3B-2

GUÍA DE PRÁCTICAS

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

E.A.P. MEDICINA HUMANA

BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

2021 - 2
Manual de Prácticas
Biología Celular y Molecular

Modelo de la carátula para los informes

Universidad Wiener

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA
Biología Celular y Molecular

Práctica N°…….

Fecundación in vitro de erizo de mar Tetrapygus niger.

Integrantes (por apellidos en orden alfabético):

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Ciclo: Primero

Sección: ……………

Docente (s):
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Fecha de realización de la práctica:

Fecha de entrega del informe:

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Biología Celular y Molecular

Modelo para la presentación del informe de práctica

I. INTRODUCCIÓN:

La fecundación consiste en la activación del óvulo por parte del

espermatozoide con la característica de que ambas células deben de tener un
estado maduro. Este proceso importante permite llevar a cabo la formación
de una célula que se conoce como huevo o cigoto que da inicio al desarrollo
embrionario a través de sucesivas divisiones de segmentación. La presente
práctica describe la fecundación externa in vitro del erizo de mar.

II. OBJETIVOS:

• Demostrar la fecundación in vitro del el erizo de mar mediante la

observación de los blastómeros.

• Determinar las distintas fases del desarrollo embriológico mediante

microscopía de luz.

III. MATERIAL Y MÉTODO

Material:
Cloruro de Potasio (KCl) al 0.5 %, Gluteraldehído al 1%, Acetocarmín y
Wright, Centrífuga, Incubadora, Tubos Ependorf, Microscopio. Biológico:
Erizos de mar de ambos sexos.
Metodología:
Se realizó la colecta de los organismos en la orilla rocosa de la playa
“Ventura”. Los erizos se estimularon con Cloruro de Potasio (KCl) al 0.5 %
inyectado en la zona bucal, los óvulos y espermatozoides la colectaron por
separado en frascos con contenían agua de mar filtrada, se centrifugaron
para obtener un botón celular.
Para la identificación de los gametos, las muestras se fijaron con
Gluteraldehído al 1% y la fecundación se determinó colocando 100 μl de
óvulos y 200 μl de espermatozoides en tubos ependorf dejándose en la
incubadora, fijando intervalos de 30 minutos durante 7 horas. Para observar
las características y diferencias morfológicas. Los óvulos y los
espermatozoides no fecundados fueron teñidos con acetocarmín y Wright,
respectivamente. Las etapas del desarrollo embrionario se determinaron sin
tinción por Microscopia de luz.

IV. RESULTADOS: (Deben realizar sus dibujos con su respectiva

explicación y de ser el caso elaborar tablas).

Se observó la morfología de los óvulos con acetocarmín y sin tinción. En los

óvulos teñidos con aceto carmín se observa claramente el núcleo (Fig. 1).

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Biología Celular y Molecular

V. CONCLUSIONES:

• Se logró la fecundación de erizo de mar en estudios in vitro desde la

formación de la doble membrana pasando por las divisiones de los
blastómeros hasta formar la blástula.

• Se observaron los estadios de segmentación de los óvulos hasta la de más

de 64 células en un tiempo de 7 horas.

VI. CUESTIONARIO: Resolver las preguntas

VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

SADAVA D, HELLER H. C, ORIANS G. H, PURVES W. K, HILLIS D. M. Vida. La

Ciencia de la Biología. 1a ed. Buenos Aires: Ed. Médica Panamericana; 2013.

LODISH, H. F., BERK, A., MATSUDAIRA, P., KAISER, M., KRIEGER, M.,
SCOTT, M. P., ZIPURSKY, S. L. y DARNELL, J. E.: Biología Celular y
Molecular. 5a ed. Editorial Médica Panamericana; 2016.