2019-Current and Emerging Methods of Antibiotic - En.es

Traducido del inglés al español - www.onlinedoctranslator.
com
diagnóstico
Revisar
Métodos actuales y emergentes de prueba de

susceptibilidad a los antibióticos
Zeeshan A. Khan†, Mohd F. Siddiqui†y el parque Seungkyung *

Escuela de Ingeniería Mecánica, Universidad de Tecnología y Educación de Corea, Cheonan,
Chungnam 31253, Corea; iamzak@koreatech.ac.kr (ZAK); mohdfarhan@koreatech.ac.kr (MFS)
* Correspondencia: spark@koreatech.ac.kr ; Tel.: +82-41-560-1149; Fax: +82-41-560-1253 †Estos
autores contribuyeron igualmente a este trabajo.
---- -
Recibido: 18 de marzo de 2019; Aceptado: 28 de abril de 2019; Publicado: 3 mayo 2019 ---
Resumen:Las pruebas de susceptibilidad a los antibióticos (AST) especifican la dosis efectiva de

antibióticos y formulan un perfil de terapia empírica para el manejo adecuado de la salud de un
paciente individual contra infecciones mortales. Por lo tanto, el diagnóstico rápido juega un papel
fundamental en el tratamiento de la infección bacteriana. En este artículo, los autores revisan la carga
socioeconómica y la aparición de resistencia a los antibióticos. Se ha proporcionado y discutido una
descripción general de las técnicas fenotípicas, genotípicas y emergentes para AST, destacando las
ventajas y limitaciones de cada una. Se presenta la perspectiva histórica de los métodos convencionales
que allanaron el camino para la AST moderna, como la difusión en disco, la prueba del epsilómetro
(Etest) y la microdilución. Se han evaluado críticamente varios métodos emergentes, como la AST óptica
y electroquímica basada en microfluidos. Finalmente,
Palabras clave:Pruebas de susceptibilidad a antibióticos; resistencia; fenotípico; genotípico; bacterias
1. Introducción
La resistencia a los antibióticos se define como la capacidad genética de las bacterias para codificar los genes de
resistencia que falsifican el efecto inhibidor de los antibióticos potenciales para la supervivencia.1]. Puede desarrollarse
intrínsecamente por recombinación natural e integración en el genoma bacteriano, o puede adquirirse a través de eventos de
mutación genética horizontal, como la conjugación, la transformación y la transducción.2]. Los eventos destacados en la
generación de resistencia bacteriana incluyen la inactivación del canal de porinas, la modificación de los objetivos de los
antibióticos y la neutralización de la eficacia de los antibióticos a través de la acción enzimática.3]. Por lo tanto, la comprensión
de la transformación genética y los cambios morfoanatómicos en las bacterias son de suma importancia para contrarrestar el
mecanismo de resistencia.
El descubrimiento de los antibióticos supuso un cambio de paradigma, ya que no solo era una herramienta eficaz contra
las infecciones crónicas, sino que también abría nuevos caminos para las industrias farmacéuticas. Las estadísticas mundiales
sobre antibióticos sugirieron un aumento del 35 % en el consumo de antibióticos entre 2000 y 2010, y la industria actual de
antibióticos asciende a 39 800 millones USD (hasta 2015). Rusia, India, China, Brasil y Sudáfrica son los principales países
contribuyentes, donde se ha estimado el 76 % del aumento en el consumo de antibióticos [4]. Los cambios experimentados en
el mayor consumo de antibióticos durante la última década no tienen precedentes, y esto es principalmente el resultado de la
aparición de nuevas enfermedades. Alternativamente, el aumento en el consumo de antibióticos y la industrialización podría
deberse al uso excesivo o inadecuado de los antibióticos recomendados por los médicos/automedicación en el momento de la
infección.5,6]. Un informe reciente de la organización mundial de la salud (OMS) sobre las muertes relacionadas con la
resistencia a los antibióticos describió la alarmante cifra de 700 000 vidas al año en la actualidad y pronosticó la inquietante
cifra de 10 millones al año para 2050, lo que garantiza que la resistencia a los antibióticos será la causa de muerte más
frecuente. [7]. Además de esto, la OMS también advierte la gravedad de la resistencia a los antibióticos, afirmando que
“amenaza los logros de la medicina moderna,
Diagnóstico2019,9, 49; doi:10.3390/diagnóstico9020049 www.mdpi.com/journal/diagnostics

Diagnóstico2019,9, 49 2 de 17
una era posterior a los antibióticos, en la que las infecciones comunes y las lesiones menores pueden causar la muerte, es una posibilidad muy
real para el siglo XXI” [8].
Varias agencias internacionales clasifican las concentraciones inhibitorias mínimas (MIC) de varias pruebas de
susceptibilidad a los antimicrobianos (AST). Estas pautas MIC determinan si un antibiótico es susceptible o no. El
Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) proporciona las pautas más populares, que se basan en las
propiedades farmacocinéticas-farmacodinámicas (PK-PD) y los mecanismos de resistencia.9]. La mayoría de los países
europeos siguen los límites de CIM basados en las propiedades de PK-PD y los límites de CIM epidemiológicos
(ECOFFS) según lo determinado por el Comité Europeo de Pruebas de Susceptibilidad Antimicrobiana (EUCAST). Los
puntos de corte MIC recomendados por EUCAST son generalmente más altos que el CLSI. Debido a las modificaciones
en las guías, los resultados cambian sustancialmente, como una mayor resistencia a la ceftazidima enNeumonía por
Klebsiellay productores de ESBLEscherichia coli(E. coli). Además, las directrices del CLSI son accesibles para los no
miembros como un paquete de tres documentos por 500 USD al año, mientras que las directrices de EUCAST están
disponibles gratuitamente en el sitio web de EUCAST [9].
Se está produciendo un fuerte aumento de la resistencia a la codificación de bacterias en todo el mundo, lo que
pone en peligro la eficacia de los antibióticos que han salvado millones de vidas.10]. Los antibióticos que han
amenazado a las bacterias durante décadas están bajo una grave amenaza. Debido a las grandes repercusiones
sociales de la resistencia a múltiples fármacos y al desarrollo significativamente reducido de fármacos, es obligatorio
determinar los microbios que necesitan más atención que otros para el desarrollo de fármacos. En consecuencia, la
OMS ha desarrollado una lista de prioridades de los patógenos y estratificó la lista en prioridades críticas, altas y
medias. Resistente a los carbapenémicosPseudomonas aeruginosayacinetobacter baumanii,resistentes a carbapenem
y cefalosporinas de tercera generaciónenterobacteriasse colocaron en bacterias de prioridad crítica. Las bacterias de
alta prioridad incluyeron bacterias resistentes a la vancomicinaEnterococcus faecium, resistente a la meticilina
estafilococo aureus(MRSA), resistente a la claritromicinaHelicobacter pylori, resistente a las fluoroquinolonas
Campylobacterspp., resistente a la penicilinasteotococos neumonia, resistente a la ampicilinaHaemophilus influenzaey
resistentes a las fluoroquinolonasShigelaspp. [11] (Figura1). La resistencia a los antibióticos betalactámicos como la
penicilina está muy extendida, mientras que la resistencia a otros fármacos, como la vancomicina y la fluoroquinolona,
se observa con menos frecuencia (Tabla complementaria S1). Las infecciones que surgen de bacterias resistentes,
debido a mutaciones, pueden presentarse con síntomas más severos que sus predecesores (Tabla complementaria
S1). Aunque los nuevos medicamentos han demostrado ser muy prometedores contra estas bacterias resistentes, su
diagnóstico rápido sigue siendo una gran preocupación (Tabla complementaria S1).
En esta revisión, discutimos de manera concisa las ventajas y limitaciones de varias herramientas para AST (Tabla
complementaria S2). Primero revisamos los métodos fenotípicos para AST como herramientas de difusión, dilución y
AST automatizadas. Se abordan los aspectos centrales de los métodos AST basados en genotipos, incluido el
diagnóstico de susceptibilidad basado en la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y la micromatriz de ADN.
Luego, se analiza una descripción general de varios enfoques emergentes, como sensores microfluídicos
fluorescentes, colorimétricos y electroquímicos, con sus advertencias relacionadas (Tabla complementaria S2).
Figura 1.Representación de la clasificación final de bacterias resistentes a los antibióticos, adaptada con permiso
de Tacconelli et al. [11]. CR = resistente a carbapenémicos. 3GCR = resistente a cefalosporinas de tercera
generación. VR = resistente a vancomicina. MR = resistente a la meticilina. ClaR = resistente a la claritromicina. FQR
= resistente a las fluoroquinolonas. PNS = no sensible a la penicilina. AmpR = resistente a la ampicilina.
2. Métodos AST fenotípicos
2.1. diffusión
El método de difusión en disco es el estándar de oro para confirmar la susceptibilidad de las bacterias. La
difusión en disco estandarizada fue introducida por los experimentos de Bauer y Kirby en 1956, después de finalizar
todos los aspectos de la optimización cambiando las condiciones físicas.12]. En este método, la colonia bacteriana
aislada se selecciona, se suspende en un medio de cultivo y se estandariza mediante una prueba de turbidez. Luego, la
suspensión estandarizada se inocula en la placa de agar solidificado y el papel tratado con antibiótico se golpea
suavemente en la placa inoculada. Se permite que el disco que contiene el antibiótico se difunda a través del agar
solidificado, dando como resultado la formación de una zona de inhibición después de la incubación durante la noche
a 35◦C. Posteriormente, se mide el tamaño de la zona de inhibición formada alrededor del disco de papel; el tamaño
del halo de inhibición corresponde a la concentración de antibiótico (Figura2) [12,13]. La evaluación y determinación
de la susceptibilidad de las bacterias generalmente toma de 16 a 24 horas. Se han realizado varios experimentos
basados en la difusión antes del método de difusión en disco estandarizado. En la década de 1920, Fleming fue el
colaborador pionero de AST. El método del canalón de Fleming fue el primer método de análisis de antibióticos en el
que el antibiótico se dispensaba en un canalón hecho en agar sólido que permitía que los antibióticos se difundieran a
través de él.14]. Posteriormente, Abraham et al. desarrollaron una modificación de este diseño, denominada “método
de la copa Oxford”. en 1941, donde se sustituyó el canalón por un vaso de cristal para la difusión [15].
Simultáneamente, en la década de 1940, Pope (1940), Foster y Woodruff (1943) y Vincet y Vincet (1944) utilizaron un
disco de papel impregnado de antibiótico para la difusión de antibióticos.dieciséis,17]. Estos métodos se vieron
obstaculizados por análisis inexactos debido a la evaporación, dificultad en el manejo, esterilización y operación
engorrosa [18]. Además, un único antibiótico se centró en las pruebas de susceptibilidad (es decir, la penicilina). En
años posteriores, ha prevalecido la introducción de fármacos efectivos y métodos convenientes de prueba de
susceptibilidad con el aumento
de las infecciones mortales. Por lo tanto, se han adoptado variaciones del método para expandir su versatilidad y
utilidad. En 1947, Hoyt, Levine y Bondi introdujeron las tabletas de penicilina y el método estándar del disco de 6,5 mm
por separado para enfatizar múltiples objetivos.19,20]. En la década de 1950, los experimentos de Gould y Bowie
(1952) y Stokes (1955) permitieron diferenciar entre bacterias susceptibles y resistentes a través de la técnica de
difusión en disco múltiple [21,22]. Todos los métodos propuestos eran inexactos, inadecuados y poco fiables para las
pruebas de rutina debido a las discrepancias en los resultados obtenidos en diferentes laboratorios.23]. Por lo tanto,
en 1961, varias organizaciones (especialmente la OMS) hicieron varios esfuerzos para abordar la necesidad de un
método estandarizado para las pruebas de susceptibilidad a los antibióticos. Más tarde, en el año 1966, el método de
Bauer y Kirby se confirmó como un método estándar para las pruebas de susceptibilidad. Este método tiene potencial
para las pruebas de rutina de susceptibilidad en laboratorios clínicos. Además, el método es ampliamente aceptado
porque ofrece un protocolo simple y rentable para la detección de múltiples objetivos.24]. Sin embargo, junto con
estas ventajas, también tiene algunos inconvenientes significativos: solo está disponible la semiautomatización
(Sirscan), disponibilidad de datos insuficiente para muchas bacterias (cepas dePseudomonas,Bacilo, yCorynebacterium
), y tiene un bajo rendimiento al analizar bacterias fastidiosas y de crecimiento lento [25,26]. Influenciado por muchos
factores fisicoquímicos como la evaporación, la solubilidad, el pH, la temperatura y los medios nutrientes, las
limitaciones adicionales restringen su idoneidad para diagnósticos precisos.27].
Recientemente, la aparición de varios instrumentos para analizar la zona de inhibición ha aumentado la

confiabilidad de los resultados de la difusión en disco al reducir la variabilidad debida al manejo y la interpretación del
operador. La cámara o escáner toma la fotografía y el software de análisis de imágenes incorporado muestra la zona
de inhibición y compara los resultados obtenidos con las diversas pautas presentes en la base de datos. Accuzone
(AccuMed International, Hillsboro, Oregón, EE. UU.), Biomic (Giles Scientific, Santa Bárbara, California, EE. UU.),
Mastascan Elite (Mast, Bootle, Reino Unido) y Sirscan (Becton Dickinson, Oxford, Reino Unido) son algunos de los
instrumentos capaces de analizar la zona de inhibición, pero todos difieren en la entrada de datos, análisis, facilidad
de uso y presentación de resultados [28].
Figura 2.Representación de varios métodos convencionales de prueba de susceptibilidad a los antibióticos. (a)
Difusión en disco, demostración de zonas de inhibición, adaptado de Sageerabanoo [29]. (B) Difusión en disco de
gradiente de Etest, adaptado de Sader [30], bajo los términos de la licencia de atribución Creative Commons. (C,D)
Macro y microdilución en caldo, mostrando la susceptibilidad bacteriana basada en la densidad óptica y (mi)
Espectrometría de masas de tiempo de vuelo por ionización por desorción láser asistida por matriz (MADI-TOF
MS), adaptada del sistema MALDI Biotyper (Bruker, Billerica, Massachusetts, Estados Unidos), Laboratory
Information System (LIS) y Laboratory Information Management System (LIMS) ).
2.2. Dilución
La dilución fue una de las primeras herramientas en la práctica microbiológica, comenzando a principios de la
década de 1870, y permite el crecimiento e identificación de poblaciones bacterianas en suspensión.31]. Pasteur,
Lister, Koch y Ehrlich fueron catalogados como los pioneros en el campo de la bacteriología y trabajaron en el
concepto de macrodilución.32]. William Roberts y John Tyndall contribuyeron aún más al método de macrodilución y
observaron el crecimiento bacteriano en un medio diluido.33]. Los dos tipos básicos de dilución son la microdilución y
la macrodilución, en las que el caldo y el agar son los medios más utilizados. En dilución en caldo, diluciones dobles
consecutivas (1, 2, 4, 8 y 12µL) de antibióticos se preparan y dispensan en tubos de microcentrífuga que contienen
medio de crecimiento bacteriano, seguido de completar el volumen final agregando el medio e incubando durante la
noche a 35◦C. Finalmente, se realiza el examen de crecimiento para establecer el punto de corte a través de la turbidez
de los medios de cultivo (Figura2) [34,35]. en agar
dilución, los antibióticos se diluyen en el medio de agar, seguido de la formación de placas y la aplicación de células
bacterianas a la superficie de la placa de agar.
A principios del siglo XX, varios científicos se esforzaron por introducir la dilución en serie. Establecieron el factor de
dilución en términos de progresión geométrica y derivaron la ecuación matemática generalizada para interpretar los
resultados de la dilución [36–40]. En 1929, Alexander Fleming realizó la técnica de dilución en serie para comprender la
actividad de los antibióticos. En esta técnica, se mezcla una dilución doble de antibióticos con un medio líquido preinoculado
para determinar las acciones de los antibióticos comprobando la turbidez. En 1942, Fleming modificó el protocolo anterior
utilizando el pH en lugar de la turbidez para identificar la actividad antibacteriana. En el mismo año, Rammelkamp y Maxon
introdujeron la macrodilución en caldo, o el "método de dilución en tubo", que se considera el método de dilución
estandarizado tanto para la concentración inhibitoria mínima (MIC) como para la AST. CLSI recomienda pautas para establecer
los puntos de corte. El primer intento con respecto a AST fue realizado por Schmith y Reymann utilizando medio de agar
durante la década de 1940.41].
La microdilución es un prototipo miniaturizado del método de macrodilución en el que las pruebas de susceptibilidad se
realizan en placas de microtitulación desechables de 96 pocillos, donde cada pocillo tiene una capacidad de muestra de ~0,1
ml (Figura2) [42]. Para dispensar las muestras en micropocillos se utilizan dosificadores mecanizados para evitar el error de
manipulación. Después de la incubación durante la noche, el crecimiento y la CIM se evalúan mediante instrumentos ópticos
especializados. Este método ha sido bien estandarizado para la mayoría de las bacterias exigentes [13].
El principal inconveniente de los métodos de dilución es la necesidad de un gran volumen de reactivos. Aparte
de eso, otras limitaciones potenciales incluyen: espacio experimental, tediosos pasos de dilución (macrodilución), la
posibilidad de resultados falsos positivos debido a largos tiempos de incubación [43], posibilidades de contaminación
cruzada, incompatibilidad bacteriana para el crecimiento y la incapacidad de discriminar bacterias viables y no viables.
Mantener los parámetros de prueba óptimos recomendados, como el pH, la temperatura, los medios y la duración de
la incubación, son obstáculos adicionales, y una placa de viabilidad de control es obligatoria en las pruebas para lograr
una relevancia clínica práctica [44].
2.3. prueba
La prueba de epsilómetro (Etest) es otro avance importante para el análisis de rutina de la resistencia
generalizada a los antibióticos en las bacterias. A fines de la década de 1980, Bolmström y Eriksson desarrollaron esta
prueba [45]. AB BIODISK fabricó la primera tira de plástico Etest para inspeccionar múltiples antibióticos en una sola
plataforma en 1991 (Figura2) [45]. Las tiras de plástico Etest están recubiertas con concentraciones de antibiótico
predefinidas, y los rangos interpretativos de CIM correspondientes están marcados en la superficie y el reverso de la
tira, respectivamente. Para la detección, se colocan múltiples tiras en una placa de agar rayado previamente
inoculado, seguido de una incubación durante la noche; Aparecen zonas de inhibición elípticas alrededor de las tiras,
indicando el MIC en el punto de intersección entre la zona de inhibición y el borde de la tira [46]. La simplicidad,
precisión y confiabilidad del Etest lo hacen apropiado y conveniente para la comercialización aprobada por la
Administración de Alimentos y Medicamentos (FDA) [47]. La capacidad de interpretaciones convenientes de MIC bajo
diversas condiciones físicas hizo que el Etest fuera un método preferencial sobre las técnicas de dilución y difusión de
disco estandarizadas en laboratorios clínicos para AST.30,48].
En la década de 1990, una serie de estudios comparativos con otras técnicas estandarizadas, por ejemplo,
la dilución y difusión en agar y la dilución en caldo, establecieron la importancia del Etest. Muchas cepas deH.
pylori,Neisseria gonorrhoeae, Enterococospp., y muchos otros aislados clínicos fueron probados por Etest y
comparados con métodos estándar, lo que resultó en una buena correlación en el rango de 91% a 99% [49–51].
Recientemente, en 2016, sensibles a la meticilinaS. aureus(MSSA) y resistentes a la meticilina
S. aureus(MRSA) se examinaron con un Etest para determinar la CIM de ceftarolina. Los resultados se compararon con
la microdilución en caldo (BMD) y mostraron una excelente concordancia de más del 95 % [52,53]. Múltiples culturas
deCampylobacterspp. contra siete antibióticos también fueron evaluados por Etest para determinar su resistencia [54
]. Todos estos resultados demostraron la fiabilidad y la importancia del Etest en la evaluación de las CIM de una
amplia gama de antibióticos con respecto a los métodos estandarizados actuales, especialmente para las bacterias de
crecimiento lento (Campylobacter jejuni,H. pylori) y raras bacterias fastidiosas (S. pneumoniaeyNeisseria spp.). Una de
las ventajas significativas del Etest es su sensibilidad; puede
detectar beta-lactamasa de espectro extendido (BLEE), incluso en cantidades mínimas [55]. Además, las cepas de
resistencia precisas se pueden cuantificar fácilmente en laboratorios/hospitales debido al gradiente de concentración
estable de antibióticos marcado en la tira Etest.
Además de varias ventajas, existen algunas limitaciones que no se pueden ignorar, principalmente relacionadas con el
comportamiento impreciso e inconsistente del Etest para ciertos agentes antibacterianos, como la penicilina, la ciprofloxacina,
la ofloxacina y la rifampicina [56]. Algunas desventajas adicionales que hacen que el Etest sea complicado para los análisis de
prueba de rutina son: antibióticos recubiertos sensibles al pH, rendimiento de lotes costoso, almacenamiento de tiras y
configuración de laboratorio para la inoculación e incubación adecuadas de la placa [57].
2.4. Espectrometría de masas de tiempo de vuelo de ionización por desorción láser asistida por matriz (MALDI-TOF MS)
MALDI-TOF MS, introducido en 2000, es otro método sensible para la identificación bacteriana. Alta
sensibilidad y precisión son las características clave que lo convierten en un método útil para la relevancia
clínica. Diversos estudios revelan su importancia en la discriminación de MRSA, MSSA y otras cepas bacterianas
en las que se han evaluado bacterias susceptibles y resistentes mediante análisis de picos espectrales. Incluso
la diferencia sutil en los perfiles de expresión se ha notado en cepas isogénicas deS. aureus[58,59]. La eficacia
de MALDI-TOF MS se ha investigado más a fondo en enterococos resistentes a la vancomicina, donde se ha
registrado una sensibilidad superior al 90 %. Además, el análisis de múltiples objetivos con diferentes cepas
resistentes dePseudomonas spp.contra ciprofloxacina, tobramicina y meropenem se han identificado de
manera eficiente.60]. El nuevo ensayo rápido de prueba de susceptibilidad a antibióticos MALDI Biotyper (MBT-
ASTRA) es una modulación más sencilla y rentable de MALDI-TOF MS utilizada para la determinación de AST y
MIC [61]. A pesar de todas las ventajas de MALDI-TOF MS, la naturaleza costosa del instrumento y su
mantenimiento son las principales desventajas para la aplicación masiva.
2.5. Sistemas Automatizados
Desde los albores de las tecnologías automatizadas en la década de 1980, las pruebas de susceptibilidad a los
antibióticos se han improvisado perpetuamente y, por lo tanto, han reemplazado a los métodos fenotípicos
convencionales.13]. La automatización, la simplicidad y la compacidad son las principales razones de su amplia
aceptación en el diagnóstico. La integración informática ha permitido el análisis en línea y el intercambio de datos, lo
que es un gran paso para la validación de resultados, especialmente en áreas remotas [62]. Entre los sistemas
automatizados desarrollados, MicroScan WalkAway (Beckman Coulter, Inc. Atlanta, Georgia, EE. UU.) (1980), Micronaut
(Merlin, berlín, Alemania) (1990), la prueba avantage (Abbott Laboratories, Irving, Texas, EE. UU.) ( 1980), Vitek 2
(bioMe'rieux, Marcy-l'MItoile, Francia) (2000), Phoenix (BD Diagnostics, Franklin Lakes, Nueva jersey, EE. UU.) (2001) y
Sensititre ARIS 2X (Trek Diagnostic Systems, Oakwood Village, Ohio, EE. UU.) (2004) son los principales sistemas
aprobados por la FDA para AST. Vitek y Pheonix detectan bacterias en crecimiento en función de la turbidez, mientras
que sistemas automatizados comparables como MicroScan WalkAway (Beckman Coulter, Inc. Atlanta, Georgia, EE.
UU.) y Sensititre ARIS 2X (se basan en la emisión de fluorescencia de las bacterias en crecimiento). La resistencia en
gramos -negativas, grampositivas yEstreptococoLas cepas de bacterias se pueden estimar fácilmente a través de
Phoenix y Vitek 2, pero MicroScan WalkAway y Sensititre ARIS 2XESBL (Trek Diagnostic Systems, Oakwood Village,
Ohio, EE. UU.) son capaces de detectar la betalactamasa de espectro extendido (BLEE). cepas en las especies
mencionadas anteriormente [63]. Micronaut y Avantage son capaces de realizar pruebas de susceptibilidad directa
precisas para bacterias grampositivas y gramnegativas, respectivamente [64,sesenta y cinco].
La incompatibilidad de detección de muchas bacterias/antibióticos utilizando Sensititre ARIS 2 y Vitek 1 ha

llevado al desarrollo de Sensititre ARIS 2X y Vitek 2 actualizados, que tienen mejores rendimientos y son
aplicables a una gama más amplia de bacterias/antibióticos. Actualmente, todos los sistemas automatizados
están incorporados con un software de sistema experto avanzado para mejorar el rendimiento y el
procesamiento de datos en línea [28]. Cada sistema automatizado tiene una capacidad de panel específica y un
tiempo promedio para realizar la detección, que varía de 40 a 100 pozos, y puede variar en tiempo como 20, 12
y 9 h, respectivamente. Ciertos modelos, como Phoenix AP y Vitek 2Xl, están dedicados a la inoculación
automatizada, capacidad de tarjeta mejorada y compacidad.
Los sistemas antes mencionados carecen de reproducibilidad, sensibilidad y confiabilidad en comparación con los
métodos tradicionales existentes. Además, la incapacidad de probar una amplia gama de bacterias clínicamente relevantes
(por ejemplo,S. neumonía), agentes antimicrobianos (p. ej., vancomicina) y aislamientos heterorresistentes, así como una
capacidad limitada del panel y el alto costo de los instrumentos y consumibles, son problemas importantes que restringen el
análisis frecuente de estos sistemas [66].
3. Métodos AST genotípicos
La AST molecular o genotípica son los métodos directos efectivos que eliminan los tediosos cultivos bacterianos,
la larga incubación, las posibilidades de contaminación y la propagación de infecciones mortales.67]. La PCR, los
microarrays de ADN y los chips de ADN, y la amplificación isotérmica mediada por bucle (LAMP) son algunas de las
técnicas genotípicas para la detección de resistencia a los antibióticos. Evaluación mutacional de la resistencia a la
meticilina enStaphylococcus spp., resistencia a vancomicina enEnterococcus spp., y resistencia a múltiples antibióticos
(isoniazida, rifampicina, estreptomicina, pirazinamida y las fluoroquinolonas) enmicobacteria spp. han sido estimados
con éxito a través de diversas técnicas genotípicas.
La PCR es una de las herramientas moleculares más eficaces y rápidas para la cuantificación y el perfilado de
genes bacterianos infecciosos. El primer informe sobre la aplicación de diagnóstico de PCR fue publicado por Saiki et
al. [68]. La metodología general de la PCR incluye ciclos de desnaturalización, hibridación de los cebadores y
elongación de los cebadores mediante una ADN polimerasa termoestable en un tampón compatible que contiene
nucleótidos, iones, etc. Cada ciclo de amplificación duplica la molécula de ADN objetivo. Se puede confirmar la
presencia de genes de resistencia en el objetivo amplificado mediante electroforesis, transferencia Southern,
polimorfismo de longitud de fragmentos de restricción, polimorfismo de conformación de cadena sencilla (SSCP),
huellas dactilares de ADN, balizas moleculares y otros métodos de análisis de secuenciación de ADN (Figura3) [68,69].
Otra herramienta desarrollada en base a PCR es LAMP, que también se ha utilizado para la evaluación de AST. En
LAMP, el gen de interés se amplifica a una temperatura constante de 60-65◦C usando unBSTADN polimerasa en lugar
deTaq polimerasa debido a la fuerte actividad de desplazamiento de cadena (requerido en técnicas isotérmicas) [70].
Figura 3.Identificación bacteriana basada en análisis de fusión de alta resolución (HRM) por PCR digital a partir de
muestras bacterianas mixtas, reproducida con permiso de [71], publicado por American Chemical Society, 2017.
(SVM: Support-vector machine)
Los microarrays de ADN y los chips de ADN son otras tecnologías prometedoras utilizadas para detectar la
susceptibilidad.72]. Las matrices de ADN emplean sondas de fragmentos de ADNc en una membrana de nailon,
donde cada chip de ADN tiene una plataforma de vidrio o silicona para la unión de la sonda. La hibridación específica
de la sonda marcada con la diana y su reconocimiento ayudan a determinar la resistencia. Determinación de la
resistencia a la isoniazida enTuberculosis M.se ha llevado a cabo con éxito a través de chips y microarreglos de ADN [
73,74]. La detección colorimétrica y la multiplexación son las características atractivas de estas técnicas.
Los métodos genotípicos se atribuyen generalmente a la detección rápida, directa, sensible y específica de genes
de resistencia, pero también presentan graves inconvenientes que disminuyen su utilidad clínica. Estos inconvenientes
incluyen: (i) los agentes antimicrobianos individuales a probar necesitan un ensayo específico
para detección; (ii) solo se pueden detectar genes de resistencia clave/potenciales, que a menudo no son relevantes
debido a mutaciones coincidentes; (iii) hay una falta de sensibilidad hacia los pacientes con infecciones latentes, o
cuando solo unos pocos organismos están presentes en una muestra; (iv) el mecanismo/perfil genético para la
resistencia de todas las bacterias aún no está definido; (v) puede esperarse la ocurrencia de resultados falsos positivos
debido a la contaminación de la muestra de prueba; (vi) requieren reactivos costosos y maquinaria con condiciones
específicas de mantenimiento; y lo más importante (vii) todas las herramientas tienen un requisito previo de personal
calificado [67].
4. Métodos emergentes para AST
Los diagnósticos basados en microfluidos son una de las herramientas emergentes más prometedoras
para AST. La microfluídica es un campo en evolución caracterizado por la manipulación de fluidos en
microvolúmenes, lo que ofrece portabilidad, rentabilidad, multiplexación, reproducibilidad y un entorno
controlable en un sistema in vitro.12]. El concepto se introdujo por primera vez en las industrias de
semiconductores y sistemas microelectromecánicos (MEMS), y luego se extendió al campo de la investigación
biomédica.75]. Dispositivos microfluídicos integrados, generalmente denominados microsistemas de análisis
total (µTAS), son competentes en la realización de diagnósticos moleculares [76].
La cantidad de muestras siempre ha sido el mayor desafío para los estudios biológicos en general y los análisis
patológicos en particular. Dado que la microfluídica es capaz de manejar una cantidad mínima de muestras, se ha convertido
en una herramienta prometedora para los patólogos. Actualmente, las plataformas de microfluidos son capaces de realizar
análisis unicelulares e incluso pueden analizar la interrogación unicelular de redes de señalización en líneas celulares
cultivadas. En las últimas décadas, se han adoptado con éxito numerosas estrategias convencionales y automatizadas para
diagnosticar la resistencia cada vez mayor a los antibióticos en las bacterias.77]. Sin embargo, las técnicas más practicadas,
como la difusión en disco y la microdilución, tienen una alta probabilidad de contaminación cruzada, protocolos laboriosos,
largos tiempos de procesamiento, fuentes de alimentación inadecuadas y configuraciones engorrosas que dificultan su
aplicación en regiones con recursos limitados. y desafortunadamente, estas regiones también tienen una mayor tasa de
resistencia [2,6]. El auge de la microfluídica como herramienta de diagnóstico se ha mostrado prometedor para abordar las
deficiencias mencionadas anteriormente.78,79].
El progreso en la obtención de imágenes ópticas ha desarrollado varios sensores de imagen con alta sensibilidad y
resolución que son capaces de realizar análisis biológicos. Estos sistemas de imagen se utilizan con frecuencia para estudios
morfológicos y de crecimiento de bacterias. En general, debido al análisis en tiempo real y la dependencia mínima del cultivo,
los dispositivos de microfluidos junto con un sensor óptico pueden realizar AST y detectar el MIC en unas pocas horas.80].
Informes recientes basados en análisis de células bacterianas individuales han afirmado que los nanofluidos basados en
sensores ópticos (30 nl) pueden terminar el AST en 30 minutos [81]. Esta imagen directa de una sola bacteria requiere pasos
simples de preparación de muestras, pero elimina los tediosos pasos de la inyección continua de muestras, la carga de células
y la identificación de células basada en el conteo [81].
Las proteínas de fluorescencia y los colorantes se usan comúnmente para marcar biomarcadores resistentes. Estas
proteínas/colorantes pueden ser de origen biológico o químico. Una de las proteínas pioneras utilizadas para la obtención de
imágenes es la proteína fluorescente verde (GFP). GFP, obtenido de medusasaequoria victoria,es esencial para el monitoreo
no invasivo en tiempo real de la susceptibilidad a los antimicrobianos.82]. Además de esto, el mismo grupo pudo evaluar
múltiples sensibilidades a los antibióticos en tiempo real en cepas bacterianas de cultivos polimicrobianos (a saber,E. coli,P.
aeruginosa,yK. pneumoniae) simultaneamente. El etiquetado de proteínas fluorescentes verdes y rojas se ha utilizado para la
cuantificación del crecimiento en tiempo real en presencia de múltiples antibióticos en una plataforma microfluídica
multiplexada (Figura4) [83]. Todos estos métodos son sensibles y confiables, pero la creación de estas bacterias
recombinantes requiere un manejo molecular, lo cual es un desafío para las observaciones clínicas de rutina. Los tintes
fluorescentes son otro medio para el marcado de fluorescencia óptica. Estos productos químicos, con todos los beneficios de
la proteína de fluorescencia, pueden evitar el impedimento esteárico debido a su pequeño tamaño y la eliminación de la
clonación o transformación. El verde SYTOX y la resazurina (alamarBlue; precursor inactivo de la resazurina) son dos
colorantes indicadores de fluorescencia comunes que se utilizan para las pruebas de viabilidad en AST [84,85]. De manera
similar, la resazurina se puede utilizar en la detección colorimétrica. Cuando se complementa el medio de cultivo con
antibiótico y resazurina, se obtiene inicialmente un color azul intenso uniforme.
En presencia de resistencia, la resazurina se reduce a resafurina, y el color azul intenso cambia a rosa y leuco;
en ausencia de resistencia en las bacterias, el color azul se mantiene. Este método también se traduce a un
chip de microfluidos para la estimación de MIC para cuatro antibióticos diferentes contra 20 cepas clínicas de
EscherichiayShigela[85].
Figura 4.Demostración de sensores para pruebas de susceptibilidad antibacteriana que involucran (a) un
biosensor óptico de microfluidos, que muestra la detección óptica de cultivos microbianos, reproducido con
permiso de [83], publicado por RCS Avances, 2015; y (B) un biosensor electroquímico, la detección se basó en la
hibridación del ARNr 16S bacteriano diana con una sonda detectora, adaptada con permiso de Liu [86] (bajo los
términos de la licencia de atribución Creative Commons).
De manera similar, el ensayo de bioluminiscencia o bioluminiscencia de ATP (ATP-BLA) es un enfoque basado en

enzimas mediado por la enzima luciferasa que convierte el sustrato de luciferina en oxiluciferina en presencia de ATP, lo que
conduce a una emisión de luz.87]. Mediante el uso de este fenómeno, se evaluó la susceptibilidad de 13 tipos diferentes de
cepas clínicas presentes en las infecciones urinarias frente a ocho antibióticos en la placa de microfluidos. Cuando las
bacterias crecieron en presencia de antibióticos, las bacterias resistentes resultaron en bioluminiscencia, mientras que las
bacterias susceptibles permanecieron neutrales. Tanto la identificación como la susceptibilidad se obtuvieron en un plazo de
3 a 6 h [88,89].
Se han desarrollado varios dispositivos electroquímicos para AST. Uno de los trabajos más destacados utilizó el
movimiento electrocinético de fluidos AC y la elevación de temperatura inducida por calentamiento Joule para la detección
electroquímica del ARNr bacteriano 16S (Figura4) [86]. Es posible una detección rápida y en tiempo real, ya que el ARNr 16s es
altamente específico para los patógenos bacterianos en el hemocultivo y no necesita purificación previa. Aunque el ARNr 16S
ha proporcionado detalles críticos sobre el análisis bacteriano sensible, las complejidades genéticas entre reinos lo hacen
inapropiado para pruebas de susceptibilidad reproducibles, clínicamente relevantes o en el punto de atención. El uso de
productos químicos electroactivos (reactivos redox) como moléculas de prueba puede ser un enfoque interesante para
dilucidar la susceptibilidad bacteriana. En 2015 se estudió la piocianina, un potencial marcador de viabilidad y virulencia
celular, para la monitorización electroquímica de la susceptibilidad deP. aeruginosabiopelículas en un dispositivo de
microfluidos [90]. Una buena correlación entre la caída de la señal eléctrica y la viabilidad deP. aeruginosalas células en
presencia de antibióticos se demostró con éxito. El biosensor electroquímico más reciente puede realizar AST en 90 minutos
junto con el aislamiento de bacterias sin etiqueta de muestras de sangre entera [91]. Los microchips de plástico con electrodos
impresos capturan las bacterias objetivo con la ayuda de anticuerpos específicos. La respuesta electroquímica a las bacterias
capturadas se controla tanto en presencia como en ausencia de antibióticos.
El sistema simplificado de cultivo de sangre (SBCS) es una herramienta emergente en herramientas de vigilancia y
pruebas cercanas al paciente para infecciones del torrente sanguíneo (BSI) [92]. Los SBCS utilizan muestras sin procesar, por
lo que no requieren tiempo de preparación de muestras. Además, los SBCS combinan la detección, el estado de Gram y la
identificación en instrumentos de hemocultivo (BC), lo que garantiza la evaluación de la susceptibilidad.
dentro de 8 a 12 h, mientras que el sistema de hemocultivo convencional requiere hasta 48 h debido a la incubación para la
generación de colonias y las pruebas de susceptibilidad. Además, debido a su naturaleza simplificada y eficiente en el tiempo,
el SBCS se puede utilizar en entornos con recursos limitados, lo que no era posible con los métodos convencionales de BC
debido a la falta de electricidad, botellas de cultivo limitadas, polvo profuso, control inadecuado de la temperatura ambiente y
falta de personal calificado [92].
5. Desafíos y Perspectiva Futura
Principalmente, el flujo continuo de medios de cultivo para alimentar las células es el mayor desafío para
mantener las condiciones de los nutrientes, ya que un ligero cambio en los medios de cultivo debido a la evaporación
puede afectar el crecimiento bacteriano y, por lo tanto, la precisión de AST.93,94]. La precisión de la AST podría
mejorarse al considerar los factores que alteran su farmacocinética (difusión, metabolismo y eliminación), lo que
puede provocar cambios impredecibles y, por lo tanto, la CIM podría cambiar. Además, para evitar el uso
indiscriminado de antibióticos y la evolución de la resistencia a los antibióticos, el esquema de dosificación también
debe considerar el método de administración de antibióticos (por ejemplo, administración oral versus intravenosa (IV))
y el sitio de infección, junto con los resultados de AST [95].
La aplicabilidad de las herramientas de biología molecular, como la clonación y la expresión
recombinante, ha mejorado la sensibilidad de detección y se pueden evaluar bajas concentraciones de
bacterias en muestras clínicas, pero existen algunas limitaciones importantes. La creación de cepas
recombinantes con estos genes moleculares es un proceso problemático. En primer lugar, el análisis genético
es engorroso y propenso a mutaciones debido al cambio frecuente en el comportamiento resistente de las
bacterias.96]. Por lo tanto, es esencial el conocimiento previo de los genes de resistencia específicos antes de
las pruebas de susceptibilidad. En segundo lugar, aún se desconocen los marcadores genéticos para todas las
bacterias clínicamente relevantes; además, los objetivos conocidos no son universales. En tercer lugar, las
habilidades avanzadas de biología molecular y los equipos de laboratorio son importantes para manejar la
tecnología recombinante. Como alternativa, se utilizan colorantes de etiquetas de fluorescencia para evitar
desafíos moleculares. Aunque el uso de tintes es simple y fácil en comparación con otras técnicas moleculares,
el requisito de una cámara de dispositivo acoplado por carga (CCD) de alta resolución e instrumentos
sofisticados para amplificación y observación de señales está restringido a áreas con recursos limitados. Los
resultados falsos positivos debidos a cambios en los parámetros físicos también son un problema importante.
Adicionalmente,97,98].
Mirando más allá de los requisitos de imágenes, los investigadores también deben centrarse en otras preguntas
relevantes sin respuesta en el contexto de los dispositivos de diagnóstico. Esto incluye principalmente qué métricas de
desempeño serán esenciales para disminuir la exposición a la contaminación de hospitales o unidades de
investigación biomédica y, en segundo lugar, qué avances serán necesarios para reducir la incorporación de circuitos
externos sofisticados, bombas y sistemas neumáticos para mantener la continuidad del flujo en plataforma de
microfluidos Para abordar estos problemas, el sistema de detección basado en papel parece ser un enfoque atractivo
para desarrollar una plataforma rentable, automatizada e incinerable para la determinación de la susceptibilidad. En
las últimas décadas, la aparición de microfluidos basados en papel ha demostrado su rendimiento para ensayos
biológicos.99], y podría ser una base para reducir la contaminación a través de una fácil eliminación. Además, la
propiedad incorporada de acción capilar del papel puede eliminar la integración de cámaras y bombas neumáticas
complicadas. Por lo tanto, más trabajo de investigación sobre AST microfluídico de papel sería beneficioso en el futuro.
La ausencia de la detección simultánea de múltiples analitos y la necesidad de herramientas de fabricación más
simples son otras deficiencias de la microfluídica. La colaboración de firmas comerciales y de investigación académica
con una distribución de tecnología transparente podría ofrecer una solución convincente para la multiplexación y para
una fabricación más sencilla. Por lo tanto, serían valiosos los esfuerzos para expandir nuestra comprensión,
especialmente para el desarrollo de un dispositivo fácil de usar con multiplexación.
Los teléfonos inteligentes y la tecnología que los impulsa son cada vez más avanzados. La combinación de
herramientas fluorescentes/colorimétricas con los teléfonos inteligentes ubicuos y en constante evolución nos
permitirá monitorear en el sitio, actualizar la base de datos en tiempo real y generar un mapa de susceptibilidad a los
antibióticos para ayudarnos a comprender la prevalencia geográfica de la resistencia. El uso de
Los teléfonos inteligentes están limitados por el rendimiento de sus cámaras, lo que resulta en límites de detección
más bajos, especialmente en un ensayo colorimétrico [100]. Es emocionante especular que el avance en curso traerá
cámaras de resolución mucho más alta junto con mejores tecnologías de lapso de tiempo y ofrecerá mediciones
morfológicas y bioquímicas.
La reacción en cadena de la polimerasa con amplificación isotérmica mediada por bucle (LAMP-PCR) nos ha
mostrado el camino para desarrollar dispositivos de flujo lateral para la detección genética de la resistencia a los
antibióticos. Carbapenem-resistencia enAcinetobacter baumaniifue evaluado con éxito por LAMP-PCR mediante la
amplificación de los genes de carbapenemasas y metalo-β-lactamasas de tipo OXA [101]. Sin embargo, se justifican
más estudios para establecer la aplicabilidad de LAMP. En los próximos años, podría haber un aumento de mutantes
no infecciosos pero portadores de resistencia; la detección genética será esencial para descartar estos mutantes, y los
dispositivos de flujo lateral basados en LAMP servirán para ese propósito.
6. Conclusiones
Si bien todos los métodos AST ofrecen evaluaciones cualitativas utilizando categorías susceptibles, intermedias o
resistentes, ciertos métodos especifican una dosificación cualitativa y efectiva de antibióticos (p. ej., concentración
inhibitoria mínima) y formulan un perfil de terapia empírica para el manejo adecuado de la salud de pacientes
individuales contra infecciones mortales. . Un aumento en la resistencia a los antibióticos es una certeza, por lo que
debemos desarrollar tecnologías que permitan una AST rápida (en una hora) y que no sean invasivas (basadas en
saliva u orina) o mínimamente invasivas.
Materiales complementarios:Los siguientes están disponibles en línea enhttp://www.mdpi.com/2075-4418/9/2/49/s1.
Contribuciones de autor:ZAK, MFS y SP escribieron y editaron el manuscrito. Todos los autores leyeron y
aprobaron el manuscrito final.
Fondos:Este trabajo fue apoyado por la subvención de la Fundación Nacional de Investigación de Corea (NRF) financiada por
el gobierno coreano (MSIT) (NRF-2015R1C1A1A01054762).
Conflictos de interés:Los autores declaran no tener conflicto de intereses.
Referencias
1. Blair, JM; Webber, MA; Baylay, AJ; Ogbolu, DO; Piddock, LJ Mecanismos moleculares de resistencia a los antibióticos.
Nat. Rev. Microbiol.2015,13, 42–51. [Referencia cruzada] [PubMed]
2. MercadoInez, JL Antibióticos y genes de resistencia a antibióticos en ambientes naturales.Ciencia2008,321, 365–367. [
Referencia cruzada] [PubMed]
3. Lalitha, M. Manual sobre pruebas de susceptibilidad antimicrobiana. EnEstándares de desempeño para pruebas antimicrobianas: duodécimo
suplemento informativo; CLSI: Wayne, Pensilvania, EE. UU., 2004; Volumen 56238, págs. 454–456.
4. Van Boeckel, TP; Gandra, S.; Ashok, A.; Caudron, Q.; Grenfell, BT; Levin, SA; Laxminarayan, R. Consumo mundial de
antibióticos de 2000 a 2010: un análisis de los datos de ventas farmacéuticas nacionales. Lanceta Infectada. Dis.
2014,14, 742–750. [Referencia cruzada]
5. Lee, C.-R.; Cho, IH; Jeong, BC; Lee, SH Estrategias para minimizar la resistencia a los antibióticos.En t. J. Medio Ambiente. Res. Salud
pública2013,10, 4274–4305. [Referencia cruzada]
6. Ayukekbong, JA; Ntemgwa, M.; Atabe, AN La amenaza de la resistencia a los antimicrobianos en los países en desarrollo: Causas y
estrategias de control.Antimicrobiano Resistir. Infectar. Control2017,6, 47. [Referencia cruzada]
7. Brogan, DM; Mossialos, E. Un análisis crítico de la revisión del informe sobre la resistencia a los antimicrobianos y el mecanismo de
financiación de enfermedades infecciosas.globo Salud2016,12, 8. [Referencia cruzada]
8. Viens, AM; Littmann, J. ¿Es la resistencia a los antimicrobianos un desastre que emerge lentamente?Ética de la salud pública2015, 8, 255–265. [
Referencia cruzada]
9. Kasim, A.; Omuse, G.; Premji, Z.; Revathi, G. Comparación del Instituto de Estándares de Laboratorio Clínico y las pautas del
Comité Europeo de Pruebas de Susceptibilidad a los Antimicrobianos para la interpretación de la susceptibilidad a los
antibióticos en un hospital docente universitario en Nairobi, Kenia: un estudio transversal.Ana. clin. Microbiol.
Antimicrobiano2016,15, 21. [Referencia cruzada] [PubMed]
10. Ventola, CL La crisis de la resistencia a los antibióticos: Parte 1: Causas y amenazas.Farmacia El r.2015,40, 277–283.
11. Tacconelli, E.; Carrara, E.; Savoldi, A.; Harbarth, S.; Mendelson, M.; Monnet, DL; Pulcini, C.; Kahlmeter, G.; Kluytmans, J.; Carmeli, Y.; et
al. Descubrimiento, investigación y desarrollo de nuevos antibióticos: la lista de prioridades de la OMS de bacterias resistentes a
los antibióticos y tuberculosis.Lanceta Infectada. Dis.2018,18, 318–327. [Referencia cruzada]
12. Bauer, AW; Kirby, WM; Sherris, JC; Turck, M. Pruebas de susceptibilidad a los antibióticos mediante un método estandarizado de un
solo disco.Soy. J. Clin. Patol.1966,45, 493–496. [Referencia cruzada] [PubMed]
13. Reller, LB; Weinstein, M.; Jorgensen, JH; Ferraro, MJ Pruebas de susceptibilidad a los antimicrobianos: una revisión de los principios
generales y las prácticas contemporáneas.clin. Infectar. Dis.2009,49, 1749–1755. [Referencia cruzada]
14. Fleming, A. Sobre la acción antibacteriana de cultivos de un penicillium, con especial referencia a su uso en el aislamiento
de B. influenzae.Hermano Exp. J. Patol.1929,10, 226. [Referencia cruzada]
15. Abraham, EP; Cadena, E.; Fletcher, CM; Gardner, AD; Heatley, NG; Jennings, MA; Florey, HW Otras observaciones
sobre la penicilina.Lanceta1941,238, 177–189. [Referencia cruzada]
16. Foster, JW; Woodruff, HB Aspectos microbiológicos de la penicilina: I. Métodos de ensayo.J. Bacteriol.1943,46, 187.
17. Vicente, JG; Vicente, HW; Morton, J. Modificación del disco de papel de filtro de la determinación de penicilina en la copa
Oxford.proc. Soc. Exp. Biol. Medicina.1944,55, 162–164. [Referencia cruzada]
18. Gavin, JJ Microbiología analítica: II. Los métodos de difusión.aplicación Microbiol.1957,5, 25.
19. Hoyt, RE; Levine, MG Un método para determinar la sensibilidad a la penicilina y la estreptomicina. Ciencias
(Washington)1947, 171. [Referencia cruzada]
20. Bondi, A., Jr.; Spaulding, EH; Smith, DE; Dietz, CC Un método de rutina para la determinación rápida de la susceptibilidad a
la penicilina y otros antibióticos.Soy. J.Med. ciencia1947,213, 221–225. [Referencia cruzada]
21. Gould, JC La determinación de la sensibilidad bacteriana a los antibióticos.Edinb. Medicina. j1952,59, 178–199. [
PubMed]
22. Stokes, EJ Pruebas de sensibilidad a los antibióticos.Hermano Medicina. j1971,2, 707. [Referencia cruzada]
23. Mayrhofer, S.; Domig, KJ; Mair, C.; Zitz, U.; Huys, G.; Kneifel, W. Comparación de los métodos de microdilución en caldo, Etest y
difusión en disco de agar para las pruebas de susceptibilidad antimicrobiana de los miembros del grupo Lactobacillus
acidophilus.aplicación Reinar. Microbiol.2008,74, 3745–3748. [Referencia cruzada]
24. Organización Mundial de la Salud.Normalización de métodos para realizar pruebas de sensibilidad microbiana: segundo informe del Comité
de Expertos en Antibióticos [Reunión celebrada en Ginebra del 11 al 16 de julio de 1960]; OMS: Ginebra, Suiza, 1961.
25. Patel, JB; Tenover, FC; Turnidge, JD; Jorgensen, JH Métodos de prueba de susceptibilidad: Métodos de dilución y difusión en
disco. Enmanual de microbiología clínica, 10ª ed.; Sociedad Estadounidense de Microbiología: Sterling, VA, EE. UU., 2011;
págs. 1122–1143.
26. Hombach, M.; Zbinden, R.; Bottger, EC Estandarización de los resultados de la difusión en disco para las pruebas de susceptibilidad a los
antibióticos utilizando el lector de zona automatizado sirscan.BMC Microbiol.2013,13, 225. [Referencia cruzada]
27. Murray, PR Pruebas de susceptibilidad a los antibióticos. Parte I.Laboratorio. Medicina.1983,14, 345–350. [Referencia cruzada]
28. Felmingham, D.; Brown, DF Instrumentación en pruebas de susceptibilidad antimicrobiana.J. Antimicrobiano. Quimioterapia. 2001,48, 81–85. [
Referencia cruzada]
29. Sageerabanoo, S.; Malini, A.; Mangaiyarkarasi, T.; Hemalatha, G. Detección fenotípica de aislamientos clínicos productores de β-
lactamasa de espectro extendido y β-lactamasa Amp-C en un hospital de atención terciaria: un estudio preliminar.J.Nat. ciencia
Biol. Medicina.2015,6, 383–387. [Referencia cruzada] [PubMed]
30. Sader, SA; Pignatari, Prueba AC E: Una nueva técnica para la prueba de susceptibilidad antimicrobiana.San Pablo Med. J. Rev. Pablo.
Medicina.1994,112, 635–638. [Referencia cruzada] [PubMed]
31. Guardino, RFHistoria temprana de la microbiología y los métodos microbiológicos; Asociación de Medicamentos Parenterales:
Wilmington, DE, EE. UU., 2005.
32. Rittenberg, SC Tres siglos de microbiología. Hubert, A. Lechevalier y Morris Solotorovsky. McGraw-Hill,
Nueva York, 1965. viii + 536 págs. Papel, $4,95.Ciencia1965,149, 530–531. [Referencia cruzada]
33. Poupard, JA; Rittenhouse, San Francisco; Walsh, LR La evolución de los métodos de prueba de susceptibilidad a los antimicrobianos.
EnPruebas de susceptibilidad antimicrobiana; Springer, Plenum Publishing: Nueva York, NY, EE. UU., 1994; págs. 3–14.
34. Ericsson, HM; Sherris, JC Pruebas de sensibilidad a los antibióticos. Reporte de un estudio colaborativo internacional. Acta
Pathol. Microbiol. Escanear.1971, 90.
35. Jorgensen, JH; Turnidge, JD; Washington, JA; Murray, relaciones públicas; Pfaller, MA; Tenover, FC; Barón, EJ; Yolken,
RH Pruebas de susceptibilidad antibacteriana: Métodos de dilución y difusión en disco. Enmanual de
microbiología clínica; Geo. F. Brooks Editor: Washington, DC, EE. UU., 1999.
36. Phelps, EB Un método para calcular el número de B. coli a partir de los resultados de las pruebas de dilución.Soy. J. Higiene Pública. 1908,18,
141.
37. McCrady, M. Tablas para una interpretación rápida de los resultados del tubo de fermentación.salud pública j.1918,9, 201–220.
38. Caña, J.Informe del Comité Asesor sobre OffEstándares de Agua Social; Informes de Salud Pública; Sage Publications, Inc.:
Teller Road, AK, EE. UU., 1925; Volumen 40.
39. Greenwood, M.; Yule, GU Sobre la interpretación estadística de algunos métodos bacteriológicos empleados en el análisis del agua.
J. hig.1917,dieciséis, 36. [Referencia cruzada]
40. Fisher, RA Métodos estadísticos para trabajadores de investigación. EnAvances en Estadística; Springer, Oliver & Boyd: Nueva York,
NY, EE. UU., 1992; págs. 66–70.
41. Trigo, PF Historia y desarrollo de la metodología de prueba de susceptibilidad a los antimicrobianos.J. Antimicrobiano. Quimioterapia. 2001,48
, 1–4. [Referencia cruzada]
42. Tang, Y.-W.; Stratton, CWTécnicas Avanzadas en Microbiología Diagnóstica; Springer: Nashville, Tennessee, EE. UU., 2012.
43. Waites, KB; Duffy, LB; BmiBmiar, CM; Matlow, A.; Talkington, DF; Kenny, GE; Totten, Pensilvania; malo, DJ; Zheng, X.;
Davidson, MK Métodos estandarizados y límites de control de calidad para pruebas de susceptibilidad de
microdilución en caldo y agar de Mycoplasma pneumoniae, Mycoplasma hominis y Ureaplasma urealyticum.
J. Clin. Microbiol.2012,50, 3542–3547. [Referencia cruzada]
44. Collins, AM; Craig, G.; Zaimán, E.; Roy, TE Una comparación entre los métodos de disco-placa y tubo-dilución para las pruebas de
sensibilidad a los antibióticos de las bacterias.Poder. J. Salud Pública/Rev. Can. Santée Publique1954,45, 430–439.
45. Picard, J.Bacteriología y Micología Veterinaria Aplicada: Técnicas Bacteriológicas; Universidad de Pretoria, Afripip:
Pretoria, Sudáfrica, 1990.
46. Sánchez, ML; Jones, RN Prueba E, un método de prueba de susceptibilidad antimicrobiana con amplia aplicación clínica y
epidemiológica.Antimicrobiano Noticias1992,8, 1–7. [Referencia cruzada]
47. Joyce, LF; Downes, J.; Stockman, K.; Andrew, JH Comparación de cinco métodos, incluida la prueba del Epsilómetro PDM
(prueba E), para la prueba de susceptibilidad antimicrobiana de Pseudomonas aeruginosa.J. Clin. Microbiol. 1992,30,
2709–2713.
48. Panadero, CN; Stocker, SA; Culver, DH; Thornsberry, C. Comparación de la prueba E con las técnicas de prueba de susceptibilidad de
dilución en agar, microdilución en caldo y difusión en agar mediante el uso de un conjunto especial de bacterias.
J. Clin. Microbiol.1991,29, 533–538.
49. Glupczynski, Y.; labbmi,METRO.; Hansen, W.; Crokaert, F.; Yourassowsky, E. Evaluación de la prueba E para la prueba
cuantitativa de susceptibilidad antimicrobiana de Helicobacter pylori.J. Clin. Microbiol.1991,29, 2072–2075.
50. Van Dyck, E.; Smet, H.; Piot, P. Comparación de la prueba E con dilución de agar para la prueba de susceptibilidad antimicrobiana
de Neisseria gonorrhoeae.J. Clin. Microbiol.1994,32, 1586–1588.
51. Schulz, JE; Sahm, DF Confiabilidad de la prueba E para la detección de resistencia a ampicilina, vancomicina y
aminoglucósidos de alto nivel en Enterococcus spp.J. Clin. Microbiol.1993,31, 3336–3339.
52. No puedoon, R.; Livermore, DM; Morosini, MI; DIaz-Regañon, J.; Rossolini, GM Prueba®versus microdilución en caldo para
la determinación de CIM de ceftarolina con Staphylococcus aureus: resultados de PREMIUM, un estudio multicéntrico
europeo.J. Antimicrobiano. Quimioterapia.2017,72, 431–436. [Referencia cruzada]
53. Skov, R.; Smith, R.; Larsen, AR; Bolmstrom, A.; Karlsson, A.; Molinos, K.; Frimodt-Moller, N.; Kahlmeter, G. Detección
fenotípica de resistencia a la meticilina en Staphylococcus aureus mediante pruebas de difusión en disco y Etest en agar
Mueller-Hinton.J. Clin. Microbiol.2006,44, 4395–4399. [Referencia cruzada] [PubMed]
54. Hariharan, H.; Sharma, S.; Chikweto, A.; Mateo, V.; DeAllie, C. Resistencia a los fármacos antimicrobianos determinada por la prueba
E en aislados de Campylobacter jejuni, C. coli y C. lari del ciego de pollos de engorde y ponedoras en Granada.compensación
inmunol. Microbiol. Infectar. Dis.2009,32, 21–28. [Referencia cruzada]
55. Falagas, ME; Karageorgopoulos, DE Organismos productores de β-lactamasa de espectro extendido.J.Hosp. Infectar. 2009,73, 345–
354. [Referencia cruzada]
56. Frosch, M.; Doncella, MCJManual de enfermedad meningocócica: biología de la infección, vacunación, manejo clínico; John
Wiley & Sons: Hoboken, NJ, EE. UU., 2006.
57. Balouiri, M.; Sadiki, M.; Ibnsouda, SK Métodos para evaluar in vitro la actividad antimicrobiana: una revisión.
J. Pharm. Anal.2016,6, 71–79. [Referencia cruzada]
58. Bernardo, K.; Pakulat, N.; Macht, M.; Krut, O.; Seifert, H.; Fleer, S.; Hunger, F.; Krönke, M. Identificación y discriminación de cepas de
Staphylococcus aureus mediante espectrometría de masas de tiempo de vuelo de desorción/ionización láser asistida por matriz.
proteómica2002,2, 747–753. [Referencia cruzada]
59. Hrabak, J.; ChudC.Akova,MI.; Walkova,R. Espectrometría de masas de ionización por desorción láser asistida por matriz: tiempo de
vuelo (MALDI-TOF) para la detección de mecanismos de resistencia a los antibióticos: desde la investigación hasta el diagnóstico
de rutina.clin. Microbiol. Rvdo.2013,26, 103–114. [Referencia cruzada] [PubMed]
60. Jung, J.; Eberl, T.; Sparbier, K.; Lange, C.; Kostrzewa, M.; Schubert, S.; Wieser, A. Detección rápida de resistencia a
antibióticos basada en espectrometría de masas e isótopos estables.EUR. J. Clin. Microbiol. Infectar. Dis.2014,33, 949–
61. Zimmermann, S.; Burckhardt, I. Desarrollo y Aplicación de MALDI-TOF para la Detección de Mecanismos de Resistencia. En
MALDI-TOF y MS en tándem para microbiología clínica; John Wiley & Sons: Hoboken, Nueva Jersey, EE. UU., 2017; págs.
231–248.
62. Richter, SS; Ferraro, MJ Instrumentación para pruebas de susceptibilidad y sistemas expertos computarizados para análisis e
interpretación de datos. Enmanual de microbiología clínica, 10ª ed.; Sociedad Estadounidense de Microbiología: Sterling, VA, EE.
UU., 2011; págs. 1144–1154.
63. Sellenriek, P.; Holmes, J.; Ferret, R.; Drury, R.; Storch, GA Comparación de MicroScan Walk-Away®, Fénix™ y VITEK-DOS®
Sistemas de microbiología utilizados en la identificación y pruebas de susceptibilidad de bacterias. En Proceedings of the
Abstr 105th General Meeting of the American Society for Microbiology, Atlanta, GA, EE. UU., 5 al 9 de junio de 2005.
64. Wright, DN; Matsen, JM; DiPersio, JR; Kirk, M.; sajón, B.; Ficorilli, SM; Spencer, HJ Evaluación de cuatro nuevos agentes
antimicrobianos en el sistema de prueba de susceptibilidad Avantage.J. Clin. Microbiol.1989,27, 2381–2383.
65. Wellinghausen, N.; Pietzcker, T.; Poppert, S.; Belak, S.; Fieser, N.; Bartel, M.; Essig, A. Evaluación del sistema Merlin
MICRONAUT para la prueba rápida de susceptibilidad directa de cocos grampositivos y bacilos gramnegativos
de hemocultivos positivos.J. Clin. Microbiol.2007,45, 789–795. [Referencia cruzada] [PubMed]
66. Karlowsky, JA; Richter, SS Sistemas de prueba de susceptibilidad a los antimicrobianos. Enmanual de microbiología clínica, 11ª ed.;
Sociedad Estadounidense de Microbiología: Sterling, VA, EE. UU., 2015; págs. 1274–1285.
67. Cockerill, FR Métodos genéticos para evaluar la resistencia a los antimicrobianos.Antimicrobiano Agentes Quimiotera.1999,43, 199–212. [
Referencia cruzada]
68. Flujo, CA; Visser, MR; Schmitz, F.-J. Detección molecular de la resistencia a los antimicrobianos.clin. Microbiol. Rvdo. 2001,14, 836–
871. [Referencia cruzada] [PubMed]
69. Molinero, MB; Tang, Y.-W. Conceptos Básicos de Microarrays y Aplicaciones Potenciales en Microbiología Clínica. clin.
Microbiol. Rvdo.2009,22, 611–633. [Referencia cruzada]
70. Li, Y.; Abanico, P.; Zhou, S.; Zhang, L. Amplificación isotérmica mediada por bucle (LAMP): una nueva plataforma de detección rápida
de patógenos.Microbio. Pato.2017,107, 54–61. [Referencia cruzada]
71. Athamanolap, P.; Hsieh, K.; Chen, L.; Yang, S.; Wang, TH Identificación bacteriana integrada y pruebas de susceptibilidad
antimicrobiana mediante PCR y fusión de alta resolución.Anal. química2017,89, 11529–11536. [Referencia cruzada]
72. Frye, JG; Lindsey, RL; Rondeau, G.; Porwollik, S.; Largo, F.; McClelland, M.; Jackson, CR; Englen, MD; Meinersmann, RJ; Berrang, ME; et
al. Desarrollo de un microarreglo de ADN para detectar genes de resistencia antimicrobiana identificados en la base de datos del
Centro Nacional de Información Biotecnológica.Microbio. Resistencia a las drogas.2010, dieciséis, 9–19. [Referencia cruzada]
73. Gryadunov, D.; Mijailovich, V.; Lapa, S.; Roudinskii, N.; Donnikov, M.; Pan'kov, S.; Markova, O.; Kuz'min, A.;
Chernousova, L.; Skotnikova, O.; et al. Evaluación de la hibridación en micromatrices de oligonucleótidos para el
análisis de Mycobacterium tuberculosis resistente a fármacos.clin. Microbiol. Infectar.2005,11, 531–539. [
Referencia cruzada] [PubMed]
74. Huang, WL; Hsu, ZJ; Chang, TC; Jou, R. Detección rápida y precisa de Mycobacterium tuberculosis resistente a la rifampicina
y la isoniazida mediante una matriz de oligonucleótidos.clin. Microbiol. Infectar.2014,20, O542–O549. [Referencia
cruzada] [PubMed]
75. Sackmann, EK; Fulton, AL; Beebe, DJ El papel presente y futuro de la microfluídica en la investigación biomédica. Naturaleza2014,
507, 181–189. [Referencia cruzada]
76. Parque, S.; Zhang, Y.; Lin, S.; Wang, TH; Yang, S. Avances en la PCR microfluídica para el diagnóstico de enfermedades infecciosas en el punto
de atención.Biotecnología. Adv.2011,29, 830–839. [Referencia cruzada]
77. Abraham, WA; Maruf, SA; Erfán, AM; Nasef, SA; Jakee, JKE La aparición de genes resistentes a desinfectantes y
antibióticos en Escherichia coli aislada de pollos en Egipto.Veterinario. Mundo2019,12, 141–145. [Referencia
cruzada] [PubMed]
78. Mentón, DC; Laksanasopina, T.; Cheung, YK; Steinmiller, D.; Linder, V.; Parsa, H.; Wang, J.; Moore, H.; Rouse, R.;
Umviligihozo, G.; et al. Diagnóstico basado en microfluidos de enfermedades infecciosas en el mundo en desarrollo.Nat.
Medicina.2011,17, 1015–1019. [Referencia cruzada]
79. Martínez, AW; Phillips, ST; Whitesides, GM; Carrillo, E.Diagnósticos para el mundo en desarrollo: dispositivos analíticos basados en
papel para microfluidos; Publicaciones de ACS: Sterling, VA, EE. UU., 2009.
80. Chen, CH; Lu, Y.; Pecado, MLY; Mach, KE; Zhang, DD; Gau, V.; Liao, JC; Wong, PK Pruebas de susceptibilidad
antimicrobiana usando microcanales de alta relación superficie-volumen.Anal. química2010,82, 1012–1019. [
Referencia cruzada]
81. Baltekin, O.; Boucharin, A.; Anderson, DI; Elf, J. Prueba rápida de susceptibilidad a los antibióticos (FASTest) basada en mediciones de la tasa
de crecimiento de células individuales.bioRxiv2016. [Referencia cruzada]
82. Webb, JS; Barratt, SR; Sabev, H.; Nixon, M.; Eastwood, MI; Greenhalgh, M.; Handley, PS; Robson, GD Proteína
fluorescente verde como indicador novedoso de susceptibilidad antimicrobiana en Aureobasidium pullulans.
aplicación Reinar. Microbiol.2001,67, 5614–5620. [Referencia cruzada]
83. Mohan, R.; Sanpitakseree, C.; Desai, AV; Sevgen, SE; Schroeder, CM; Kenis, PJA Un enfoque microfluídico para estudiar el efecto de
las interacciones bacterianas en la susceptibilidad antimicrobiana en cultivos polimicrobianos.RSC Avanzado. 2015,5, 35211–
84. Kaláshnikov, M.; Lee, JC; Campbell, J.; Sharon, A.; Sauer-Budge, AF Una plataforma de microfluidos para pruebas rápidas de
susceptibilidad a antibióticos inducida por estrés de Staphylococcus aureus.Chip de laboratorio2012,12, 4523–4532. [Referencia
cruzada]
85. Elavarasan, T.; Chhina, SK; Ceniza, MP; Sankaran, K. Antibiograma colorimétrico basado en reducción de resazurina en chip plástico
microfluídico.Sens. Actuadores B Chem.2013,176, 174–180. [Referencia cruzada]
86. Liu, T.; Lu, Y.; Gau, V.; Liao, JC; Wong, PK Pruebas rápidas de susceptibilidad antimicrobiana con biosensores electrocinéticos mejorados para
el diagnóstico de infecciones bacterianas agudas.Ana. biomedicina Ing.2014,42, 2314–2321. [Referencia cruzada]
87. Marqués, SM; Esteves da Silva, JC Bioluminiscencia de luciérnaga: un enfoque mecánico de las reacciones catalizadas por luciferasa.
Vida IUBMB2009,61, 6–17. [Referencia cruzada]
88. Dong, T.; Zhao, X. Identificación rápida y pruebas de susceptibilidad de microbios uropatógenos a través del ensayo de
bioluminiscencia de ATP inmunoabsorbente en un simulador de microfluidos para la terapia con antibióticos.Anal. química 2015,
87, 2410–2418. [Referencia cruzada]
89. Ivancic, V.; Mastali, M.; Percy, N.; Gornbein, J.; Babbit, JT; Li, Y.; Landaw, EM; Bruckner, DA; Churchill, BM; Haake, DA
Determinación rápida de la susceptibilidad antimicrobiana de uropatógenos en muestras clínicas de orina mediante el
uso de bioluminiscencia de ATP.J. Clin. Microbiol.2008,46, 1213–1219. [Referencia cruzada]
90. Webster, TA; Sismaet, HJ; Goluch, ED Monitoreo electroquímico de la susceptibilidad a los antibióticos de las biopelículas
de Pseudomonas aeruginosa.Analista2015,140, 7195–7201. [Referencia cruzada]
91. Safavieh, M.; Pandya, HJ; Venkataraman, M.; Thirumalaraju, P.; Kanakasabapatía, MK; Singh, A.; Prabhakar, D.; Chug, MK;
Shafiee, H. Pruebas rápidas de susceptibilidad antimicrobiana en tiempo real con detección eléctrica en microchips de
plástico con electrodos impresos.Aplicación ACS. Mate. Interfaces2017,9, 12832–12840. [Referencia cruzada]
92. Dailey, PJ; Osborn, J.; Ashley, EA; Barón, EJ; Danza, DAB; Fusco, D.; Fanello, C.; Manabe, YC; Mokomane, M.; Newton, PN; et
al. Definición de los requisitos del sistema para el cultivo de sangre simplificado para permitir el uso generalizado en
entornos con recursos limitados.Diagnóstico2019,9, 10. [Referencia cruzada]
93. Rodríguez, FD; Simonsson, P.; Alling, C. Un método para mantener concentraciones constantes de etanol en medios de
cultivo celular.Alcohólico Alcohólico.1992,27, 309–313.
94. Dawson, AI Variaciones bacterianas inducidas por cambios en la composición de los medios de cultivo.J. Bacteriol. 1919,4,
133–148. [PubMed]
95. Schreckenberger, PC; Binnicker, MJ Optimización de los informes de pruebas de susceptibilidad a los antimicrobianos.
J. Clin. Microbiol.2011,49, T15–T19. [Referencia cruzada]
96. Martínez, JL; Baquero, F. Frecuencias de mutación y resistencia a antibióticos.Antimicrobiano Agentes Quimiotera. 2000,44, 1771–
97. Khan, ZA; Siddiqui, MF; Park, S. Progreso en las pruebas de susceptibilidad a los antibióticos: una revisión comparativa con especial
énfasis en los métodos microfluídicos.Biotecnología. Letón.2019,41, 221–230. [Referencia cruzada]
98. van Belkum, A.; Dunne, WM, Jr. Pruebas de susceptibilidad antimicrobiana de próxima generación.J. Clin. Microbiol. 2013,51, 2018–
99. Kim, S.; Masum, F.; Jeon, JS Desarrollos recientes de pruebas de sensibilidad a antibióticos fenotípicos basados en chips.
biochip j.2019,13, 43–52. [Referencia cruzada]
100. Huang, X.; Xu, D.; Chen, J.; Liu, J.; Li, Y.; Canción, J.; Ma, X.; Guo, J. Biosensores analíticos basados en teléfonos inteligentes. Analista
2018,143, 5339–5351. [Referencia cruzada]
101. Vergara, A.; Zboromyrska, Y.; Mosqueda, N.; Morosini, MI; GarcIa-helechoandez, S.; Roca, I.; Hipocresíaon, R.; Marco, F.; Vila, J.
Evaluación de una metodología basada en amplificación isotérmica mediada por bucle para detectar el transporte de
carbapenemasas en aislados clínicos de Acinetobacter.Antimicrobiano Agentes Quimiotera.2014,58, 7538–7540. [Referencia
cruzada] [PubMed]
©2019 por los autores. Licenciatario MDPI, Basilea, Suiza. Este artículo es un artículo de
acceso abierto distribuido bajo los términos y condiciones de la licencia Creative Commons
Attribution (CC BY) (http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/).

2019-Current and Emerging Methods of Antibiotic - En.es

Cargado por

Información del documento

Título original

Derechos de autor

Formatos disponibles

Compartir este documento

Compartir o incrustar documentos

Opciones para compartir

¿Le pareció útil este documento?

¿Este contenido es inapropiado?

Copyright:

Formatos disponibles

2019-Current and Emerging Methods of Antibiotic - En.es

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

Traducido del inglés al español - www.onlinedoctranslator.

Métodos actuales y emergentes de prueba de

Zeeshan A. Khan†, Mohd F. Siddiqui†y el parque Seungkyung *

Resumen:Las pruebas de susceptibilidad a los antibióticos (AST) especifican la dosis efectiva de

Palabras clave:Pruebas de susceptibilidad a antibióticos; resistencia; fenotípico; genotípico; bacterias

Diagnóstico2019,9, 49; doi:10.3390/diagnóstico9020049 www.mdpi.com/journal/diagnostics

real para el siglo XXI” [8].

2. Métodos AST fenotípicos

Recientemente, la aparición de varios instrumentos para analizar la zona de inhibición ha aumentado la

2.5. Sistemas Automatizados

La incompatibilidad de detección de muchas bacterias/antibióticos utilizando Sensititre ARIS 2 y Vitek 1 ha

3. Métodos AST genotípicos

4. Métodos emergentes para AST

De manera similar, el ensayo de bioluminiscencia o bioluminiscencia de ATP (ATP-BLA) es un enfoque basado en

5. Desafíos y Perspectiva Futura

Materiales complementarios:Los siguientes están disponibles en línea enhttp://www.mdpi.com/2075-4418/9/2/49/s1.

Conflictos de interés:Los autores declaran no tener conflicto de intereses.

También podría gustarte