PROTOCOLO QIAGEN

2. Añada 400 μl de tampón AP1 y 4 μl de ARNasa A. Agite en el vórtex e incube durante 10 min a
65 ° C.

Invierta el tubo 2-3 veces durante la incubación.

Nota: No mezcle Buffer AP1 y RNase A antes de usar.

3. Añada 130 µl de tampón P3. Mezclar e incubar durante 5 min en hielo.

4. Recomendado: Centrifugue el lisado durante 5 min a 20.000 x g (14.000 rpm).

5. Pipetee el lisado en una columna giratoria QIAshredder colocada en un tubo de recolección de 2

ml. Centrifugar durante 2 min a 20.000 x g.

6. Transfiera el flujo a través de un tubo nuevo sin alterar el gránulo si está presente. Agregar

1,5 volúmenes de Tampón AW1 y mezclar pipeteando.

7. Transfiera 650 μl de la mezcla a una columna de centrifugación DNeasy Mini colocada en un

recipiente de 2 ml.

tubo de recogida. Centrifugar durante 1 min a ≥6000 x g (≥8000 rpm). Deseche el flujo continuo.

Repita este paso con la muestra restante.

8. Coloque la columna de centrifugado en un nuevo tubo de recogida de 2 ml. Añada 500 μl de

tampón AW2 y centrifugar durante 1 min a ≥6000 x g. Deseche el flujo continuo.

9. Agregue otros 500 μl de tampón AW2. Centrifugar durante 2 min a 20.000 x g.

Nota: Retire la columna de centrifugado del tubo de recolección con cuidado para que la columna
no entrar en contacto con el flujo continuo.

10.Transfiera la columna de centrifugado a un nuevo tubo de microcentrífuga de 1,5 ml o 2 ml.

11.Añadir 100 μl de tampón AE para la elución. Incube durante 5 min a temperatura ambiente
(15–25 ° C). Centrifugar durante 1 min a ≥6000 x g.