Universidad Nacional Jorge Basadre Grohmann

Facultad de Ciencias – E.P Biología Microbiología

Bacteriología

BACILOS FORMADORES DE ESPORAS

GÉNEROS
BACILLUS Y CLOSTRIDIUM

Copyright © 2020 - Dr. César Cevallos Columbus

 GÉNERO BACILLUS Y CLOSTRIDIUM
CARACTERÍSTICAS GENERALES

GÉNERO BACILLUS GÉNERO CLOSTRIDIUM

Bacterias en forma de bastón.
Gram positivas
Aerobios estrictos o anaerobios facultativos
Beta hemolíticos, excepto B. anthracis
Forman endosporas (oval o cilíndrica)
Catalasa positiva
Se agrupan formando cadenas
Saprofitas: B. cereus y B. subtilis
Móviles (flagelos perítricos), excepto: B.anthracis
Controlador biológico: B. thurigiensis
Presentan gran actividad bioquímica (ciclos
biogeoquímicos del carbono y nitrógeno).
1. Género Clostridium: integrado por más de 100 especies de
bacilos anaerobios (excepto C.histolyticum, C.tertium) y
formadores de esporas.
2. Por lo menos 20 especies son toxigénicas
3. Organismos ubicuos: suelo, aguas residuales, flora microbiana
tracto gastrointestinal (animales y hombre).
4. Patógenos: C. tetani (tétano), C.botulinum, C. baratii
(botulismo), C. perfringens, C. septicum, C. histolyticum,
C.novyi (mionecrosis), C. difficile (diarrea y colitis
pseudomembranosa).
5. Sintetizan y secretan exotoxinas muy potentes.
 GÉNERO BACILLUS
ACIDÓFILAS TERMÓFILAS DENITRIFICANTES PATÓGENOS DE VERTEBRADOS
 B. acidocaldarius  B. acidocaldarius  B. azotoformans
 B. coagulans  B. schlegelii  B. cereus  B. anthracis
 B. polymixa  B. stearothermophilus  B. laterosporus  B. cereus
 B. licheniformis  B. alvei
ALCALINOFILAS PATÓGENOS DE INSECTOS  B. pasteurii  B. coagulans
 B. alkalophilus  B. larvae  B. stearothermophilus  B. megaterium
 B. pasteurii  B. lentimorbis  B. subtilis
 B. popilliae PROD. DE ANTIBIÓTICOS  B. pumilus, etc.
PSICOTROFAS  B. thuringiensis  B. brevis
 B. globisporus  B. brevis  B. cereus
 B. insolitus  B. subtilis  B. circulans
 B. marinus  B. Subtilis
 B. macquariensis FIJADORES DE NITRÓGENO  B. licheniformis
 B. megaterium  B. macerans  B. polymixa
 B. polymixa  B. polymixa  B. pumilus
 B. laterosporus

Bacillus subtilis: Bacitracina-A, pero sobre todo Surfactin, el Iturin A y Fengycin

B. polymyxa: Polimixina-B
B. brevis: Tirocidina-A y Gramicidina-S
 GÉNERO CLOSTRIDIUM

Familia: CLOSTRIDEACEAE
Géneros: Clostridium (anaerobio)

Clostridium neurotóxicos Clostridium histotóxicos

C. tetani, C. botulinum C. perfringens, C. novyi
C. septicum

Clostridium enterotóxicos Clostridium piógenos

C. perfringens C. perfringens
C. difficile C. ramosum
 GÉNERO CLOSTRIDIUM

Clostridium perfringens Clostridium difficile Clostridium tertium

Clostridium difficile Clostridium tetani C. sporogenes

 CAPACIDAD PATOGÉNICA
GÉNERO BACILLUS GÉNERO CLOSTRIDIUM

Este género se define por los cuatro rasgos siguientes:

1. Presencia de endoporas;
2. Metabolismo anaerobio estricto;
3. Incapacidad de reducir sulfato a sulfito, y
4. Pared celular grampositiva.

Capacidad patógena debido:

1) Capacidad para sobrevivir en condiciones extremas

mediante la formación de esporas;
2) Rápido crecimiento en un ambiente enriquecido y
privado de oxígeno, y
3) Síntesis de toxinas histolíticas, enterotoxinas y
neurotoxinas.
 Bacillus anthracis
Bacilo voluminoso, de 4 a 6 m long.
Gram positivo, no móvil.
Extremos cuadrados
Forma espora: central, oval, no deformante
Forman cápsula: polipéptido formado por Ac.
D-glutámico (antifagocítico)
En muestras clínicas: aparece como bacilo
único o emparejado.
Cultivo
 B.anthracis: aerobio (anaerobio facultativo), forma
cadenas serpentinas y largas.
 Crece en pH entre 7.0 y 7.4. Se desarrolla en medios
simples
 Colonias: pequeñas, opacas, color blanco grisáceo y
duras. Bordes con flecos (melena de león).
 Es proteolítico y fermentativo.
Patogenia
 Factores de virulencia: Cápsula y Toxina
Vías de contagio
 Inoculación, inhalación o ingestión.

Tinción de Gram de B. anthracis, que muestra grandes barras Gram positivas con
esporas elipsoidales sub terminales en hemocultivo del paciente
 B.anthracis: Productos extracelulares

 Cápsula (ácido poli-D-glutámico), codificada por un plásmido

 Toxina :
* Factor de Edema (EF)
* Factor II o PA (antígeno protector): inmunógeno
* Factor III o LF (Factor letal): efecto mortal
LF + PA: mortal , no produce edema. Inmunógenos
EF + PA + LF: toxicidad máxima (provoca edema y necrosis e
incluso la muerte en animales. Inmunógenos.
 B.anthracis: PATOGENIA EN HUMANOS
1. Ántrax cutáneo (pústula maligna)
La lesión o pústula suele ser única, indolora, necrosante, seropurulenta, ulcerosa
y hemorrágica: La escara negra es la base del término “carbunco”. La lesión está
rodeada por una zona de edema intenso, causado por exudado gelatinoso.
B.anthracis: PATOGENIA EN HUMANOS

Cortesía: An. Fac. med. v.74 n.2 Lima abr./jun. 2013

B.anthracis: PATOGENIA EN HUMANOS
 B.anthracis: PATOGENIA EN HUMANOS
2. Carbunco Pulmonar

Es mortal (100%), debido a la septicemia, que origina

la muerte temprana por toxina (a las 24 h). La tos no
productiva y los síntomas pulmonares vagos suelen
originar un Dx equivocado de “neumonía viral”.

3. Carbunco Intestinal
Enfermedad poco frecuente en el humano, pero 100%
fatal. Síntomas clínicos variables: adenopatías
mesentéricas y ascitis hemorrágica.
 Bacillus cereus
Características Generales
Bacilo Gram positivo,
Aerobio y anaerobio facultativo
Espora: central, forma elipsoide.
Crece entre los 10 - 48ºC, la temperatura óptima es entre 28 - 35º C.
Generalmente son móviles con flagelos perítricos.
Poseen antígenos somáticos y flagelares y de esporas.
Se puede aislar: alimentos naturales e industrializados, alimentos:
pasteles con crema, carnes y verduras, sopas, salsas, ensaladas, arroz y
cereales.
pH = 4,9 - 9,3; Aw = 0,93 - 0,95.
Al final de la fase exponencial ocurre la esporulación porque son menos
exigentes. La germinación de las esporas es a 30ºC. Las esporas resisten
100º durante 5-10 minutos.
 B. cereus: ENZIMAS Y TOXINAS
1. Lecitinasa (fosfolipasa): Produce efectos necróticos de células
intestinales.
2. Hemolisina: produce la lisis de glóbulos rojos
3. Factor letal: produce la muerte de conejos cuando por vía
endovenosa
4. Factor de permeabilidad vascular: alteraciones permeabilidad de los
vasos sanguíneos.
5. Toxina necrótica: produce necrosis de las células del epitelio
intestinal.
6. Toxina emética: produce vómitos. Toxina estable a 126ºC/90 minutos.
Estable a pH 2 y 11 durante 2 horas, puede sobrevivir en los
alimentos.
7. Factor del asa ileal de conejo: origina diarrea y salida de líquido en
experimentación.
 Bacillus cereus: Patogenia y Clínica
PODER PATOGENO

Toxina emética o vomitoxina (toxina termoestable: 120°C/1h).

Toxina diarrogénica (Toxina termolábil): Proteína de peso molecular 38-50 Kd.

Inactiva a 56ºC/5 minutos, es termolábil.

CUADRO CLINICO

Síndrome emético: nauseas y vómitos se producen al cabo de 1-5 hs, la

diarrea no es tan frecuente.

Síndrome diarreico: período de incubación de 8 a 10 horas, dolor abdominal y

diarrea, la clínica desaparece a las 12-24 horas.
 B. cereus: DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO
El aislamiento e identificación de B. cereus en el laboratorio clínico bacteriológico a partir de coprocultivos no es
rutinaria.

En las muestras clínicas (heces) de los pacientes durante la fase aguda de la enfermedad dan la confirmación de
que B. cereus está involucrado en el brote.

El análisis del alimento es de fundamental importancia para poder confirmar el agente etiológico.

B. cereus en AST
B. cereus , tinción Gram B. cereus en agar sangre
 OTROS ESPECIES DE BACILLUS
B. stereathermophilus: control biológico
en autoclave.
B. subtilis: presente en el aire y en el polvo,
es un contaminate de laboratorio, pero
puede producir enfermedad en personas
inmunodeprimidas. También se utiliza
como controlador biológico en autoclave.
B. thurigiensis: es utilizado como pesticida
por producir una toxina letal para ciertos
insectos.
BACILLUS THURIGIENSIS
Es un bacilo gram positivo,
Flagelación perítrica,
Anaerobio facultativo y quimioorganótrofo.
Actividad de catalasa.
Fermentan: glucosa, fructosa, trealosa,
maltosa y ribosa.
Hidrolizan: gelatina, almidón, glucógeno,
esculina y N-acetil-glucosamina.
Forman una inclusión parasporal (espora):
son tóxicos para distintos invertebrados.
Proteína de toxicidad: CRY (del inglés,
Crystal).
B. thuringiensis se clasifica en 84 serovares
mediante serología del antígeno flagelar H.
 BACILLUS THURIGIENSIS

M. de contraste de fase, en fresco

 CLOSTRIDIUM TETANI
Características generales: Productos extracelulares (TOXINAS)
1. Bacilo Grampositivo Tetanolisina (lisis de los glóbulos rojos y neutrófilos)
2. Bacilo delgado, de 3 a 5 m long./0.3 a 0.7 diámetro. Tetanopasmina (neurotoxina soluble y termolábil)
3. Móviles: flagelos peritricos
4. Forman esporas terminal, esféricas y deformante del cuerpo
bacteriano.
5. No capsulado. Anaerobio obligado y débilmente proteolítico.

Estructura antigénica
1. Antígenos: somático (Ag. O) y flagelar (Ag. H)
2. Serotipos (10) con un solo tipo de toxina tetánica
 CLOSTRIDIUM TETANI
Tetanopasmina: se fija a gangliósidos (GT1) en membranas sinápticas y actúa en las sinapsis inhibidoras de nervios. Bloquea la función del
transmisor inhibidor (GABA, Glicina e incluso noradrenalina). La toxina se transmite vía axónica en sentido retrógrado: parálisis espástica.
CLOSTRIDIUM TETANI: PATOGENIA
 TÉTANO: PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO
Tratamiento no siempre satisfactorio, por
lo tanto es más importante la prevención:
1. Inmunización activa con toxoide,
2. Atención apropiada de heridas
contaminadas con tierra,
3. Empleo profiláctico de la antitoxina,
4. Administración de penicilina.
MEDIDAS QUIRÚRGICAS
Desbridamiento quirúrgico es importante,
ya que retira el tejido necrosado en el cual
pueden proliferar más microorganismos.
ANTIBIÓTICOS
Penicilina inhibe el crecimiento de C. tetani
y detiene la producción de toxina.
TOXOIDE TETÁNICO
 Clostridium botulinum
Características ORIGEN DEL BOTULISMO
La intoxicación se adquiere por ingesta de:
Reservorio: es el aire, tierra y polvo, e
incluso el agua. Alimentos enlatados contaminados
Conservas caseras contaminadas
Espora oval, subterminal y deforma al bacilo.
Carne contaminada mal cocida
Metabolismo es fermentativo (carbohidratos)
y proteolítico.
Móviles con flagelos perítricos y con 4
antígenos distintos: somático, flagelar,
esporas y endotoxinas.
Clasificación: 4 clases (I a IV) y producen 7
toxinas serológicamente diferentes (A, B, C,
D, E, F y G).
Enfermedad: Botulismo una toxiinfección
alimentaria producida por ingerir alimentos
con la toxina (Toxinas: A, B y E).
 Clostridium botulinum
PATOGENIA Y CLINICA
ACCIÓN DE LA TOXINA
BOTULISMO POR ALIMENTOS: 08 tipos
inmunológicamente distintos de toxina (A,
B, C1 , C 2, D, E, F, G). Todas, excepto la
C2, son neurotoxinas. Los tipos A, B y E
son los más frecuentemente relacionados
con enfermedad humana.

SINTOMATOLOGÍA

Periodo de incubación: 12-72 h y hasta 8 días

Flacidez muscular, cansancio y lasitud La toxina es transportada a los nervios periféricos hacia el
SNC donde se fija a los terminales presinápticos de los
Vértigo y estreñimiento nervios colinérgicos, bloqueando la liberación de acetil-
Diplopía, Disfagia y Disfonía colina, produciendo parálisis total de los impulsos nerviosos.
Parálisis flácida hasta en músculos de la cara
Atelectasia (Disminución del volumen pulmonar)
Paro respiratorio
 Clostridium perfringens
 Bacilos rectos de 4-8 x 0,5-1,5 u., inmóviles y TOXINAS
anaerobios estrictos.
 Esporas ovaladas subterminales y no 1. Alfa (): Lecitinasa C o fosfolipasa,  la permeabilidad
deformante de la célula. vascular. Es mortal
 Producen H2S, lecitinasa, reducen los nitritos, 2. Beta (): es necrotizante. Induce hipertensión. No hemolítica
fermentan azucares. 3. Epsilón ():  permeabilidad de pared gastrointestinal. NH
 Necesidades nutritivas complejas: en su cultivo 4. Iota (): es necrotizante y produce  permeabilidad vascular.
necesitan aminoácidos y factores de Es mortal
crecimiento.
5. Delta () y Teta (): toxinas hemolíticas
 La temperatura óptima de las toxinas es 43-47º,
la máxima 50º, aunque la temperatura depende 6. Kappa (): colagenasa, es necrosante.
de la cepa. Las toxinas necesitan un pH próximo 7. Lambda (): proteasa. No es toxina.
a 7,5.
8. Mu (): hialuronidasa
 Las esporas son bastante resistentes al calor,
resisten 100º 1 hora, la germinación se produce 9. Nu (): DNAsa
a 70-80ºC.
C. perfringens: ORIGEN DE LA PATOGENIA
 C. perfringens: ORIGEN DE LA PATOGENIA
Toxinas mortales: alfa, beta, gamma y iota. MIONECROSIS (gangrena gaseosa)
Cl.perfringens, de tipo A, es el agente más frecuente de mionecrosis gaseosa. El 1. Síndrome de rápida necrosis del tejido muscular, con
tipoA (alfa) produce aumento de la permeabilidad vascular con hemólisis poca inflamación, y producción de gas en los tejidos.
masiva y hemorragia, destrucción tisular, toxicidad hepática y disfunción 2. En desgarradas, sucias, sobre todo cuando acompaña
miocárdica. La toxina beta es responsable de la enteritis necrozante fracturas, por cirugía pélvica o intraabdominal, aborto
La enterotoxina, proteína termolábil, es producida por mayormente por las séptico, etc.
cepas tipo A, pero también por las cepas tipo C y D. 3. La mionecrosis es una infección mixta.
 Diagnóstico Clínico
TÉTANO: El Dx del tétanos es clínico.
BOTULISMO: El Dx es clínico e epidemiológico.
MIONECROSIS: El Dx es clínico.

Diagnóstico BACTERIOLÓGICO

EX. DIRECTO: Tinción Gram. Tétanos (tejido necrosado)

Mionecrosis (tejido necrosado)

CULTIVO: Agar sangre (C. tetani, y C. perfringens)

Agar yema de huevo para anaerobios (C. botulinum)

SEROLOGÍA: Botulismo. Detectar cepa y la toxina implicadas