UNIVERSIDAD NACIONAL JORGE BASADRE GROHMANN

CLASE N° 7 : RECOMBINACIÓN ESPECIFICA DE SITIO

MSc. Rosa María Liñán Abanto

 RECOMBINACIÓN ESPECIFICA DE SITIO
Es la recombinación entre dos segmentos de ADN con regiones cortas de similitud de
secuencias (20 pb)

CSSR: Recombinación especifica de sitio

conservadora

o Todo enlace del DNA que se rompe durante la

reacción se vuelve a restablecer por acción de
la recombinasa
o No se necesita energía externa para el corte y
el resellado del DNA
o Se genera un intermediario covalente: DNA-
proteína
Características de la
CSSR
o Consiste en el movimiento de secuencias
llamadas elementos móviles entre distintos
sitios de un mismo cromosoma o diferentes
cromosomas
o El segmento de DNA que se mueve contiene
elementos de secuencia cortos y específicos:
sitios de recombinación.
o Esta mediada por enzimas que reconocen
secuencias específicas y cortas de
nucleótidos presentes en las moléculas entre
las que se produce la recombinación

o Puede alterar el orden de los genes y también agregar nueva información en

un genoma
o Requiere de maquinaria propia
Ejemplos: Recombinasa Cre-sitios loxP (Fago P1)
Integrasa Int del fago lambda-sitios att (attP y attB)
ELEMENTOS QUE PARTICIPAN EN LA CSSR

Sitio de recombinación: esta organizado en

o Secuencias de
reconocimiento:
Ubicadas de manera simétrica
o Región crossing over:
Es asimétrica, corta y central
Corte y resellado del DNA
Un sitio de recombinación dado siempre
tiene una polaridad definida
Recombinasas

Escinden y resellan el DNA mediante un

intermediario covalente de DNA-proteína.
Existen dos familias:
serina recombinasas y
las tirosina recombinasas
 Acción de recombinasas especificas de sitio conserva en la unión la
energía del enlace
Serina recombinasa fosfodiéster escindido

Residuo de serina ataca un enlace Rotura monocatenaria en el DNA y se genera Se forma intermediario
fosfodiéster en el sitio de recombinación un enlace covalente entre la serina y un fosfato covalente: DNA-proteína

Sellado: Unión de cadenas de DNA Regeneración de

por reversión del proceso de corte recombinasa
Un OH del DNA escindido
ataca al enlace covalente de
DNA-proteína
 MECANISMO DE CSSR

Alineamiento de las secuencias a recombinar

Recombinasa se une a las secuencias de reconocimiento

Se realizan cortes en la zona de crossing over

La recombinación

Sellado
ACCIÓN DE LAS RECOMBINASAS
 TIPOS DE REORDENAMIENTOS DEL DNA

La CSSR puede generar tres tipos de reordenamientos y esta determinado por la organización de
los sitios de recombinación

INSERCIÓN DELECCIÓN INVERSIÓN

Se produce específicamente La recombinación se produce Cuando la recombinación se

cuando los sitios de entre sitios organizados en la da entre un par de sitios
recombinación en dos moléculas forma de repeticiones directas y invertidos, invertirá el
diferentes se acercan para elimina el segmento de DNA segmento de DNA entre los
realizar el intercambio de DNA entre los dos sitios dos sitios