micción espontanea. Por punción supra-
púbica se punza directamente la vejiga, se coloca en el envase recolección y
más rápido la envían al laboratorio.

Conservación.

Ya tengo la muestra por expulsión espontanea, por catéter por punción supra-
púbica como sea, enviar inmediatamente al laboratorio o de repente si voy a
cambiarme de ropa rapidito la meto en la nevera en la parte de abajo, si por
ejemplo vivo en la perimetral y voy a llevar la muestra al laboratorio La
Milagrosa se debe agarrar un envase le colocan hielo y el recolector tapado lo
colocan allí y se cercioran que el agua del hielo no vaya a ingresar en la orina y
así ustedes la pueden transportar a donde ustedes quieran, no es bueno por
más que usted viva cerca del laboratorio que la orina no vaya en hielo; OJO la
orina no puede ser congela.

Entonces orinaron, agarraron un envase le metieron hielo, el envase de la orina

bien tapadita metieron el envase en el hielo para que se mantenga bien fría y la
envían a su laboratorio.

Hemocultivo, cultivo de la sangre.

¿En qué caso se pide un hemocultivo?

 Si hay un fiebre de origen desconocida

 Si hay un síndrome febril agudo
 Si hay una endocarditis
 En caso se sepsis

¿Cuándo tomar la muestra de hemocultivo? Esto es importante porque si no lo

que están sospechando no lo van a encontrar:

 Antes de darle antibiótico: porque si hay 100000mil unidades al

comenzar a dar antibiótico vamos a llevar a 10000mil unidades y para
pescar esas 10000mil unidades va a costar, entonces antes de dar
antibiótico tomamos nuestra de hemocultivo
 Si ya le dieron antibiótico pero se puso peor el paciente le dio fiebre
entonces antes de volverle a dar antibiótico.

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 Antes del pico febril, tienen la costumbre de tomar el hemocultivo en el

pico febril, el momento es cuando la fiebre le está subiendo no cuando
esta prendido en fiebre.

Numero de tomas.

Si realmente estamos sospechando que el paciente tiene una sepsis o una

pantedemia vamos a tomarle más de un frasco, pero vena lo que ocurre esta
es la vida real pedimos más de una generalmente mandan 2 o 3, bueno si la
licenciada dice que son 10cc por cada frasco yo le saco 30cc y 10cc para cada
frasco NO, si son 3 frascos pero en tiempos diferentes y en sitios anatómicos
diferentes, entre frasco y frasco van a pasar 40minutos, entonces son 3 sitios
diferentes con intervalos de 40minitos porque quiero diferencias una sepsis de
una paderemia intermitente y son varias porque hay veces que la bacteria pasa
a la circulación y luego vuelve a los tejidos, tenemos que pescar justo el
momento donde está en el torrente sanguíneo por eso.

¿Por qué 10ml de sangre?

Esto no es así del todo del todo, depende del frasco que estemos usando, por
ejemplo te llego un frasco inusual osea no es la misma marca de siempre, hay
que preguntar cuando ml son para cada frasco porque dice la literatura que son
10 ml pero todos los días las casas comerciales inventan frascos de
hemocultivo diferente y puede que la relación no sea la misma, la cantidad de
repente puede que sea 10ml de sangre por 10ml de caldo, aja pero si el frasco
que se esté utilizando no tiene 10 sino lo que tiene es 6 entonces esa relación
no puede ser 10ml de sangre, acostúmbrense a preguntar la cantidad para
cada frasco en determinada marca para adultos y para niños, lo normal dice
que para adulto son 10ml pero no siempre es así.

Las puntas de catéter muchas veces nosotros prescribimos puntas de catéter

pero no todas, es decir, llámese catéter vascular de derivación ventricular y
catéter lumer no sondas de feley que es la de la orina esa NO; enviar los 5cm
distal, colocar en un tuvo estéril seco a este no le van a agregar solución
fisiología, a este picaron unos pedacitos con unas pinzas estériles, de una
forma estéril lo colocaron en ese tuvo estéril, si no tiene tuvo se puede agarrar
una jeringa grande le sacan el embolo, meten el catéter y el pedacito de la
manguera y coloran otra vez el embolo porque se supone que la jeringa esta
estéril sino tienen un envase adecuado, un envase adecuado puede ser un
envase de orina o si del laboratorio mandan unos tubos grandes gruesos de
esos estériles también es lo mismo pero no me lo vayan a colocar en un tuvo
tapa roja, ni en un tuvo tapa morada, ni en un tubo tapa azul, ningún tubo de
laboratorio de esos rojos, ni de hematología, ni de química, ni de ningún otra
coloración. No manden un pedazo de catéter NO.

Exudado faríngeo.

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Si es un exudado faríngeo hay ciertas condiciones que debe tener el paciente,

un faringitis atroz el paciente debe ir al laboratorio sin cepillarse y en ayunas,
se toma la muestra la parte posterior de la garganta se ve esas placas blancas
de pus ese es el material, se coloca en su medio de transporte que es el hisopo
largo, lo meten en su gel y lo envían al laboratorio.

Si recibimos una muestra de esputo la recolección va a depender de lo que

estemos buscando, si sospechamos de una tuberculosis o de una neumonía.

Si sospechamos de tuberculosis el envase puede ser estéril o no estéril, puede

ser preferiblemente esputo que es aquella masa verde espesa no agua saliva,
preferiblemente el de la mañana porque pasa como el de la orina esa flema
está asentada en esos, antes de cepillarse los dientes en un lugar ventilado se
esgarra y se coloca la muestra en el recolector.

Si sospechamos de una neumonía el envase a juro tiene que ser estéril, la

muestra es el esputo, aquí el paciente debe cepillarse y usar enjuague dental.
Preferiblemente se utiliza esputo y no saliva porque aquella muestra que sea
bien fea bien purulenta tiene típicamente menos de 10 células epiteliales y más
25 leucocitos polimorfonucleares por campo eso es una muestra bien
representativa del sistema respiratorio.

En el caso de las personas que no pueden esgarrar se pueden tomar ciertas

técnicas para que la persona pueda tomar u obtener esa muestra de flema que
puede ser:

 Por drenajes postural que es cuando mandan a acostar al paciente de

cierta manera para que tosa esa posición hace como que se eleven los
pulmones más hacia la parte de la tráquea entonces cuando el paciente
tosa es más corto el trayecto para que pueda salir esa flema.
 Aspiración por catéter esto lo hacen mucho en terapia intensiva con los
pacientes que están en coma.
 Inducción de flema o esa fluidificación a través de nebulización son
solución salina fisiológica.
 Aspiración transtraqueal.

Soluciones a algunos problemas que se nos puedan presentar:

 Fin de semana o una guardia de noche y el paciente está mal un

derrame pleural o necesita tomar una muestra de líquido asitico,
pericárdico, articular, cefalorraquídeo de esos sitios que se supone que
son normalmente estériles, si es un líquido cefalorraquídeo agrega un
1cc de líquido cefalorraquídeo en un frasco de hemocultivo y lo colocan
en un baño de María a 37° vamos a engañar al microorganismo que
todavía está en el cuerpo, tiene la temperatura que son 37° y el caldito
conde lo vamos a metes tiene la comida para que él se mantenga

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distraído. Ahora si es otro liquido diferente al cefalorraquídeo podemos

tomar 10cc y lo inoculamos en ese caldo y hacemos lo mismo, la idea es
engañar al microorganismos de que todavía está en el cuerpo. Si es una
secreción purulenta lo colocamos en el medio de transporte.

No es muy bueno tomar las muestras con hisopo así estén en el medio de
transporte durante el fin de semana, de repente si fue el domingo en la noche
aguanta para el lunes en la mañana pero si estamos hablando del viernes en la
noche para el lunes a pasado demasiado tiempo estos no es lo adecuado, el
paciente que aguante se le va dando terapia empírica hasta que el lunes se le
pueda tomar la muestra ahí no se puede hacer más nada ahí se le va a tener
que tomar la muestra posterior al tratamiento pero podemos resolver con los
líquidos normalmente estériles que no son fáciles. NO hacer los fines de
semana lo de los hisopos.

¿Cuándo no se recibe una muestra?

 Cuando el petitorio está incompleto, no me dicen quién es el médico y

eso es un dato epidemiológico importante, ni la clínica ni de qué servicio,
si no está completo no se le realizara nada.
 Discrepancia entre la identificación del paciente, la solicitud de examen y
el tipo de muestra, no todo liquido amarillo es orina, no todo es obvio.
 Si la muestra está identificada solo por el sitio anatómico (muestra del
brazo, muestra de la pierna, de la cabeza, del oído) NO, tiene que ser
por ejemplo secreción purulenta del oído derecho, secreción purulenta
de rodilla izquierda, muestra de orina tomada por micción espontanea.
 Ese detallito que ustedes van a colocar de lo que quieren de cada
muestra que si un cultivo, Gram, especial, estudio para micobacterias
ojo cuando lo hagan porque si colocan en un faríngeo que quieren un
Gram, al igual que si lo piden para una heces está mal porque a un
faríngeo no se le pide Gram y a unas heces tampoco. Si me piden un
Gram de una secreción de catéter, de una punta nasal, si me piden un
Gram nada más enviada en el medio de transporte, las muestras
purulentas se deben enviar en 2 envases si no se envía en una jeringa o
si la logaron tomar nada mas con hisopo ese hisopo o esa muestra debe
venir en 2 envases en uno que tenga solución salina y en otro que tenga
el medio de transporte porque si nada más me mandan el tubo que
tenga el medio de transporte no hago más nada no les puedo hacer el
Gram, les hare el cultivo nada mas pero el Gram no se los puedo hacer
porque el Gram se hace de la muestra que tiene solución salina.
 En recipientes inadecuados no se recibe la muestra. OJO en los tubos
tapa roja, tapa morada, los tapa azul, si no saben dónde colocar la
muestra es mejor que la dejen en la jeringa, no vayan a mandar una
muestra de orina en un envase de esputo que no es estéril, no vayan a

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mandar una biopsia o una punta de catéter en un envase para BK no se

recibe

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