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Para definir las distintas condiciones ambientales que los laboratorios de biotecnología y de tipo
biológico deben reunir conforme a lo establecido en las disposiciones legales vigentes. A este respecto,
se pueden considerar las siguientes actividades laborales:
Para que puedan darse unas buenas condiciones de orden y limpieza es necesario también respetar las
dimensiones mínimas de los espacios de trabajo, permitiendo a trabajadores realizar sus actividades sin
riesgos para su seguridad y salud y en condiciones ergonómicas aceptables. Las dimensiones mínimas
que deben reunir tales espacios son las siguientes:
La separación entre los elementos materiales existentes en el laboratorio deberá ser suficiente para que
los trabajadores puedan realizar su labor en condiciones de seguridad, salud y bienestar.
Cuando el espacio libre de que se disponga en el laboratorio no permita a los trabajadores la libertad de
movimientos requerida para el desarrollo de su actividad, deberá disponerse de un espacio adicional
suficiente en las inmediaciones del puesto de trabajo.
Desinfección de plantas
Esterilización de material
Sala de lavado de material (potes, pinzas, botellones, etc.)
Sala de ingreso general
En la pre-cámara de ingreso al laboratorio (sala de ingreso general): los operarios dejan prendas
portadoras de ácaros como por ejemplo bufandas, ropa de lana en general y se procede a la colocación
de cubre calzado.
Una vez dentro del laboratorio se coloca mascarilla, botas, y guantes de látex (estas prendas son
indispensables para movilizarse dentro de las instalaciones).
Pre-cámara de ingreso a la cámara de cultivo: en dicho sector los operarios trabajan con mascarilla,
botas, guantes de látex, en esta zona se tienen que evitar los movimientos bruscos para no generar flujo
turbulento de aire y eliminar la menor cantidad de partículas por parte del operador.
Área de cubículos
Área de Laboratorio
Área de Siembra
Área de incubación de cultivos
Dado que ningún laboratorio puede ejercer un control absoluto sobre las muestras que recibe, el
personal puede verse expuesto a organismos de grupos de riesgo más altos de lo previsto. Esa
posibilidad debe tenerse presente en la elaboración de los planes y las políticas de seguridad.
Cada laboratorio debe adoptar un manual de seguridad o de trabajo en el que se identifiquen los riesgos
conocidos y potenciales y se especifiquen las prácticas y los procedimientos encaminados a eliminar o
reducir al mínimo esos riesgos. Las técnicas microbiológicas apropiadas son fundamentales para la
seguridad en el laboratorio y no pueden sustituirse por equipo de laboratorio especializado, que no pasa
de ser un complemento.
El laboratorio debe ser un lugar seguro para trabajar donde no se deben permitir descuidos o bromas.
Para ello se tendrán siempre presente los posibles peligros asociados al trabajo con materiales
peligrosos. Nunca hay excusa para los accidentes en un laboratorio bien equipado en el cual trabaja
personal bien informado. Normas que deben conocerse y seguirse en el laboratorio:
Examinar el estado de las piezas antes de utilizarlas y desechar las que estén defectuosas.
Desechar el material que haya sufrido golpes contundentes, aunque no se observen fisuras.
Efectuar el montaje de cada operación con especial cuidado, evitando que los distintos
elementos que intervienen queden tensionados, empleando los soportes y abrazaderas
adecuadas y fijando todas las piezas según la función a realizar.
No calentar directamente el vidrio con la llama. Para ello, se recomienda interponer un material
capaz de difundir el calor, como una rejilla metálica y utilizar preferentemente piezas de vidrio
PYREX.
Evitar que las piezas queden atascadas colocando una fina capa de grasa de silicona entre las
superficies de vidrio en contacto.
SEÑALIZACIÓN
En los laboratorios de biotecnología la señalización contribuye a indicar aquellos riesgos que por su
naturaleza y características no han podido ser eliminados. Considerando los riesgos más frecuentes en
estos lugares de trabajo, las señales a tener en cuenta son:
Señales de advertencia de un peligro
Tienen forma triangular y el pictograma negro sobre fondo amarillo. Las que con mayor frecuencia se
utilizan son:
Tienen forma triangular y el pictograma negro sobre fondo amarillo. Las que con mayor frecuencia se
utilizan son:
Señales de prohibición
De forma redonda con pictograma negro sobre fondo blanco. Presentan el borde del contorno y una
banda transversal descendente de izquierda a derecha de color rojo, formando ésta con la horizontal un
ángulo de 45º.
Otras señales
Salidas de emergencia y elementos de primeros auxilios (botiquín, duchas de emergencia, lavaojos, etc.).
Identificar las tuberías por el color con que están pintadas, en función del fluido por ellas transportado
1) Libre
2) Restringida
3) Transferencias
La circulación libre, por un pasillo periférico, permite a los visitantes ver el equipamiento y los
procedimientos del laboratorio a través de ventanas que comunican con las salas, sin necesidad de
ingresar al área aséptica. Asimismo este pasillo periférico de circulación libre permite el ingreso de los
abastecimientos y la salida de los elementos utilizados para los procedimientos.
Entre la circulación libre y la restringida hay aéreas de transferencia para personal y elementos. Toda la
unidad esta abastecida con aire filtrado, a presión positiva y a temperatura y humedad regulables. Se
han empleado para revestimiento de pisos y paredes materiales lisas, lavables y resistentes para
asegurar la higiene y antisepsia.
El Área de Circulación Restringida en la que se encuentran las salas de cultivo de tejidos, la oficina de
registro de los procedimientos, forman una unidad funcional en la que rige la estricta disciplina de una
sala de operaciones
Materiales:
Equipos
Estufa
Autoclave
Camara de Flujo laminar
Malla térmica
Agitador magnetico
Medidor de Ph
Reactivos
Agar
Sacarosa
Agua
Alcohol 90%
Legia
Carbon Activado
Levadura
NH4NO3
KNO3
Mg SO4. 7H2O
Mn SO4. H2O
Zn SO4. 7H2O
Cu SO4. 5H2O
Ca Cl2. 2H2O
KI
Co Cl2. 6H20
K H2 PO4
H3 BO3
Na2MoO4. 2H2O
Fe SO4. 7H2O
Na2 EDTA
Acido Nicotinico
Piridoxina
Tiamina
Glicina
Mioinositol
El área de lavado debe incluir por lo menos un lavadero grande con agua caliente y agua fría y una
fuente de agua de alto grado de pureza, preferiblemente agua doblemente destilada, y también debe
proveer basureros adecuados para el material vegetal, inorgánico y de vidrio que se deseche.
Materiales:
Probetas
Buretas
Erlemmeyer
Pipetas
Servilletas
Guantes
Fundas de basura
Mesones
Llaves de agua adecuadas
Equipos
Estufa
Autoclave
Reactivos
Legia
Hipoclorito de Sodio 5%
Alcohol 95%
Agua esteril
ÁREA DE TRASFERENCIA
En esta área del laboratorio se realiza el trabajo de escisión, inoculación y trasferencia de los espantes a
los medios de cultivo. Dado que este trabajo demanda los mas alto nivel de limpieza ambiental, se
recomida la estalación de gabinetes de flujo horizontal o vertical de aire filtrado bajo presión, o la
construcción de cuartos de trasferencia.
Sin embargo ciertas operaciones de inoculación como la excision y el cultivo de ápices y meristemas en
tubo de ensayo de boca angosta, se pueden realizar sobre una mesa limpia, ubicada en un lugar del
laboratorio libre de corrientes de aire y polvo. Los gabinetes de flujo laminar deben ubicarse, en lo
posible, en un lugar alejado de las puertas y con un mínimo de corriente de aire, con el fin de prolongar
la vida útil de los filtros.
Materiales:
Placas petry
Probetas
Erlemmeyer
Pipetas
Servilletas
Guantes
Fundas de basura
Pipetas
Pinzas
Asas
Frascos esteriles
Equipos
Hipoclorito de Sodio 5%
Alcohol 95%
Agua esteril
ÁREA DE INCUBACIÓN
Los cultivos se incuban en un cuarto apropiado o en gabinetes o cámaras de crecimiento; estas pueden
ser más eficientes en cuanto al control ambiental, pero son más costosas.
El área de incubación o crecimiento in vitro debe proporcionar un buen control de la temperatura (20-28
oC), de la iluminación (variables según las necesidades: 1000 a 5000 lux) y de la humedad relativa (70-
80%).
En el cuarto de incubación se instalan estanterías metálica o de madera para colocar los cultivos. Estas
estanterías puede tener dimensiones variables: el ancho entre 0.30m y 1.00 m, el largo de acuerdo con
el tamaño del cuarto, y la altura total de 1.80 a 2.20 m; la distancia entre entrápanos es de 0.20 a .50 m.
Esta área debe incluir, además uno espacio para cultivos en agitación y para cultivos estático en
oscuridad.
Es necesario propiciar una buena distribución del aire en este cuarto para evitar zonas de
recalientamento por efecto de las luces. Cuando se utilizan tubos fluorescentes, es conveniente sacar los
balastros fuera de este cuarto. Las regulación de la temperatura se puede lograr por medios de aparato
de aire acondicionado de pared o de sistema central. En cualquier caso, es necesario tomas
precauciones para evitar el calentamiento excesivo, instalando alarmas y controles para cortar la
iluminación cuando falle el aire acondicionado.
Equipos:
Alcohol 95%
ÁREA DE CRECIMIENTO
Durante el período de incubación, los cultivos son expuestos a condiciones ambientales disímiles al
ambiente externo.
La atmósfera interna se caracteriza por presentar una considerable variación diurna en la concentración
de CO2, humedad relativa elevada, temperatura constante e intensidad lumínica baja. A su vez, el medio
de cultivo compuesto por concentraciones elevadas de azúcares (en aquellos sistemas heterótrofos y
semiautótrofos de micropropagación), sales y reguladores del crecimiento, sumado a la ausencia de
microorganismos, generan anormalidades morfológicas, anatómicas y fisiológicas que las plantas
deberán corregir cuando son transferidas al ambiente externo. Este período de adaptación al nuevo
hábitat es llamado fase o etapa de aclimatación.
El retraso en el desarrollo de la cutícula y la escasa funcionalidad del aparato estomático que presentan
las hojas de la mayoría de las especies cultivadas in vitro, determinan una alta tasa de transpiración que
puede ocasionar la muerte por deshidratación.
Instalaciones:
Invernadero
Suministro de agua y electricidad
Luz natural
Materiales:
Macetas, bandejas
Camas de crecimiento
Sustratos
Fundas plásticas
Tamiz para sustratos
Pala, rastrillo
Basurero
Equipos:
Nebulizadores
Cámaras de alta humedad
Mobiliario:
ÁREA DE CUARENTENA
Toda actividad destinada a prevenir la introducción y/o propagación de plagas de cuarentena o para
asegurar su control oficial
La producción de materiales elites de sanidad certificada, se hace necesario contar con un área para la
recepción de las muestras o plantas destinadas a la limpieza clonal, generalmente protegida contra
insectos. Esta área de cuarentena debe estar separada del resto del laboratorio pero cercana al área de
control fitosanitario; donde se hacen pruebas necesarias para comprobar la sanidad del material
vegetal, especialmente enfermedades causadas por virus, bacterias y hongos.
Instalaciones:
Materiales:
Bandejas
Frascos
Basurero
Equipos:
Congelador - refrigerador
Mobiliario:
El objetivo de área de observación y examen es realizar observaciones periódicas de los cultivos, tanto
en medios semisólidos como en líquidos. Generalmente los microscopios (estéreo, compuesto, invertido
y otros) se encuentran en el área de incubación como en el de transferencia, pero opcionalmente
pueden estar en un área separada.
Instalaciones:
Suministro electricidad.
Materiales:
Equipos:
Microscopio binocular
Estereoscopio
lupas estereoscópicas
Mobiliario:
BODEGA
La bodega es un área disponible y adecuada para el almacenamiento de: reactivos, materiales, etc. La
operación de bodegas es la organización que se le da a estas para que el material que se va a resguardar
se haga de una forma ordenada, con facilidad de movibilidad y un estricto control.
Reactivos
Materiales
PRESUPUESTO
Terreno
Valor
Descripción Unidad Cantidad Unitario Valor Anual
Terreno m2 36 600 21,600.00
Subtotal 21,600.00
Imprevistos 432
Total 22,032.00
Maquinaria y Equipo
Descripción Unidad Cantidad Valor Unitario Valor Anual
Agitador magnético Un. 3 2950 8,850.00
Balanza de precisión Un. 4 3000 12,000.00
Microondas Un. 1 600 600.00
Autoclave Un. 1 980 980.00
Dispensador automático Un. 1 300 300.00
Microscopios Un. 5 4829 24,145.00
PH-metro Un. 1 800 800.00
Refrigerador Un. 1 2300 2,300.00
Destilador Un. 1 38000 38,000.00
Timer Un. 6 120 720.00
Cámara de Flujo Laminar Un. 2 40000 80,000.00
Sistema de filtración Un. 1 2500 2,500.00
Esterilizador Un. 3 2390 7,170.00
Subtotal 178,365.00
Imprevistos 3,567.30
Total 181,932.30
Material de Vidrio
Valor Valor
Descripción Unidad Cantidad Unitario Anual
probeta grad.b/vidrio 10 ml Un. 10 1.75 17.50
probeta grad.b/vidrio 50 ml Un. 10 2.67 26.70
probeta grad.b/vidrio 100 ml Un. 10 3.32 33.20
probeta grad.b/vidrio 250 ml Un. 10 7.00 70.00
probeta grad.b/vidrio 1000 m Un. 10 17.42 174.20
pipeta grad.ser.1/100 0,5 ml Un. 15 3.31 49.65
bureta grad.c/robin rect 50 ml Un. 6 43.01 258.06
vaso ppdo.graduado 100 ml Un. 20 1.67 33.40
vaso ppdo.graduado 250 ml Un. 20 1.97 39.40
matraz t.plastica 100 ml Un. 10 7.92 79.20
matraz t.plastica 500 ml Un. 10 14.42 144.20
matraz t.plastica 25 ml Un. 10 2.73 27.30
tubo ensayo 25 x 150 mm Un. 200 1.35 270.00
caja petri 150x30 mm Un. 200 4.27 854.00
Subtotal 2076.81
Imprevistos 41.5362
Total 2118.35
Reactivos
Cantida
Descripción Unidad d Valor Unitario Valor Anual
Hipoclorito de calcio 35% lt. 1 0.74 0.74
Alcohol 96% lt. 1 3.29 3.29
Carbon activado p.a. 100g gr. 1 4.76 4.76
Acido fólico 25g gr. 1 41.75 41.75
Acido ascórbico 500g gr. 1 29.75 29.75
Niacinamida 100g gr. 1 12.75 12.75
Acido nicotínico 500g gr. 1 30.75 30.75
Biotina 1g gr. 50 42.75 2137.5
sacarosa p.a. 500 gr gr. 5 7.19 35.95
agar-agar 500 gr gr. 10 124.83 1248.3
nutritivo agar 500 gr gr. 10 129.93 1299.3
M&S 10 lt lt. 1 6.75 6.75
Acido absicico 1g gr. 2 228.75 457.5
Subtotal 5309.09
Imprevistos 106.1818
Total 5415.2718
Equipo de Oficina
Valor
Descripción Unidad Cantidad Unitario Valor Anual
Telefonos convenionales Un. 1 35.00 35.00
Fax Un. 1 109.00 109.00
Sumadora Un. 1 50.00 50.00
Subtotal 194.00
Imprevistos 3.88
Total 197.88
Equipo de Computación
Valor
Descripción Unidad Cantidad Unitario Valor Anual
Computadoras Un. 3 595.00 1,785.00
Impresora multifuncional Un. 1 109.00 109.00
Implementos de red Un. 1 150.00 150.00
Subtotal 2,044.00
Imprevistos 40.88
Total 2,084.88
Herramientas
Descripción Unidad Cantidad Valor Unitario Valor Anual
Mesa de trabajo Un. 8 62 496.00
Taburetes Un. 8 60 480.00
Lavadero Un. 3 100 300.00
Vitrina de almacenamiento Un. 3 250 750.00
Subtotal 2,026.00
Imprevistos 40.52
Total 2,066.52
Muebles y enseres
Descripción Unidad Cantidad Valor Unitario Valor Anual
Escritorio gerencia Un. 1 110 110.00
Escritorio secretaria Un. 1 145 145.00
Archivadores Un. 1 87 87.00
Sillas tipo gerente Un. 1 174 174.00
Sillas tipo secretaria Un. 7 87 609.00
Sistema de aire acondicionado Un. 1 870 870.00
Casilleros Un. 2 174 348.00
Alfombras Un. 1 40 40.00
Equipo de sonido Un. 1 203 203.00
Subtotal 2,586.00
Imprevistos 51.72
Total 2,637.72
Materiales Indirectos
Descripción Unidad Cantidad Valor Unitario Valor Anual
Papeles Un. 12 4.00 48.00
Jabon Un. 15 0.60 9.00
Papel Higiénico Rollos 5 3.00 15.00
Trapeador Un. 6 1.50 9.00
Escoba Un. 6 1.50 9.00
Desinfectante Un. 4 3.20 12.80
Manguera Un. 2 4.00 8.00
Guantes Doc. 1 4.00 4.00
Subtotal 114.80
Imprevistos 2.30
Total 117.10
Insumos
Descripción Unidad Cantidad Valor Unitario Valor Anual
Material de limpieza Un. 3 10.50 31.50
Agua potable m3 150 0.15 22.50
Energía Eléctrica Kwh. 950 0.08 76.00
Subtotal 130.00
Imprevistos 2.60
Total 132.60
Inversion Total
Concepto Total
Maquinaria y Equipo 181,932.30
Terreno 22,032.00
Equipo de Oficina 197.88
Equipo de Computacion 2,084.88
Herramientas 2,066.52
Muebles y Enseres 2,637.72
Mano de Obra Directa 1,393.08
Mano de Obra Indirecta 1,351.70
Insumos 132.60
Materiales Indirectos 117.10
Material de Vidrio 2118.35
Reactivos 5415.2718
Subtotal 221,479.39
Imprevistos 44295.879
Total 265,775.27
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