La Acción de Las Enzimas en Los Detergentes - Compressed

BIOTECNOLOGÍA AMBIENTAL FCAG – UNJBG - 2021
“Año del Bicentenario del Perú: 200 años de Independencia"
UNIVERSIDAD NACIONAL
JORGE BASADRE GROHMANN
FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS
Escuela Profesional de Ingeniería Ambiental
BIOTECNOLOGIA AMBIENTAL
La Acción de las Enzimas en los Detergentes
Docente
MSc. BROUSETT MINAYA, MAGALY
Estudiantes
Gabriela Monje Casas Código: 2019-178069

María Amelia Lope Vichata Código: 2019-178044
Karol Victoria Córdova Vela Código: 2021-178037
Frank Luis Cruz Maqque Código: 2019-178003
Luis Fernando Chura Mamani Código: 2019-178002
Ronald Jhonson Mamani Quispe Código: 2019-178065
TACNA – PERÚ
2021
Resumen
Las enzimas son una clase especial de proteínas que aceleran la velocidad de las reacciones
químicas que ocurren en una célula. Por esto se las conoce como “catalizadores biológicos”.
Para realizar su función, una enzima reconoce una molécula específica, llamada sustrato. Cada
enzima se une a su sustrato específico en el sitio activo y provoca en él un cambio químico, por
el cual se obtiene un producto. El cambio implica la formación o rotura de un enlace covalente.
La enzima que participa en la reacción no sufre modificaciones, y puede volver a actuar sobre
otro sustrato del mismo tipo. En ausencia de las enzimas, las reacciones bioquímicas serían
extremadamente lentas y la vida no sería posible. Las enzimas pueden aumentar la velocidad
de las reacciones en un millón de veces.
Las enzimas empleadas en detergentes se encuentran disponibles en forma líquida y
granular. Éstas actúan sobre los materiales que constituyen las manchas, facilitando la remoción
de los mismos y de forma más efectiva que los detergentes convencionales. Entre las enzimas
utilizadas se pueden encontrar: proteasas (producidas principalmente por Bacillus licheniformis
o B. Amyloliquefaciens y Aspergillus flavus) que aceleran la degradación de proteínas y
producen pequeños péptidos o aminoácidos individuales los cuales pueden ser fácilmente
removidos de los tejidos.
Las amilasas provenientes de Bacillus licheniformis, que degradan el almidón, sacando
manchas de chocolate y papa, entre otros. Las lipasas, que rompen los lípidos por hidrólisis,
sacando manchas de grasa y aceite. Las células producidas por el hongo Humicola insolens son
utilizadas para remoción de suciedad, y para restaurar la suavidad y color de fibras de algodón.
INTRODUCCIÓN
Durante las últimas décadas, nuevos desarrollos en enzimología en combinación con la
aplicación del ADN y la ingeniería de proteínas han conducido a la bioingeniería de enzimas.
La ingeniería de proteínas consiste en modificar una proteína existente o crear una nueva
proteína con propiedades específicas. Estas tecnologías avanzan con el estudio de los
extremófilos, la identificación de nuevos compuestos y las rutas metabólicas, y la
caracterización molecular y bioquímica de componentes celulares. Debido a que muchos
procesos industriales requieren altas o bajas temperaturas o pH ácidos o alcalinos, los
organismos extremófilos que viven en condiciones ambientales extremas de temperatura,
salinidad, etc., se han convertido para las industrias en atractivas fuentes de enzimas. Por
ejemplo, en la industria de los detergentes y jabones para la ropa de uso hogareño se utilizan
biocatalizadores que quiten las manchas a baja temperatura, mientras que en tratamientos de
esterilización de ropa de quirófano se prefiere un jabón que tenga biocatalizadores que
funcionen a altas temperaturas.
Hoy en día las enzimas forman parte de los procesos industriales y de las actividades
domésticas. Por ejemplo, al lavar la ropa las enzimas son las que hacen el trabajo sucio de sacar
las manchas. Efectivamente, el detergente en polvo tiene enzimas que remueven selectivamente
las manchas de aceites, proteínas o almidones de la ropa. Las enzimas son biocatalizadores,
proteínas que aceleran los procesos de degradación, transformación o fabricación de sustancias.
Las enzimas que se usan industrialmente son producidas en grandes cantidades por bacterias y
hongos que se cultivan en tanques llamados fermentadores. Estas enzimas se vienen usando
desde hace más de 40 años con el objetivo de reemplazar a los compuestos sintéticos, minimizar
el uso del agua y el consumo de energía, ya que antes las manchas sólo podían ser removidas
con blanqueadores y altas temperaturas. La mayoría de las enzimas que están hoy en el mercado
han sido mejoradas por técnicas de ingeniería de proteínas o provienen de microorganismos
recombinantes (genéticamente modificados) para optimizar su proceso de fabricación.
MARCO TEÓRICO
1. LIPASAS
1.1. Caracterización de las Enzimas Lipolíticas Lipasas
En 1856 Claude Bernard descubrió una lipasa en el jugo pancreático. Observó que esta
enzima hidrolizaba gotas de aceite insoluble y las convertía en productos solubles. (Lukovi N.,
2013). Desde 1901 se ha estudiado la presencia de lipasas en los microorganismos Bacillus
prodigiosus , B. pyocyaneus y B. fluorescens. Sin embargo, su habilidad como catalizadoras de
la hidrólisis y sintetizadoras de ésteres ha sido descubierta desde hace unos 70 años
aproximadamente. Los procesos mediados por enzimas han sido utilizados desde las
civilizaciones más antiguas. Hasta el día de hoy se conocen aproximadamente 4000 tipos de
enzimas diferentes. (Ma F., 2019).
Debido al conocimiento existente sobre estas enzimas, a su disponibilidad y al hecho de que
los procesos en los que intervienen son generalmente menos costosos y menos contaminantes,
que sus correspondientes procesos químicos, “las lipasas bacterianas son las enzimas más
versátiles y más ampliamente utilizadas en biotecnología”. (Bornscheuer UT., 2002).
Además, estas enzimas son altamente estables en un amplio rango de temperaturas, pH y
solventes orgánicos, aunque la mayoría presentan una mayor actividad a pH neutros o básicos.
Son también estables frente a diferentes detergentes, iones (aunque alguno puede activarlas o
inhibirlas) y agentes químicos y, en general, no requieren cofactores. (Beuchat LR., 2001). las
enzimas lipolíticas bacterianas son activas en un amplio rango de sustrato, pudiendo realizar
reacciones de síntesis, hidrólisis o de intercambio de grupos, muchas veces de forma altamente
quimio, regio o estereoespecífica (actúan sobre un compuesto químico muy concreto,
produciendo un solo tipo de reacción y un solo tipo de producto), y sin llevar a cabo reacciones
laterales o generar subproductos. (United States of America Environmental Protection Agency,
2018).
Al poder catalizar reacciones tanto en condiciones acuosas como no acuosas, sus
aplicaciones son muchas y muy variadas. Se utilizan en la medicina, en la industria alimenticia,
en química orgánica y en el tratamiento de aguas residuales, así como también como
biosensores y para la producción de biodiesel. Incluso se han hecho investigaciones sobre la
degradación de polímeros por la acción de lipasas de levaduras. (Olempska-Beer Z., 2016).
1.2. Clasificación de las enzimas lipasas
La clasificación más aceptada aún en el 2019 fue propuesta por Arpigny y Jaeger (Arpigny
L., 1999, Jaeger KE., 2012) desde 1999. Estos autores las clasificaron en 8 familias: las lipasas
verdaderas, la familia II o GDSL, la familia III, la familia IV o HSL (lipasa sensible a hormona),
la familia V, la familia VI, la familia VII y la familia VIII.
1.2.1. Familia I o lipasas verdaderas
Las lipasas bacterianas verdaderas que primero se estudiaron y utilizaron industrialmente
fueron las denominadas lipasas de pseudomonas, nombradas así por la bacteria de la que
proceden. Estas enzimas fueron subdivididas en pseudomonas del grupo 1, 2 y 3, de acuerdo
con la secuencia de sus aminoácidos.
1.2.2. Familia II o GDSL

La familia II o GDSL está compuesta por glicina, ácido aspártico, una serina, una leucina y
otra serina (GDSL). Existe el consenso de que las esterasas/lipasas tienen conservada una
secuencia de aminoácidos denominado pentapéptido, que está formado por una glicina, una
serina y un ácido aspártico, intercalando entre cada uno de ellos un aminoácido cualquiera, es
decir, glicina-X-serina-X-aspártico. La característica más relevante de esta familia es que su
pentapéptido no está formado por estos aminoácidos, sino por una glicina, seguido de un ácido
aspártico, una serina, una leucina y una serina (en algunos casos), de ahí que se le denominará
GDSLS. Pero como la última serina no es conservada en todas las proteínas de esta familia, se
les ha reducido el nombre a GDSL. Debido a esto, las enzimas de esta familia no presentan el
nucleophilic elbow (codo nucleofílico). (Ro HS., 2014)
1.2.3. Familia III
Las lipasas de esta familia fueron identificadas por primera vez por Cruz y otros, en 1994.34
Estos autores resolvieron la estructura tridimensional de la lipasa extracelular de Streptomyces
exfoliatus (M86351). También, observaron que esta enzima presenta tanto la triada catalítica
como la forma tridimensional característica de las α/β-hidrolasas y además, se vio que tiene
una identidad del 20 % con el factor de plaqueta acetilhidrolasa activado (FPA-AH) del plasma
humano.30)
1.2.4. Familia IV o lipasa sensible a hormona (LSH)
Un número elevado de enzimas de esta familia presentan en la secuencia de aminoácidos
una elevada similitud a la LSH de mamíferos, de ahí que se les haya denominado de la misma
manera. Las enzimas de este linaje, además del pentapéptido característico de la superfamilia
(G-X-S-X-G) de las lipasas/esterasas bacterianas, también presentan la secuencia His-Gly-Gly-

Gly, que aparece localizada entre los aminoácidos 70 y 100 de las enzimas, anteriores a la serina
catalítica, donde la serina, junto con una histidina y un glutámico, son los aminoácidos
responsables de su actividad catalítica, formando la triada catalítica.
1.2.5. Familia V
En esta familia se encuentran enzimas de bacterias mesófilas (Pseudomonas oleovorans,
Acetobacter pasteurianus y Haemophilus influenzae), psicrófilas (Moraxella sp) y termófilas
(Sulfolobus solfataricus). Todas ellas muestran una similitud comprendida entre el 20 % y el
25 % con otras enzimas bacterianas no lipolíticas, como son las deshalogenasas y las
haloperoxidasas. Todas poseen la triada catalítica formada por la serina, el glutámico o el
aspártico y la histidina y el plegamiento característico de las α/β-hidrolasas.
1.2.6. Familia VI
Las lipasas bacterianas incluidas en esta familia son esterasas de pequeño peso molecular,
entre 23 kDa y 26 kDa, y que curiosamente muestran un 40 % de homología con las
lisofosfolipasas de eucariotas. Hasta la resolución de la estructura tridimensional de la
carboxilesterasa de Pseudomonas fluorescens (1AUO), poco se sabía sobre esta familia. De
hecho, lo que se conoce de esta familia es gracias a los estudios realizados en este tipo de
enzimas.
1.2.7. Familia VII
En la familia VII se hallan esterasas con un peso molecular de aproximadamente unos 55
KDa. Todas las enzimas de esta familia presentan una elevada homología con
acetilcolinesterasas de eucariotas y carboxylesterasas del intestino e hígado humano. La
carboxilesterasa de Arthrobacter oxydans (Q01470) es particularmente activa sobre el herbicida

fenilcarbamato, concretamente, hidroliza las cadenas laterales del carbamato. La esterasa de
Bacillus subtilis presenta una elevada eficacia para hidrolizar los ésteres de p-nitrobenzil, por
lo que es usada para proteger los grupos funcionales durante la síntesis de antibióticos β-
lactámicos.
1.2.8. Familia VIII
Esta familia está formada por enzimas que tienen unos 380 aminoácidos y una elevada
homología con algunas β-lactamasas de clase C. La principal diferencia de esta familia con el
resto, es que las tres enzimas que la forman, presentan unos 150 aminoácidos, desde la posición
50 hasta la 200, aproximadamente, que tiene una homología del 45 % con la proteína de
Enterobacter cloacae (β-lactamasa). Son necesarios más estudios estructurales de las proteínas
que forman esta familia para dilucidar qué aminoácidos son los responsables de la catálisis
enzimática.
1.3. Cinética de la reacción de las lipasas
Las lipasas han sido son enzimas específicas para catalizar la separación hidrolítica de los
ácidos grasos de cadena larga presentes en los acilgliceroles los cuales son sustrato naturales,
muy pocas lipasas son específicas en sus reacciones. Por este motivo, el término especificidad
se ha ido reemplazando en la literatura por el de selectividad, el cual describe mucho mejor el
comportamiento reactivo de estas hidrolasas. En última instancia, la determinación de la
especificidad de una lipasa depende de la sensibilidad del método empleado para ello.
1.4. pH y °T óptima de las lipasas
El pH óptimo para las lipasas se encuentra generalmente en el intervalo entre 7,0 y 9,0. No
obstante, para algunas lipasas, el pH óptimo se encuentra en la región acídica. Asimismo, se

han encontrado lipasas con la mayor actividad a valores de pH más alcalinos.
La temperatura óptima para las lipasas puede encontrarse en el intervalo entre 35 y 50 °C,
aunque existen lipasas termoestables que exhiben valores de temperatura óptima superiores a
50 °C.
1.5. Inhibidor de la lipasa
Las lipasas son inhibidas por los organofosfatos, como el dietil-/-nitrofenilfosfato y el
diisopropil-fluorofosfato, por las carbodiimidas en presencia de nucleófilos, como el glicin-etil
éster, y por el iodo. También son inhibidores de lipasas los ácidos borónicos y el fenil-metil-
sulfonilfluoruro, así como los metales pesados, el EDTA, algunos terpenos, los iones
halógenos, los alcaloides, el cloroformo, el n-hexanol, el dietil-fenil carbonato, el bromoformo,
varias lactonas y algunos 1,2-etilen-di-N-alquilcarbamatos en presencia de detergentes.
Algunos cationes metálicos pueden producir inhibición.
1.6. Ventajas de las lipasas
- La lipasa al trabajar con menos calor, impiden la formación de grasas trans en los
alimentos, permitiendo la formación de grasas con menos insaturaciones, debido a las
bajas temperaturas con las que trabaja.
- El uso de las lipasas disminuye el incremento de triglicéridos en la sangre, previniendo
la acumulación de grasas y altos niveles de colesterol en la sangre.
- Son extremadamente específicas en su desarrollo y, por otro, son muy veloces en
reaccionar.
1.7. Usos en la industria de las lipasas

Las aplicaciones que tienen las lipasas en la industria actual son múltiples y van desde la
fabricación de detergente, la industria de la leche y los quesos, (son añadidas a quesos duros,
curados para dar aroma picante), panaderías para mejoramiento de sabores, industria de
bebidas, producción de productos químicos de interés por medio de enlaces éster,
polimerización e incluso se hacen investigaciones para la producción de biodiésel.
Las lipasas son enzimas con una aplicación amplia en diferentes procesos industriales,
particularmente en sus formas inmovilizadas. Ellas se emplean en la producción de detergentes
y de saborizantes naturales (Pandey et al., 1999), en la hidrólisis de aceites y grasas (Taylor,
1996), en la producción de papel (Jaeger y Reetz, 1998) y en la elaboración de cosméticos
(Benjamin y Pandey, 1998). Debido a su capacidad de catalizar la síntesis de determinados
compuestos en medios orgánicos con actividad de agua controlada (Dandavate et al., 2009;
Gupta y Khare, 2009), las lipasas se han empleado en la producción de intermediarios para la
síntesis orgánica (Vaidya, 1996), así como de penicilinas (Savidge, 1984).
1.8. Cofactor de las lipasas
La Colipasa es un cofactor proteico necesario para la actividad óptima de la lipasa, necesario
para que realice una hidrólisis eficiente de los triglicéridos adquiridos con los alimentos.
1.9. Sustrato de las lipasas
- Sustratos: Triacilglicéridos con ácidos grasos

Acción Enzimática:
- Productos: 2-monoacilglicerido y dos ácidos grasos libres

- Se requiere: colipasa, fosfolípidos, sales.
AMILASAS
El químico Anselme Payen (1795 – 1871) es conocido especialmente por el descubrimiento
de la primera enzima en ser identificada, junto al químico Jean François Persoz quien en un
principio la bautizó con el nombre de “Diastasa” del griego “Separación” en el año 1833, ya
que separa los bloques de almidón en unidades individuales de la glucosa. (Macho, 2015).
La amilasa es una enzima que degrada el almidón, también se conoce con el nombre de
sacarasa y ptialina, y en el cuerpo humano la amilasa se produce principalmente en las
glándulas salivales, glándulas parótidas y en el páncreas, y presenta su actividad enzimática
máxima a pH 7. También puede encontrarse en alimentos vegetales (Nutrición, 2018).
Según el autor, las amilasas pueden ser añadidas a productos alimenticios o complementos
alimenticios para mejorar la digestión de los carbohidratos. Pueden encontrarse fácilmente en
productos ricos en hidratos de carbono o complejos enzimáticos dirigidos a mejorar la
digestión.
La importancia de estas enzimas, antropocéntricamente hablando, no es solamente
fisiológica, puesto que en la actualidad este tipo de enzimas tiene gran trascendencia
biotecnológica tanto en la producción industrial de alimentos, papel, textiles, azúcares y otros
(Puig, 2019)
FUNCIONES
Muchas son las funciones que son adjudicadas a las enzimas con actividad amilasa, no sólo
desde el punto de vista natural o fisiológico, sino también desde el punto de vista comercial e
industrial, relacionado directamente con el hombre (Puig, 2019).
1. EN LOS ANIMALES
Las amilasas en los animales están presentes esencialmente en la saliva, el hígado y
el páncreas, donde median la degradación de los diferentes polisacáridos consumidos
en la dieta (de origen animal (glucógenos) o vegetal (almidones)). La α-amilasa presente
en la saliva se emplea como indicador del estado fisiológico de las glándulas salivales,
puesto que constituye más del 40% de la producción proteica de estas glándulas. En el
compartimiento bucal, esta enzima se encarga de la “pre digestión” del almidón,
produciendo residuos de maltosa, maltotriosa y dextrina.
2. EN LAS PLANTAS
En las plantas el almidón es un polisacárido de reserva y su hidrólisis, mediada por
enzimas amilasas, tiene muchas funciones importantes. Entre ellas se pueden destacar:
● La germinación de las semillas de cereales por digestión de la capa de aleurona.
● La degradación de las sustancias de reserva para la adquisición de energía en
forma de ATP.
3. EN LOS MICROORGANISMOS
Muchos microorganismos emplean amilasas para la obtención de carbono y energía
a partir de diversas fuentes de polisacáridos. En la industria, estos microorganismos son
explotados para la producción a gran escala de dichas enzimas, que sirven para
satisfacer diferentes demandas comerciales del hombre.
4. USOS INDUSTRIALES
En la industria las amilasas se emplean con diversos propósitos, entre los que
destacan la manufactura de maltosa, de jarabes con alto contenido de fructosa, de
mezclas de oligosacáridos, de dextrinas, etc. Son empleadas también para la
fermentación alcohólica directa de almidón hasta etanol en la industria cervecera, y para
el aprovechamiento de las aguas de desecho producidas durante el procesamiento de
alimentos de origen vegetal como fuente de alimento para el crecimiento de
microorganismos, por ejemplo.
CLASIFICACIONES
● α-Amilasa
Las α-amilasas son metaloenzimas de calcio, completamente funcionales en ausencia
de calcio. Actúan a lo largo de cualquier punto de la cadena de los carbohidratos,
descomponiéndose en maltotriosa y maltosa desde la amilosa o maltosa, glucosa y
dextrina desde la amilopectina. Dado que puede actuar en cualquier punto de la cadena
es más rápido que la β-amilasa. En los animales es una enzima digestiva mayor y su pH
óptimo está entre 6.7 y 7.0.

● β-Amilasa
Otra forma de amilasa, la β-amilasa es también sintetizada por bacterias, hongos y
plantas. Actúa desde el extremo no reductor de la cadena, catalizando la hidrólisis del
segundo enlace α-1,4, rompiendo dos unidades de glucosa (maltosa) a la vez. Durante
el proceso de maduración de la fruta la β-amilasa rompe el almidón en azúcar dando
lugar al sabor dulce de la fruta. La amilasa presente en el grano de cereal es la
responsable de la producción de malta. Muchos microorganismos también producen
amilasa para degradar el almidón extracelular. Los tejidos animales no contienen β-
amilasa, aunque puede estar presente en microorganismos saprófitos del tracto
gastrointestinal. Tiene un pH óptimo de 12.
● γ-Amilasa
Además de romper el último enlace α(1-4)glicosídico en el extremo no reductor de
la cadena de amilosa y amilopectina, liberando glucosa, la γ-amilasa puede romper los
enlaces glicosídicos α(1-6). A diferencia de las otras amilasas esta forma es más eficaz
en medios ácidos y su pH óptimo es de 3.
PROTEASAS
Las proteasas, también denominadas peptidasas, son enzimas que rompen los enlaces
peptídicos de las proteínas. Se sintetizan y se encuentran de forma natural en los seres vivos,
en los que intervienen en la digestión de las proteínas, facilitando su degradación, absorción y

metabolismo.
Las proteasas intervienen en reacciones metabólicas, facilitando la digestión de las proteínas
de los alimentos (Fig. 1). Pueden romper enlaces peptídicos específicos (proteolisis limitada),
dependiendo de la secuencia de aminoácidos de la proteína, o pueden reducir un péptido
completo a aminoácidos (proteolisis ilimitada). (S / fb)
Fig. 1. Las proteasas facilitan la liberación de péptidos en la digestión proteica.
APLICACIONES INDUSTRIALES
CÁRNICOS
Ablandamiento de carnes
Importante impacto económico

Alternativas tradicionales
Enzimas proteolíticos:
● Aplicación por inyección
● Aplicación pre-matanza
PANADERÍA
ACCIÓN SOBRE EL GLUTEN
● Glicoproteína abundante en cereales
● Responsable de la elasticidad de la masa
● Reduce el tiempo de amasado
● Mejoran la maquinabilidad
● Aumentan la extensibilidad del gluten
CERVEZA
● Aplicación en la cerveza ya terminada
● Se usan para evitar la formación de:
complejos tanino-proteicos
Taninos
Metabolitos secundarios de las plantas
Función: defensa ante el herbivorismo

Capacidad de unir entre sí proteínas de forma no específica
Causantes de la astringencia del vino tinto
LIMPIEZA
Jabones y detergentes
- Degradan la suciedad a fragmentos más pequeños y solubles
- Temperatura de lavador menor
- Mayor efectividad contra algunas manchas
Mismo fundamento que el jabón
CLASIFICACIONES
SEGÚN LA ZONA EN LA CORTEN
Exopeptidasas: hidrolizan los extremos N terminal (aminopeptidasas) y C terminal
(carboxipeptidasas)
Ejemplo:
● Alanina aminopeptidasa: corta en el extremo amino en caso de que el residuo en
posicion N terminal sea alanina.
● Carboxipeptidasa A: corta en el extremo C terminal, preferentemente cuando el residuo
en dicha posicion es un aminoácido hidrofóbico y voluminoso como fenilalanina

Endopeptidasas: hidrolizan enlaces peptídicos dentro de la cadena según su
especificidad
Ejemplo:
Tripsina: secretada por el páncreas en la digestión, corta el péptido donde haya residuos
de arginina o lisina
Termolisina: enzima sintetizado por la bacteria Gram positiva Bacillus
thermoproteolyticus, corta el péptido en la posición de residuos hidrofóbicos
SEGÚN GRUPOS QUÍMICOS PARTICIPANTES EN LA CATÁLISIS
PEPTIDASAS SERÍNICAS
Su catálisis depende del ataque nucleófilo de el -OH de un residuo de serina al enlace
peptídico
● Se forman intermedios covalentes
● Actividad óptima a pH alcalino
EJEMPLO: tripsina
PEPTIDASAS DE TREONINA
Utilizan treonina como nucleófilo para romper el enlace peptídico
Se forman intermedios covalentes

PEPTIDASAS CISTEÍNICAS
Un residuo de cisteína en el centro activo actúa como nucleófilo para hidrolizar el enlace
peptídico
Se forman intermedios covalentes
La mayoría atacan específicamente a enlaces peptídicos en los que participe una
histidina
EJEMPLOS:
Papaína:
● Gran cantidad de cortes en proteínas animales, se usa para ablandar la carne
● Se desnaturaliza en condiciones de pH y temperatura mayores que 8 y 37ºC
● Propiedades antiinflamatorias
Caspasas:
● Median los procesos de apoptosis
● Participan en la maduración de interleucinas
● Fallos en su actividad vinculados a desarrollo de tumores y enfermedades autoinmunes
PEPTIDASAS ASPÁRTICAS
Están ampliamente distribuidas, encontrándose en vertebrados, hongos, plantas,
protozoos y retrovirus
El nucleófilo que ataca al enlace peptídico es una molécula de agua retenida en un
residuo de aspartato
La mayoría se sintetizan como zimógenos (precursores) inactivos que son activados por
hidrólisis
EJEMPLOS:
Renina:
● Enzima sintetizada por la corteza renal en caso de descenso brusco de la presión arterial
● Enzima clave en el sistema renina-angiotensina-aldosterona
Pepsina:
● Interviene en la digestión de proteínas en mamíferos
● Es producida y secretada por las glándulas gástricas y vertida al estómago como
pepsinógeno.
● El pH ácido del estómago la hidroliza produciendo su activación
● pH óptimo entre 2 y 3
● Corta en zonas con residuos hidrofóbicos aromáticos
METALOPEPTIDASAS
Requieren cofactores metálicos en su centro activo
El nucleófilo que ataca al enlace peptídico es una molécula de agua retenida en el
cofactor
EJEMPLO:
Termolisina de Bacillus protheolyticus
METODOLOGÍA
Procedimiento de la parte Experimental
1. Lo primero fue identificar el producto y materiales que usaremos de la cual fueron 3

productos para la realización (Ariel, Patito y Enzimas digestivas). Como material de
apoyo utilizamos 9 vasos descartables de 500 ml, 9 rectángulos de tela (10 x 20 )cm de
algodón, un recipiente de 15 ml. 3 palitos de anticucho .
2. Para la realización del manchado de la tela utilizamos (chocolatada, huevo y pintalabios
con poco de aceite). Lo que hicimos fue hacer 3 manchas rectangulares en la tela con la
finalidad de tener una mejor visión en la cual realizamos el manchado en el mismo
orden. Para la realización del manchado pusimos en cada recipiente las muestras de las
cuales para el pintado usamos hisopos y lo dejamos secar por 24 horas este proceso lo
hicimos por triplicado de cada producto.
3. Para la concentración de detergente que irá en cada recipiente fueron 2 cucharadas de
sopera de 15 g cada una en un recipiente de 500ml de agua y para las enzimas
digestivas usamos 2 pastillas. para el primer proceso solo fue agua sin detergente, el
segundo proceso fue agua con detergente y para el último proceso fue agua con
detergente diluido y llevado a una temperatura de ebullición con un reposo de 1 min.
los procesos fueron por triplicado con los detergentes (Ariel, Patito y enzimas
digestivas)
4. Para el depósito de muestras alineamos los recipientes en el siguiente orden
(detergente hervido, agua y detergente sin hervir) una vez ya alineado en cada
recipiente introducimos una muestra de tela ya manchada de las cuales obtuvimos 9
muestras de vasos y lo dejamos reposar de 12 a 24 horas. A las muestras ya reposadas
hacemos una agitación de revolver 10 veces al inicio y al final del tiempo de
incubación.
5. como proceso final hacemos el enjuague y el secado, para el enjuague la mejor
manera es sin restregar, llenando y vaciando el recipiente 20 veces hasta eliminar
totalmente el producto. No conviene agarrar las muestras con las manos hasta que
estén bien enjuagadas, porque las enzimas pueden causar alergias. Si se prefiere
enjuagar dejando caer el agua de la canilla hay que usar guantes o una bolsa de
plástico como protección. y para el secado la mejor opción es dejarlo secar en la
sombra, porque el sol y las luces fuertes alteran los pigmentos, dando falsos
resultados.
finalizando hacemos una evaluación de escala con la finalidad de determinar la
intensidad de las manchas y el efecto que puede tener cada producto frente a estos
Tabla 1: Escala utilizada para evaluar la intensidad de las manchas en las muestras.
Esquematización del procedimiento
diagrama de flujo: proceso experimental de enzimas

en los detergentes
fuente: elaboración propia
OBSERVACIONES Y RESULTADOS
1. COMPARANDO LA EFICIENCIA DE VARIOS PRODUCTOS
Se realizó la experiencia con muestras manchadas con varias sustancias (bebida chocolatada,
lápiz de labios y huevo), se dejaron en remojo durante 4 horas. en la cual realizamos 5 tipos de
detergentes. en la cual dividiremos en 2 tipos de incubación uno con detergente hervido y el
otro con detergente sin hervir
DETERGENTE HERVIDO
En las condiciones del experimento del detergente hervido, ningún producto elimina las
manchas por completo. Sin embargo, el detergente Ariel oxi-poder fue más eficiente en el
resultado de las 3 manchas, lo cual se muestra en la tabla 2.
Tabla 2: intensidad de manchas después del lavado y secado
TRATAMIENT BEBIDA LAPIZ LABIAL HUEVO

O CHOCOLATADA
ARIEL 1 3 1
MARSELLA 4 4 1
ACE 2 3 1
PATITO 3 3 1
ENZIMAX 3 4 1
(NEOENZIMAX
NF)
AGUA 4 4 4
figura 2: Imagen de las muestras lavadas con las formulaciones con diferentes
detergentes
En la figura 2 podemos ver el contraste de las manchas en las telas con los diferentes
detergentes como vemos es evidente que todos los detergentes y enzimas pudieron eliminar las
manchas del huevo. Sin embargo las muestras de los detergentes Ariel y Ace son las que más
presentan los mejores resultados en las pruebas de lavado. que fueron los que más eliminaron
las 3 manchas siendo así más efectivo en la visualización de la mancha que viene hacer poco
visible
DETERGENTE SIN HERVIR
En las condiciones del experimento del detergente sin hervir, ningún producto elimina las
manchas por completo. Sin embargo el detergente ariel oxi-poder fue más eficiente en el
resultado de las 3 manchas, lo cual se muestra en la tabla 3.
Tabla 3: Intensidad de manchas después del lavado y secado
TRATAMIENT BEBIDA LAPIZ LABIAL HUEVO

O CHOCOLATADA
ARIEL 1 2 1
MARSELLA 2 3 1
ACE 2 3 1
PATITO 2 3 1
ENZIMAX 2 4 1
(NEOENZIMAX
NF)
AGUA 4 4 4
figura 3: imagen de las muestras lavadas con las formulaciones con diferentes
detergentes sin hervir

En la figura 3 se recopilan los resultados de las muestras lavadas del segundo grupo, donde
se puede evidenciar y corroborar los resultados obtenidos por estos tipos de detergentes donde
presentan en mayor medida las manchas como vemos ningún detergente pudo quitar las
manchas por completo sin embargo si se puede evidenciar que la intensidad de las manchas es
mínima. Los detergentes más eficientes fueron el Ariel y el Marsella dando como resultado los
mejores resultados en las pruebas de lavado. que fueron los que más eliminaron las 3 manchas
siendo así más efectivo en la visualización de la mancha que viene hacer poco visible y eso se
debe a las enzimas que contienen dichos detergentes.
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS Y CONCLUSION
como vimos los resultados la presencia de enzimas Acelera la degradación de las manchas,
compuestas por sustancias orgánicas (proteínas, lípidos, carbohidratos) en nuestro caso
proteínas del huevo(ovoalbúmina), lápiz labial disuelta en aceite (lípidos, entre otros). en la
chocolatada(caseína, albumina, proteínas, grasa saturada ) lo cual tiene que ver con la
proporción que viene en cada detergente(Ariel, Patito, Ace, Marsella, NEOENZIMAX NF) y
según el experimento podemos decir las presencia de dichas enzimas en cada detergente, se
encontró la presencia de celulosa en el detergente Marsella, en el patito enzimas lipoactivas,
la de ACE tiene lipasas, proteasas, catalasas, celulosas pero en menor proporción, aparte de
la presencia de estas enzimas poseen Agente tensioactivo o "surfactante”, Agentes
coadyuvantes y Agentes auxiliares
● si el sustrato es una proteína da como productos aminoácidos
● si el sustrato es almidón da como producto glucos
● si el sustrato es grasa da como productos ácidos grasos
La temperatura tuvo que ver mucho en las enzimas, ya que si sobrepasaba su temperatura
óptima las moléculas enzimáticas pierden su estructura espacial y, por lo tanto, su sitio activo.
Por eso no pueden unir el sustrato y, en consecuencia, actuar sobre él y el sacado de manchas
pierde resultados
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
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Beneficios y propiedades | NutriTienda: https://blog.nutritienda.com/amilasa/

Puig, R. (03 de 07 de 2019). Lifeder. Obtenido de Amilasa: características,
clasificación, estrucutura, funciones: https://www.lifeder.com/amilasa/
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carabobo. venezuela.

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BIOTECNOLOGÍA AMBIENTAL FCAG – UNJBG - 2021

“Año del Bicentenario del Perú: 200 años de Independencia"

Escuela Profesional de Ingeniería Ambiental

MSc. BROUSETT MINAYA, MAGALY

Gabriela Monje Casas Código: 2019-178069

el cual se obtiene un producto. El cambio implica la formación o rotura de un enlace covalente.

de las reacciones en un millón de veces.

Las enzimas empleadas en detergentes se encuentran disponibles en forma líquida y

utilizadas se pueden encontrar: proteasas (producidas principalmente por Bacillus licheniformis

o B. Amyloliquefaciens y Aspergillus flavus) que aceleran la degradación de proteínas y

removidos de los tejidos.

Las amilasas provenientes de Bacillus licheniformis, que degradan el almidón, sacando

Durante las últimas décadas, nuevos desarrollos en enzimología en combinación con la

aplicación del ADN y la ingeniería de proteínas han conducido a la bioingeniería de enzimas.

extremófilos, la identificación de nuevos compuestos y las rutas metabólicas, y la

caracterización molecular y bioquímica de componentes celulares. Debido a que muchos

procesos industriales requieren altas o bajas temperaturas o pH ácidos o alcalinos, los

organismos extremófilos que viven en condiciones ambientales extremas de temperatura,

esterilización de ropa de quirófano se prefiere un jabón que tenga biocatalizadores que

funcionen a altas temperaturas.

proteínas que aceleran los procesos de degradación, transformación o fabricación de sustancias.

han sido mejoradas por técnicas de ingeniería de proteínas o provienen de microorganismos

recombinantes (genéticamente modificados) para optimizar su proceso de fabricación.

1.1. Caracterización de las Enzimas Lipolíticas Lipasas

2013). Desde 1901 se ha estudiado la presencia de lipasas en los microorganismos Bacillus

prodigiosus , B. pyocyaneus y B. fluorescens. Sin embargo, su habilidad como catalizadoras de

la hidrólisis y sintetizadoras de ésteres ha sido descubierta desde hace unos 70 años

enzimas diferentes. (Ma F., 2019).

Debido al conocimiento existente sobre estas enzimas, a su disponibilidad y al hecho de que

versátiles y más ampliamente utilizadas en biotecnología”. (Bornscheuer UT., 2002).

Además, estas enzimas son altamente estables en un amplio rango de temperaturas, pH y

reacciones de síntesis, hidrólisis o de intercambio de grupos, muchas veces de forma altamente

quimio, regio o estereoespecífica (actúan sobre un compuesto químico muy concreto,

laterales o generar subproductos. (United States of America Environmental Protection Agency,

Al poder catalizar reacciones tanto en condiciones acuosas como no acuosas, sus

aplicaciones son muchas y muy variadas. Se utilizan en la medicina, en la industria alimenticia,

en química orgánica y en el tratamiento de aguas residuales, así como también como

biosensores y para la producción de biodiesel. Incluso se han hecho investigaciones sobre la

degradación de polímeros por la acción de lipasas de levaduras. (Olempska-Beer Z., 2016).

1.2. Clasificación de las enzimas lipasas

la familia V, la familia VI, la familia VII y la familia VIII.

1.2.1. Familia I o lipasas verdaderas

Las lipasas bacterianas verdaderas que primero se estudiaron y utilizaron industrialmente

proceden. Estas enzimas fueron subdivididas en pseudomonas del grupo 1, 2 y 3, de acuerdo

con la secuencia de sus aminoácidos.

1.2.2. Familia II o GDSL

decir, glicina-X-serina-X-aspártico. La característica más relevante de esta familia es que su

nucleophilic elbow (codo nucleofílico). (Ro HS., 2014)

1.2.3. Familia III

Estos autores resolvieron la estructura tridimensional de la lipasa extracelular de Streptomyces

1.2.4. Familia IV o lipasa sensible a hormona (LSH)

Un número elevado de enzimas de esta familia presentan en la secuencia de aminoácidos

(G-X-S-X-G) de las lipasas/esterasas bacterianas, también presentan la secuencia His-Gly-Gly-

responsables de su actividad catalítica, formando la triada catalítica.

En esta familia se encuentran enzimas de bacterias mesófilas (Pseudomonas oleovorans,

Acetobacter pasteurianus y Haemophilus influenzae), psicrófilas (Moraxella sp) y termófilas

(Sulfolobus solfataricus). Todas ellas muestran una similitud comprendida entre el 20 % y el

haloperoxidasas. Todas poseen la triada catalítica formada por la serina, el glutámico o el

aspártico y la histidina y el plegamiento característico de las α/β-hidrolasas.

entre 23 kDa y 26 kDa, y que curiosamente muestran un 40 % de homología con las

lisofosfolipasas de eucariotas. Hasta la resolución de la estructura tridimensional de la

carboxilesterasa de Pseudomonas fluorescens (1AUO), poco se sabía sobre esta familia. De

1.2.7. Familia VII