Universidad Nacional Autónoma de México

Licenciatura en Química

Previo Cromatografía

Laboratorio de química orgánica

Gpo: 1302B
Equipo 3
Profesor: Ivan Missael Espinoza Muñoz
Alumnos: Martínez García Luis Eduardo
Pineda Estrada Camilo
Vega Roldan Miriam
Semestre: 2021-2

16 Octubre, 2021
1. Objetivo(s)
Emplear a la cromatografía, como un método para separar los compuestos
presentes en una mezcla; así mismo, utilizar a ésta para la purificación y posible
identificación de los mismos

2. Define los siguientes términos:

a) Cromatografía
Actualmente la cromatografía es el nombre que se le da a un grupo de técnicas
utilizadas en la determinación de la identidad de sustancias, en la separación de
componentes de las mezclas y en la purificación de compuestos. Esta técnica es
muy efectiva y por lo tanto se utiliza tanto a nivel de investigación como a nivel
industrial.
Este método puede variar de técnica en técnica, pero siempre se basa en el mismo
principio: Todos los sistemas de cromatografía contienen una fase estacionaria y
una fase móvil.
La cromatografía es esencialmente un método de separación en el que los
componentes a separar se distribuyen entre dos fases, una inmóvil (fase
estacionaria), y otra móvil (fase móvil) la cual percola a través de la primera. El
proceso cromatográfico se da como resultado de repetidos procesos de
sorción-desorción durante el movimiento de los componentes de la mezcla
arrastrados por la fase móvil a lo largo de la fase estacionario (elución),
produciéndose la separación debido a las diferencias en las constantes de
distribución de los componentes de la mezcla entre la fase estacionaria y la móvil. A
la distribución final de los componentes en función de su posición sobre el lecho
estacionario, o del tiempo en que eluyen se le denomina cromatograma.
b) Fase móvil
Es un fluido que puede ser líquido, gas o fluido supercrítico que se usa como
portador de la mezcla y que se hace pasar a través de la columna cromatográfica y
la fase estacionaria.
c) Fase estacionaria
Material que permanece dentro de la columna cromatográfica durante la
cromatografía y que retiene algún componente de la muestra, posee una gran área
superficial y puede ser un sólido o un líquido dispuesto sobre un sólido que actúa
como soporte.
d) Revelador
Proceso de separar un soluto de la muestra por medio de cromatografía.
Existen diversos procedimientos para detectar los componentes de la muestra en la
placa tras el proceso de separación. Uno de los más utilizados consiste en
incorporar a la fase estacionaria un material fluorescente y examinar la placa, una
vez finalizado el desarrollo, bajo luz ultravioleta (los lugares de la placa donde se
encuentran los componentes no muestran fluorescencia).

3. Realiza una tabla que describa las características de compuestos que

pueden ser empleados como fase móvil y fase estacionaria, así como
ejemplos de sustancias químicas que pueden utilizarse, como fase móvil y
fase estacionaria

Fase móvil Fase estacionaria

● Puede ser un sólido o líquido ● Baja volatilidad: Su temperatura

de ebullición debe de estar al
menos 100 grados por encima
de la temperatura máxima de
trabajo.
● Deben ser estables a
temperaturas elevadas
● Deben ser químicamente inertes
(no reaccionar)
● El estado de la fase estacionaria
puede ser sólido o líquido

4. Métodos cromatográficos
5. ¿Cómo preparar una placa para cromatografía en capa fina?
1. Manejar la placa por sus bordes. Dividir la placa en 8 trozos de 5 x 5 cm,
dibujar las líneas con un lápiz romo utilizando una regla sobre la superficie
absorbente de la placa de celulosa.

2. Cortar cuidadosamente la placa en 8 piezas (no utilizar cutter). Para cada

grupo de prácticas se necesitaran dos piezas.
3. Medir 1 cm desde un borde en cada pieza y trace una línea recta con un
lápiz. No aplicar mucha presión, debido a que esto puede separar la celulosa
de su placa de apoyo. Esta será la línea de origen de la muestra.

6. ¿Cómo se prepara una columna?

Para preparar una columna, se introduce un absorbente sólido en un tubo cilíndrico
de vidrio o plástico. El tamaño de este tubo dependerá de la cantidad de compuesto
que se aísla. La base del tubo contiene un filtro, ya sea un tapón de algodón o lana
de vidrio, o fibra de vidrio que sujete la fase sólida. Un depósito de solvente puede
fijarse a la parte superior de la columna.
Por lo general, se usan dos métodos para preparar una columna: el método seco y
el método húmedo. Para el método seco, primero se llena la columna con la fase
estacionaria en forma de polvo seco, tras lo cual se añade la fase móvil, que se
pasa a través de la columna hasta que esté completamente húmeda, y que a partir
de ese punto se procura que no llegue a secarse.​
Para el método húmedo, se prepara una suspensión del eluyente con la fase
estacionaria en polvo, que a continuación se vierte cuidadosamente en la columna.
La parte superior del sílice debe ser plano, y puede protegerse mediante una capa
de arena. El fluido se pasa lentamente a través de la columna para hacer avanzar el
material orgánico.

7. Tipos de reveladores y ejemplos

Los reveladores pueden ser físicos o químicos. Los reveladores físicos
comprenden por ejemplo lámparas que emiten luz UV, la cual permite visualizar
componentes que por sus características químicas son capaces de emitir
fluorescencia (ej: compuestos fenólicos), la exposición al calor también puede
generar ciertos cambios en los componentes separados (ej. acelerar la oxidación de
éstos) que permitan visualizarlos. Los reveladores químicos son sustancias
químicas con reactividad, la cual generalmente es específica para grupos
funcionales determinados en una molécula, y a través de éstos es posible
seleccionar qué tipo de moléculas (componentes) queremos visualizar.

8. Propiedades de reactivos y productos.

Reactivo Toxicológicas Propiedades
Fisicoquímicas
Dicromato de ● Toxicidad aguda oral
sodio(Na2Cr2O7 Categoría 3 (H301)
● Toxicidad aguda cutánea
Categoría 4 (H312)
● Toxicidad aguda por
inhalación - Polvos y
nieblas Categoría 2
(H330)
● Corrosión o irritación
cutáneas Categoría 1 B
(H314)
● Lesiones o irritación
ocular graves Categoría 1
(H318)
● Sensibilización
respiratoria Categoría 1
(H334)
●
Sensibilización cutánea
Categoría 1 (H317)
● Mutagenicidad en células
germinales Categoría 1B
(H340)
Anhídrido acético C4H6O3 ● Toxicidad aguda oral
Categoría 3 (H301)
● Toxicidad aguda
cutánea Categoría 4
(H312)
● Toxicidad aguda por
inhalación - Polvos y
nieblas Categoría 2
(H330)
● Corrosión o irritación
cutáneas Categoría 1 B
(H314)
● Lesiones o irritación
ocular graves Categoría
1 (H318)
● Sensibilización
respiratoria Categoría 1
(H334)
● Sensibilización cutánea
Categoría 1 (H317)
Ácido nítrico HNO₃ ● H272. Puede agravar un
● Aspecto Naranja
● Estado físico
Sólido Olor Inodoro
Umbral
● olfativo No hay
datos disponibles
● pH 3.5-3.9 5%
● aq.sol
● Punto/intervalo de
fusión 357 °C /
674.6 °F Punto de
● reblandecimiento
No hay datos
disponibles
● Punto /intervalo de
ebullición 400 °C /
752 °F
● Estado físico
líquido (fluído)
● Color incolor Olor
picante Umbral
● olfativo No existen
datos disponibles
● pH (valor) 3 (10 g /l
, 20 °C)
● Punto de
fusión/punto de
congelación -73 °C
● Punto inicial de
ebullición e
intervalo de
ebullición 139,5 °C
a 101,3 kPa
● Punto de
inflamación 49 °C
● Estado físico,
 incendio; comburente. color y olor: Café
● H290. Puede ser rojizo con olor
corrosivo para los sofocante
metales. ● Umbral de olor:
● H314. Provoca graves 0.29 a 0.98 ppm
quemaduras en la piel y ● pH (solución
lesiones oculares. acuosa a 0.1 M): 1
● P210 Mantener alejado ● Temperatura de
de fuentes de calor. fusión (1 atm.):
● P220. Mantener alejado -42 °C
de la ropa / materiales ● Masa molar:
combustibles 63.02 g /mol 6.
Temperatura de
ebullición (1 atm):
86 °C
● Temperatura de
inflamación: N.A.
● Velocidad de
evaporación
(butilacetato = 1):
N.D.

Sulfato crómico Cr2(SO4)3 ● H315 Provoca ● Estado físico

irritación cutánea. ● sólido Color rojo
● H319 Provoca violeta
irritación ocular ● Olor inodoro
grave. ● Umbral olfativo
No existen datos
disponibles
● pH (valor) 3 (50 g
/l , 20 °C)
● Punto de
fusión/punto de
congelación 89 °C

● H290 Puede ser ● Estado físico

corrosivo para los líquido
metales ● Color incolor
● H314 Provoca ● Olor inodoro
quemaduras graves en ● pH (valor) <1 (20
la piel y lesiones °C)
oculares graves
Ácido sulfúrico H₂SO₄
9. Diagrama de flujo del procedimiento experimental ecológico
10. Referencias

● Facultad de Química. (2007, diciembre). Técnicas cromatográficas. UNAM.

http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/M.Cromatogrficos_6700.pdf
● Passaro, C., Rivera, C., & Roman, M. (2016, octubre). GUÍA SOBRE
PRINCIPIOS BÁSICOS DE CROMATOGRAFÍA Y SUS APLICACIONES.
Cigaca.
https://repositorio.sena.edu.co/bitstream/handle/11404/4694/guia_cromatogra
f%EDa.pdf;jsessionid=5B043DCAF9DC04A73B72147D446E8D4B?sequence
=1
● Araceli, M., Soberón, J., & Battuone, V. (2010). CROMATOGRAFÍA:
CONCEPTOS Y APLICACIONES. Revista Arakuku, 1(1), 1–6.
https://ri.conicet.gov.ar/bitstream/handle/11336/75465/CONICET_Digital_Nro.
3655a360-b03b-44c8-8519-bc747d073f7c_A.pdf?Sequence=2&isallowed=y
● https://www.bioted.es/wp-content/uploads/2020/02/PRINCIPIOS-CROMATOG
RAFIA-EN-CAPA-FINA-1.pdf
● colaboradores de Wikipedia. (2020, 5 noviembre). Cromatografía en columna.
Wikipedia, la enciclopedia libre. Recuperado 14 de octubre de 2021, de
https://es.wikipedia.org/wiki/Cromatograf%C3%ADa_en_columna