Bioquímica Estructural 1(2-ING-A) C. Pastor, S. Calvo, J. Parra & K.

Rodríguez

IDENTIFICACION DE AMINOACIDOS

IDENTIFICATION OF AMINO ACIDS

C. Pastor, S. Calvo, J. Parra & K. Rodríguez1

Jueves, 21 de octubre de 2021

RESUMEN

La siguiente experiencia a desarrollar tiene como fin, identificar de manera práctica las principales
características que tienen los aminoácidos. Se utilizarán reactivos colorimétricos y otras sustancias
químicas, asimismo, algunos equipos del laboratorio que nos ayudarán a determinar cualidades
como el color que es especifico en cada caso. Cabe aclarar que dichas características se dan por la
interacción entre los reactivos, el radical, el grupo amino y carboxilo. Se emplearon algunos
aminoácidos como muestras trabajo para poder reconocer gracias a los implementos antes
mencionados que propiedades le da el radical al mismo y como interactúan los grupos funcionales.

Palabras Clave: Aminoácidos, Radical, Grupos Funcionales, Estructuras.

ABSTRACT

The purpose of the following experience to develop is to identify in a practical way the main
characteristics that amino acids have. Colorimetric reagents and other chemical substances will be
used, likewise, some laboratory equipment that will help us determine qualities such as the color
that is specific in each case. It should be clarified that these characteristics are given by the
interaction between the reactants, the radical, the amino group and the carboxyl. Some amino
acids were used as work samples to be able to recognize, thanks to the aforementioned
implements, what properties the radical gives to it and how the functional groups interact.

Key Words: Amino Acids, Radical, Functional Groups, Structures.

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1. INTRODUCCIÓN  AMINOÁCIDOS ESENCIALES: Los
aminoácidos esenciales no los puede producir el
Un aminoácido es una molécula orgánica con cuerpo. En consecuencia, deben provenir de los
un grupo amino (-NH2) en uno de los extremos de alimentos.
la molécula y un grupo carboxilo (-COOH) en el
otro extremo. Dos aminoácidos se combinan en
Los 9 aminoácidos esenciales son: histidina,
una reacción de condensación entre el grupo amino
isoleucina, leucina, lisina, metionina,
de uno y el carboxilo del otro, liberándose una
fenilalanina, treonina, triptófano y valina.
molécula de agua (deshidratación) y formando un
enlace amida que se denomina enlace peptídico,
 AMINOÁCIDOS NO ESENCIALES: No
estos dos "residuos" de aminoácido forman
esencial significa que nuestros cuerpos pueden
un dipéptido, si se une un tercer aminoácido se
producir el aminoácido, aun cuando no lo
forma un tripéptido y así, sucesivamente, hasta
obtengamos de los alimentos que consumimos.
formar un polipéptido. Esta reacción se genera de
manera natural dentro de las células, más
precisamente en los ribosomas. (1) Los aminoácidos no esenciales incluyen:
alanina, arginina, asparagina, ácido aspártico,
Todos los aminoácidos componentes de cisteína, ácido glutámico, glutamina, glicina,
las proteínas son L-alfa-aminoácidos. Esto significa prolina, serina y tirosina.
que el grupo amino está unido al carbono contiguo
al grupo carboxilo (carbono alfa) o, dicho de otro  AMINOÁCIDOS CONDICIONALES: Los
modo, que tanto el carboxilo como el amino están aminoácidos condicionales por lo regular no son
unidos al mismo carbono, además, a este carbono esenciales, excepto en momentos de
alfa se unen un hidrógeno y una cadena enfermedad y estrés.
(habitualmente denominada cadena lateral
o radical R) de estructura variable, que determina Los aminoácidos condicionales incluyen:
la identidad y las propiedades de cada uno de los arginina, cisteína, glutamina, tirosina, glicina,
diferentes aminoácidos. Existen cientos de ornitina, prolina y serina. (4)
radicales, pero solo 20 son los que conforman a
las proteínas. (2) La finalidad del trabajo es demostrar de manera
práctica como el radical del aminoácido es que le
La unión de varios aminoácidos da lugar a cadenas
confiere todas sus propiedades específicas, ya que
llamadas péptidos o polipéptidos, que se
a nivel general todos tienen la misma estructura,
denominan proteínas cuando la cadena
los que los diferencia es su radical que le dará
polipeptídica supera una cierta longitud (entre 50 y
comportamientos distintos a cada uno de estos y
100 aminoácidos) o la masa molecular total supera
obviamente esto influye en la función que
las 5000 uma y, especialmente, cuando tienen una
desempeñan a nivel organismo (planta).
estructura tridimensional estable definida. (3)

Los aminoácidos se clasifican en tres grupos: 2. SECCIÓN EXPERIMENTAL

En esta práctica se emplearán 10 aminoácidos de
 Aminoácidos esenciales los 20 que conforman a las proteínas, con el
objetivo de saber sus características químicas, es
 Aminoácidos no esenciales
decir saber que propiedades tiene el radical de
 Aminoácidos condicionales cada uno de estos y como interactúan sus grupos

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funcionales, todo esto con la ayuda de reactivos Millon
colorimétricos y algunos quipos del laboratorio. adicionar 0,5mL de solución de ácido
 Nitrito de sodio
nítrico concentrado, agitar muy bien y
2,1 MATERIALES Y ORDEN EXPERIMENTAL (NaNO2)5% dejar enfriar a temperatura ambiente
 Nitrito de sodio hasta la aparición de una coloración.
DE LAS PRUEBAS. (Tabla 1)
Adicionar NaOH 10 M hasta que la
(NaNO2)1% solución esté levemente básica
MATERIALES ORDEN EXPERIMENTAL (comprobar con papel tornasol)
 Tubos de PRUEBA 1: Tomar la muestra  Agua destilada
vegetal de estudio y macerar con 20mL  Ácido acético PRUEBA 5: Preparar las sustancias
ensayo
de agua, luego filtrar. que se observan en la tabla 2,
 Pipetas Pasteur glacial posteriormente adicionar a cada tubo 5
NOTA: Esta prueba se omite, puesto  Ácido sulfúrico gotas de reactivo de Millón. Agitar la
 Gradilla para que nosotros ya teníamos el extracto solución y colocarla en baño de maría
tubos de preparado, por lo que no fue necesario concentrado (70°C) durante 15 minutos. Pasado
hacerlo en el laboratorio. (El extracto este tiempo, dejar enfriar la solución y
ensayo  Ácido
empleado fue el de quinua) adicionar 5 gotas de solución nitrito de
 Beaker (100ml) sulfanílico1%en sodio (NaNO2)10g/L.
PRUEBA 2: Para todas las pruebas
 Pinza para se deben preparar 12 tubos de ensayo HCl 1M
PRUEBA 6: Preparar las sustancias
con las siguientes sustancias.  Carbonato de que se observan en la tabla 2,
tubos de
seguidamente adicionar a cada tubo
ensayo Tubo sodio
Sustancia 1mL de solución de ácido sulfanílico
(Na2CO3)5% (1% en HCl 1M). Mezclar la solución
 Papel filtro 1
1 mL de bebida con obtenida y colocar los tubos en hielo
 Mortero con  α-naftolo 1-
aspartame durante 10 minutos aproximadamente.
pistilo 2 naftol5% Pasado este tiempo, adicionar 1mL de
1 mL de extracto vegetal la solución de nitrito de sodio (NaNO2)
 Beaker de  agua de bromo
3 al 5% y mezclar bien.
1mLTyr  Acetato de
50mL
4 Colocar nuevamente los tubos en hielo,
 Papel tornasol 1mL Pro plomo2% durante 5 minutos y alcalinizar la
5  Hielo solución añadiendo 2mL de solución de
 Beaker de 1mL Gly carbonato de sodio (Na2CO3) al 5 %.
500mL 6  Planchas de
1mL Trp
 Embudo calentamiento PRUEBA 7: Preparar las sustancias
7
1mL Leu  Baño de maría que se observan en la tabla 2,
 Soluciones de posteriormente adicionar a cada tubo
8
aminoácidos al 1mL Phe a70°C 2mL de ácido acético glacial. Mezclar
9 vigorosamente la solución y adicionar
3%: Leu, Cys, 1mL His 2mL de ácido sulfúrico concentrado y
Pro, Met, Gly, 10 deje reposar los tubos.
1mL de Arg
Arg,Trp, Phe, 11 PRUEBA 8: Preparar las sustancias
1mL de Met que se observan en la tabla 2,
Tyr, His
12 seguidamente adicionar a cada
 Reactivo de 1mL de Cys solución 1mL de NaOH 10M, mezcle
Tabla 2 bien y adicione 3 gotas de α-naftolal
ninhidrina
PRUEBA 3: Preparar las sustancias 5%. Mezclar nuevamente y adicionar 5
 Ácido nítrico que se observan en la tabla 2, gotas de agua de bromo.
posteriormente, adicionar 5 gotas de
concentrado PRUEBA 9: Preparar las sustancias
solución de ninhidrina y colocara baño
 Hidróxido de de maría hirviendo, durante 5 minutos. que se observan en la tabla 2,
seguidamente se debe agregar 5 gotas
sodio10 M PRUEBA 4: Preparar las sustancias de NaOH 10M y 10 gotas de acetato de
 Solución de que se observan en la tabla 2, después plomo en solución, se debe calentar la

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mezcla hasta ebullición y verificar la
aparición de un precipitado de color
negro positivo para aminoácidos
sulfurados.
Tabla 1
2,2 ILUSTRACIONES, DESCRIPCIONES Y
DATOS OBTENIDOS, A PATIR DE LAS
REACCIONES. (Tabla 3)
ILUSTRACION PRUEBA 2 DESCRIPCION
El objetivo de esta prueba es
 REACCTIVOS SIN contextualizar a los
COMPLEMENTOS practicantes sobre la
naturaleza de los
aminoácidos, es decir mostrar
algunas características físicas
como el color, con la idea de
entender mejor que es con lo
que se va a trabajar.
Basándonos en el
fundamento de identificar
algunas propiedades físicas
Ilustración 1 (que se ven a simple vista),
identificamos que la mayoría
de sustancias posee un color
transparente, no obstante,
hay algunas excepciones
como en los tubos 1,3 y 6
donde se observan
coloraciones ligeramente
blancas y en el tubo 2 donde
se observa una coloración
amarilla muy suave.
Asimismo, se pudo identificar
Ilustración 2 a simple vista que el tubo 6
(Trp) poseía una densidad
mayor que las demás
sustancias, esto porque al
adicionarla al tubo se veía
como una textura algo similar
a la del aceite, aunque no tan
densa, es decir no era liquida
del todo, sino que se
observaba una textura algo
viscosa en muy baja medida.
Ilustración 3
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ILUSTRACION PRUEBA 3 DESCRIPCION
 REACTIVOS +  FUNDAMENTO QUIMICO
NINHIDRINA (SIN PRUEBA DE
CALENTAR) NINHIDRINA (HIDRATO
DE
TRICETOHIDRINDENO):
Todas aquellas sustancias
que presentan al menos un
grupo amino y uno carboxilo
libre, reaccionan con la
ninhidrina. La positividad se
Ilustración 4 manifiesta por la aparición de
un color violáceo o amarillo.
Debido a que las proteínas y
 REACTIVOS + los aminoácidos poseen esta
NINHIDRINA (CON característica, la reacción
TEMPERATURA) sirve para identificarlos.
Primero que nada, se observó
que al agregar la ninhidrina a
los tubos, todos cambian su
coloración original a una
coloración blancuzca o
amarillenta variando la
intensidad en cada uno de
estos, el denominador común
es que todos los tubos que
tenían sustancias
transparentes originalmente
Ilustración 5 presentan coloraciones más
suaves, mientras que, los que
ya tenían alguna coloración
primeramente, aumentan la
intensidad de la misma.
Posteriormente, se observó
que al someter los tubos a
baño maría por 5 minutos, la
mayoría de estos comienzan
a cambiar su coloración a un
tono morado o amarillo muy
intenso. Así que basándonos
en el principio químico de
Ilustración 6
esta prueba podemos decir
que las sustancias que
presentan al menos un grupo
amino y carboxilo libre son:
Los tubos 1,2,3,5,7,9,11 y
12.
Adicionalmente, podemos
Ilustración 7 decir que las sustancias de
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los tubos (4,6,8 y 10) no básica, siendo así se obtuvo
presentan grupos amino y que para obtener un pH de
carboxilo libres, ya que 10 se requiere de 1.7mL de
después de añadir el reactivo NaOH aproximadamente,
y someterlo a temperatura esto se ve en la ilustración
estos no cambiaron su 12.
coloración a un color morado
u amarillo. Las coloraciones se dan
ILUSTRACION PRUEBA 4 DESCRIPCION cuando se agrega el ácido
cítrico, pero estas intensifican
 FUNDAMENTO QUIMICO su color cuando alcalinizamos
 REACTIVOS + ACIDO PRUEBA DE la solución, es así que,
NITRICO + XANTOPROTEICA partiendo del fundamento
HIDROXIDO DE químico de esta prueba, las
SODIO Es una reacción que reconoce sustancias que tienen grupos
los aminoácidos que poseen benceno en su estructura
el grupo bencénico. Las son: Los tubos 2,3 y 6, esto
proteínas que tienen en su según la coloración naranja o
composición estos amarilla obtenida.
aminoácidos también darán la
reacción. La positividad se Los demás tubos según los
reconoce por la aparición de resultados no presentan
un color amarillo o verde grupos benceno es su
debido a la formación de estructura, ya que no
nitrocompuestos. cambiaron su coloración
transparentosa original.
Primero que nada, se observó
Ilustración 8
que al agregar el ácido cítrico PH INICAL (ACIDO)
a los reactivos, todos Ilustración 10
comienzan a calentarse, es
decir que se da una reacción
exotérmica, ya que se libera
temperatura, vapor y en
algunos casos había
burbujeo. Añadiendo ácido a
los reactivos es lógico pensar
que el pH va a tender a ser Ilustración 11
muy menor a 7, y esto se PH FINAL (BASICO)
comprueba con el papel
tornasol, que efectivamente
nos dice que el pH de las
soluciones es de 0, esto lo
podemos ver en la ilustración
11.

Por otro lado, la practica nos

dice que debemos alcalinizar Ilustración 12
las soluciones ligeramente, es
decir hacer que el pH sea
mayor a 7 sin pasar de 10 o ILUSTRACION PRUEBA 5 DESCRIPCION
11 por mucho, por lo que se  FUNDAMENTO QUIMICO
tuvo que ir agregando PRUEBA DE MILLON.
progresivamente NaOH e ir
 REACTIVOS +
midiendo el pH para que la El reactivo de Millón es un
MILLON + NITRITO
Ilustración 9 solución no quedara muy ensayo químico que sirve
DE SODIO

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para saber si existe tirosina
en la solución, si esto es así
se genera un coágulo blanco
que por calentamiento pasa a
color rojo. El mecanismo de
la reacción es poco conocido,
posiblemente por la
T2 T3 formación del complejo óxido
de mercurio y fenol.
Cuando se agrega el nitrito
de sodio a la solución, se
observa la formación de una
coloración oscura que con el
tiempo se va asentando en la
base del tubo, este
Ilustración 13 precipitado obtenido es más
grande en un tubo que en el
otro, nosotros asumimos que
esto se debe a la cantidad de
tirosina que esta presente en
las soluciones, es así que en
el tubo 2 donde está el
extracto de quinua hay una
cantidad más baja de tirosina
que en el tubo 3 donde hay
netamente tirosina.
Partiendo del fundamento
químico de esta prueba los
únicos tubos que dan positivo
son el tubo 2 y 3, por ende,
son los únicos fotografiados,
los demás tubos conservan
sus coloraciones originales,
por lo que se asume que dan
negativo ya que no se forma
ningún tipo de precipitado
 ESTRUCTURA DEL aun después de dejarlos
REACTIVO DE reposar por un tiempo.
MILLON Ilustración 14
ILUSTRACION PRUEBA 6 DESCRIPCION
 REACTIVOS + ACIDO  FUNDAMENTO QUIMICO
PRUEBA DE PAULY.
SULFANILICO +
NITRITO DE SODIO +
CARBONATO DE La prueba de Pauly se utiliza
SODIO (CON para detectar la presencia
TEMPERATURA BAJA) de tirosina o histidina en
proteínas. Las aminas,
fenoles e imidazoles
reaccionan con el ácido
sulfanílico diazotizado, en
condiciones alcalinas se
forma un color rojo por
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una reacción de
acoplamiento. Para esta
reacción las soluciones deben
enfriarse en baño de hielo
porque los compuestos
diazonio solo se forman en
frío. 
Cuando agregamos el ácido
sulfanilico y sometemos los
tubos a bajas temperaturas
no se forman ningún agente
colorimétrico, esto sucede
cuando se alcaliniza la
solución con el carbonato de
sodio, ya que al añadir este
reactivo y someter los tubos
a bajas temperaturas
observamos como
progresivamente se van
formando coloraciones rojas
muy intensas y algunas muy
suaves acercándose más a un
color anaranjado y en
algunos casos amarillo.
Basándonos en el
Ilustración 15
fundamento químico de la
prueba podemos decir que en
los tubos 2,6 y 9 hay
presencia segura de tirosina
o histidina, ya que en estos
tubos es en donde la
coloración rojiza es más
intensa. En los tubos 11 y 12
se podría decir que hay
presencia de estas
sustancias, pero en muy baja
cantidad, ya que la coloración
es muy suave acercándose al
color anaranjado, esto quizás
porque se contamino con
Ilustración 16 otro reactivo la pipeta de
estos tubos, de igual manera
los tubos que presentaron
coloración amarilla se
descartaron junto con los que
conservan la coloración
transparentosa significando
que estos son el control
negativo para la prueba de
Pauly.
Ilustración 17
ILUSTRACION PRUEBA 7 DESCRIPCION
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https://es.wikipedia.org/wiki/Amino
%C3%A1cido

2. Wilson, D. J., MD. (2019, 26 febrero).

Biosíntesis del aminoácido. News-Medical.Net.
Recuperado 16 de octubre de 2021, de
https://www.news-medical.net/life-sciences/Am
ino-Acid-Biosynthesis-(Spanish).aspx

3. Aminoácido. (s. f.). Genome.gov. Recuperado

16 de octubre de 2021, de
https://www.genome.gov/es/genetics-
glossary/Aminoacido
4. Aminoácidos. (s. f.). Medlineplus. Recuperado
16 de octubre de 2021, de
https://medlineplus.gov/spanish/ency/article/00
2222.htm

3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN

RESULTADOS. INFORMACIÓN
DISPONIBLE.

4. CONCLUSIONES

5. BIBLIOGRAFÍA

1. Colaboradores de Wikipedia. (2021f, octubre 6).

Aminoácido. Wikipedia, la enciclopedia libre.
Recuperado 16 de octubre de 2021, de

Facultad de Ciencias
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