Apa de Biologia Molecular, Paralelo E.

FICHA DE IDENTIFICACIÓN DE TRABAJO DE INVESTIGACIÓN
Título Extracción casera de la cadena de ADN del Maíz para la detección de

Organismos Genéticamente Modificados
Nombres y Apellidos Código de estudiantes

Autor/es Carrion Apaza Nataly Jilari 77310
Mallcu Yujra Marco Antonio 77266
Mamani Flores Silvana Mical 47116
Mamani Mita Valeria 75894
Marca Yupanqui Adrián Christian 80273
Marca Yupanqui Graciela Patty 75622
Mayta Balcazar Brenely Ximena 80414
Morales Rengel Marcelo Jesús 80402
Quisbert Salas Marco Antonio 80796
Rocabado Sejas Graciela Stephani 80601
Vallejo Ramos Betty Isabel 80793
Velasquez Vasquez Dameiva Belen 80564
Fecha /06/2021
Título: Extracción casera de la cadena de ADN del Maíz para la detección de Organismos Genéticamente Modificados
Autor/es: Morales M. Velasquez D. Quisbert M Rocabado G. Mallcu M. Mamani V. Marca A. Carrion N.Marca G. Vallejo B. M.
Mayta B.
Carrera Bioquímica y farmacia

Asignatura Biología molecular
Grupo E
Docente Dr. Yeny Jimena Chambi Delgado
Periodo Académico I-2021
Subsede La Paz
Copyright © (AGREGAR AÑO) por (NOMBRES). Todos los derechos reservados.
.
RESUMEN:
Los organismos genéticamente modificados tienen una enorme preponderancia en los

mercados alimenticios actuales, en nuestra sociedad se prohibió el uso y el consumo de
alimentos con modificaciones genéticas, pero eso no imposibilita la entrada de alimentos
importados con alto contenido de OGMs, si bien hasta el momento no se encontraron evidencias
científicas de que los alimentos OGMs sean dañinos para la salud del ser humano, es necesario
el poder contar con información concreta y real la existencia o no de OGMs en cualquier
alimento, para eso es primordial el extraer la cadena de ADN de cualquier tipo de organismo
vivo, ya sea vegetal, animal o bacterial, esto es el objeto central del presente trabajo de
investigación, posteriormente por medio del método PCR se detectan OGM.
Lamentablemente debido a la coyuntura actual es imposible el acceder a un laboratorio para

aislar una cadena de ADN, es por eso que con el fin de dar el primer paso en la detección de
OGMs se realizo un método casero para el aislamiento de las cadenas de ADN del maíz, como
muestra central y de otros vegetales con el fin de corroborar que el experimento sea homogéneo
en los resultados.
Palabras clave: ADN, OGMs, Maíz genéticamente modificado
ABSTRACT:
Genetically modified organisms have an enormous preponderance in current food markets, in our
society the use and consumption of foods with genetic modifications has been prohibited, but that does
not preclude the entry of imported foods with a high content of GMOs, although until now no scientific
evidence was found that GMO foods are harmful to human health, it is necessary to have concrete and
real information on the existence or not of GMOs in any food, for that it is essential to extract the DNA
chain from any type of living organism, be it plant, animal or bacterial, this is the central object of this
research work, later by means of the PCR method GMOs are detected.
Unfortunately, due to the current situation, it is impossible to access a laboratory to isolate a DNA
chain, that is why in order to take the first step in the detection of GMOs, a home method was carried out
for the isolation of DNA chains. of corn, as the central sample and of other vegetables in order to
corroborate that the experiment is homogeneous in the results.
Asignatura: Biología molecular y genética

Carrera: Bioquímica y Farmacia Página 36 de 39
Mayta B.
Key words: DNA, GMOs, Genetically modified corn

Mayta B.
Tabla De Contenidos
Lista De Tablas...........................................................................................................................4
Lista De Figuras..........................................................................................................................5
Introducción................................................................................................................................6
Capítulo 1. Planteamiento del Problema.....................................................................................7
1.1. Formulación del Problema.........................................................................................7
1.2. Objetivos....................................................................................................................7
1.2.1 Objetivo general……………………………………………………………...…….7
1.2.2 Obejtivos específicos……………………………………………………………….7
1.3. Justificación...............................................................................................................7
1.4. Planteamiento de hipótesis........................................................................................7
Capítulo 2. Marco Teórico..........................................................................................................8
2.1 Área de estudio/campo de investigación.......................................................................8
2.2 Desarrollo del marco teórico.........................................................................................8
2.2.1 Ácido desoxirribonucleico…………………………………………………………8
2.2.2 Organismos genéticamente modificados………………………………………..…8
2.2.3 Maíz genéticamente modificado……………………………………………...……8
2.2.4 Métodos de extracción de cadenas de ADN en el laboratorio………………….… 8
2.2.5 Método casero de extracción de cadenas de AND………………………………....8
Capítulo 3. Método.....................................................................................................................9
3.1 Tipo de Investigación....................................................................................................9
3.2 Operacionalización de variables....................................................................................9
3.3 Técnicas de Investigación.............................................................................................9
3.3.1 Materiales.………………………………………………………………………….9
3.3.2 Procedimiento………………………………………………………………………9
3.4 Cronograma de actividades por realizar........................................................................9
Capítulo 4. Resultados y Discusión..........................................................................................10
Capítulo 5. Conclusiones..........................................................................................................11
Referencias................................................................................................................................12
Apéndice...................................................................................................................................13

Mayta B.
Lista De Tablas
Tabla 1 Operacionalización de variables…………………………………………………..…25

Tabla 2 Técnicas de investigación…………………………………………………………....26
Tabla 3 Materiales…………………………………………………………………………….26
Tabla 4 Cronograma de actividades por realizar…………………………………………...…28

Mayta B.
Lista De Figuras
Figura 1. Cadena de ácido desoxirribonucleico………………………………………………..11

Figura 2. Muestra de la siembra de hongos en un agar glucosado de Sabouraud……………...15
Figura 3. Muestra de la extracción del genoma de ratas en laboratorio……………………….16
Figura 4. Extracción del gen beta-caroteno……………………………………………………16
Figura 5. Maíz tolerante a herbicida…………………………………………………………...19
Figura 6. El ADN se muestra como unas hebras blanquecinas entre el etanol y la solución
acuosa……………………………………………………………………………….………….23

Mayta B.
Introducción
El maíz tiene su origen en América, hoy en día se halla disperso por todo el mundo y ha
contribuido sustancialmente a la alimentación de la humanidad. Son los pueblos agricultores
del suroeste de México los que hace miles de años modificaron de manera natural el teosinte
(planta silvestre) para lograr su transformación en lo que hoy conocemos como el cultivo de
maíz. Se describieron cerca de 260 razas de maíz y más de la mitad son provenientes de la zona
andina.
Se considera a Bolivia como centro de origen de maíces nativos y se afirma que en el país se
han clasificado 7 complejos raciales (alto andino, amazónico, perla, morocho, harinoso de los
valles templados, pisankalla y cordillera), aspecto que confirma una vez más la gran riqueza y
biodiversidad genética de nuestro país.
Pese a nuestra riqueza genética y aun cuando existe la prohibición de importación para los
productos OGM, el maíz modificado genéticamente es uno de los bienes mas importados en el
país.
Los OGM´s son organismos a los que se les inserta material genético de especies distintas a la
que pertenecen, mediante técnicas de ingeniería genética. Con estas técnicas se trascienden las
barreras reproductivas que existen entre las diferentes especies, haciendo posible que, por
ejemplo, se le inserte un gen de bacteria a una planta.
En el maíz particularmente se realizo la modificación genética por medio de técnicas de
ingeniería genética, con las que le han agregado genes de otros organismos. Las dos
características más comunes en los maíces transgénicos actuales son la tolerancia a herbicidas y
la resistencia a insectos.

Mayta B.
Capítulo 1. Planteamiento del Problema
1Formulación del Problema
¿Es posible realizar la extracción de cadenas de ADN por medio de la experimentación en casa?
2Objetivos
Objetivo General
Extraer cadenas de ADN del Maíz de manera casera para la detección de modificaciones
genéticas.
1.2.2 Objetivos Específicos
 Identificar las características de los organismos genéticamente modificados.

 Reconocer las características del maíz genéticamente modificado.
 Distinguir los distintos métodos de extracción de ADN aplicados en laboratorio.
 Presentar la metodología para la extracción casera de ADN.
3 Justificación
Los alimentos genéticamente modificados acaparan cada vez más las alacenas de nuestras
tiendas, si bien aun no se demostró científicamente que existan efectos adversos para el ser
humano sobre el consumo de alimentos genéticamente modificados, es necesario el poder
determinar si un alimento fue o no modificado genéticamente,
Pero como actualmente no se pueden acceder a laboratorios ni siquiera para poder aislar las
cadenas de ADN, surge la idea de intentar un método con elementos caseros que permita dar el
primer paso en la determinación de organismos genéticamente modificados, que es el aislar la
cadena de ADN de cualquier alimento o célula animal.
El fin de este trabajo es aislar cadenas de ADN de manera casera para un posterior analisi a
través del método PCR detectar si fue o no modificado genéticamente, como se vera mas
adelante el llevar a cabo dicho trabajo es extremadamente sencillo y con la facilidad de encontrar

Mayta B.
todos los elementos necesarios en nuestras casas sin el apuro que probablemente significaría el
trabajar en un laboratorio.
4Planteamiento de hipótesis
Al no contar con laboratorios para la extracción del ADN de productos orgánicos por la
pandemia, el método de extracción casero de cadenas de ADN resulta ser una opción más que
posible, requiere de poca tecnificación y pocos materiales, lo que la hace ideal como respuesta a
la carencia de laboratorios.

Mayta B.
Capítulo 2. Marco Teórico
2.1 Área de estudio/campo de investigación
El área de estudio fue realizada mediante la recopilación de datos e información de recursos

bibliográficos.
2.2 Desarrollo del marco teórico
2.2.1 Ácido Desoxirribonucleico
Al realizar la hidrolisis completa de los ácidos nucleicos, se obtienen tres tipos de

componentes, azucares, bases nitrogenadas y ácido fosfórico.
El azúcar, en el caso de los ácidos desoxirribonucleicos (ADN) es la 2-desoxi-D-ribosa y en el
caso de los ácidos ribonucleicos (ARN) es la D-ribosa.
Las bases nitrogenadas que forman parte de los ácidos nucleicos son de dos tipos, púricas y
pirimidínicas. Las bases púricas derivadas de la purina (fusión de un anillo pirimidínico y uno de
imidazol) son la Adenina (6-aminopurina) y la Guanina (2-amino-6-hidroxipurina). Las bases
pirimidínicas (derivadas de la pirimidina) son la Timina (2,6-dihidroxi-5-metilpirimidina o
también llamada 5-metiluracilo), Citosina (2-hidroxi-6-aminopirimidina) y Uracilo (2,6-
dihidroxipirimidina). Las bases nitrogenadas que forman normalmente parte del ADN son:
Adenina (A), Guanina (G), Citosina y Timina (T). Las bases nitrogenadas que forman parte de el
ARN son: Adenina (A), Guanina (G), Citosina (C) y Uracilo (U). Por tanto, la Timina es
específica del ADN y el Uracilo es específico del ARN.
La unión de la base nitrogenada a la pentosa recibe el nombre de nucleósido y se realiza a
través del carbono 1’ de la pentosa y los nitrógenos de las posiciones 3 (pirimidinas) o 9
(purinas) de las bases nitrogenadas mediante un enlace de tipo N-glucosídico. La unión del
nucleósido con el ácido fosfórico se realiza a través de un enlace de tipo éster entre el grupo OH
del carbono 5’ de la pentosa y el ácido fosfórico, originando un nucleótido. Los nucleótidos son
las unidades o monómeros utilizados para construir largas cadenas de polinucleótidos.

Mayta B.
Tanto los nucleótidos como los nucleósidos pueden contener como azúcar la D-ribosa
(ribonucleótidos y ribonucleósidos) o la pentosa 2-desoxi-D-ribosa (desoxirribonucleótidos y
desoxirribonucleósidos). Además, los nucleótidos pueden tener 1, 2 ó 3 grupos fosfato unidos al
carbono 5’ de la pentosa, existiendo, por tanto, nucleótidos 5’ monofosfato, nucleótidos 5’
difosfato y nucleótidos 5’ trifosfato. En algunos casos el ácido fosfórico se une a la pentosa por
el carbono 3’, existiendo nucleótidos 3’ monofosfato, difosfato o trifosfato según el número de
grupos fosfato que posea.
Los nucleótidos se unen entre sí para formar largas cadenas de polinuclóetidos, esta unión
entre monómeros nucleótidos se realiza mediante enlaces fosfodiéster entre los carbonos de las
posiciones 3’ de un nucleótido con la 5’ del siguiente.
Figura 1 Cadena de ácido desoxirribonucleico
Proporciones de las bases nitrogenadas

Al principio se pensaba que los ácidos nucleicos eran la repetición monótona de un
tetranucleótido, de forma que no tenían variabilidad suficiente para ser la molécula biológica que
almacenara la información. Sin embargo, Chargaff (1950) demostró que las proporciones de las
bases nitrogenadas eran diferentes en los distintos organismos, aunque seguían algunas reglas.
Estas reglas de Chargaff se cumplen en los organismos cuyo material hereditario es ADN de
doble hélice y son las siguientes:

Mayta B.
 La proporción de Adenina (A) es igual a la de Timina (T). A = T. La relación entre

Adenina y Timina es igual a la unidad (A/T = 1).
 La proporción de Guanina (G) es igual a la de Citosina (C). G= C. La relación entre
Guanina y Citosina es igual a la unidad (G/C=1).
 La proporción de bases púricas (A+G) es igual a la de las bases pirimidínicas (T+C).
(A+G) = (T + C). La relación entre (A+G) y (T+C) es igual a la unidad (A+G) /(T+C)
=1.
Sin embargo, la proporción entre (A+T) y (G+C) era característica de cada organismo,
pudiendo tomar, por tanto, diferentes valores según la especie estudiada. Este resultado indicaba
que los ácidos nucleicos no eran la repetición monótona de un tetranucleótido. Existía
variabilidad en la composición de bases nitrogenadas.
El modelo de la doble hélice: Watson y Crick
Una vez demostrado que los ácidos nucleicos eran los portadores de la información genética,
se realizaron muchos esfuerzos encaminados a determinar su estructura con exactitud. Watson y
Crick (1953) fueron los primeros investigadores en proponer una estructura para los ácidos
nucleicos y su labor investigadora se vio recompensada con el Premio Nobel en 1962, Premio
Nobel que compartieron con M. H. F. Wilkins y que se les concedió por sus descubrimientos en
relación con la estructura molecular de los ácidos nucleícos y su significación para la transmisión
de la información en la materia viva. Para realizar su trabajo emplearon dos tipos de datos ya
existentes.
 Por un lado, utilizaron los datos obtenidos varios años antes por Chargaff (1950),
relativos a la composición de bases nitrogenadas en el ADN de diferentes organismos.
 El otro tipo de datos eran los procedentes de estudios de difracción de rayos X sobre
fibras de ADN. Para determinar la estructura tridimensional o disposición espacial de las
moléculas de ADN, se hace incidir un haz de rayos X sobre fibras de ADN y se recoge la
difracción de los rayos sobre una película fotográfica. La película se impresiona en
aquellos puntos donde inciden los rayos X, produciendo al revelarse manchas. El ángulo
de difracción presentado por cada una de las manchas en la película suministra
información sobre la posición en la molécula de ADN de cada átomo o grupo de átomos.

Mayta B.
Mediante esta técnica de difracción de rayos X se obtuvieron los siguientes resultados:

 Las bases púricas y pirimidínicas se encuentran unas sobre otras, apiladas a lo largo del
eje del polinucleótido a una distancia de 3,4 Å. Las bases son estructuras planas
orientadas de forma perpendicular al eje (Astbury, 1947).
 El diámetro del polinucleótido es de 20 Å y está enrollado helicoidalmente alrededor de
su eje. Cada 34 Å se produce una vuelta completa de la hélice.
 Existe más de una cadena polinucleotídica enrollada helicoidalmente (Wilkins et el.
1953, Frankling y Gosling, 1953).
Basándose en estos dos tipos de datos Watson y Crick propusieron su Modelo de estructura para
el ADN conocido con el nombre de Modelo de la Doble Hélice. Las características del Modelo
de la Doble Hélice son las siguientes:
 El ADN es una doble hélice enrollada helicoidalmente “a derechas” (sentido dextrorso).
Algo parecido a dos muelles entrelazados.
 Enrollamiento de tipo plectonémico: para separar las dos hélices es necesario girarlas
como si fuera un sacacorchos.
 Cada hélice es una serie de nucleótidos unidos por enlaces fosfodiéster en los que un
grupo fosfato forma un puente entre grupos OH de dos azúcares sucesivos (posiciones 3’
de un azúcar y 5’ del siguiente).
 Las dos hélices se mantienen unidas mediante puentes o enlaces de hidrogeno producidos
entre las bases nitrogenadas de cada hélice. Siguiendo los datos de Chargaff (1959), la
Adenina de una hélice aparea con la Timina de la hélice complementaria mediante dos
puentes de hidrógeno. Igualmente, la Guanina de una hélice aparea con la Citosina de la
complementaria mediante tres puentes de hidrógeno.
 Las dos hélices por razones de complementaridad de las bases nitrogenadas son
antiparalelas, teniendo secuencias de átomos inversas. Una hélice lleva la secuencia 5’P
→ 3’ OH , mientras que la hélice complementaria sigue la secuencia de átomos 3’OH →
5’P.
 El diámetro de la doble hélice es de 20 Å.

Mayta B.
 Las bases nitrogenadas son estructuras planas perpendiculares al eje de la doble hélice y
están apiladas unas sobre otras a una distancia de 3,4 Å. Cada 10 bases, cada 34 Å se
produce una vuelta completa de la doble hélice (360º).
 Las bases se encuentran en sus configuraciones cetónicas, cumpliendo así las reglas de
apareamiento A-T y G-C.
 La secuencia de bases nitrogenadas puede ser cualquiera, no existe ninguna restricción
2.2.2. Organismos Genéticamente Modificados
Según María Estela Raffin, Argentina 2021, menciona que los organismos genéticamente
modificados son todos aquellos seres vivientes cuyo material genético ha sido adulterado por
intervención humana como fruto de la ingeniería genética, lo cual puede implicar la selección
artificial es decir el cruce controlado de especie o bien técnicas de inserción de genes; también
suelen ser microrganismos como bacterias o levaduras, además especies animales y vegetales,
que sirven de insumo para estudios científicos experimentales, cuyo consumo puede ser un
bien y solución al tema del hambre en el mundo, o una catástrofe para la biodiversidad del
planeta ya que se ha demostrado una alteración provocando diferentes tipos de daño en el
organismo de los animales genéticamente modificados.
Tipos de organismos genéticamente modificados
Según María Estela Raffin, Argentina 2021, manifiesta que podemos distinguir tres tipos de
organismos transgénicos producidos en la actualidad:
Microorganismos transgénicos
Por lo que Maria Raffin, indica que se trata de levaduras, hongos y bacterias, generalmente,
empleadas en la obtención de sustancias médicas y alimenticias de gran importancia.
Por ejemplo, la insulina para uso humano que era muy difícil y costosa de sintetizar, pero
gracias a la manipulación genética, se la puede obtener a partir de bacterias cuyo genoma ha sido
genéticamente modificado e insertar genes humanos.

Mayta B.
Figura 2. Muestra de la siembra de hongos en un agar glucosado de Sabouraud
Animales transgénicos
Maria Raffin investigadora de Argentina 2021, manifiesta además que los

animales transgénicos suelen estar destinados al uso de laboratorio, o para la obtención de
proteínas humanas o de alimentos transgénicos, en otros casos se manipula genéticamente a cierto
tipo de animales para consumo a gran escala como los salmones que estos una vez modificados
genéticamente adquieren masa y peso en poco tiempo.
Por ejemplo, al estudiar la hormona del crecimiento de los ratones y lograr manipularla para
obtener ejemplares de mayor tamaño, se pudo generar bovinos de mayor masa y crecimiento más
veloz, para alimentar así la industria cárnica de manera más eficiente o generar vacas de mayor
capacidad generadora de leche, para la industria láctea.

Mayta B.
Figura.3. Muestra de la extracción del genoma de ratas en laboratorio
Plantas transgénicas
Según María Raffin 2021, las plantas genéticamente modificadas suelen ser cultivos

alimenticios, y han sido modificados para maximizar su producción, para resistir a ambientes más
extremos o a productos pesticidas que antiguamente las dañaban. Muchas de estas especies
transgénicas se cosechan para la industria del biocombustibles.
Figura 4. Extracción del gen de beta - caroteno
2.2.3. Maíz genéticamente modificado

Mayta B.
El cultivo de maíz genéticamente modificado se ha incrementado sustancialmente desde su

introducción en el comercio. Los maíces modificados genéticamente que se encuentran
actualmente en el mercado responden a dos características agronómicas: resistencia a insectos
(Bt) y tolerancia a herbicidas. La primera variedad de maíz modificado genéticamente
comercializada fue el maíz resistente a insectos, introducida en el año 1996 en los Estados
Unidos, James, 2004.
Maiz Bt
El maíz Bt es una planta modificada genéticamente mediante biotecnología moderna para
defenderse a si misma del ataque de insectos lepidópteros. Utilizando la tecnología de ADN
recombinante se modificó el maíz, insertando un gen de la bacteria Bacillus thuringensis, Bt, de
tal modo, que sus hojas, tallo y polen expresaran la proteína Bt de la bacteria. El maíz Bt
constituye una importante y nueva herramienta para el control de los daños y pérdidas causadas
por plagas de insectos.
Bacillus thuringiensis
Es una bacteria del suelo que en condiciones naturales produce la proteína cristalina Bt. Esta
proteína es el ingrediente activo que ha sido utilizado por los agricultores y jardineros durante 40
años en la agricultura tradicional y orgánica. Las diferentes subespecies de Bt producen
diferentes proteínas llamadas proteínas “Cry”, existiendo más de 200 tipos que son clasificadas
según su estructura y los insectos que controlan (Metz, 2003). Las proteínas Bt tipo Cry,
controlan algunas de las plagas del maíz, entre ellas, el barreneador del tallo o taladro, nombre
común con que se designa en Europa a Ostrinia nubilialis, uno de los insectos más destructivos y
por consiguiente una de las plagas con mayor impacto económico en la producción de maíz. Se
ha establecido adicionalmente la capacidad de controlar otros insectos lepidópteros plaga tales
como: el gusano barrenador del Suroeste (Diatraea grandiosella), el gusano cortador negro
(Agrotis ipsilon) y gusano cogollero (Spodoptera sp), así como al cucarrón de las raíces,
coleóptero del género Diabrótica (Chrysomelidae), (AGBIOS, 2002). El mecanismo de acción de
las proteínas Cry es tan especifico que, a pesar de ser muy efectivo contra algunas de estas plagas
del maíz, no genera efecto sobre otros insectos no objetivo y es seguro tanto para el hombre
como para los animales (pájaros, peces, ganado, entre otros). En el caso de los mamíferos no

Mayta B.
existen receptores para la toxina Bt en la superficie de las células intestinales de mamíferos, por
lo cual, los humanos y el ganado, entre otros, no son susceptibles a estas proteínas (Metz, 2003).
Maíz tolerante a herbicida
Son diversos los factores que afecta la producción eficiente de maíz, entre ellos, que el cultivo
pueda crecer libre de la competencia de malezas. El control de plantas no deseadas o malezas en
la gran mayoría de los casos, se logra con la aplicación oportuna de herbicidas autorizados. Los
herbicidas son sustancias químicas empleadas para el control de las malezas, práctica esencial
para todo tipo de agricultura. Sin embargo, la aplicación de herbicidas para el control de malezas
puede afectar el cultivo si el producto no es bien tolerado por la planta. Con el objeto de superar
estos inconvenientes, en la década de los 90 se desarrollaron plantas capaces de tolerar la
aplicación de herbicidas no selectivos, mediante la utilización de las modernas técnicas de
biotecnología. El maíz tolerante a herbicidas es un maíz que ha sido mejorado mediante el uso de
tecnología de ADN recombinante para tolerar la aplicación de cierto tipo de herbicidas. Con el
empleo de estas tecnologías ha sido posible desactivar o reemplazar la secuencia de
susceptibilidad por otra que confiera resistencia y que permita a la planta de cultivo tolerar la
aplicación del herbicida.
En el caso del maíz se han desarrollado líneas tolerantes a tres herbicidas, glifosato,
glufosinato de amonio e imidazolinonas. Los genes de tolerancia empleados para generar la
resistencia a estos herbicidas, en los dos primeros eventos, provienen de bacterias que
naturalmente presentan esta característica. El glifosato funciona inhibiendo la enzima 5 -
enolpiruvilsikimato - 3 - fosfato sintasa (EPSPS), la cual juega un papel esencial en la síntesis de
aminoácidos como la fenilalanina, la tirosina y el triptófano. En los maíces modificados
genéticamente se ha introducido un gen de una bacteria del suelo que produce la enzima EPSPS
tolerante al glifosato. La introducción de esta característica le permite a la planta tolerar las
aspersiones con glifosato, de este modo la planta de cultivo no será afecta y por el contrario las
malezas sí. En el caso de la tolerancia al glufosinato, la planta de maíz ha sido modificada con un
gen de una bacteria, que codifica la enzima fosfinotricina acetiltransferasa (PAT), que le otorga
la característica de transformar la fosfinotricina, compuesto activo del glufosinato, en una
sustancia no tóxica (Halford, 2003). Los herbicidas del grupo de las imidazolinonas, actúan
inhibiendo la enzima acetolactato sintetasa (ALS), la cual es clave en la producción de

Mayta B.
aminoácidos como valina, leucina e isoleucina. Líneas de maíz con tolerancia a herbicidas de
este grupo han sido desarrolladas mediante transformación genética (Kleter et al, 2000). También
empleando mutagénesis química se han obtenido variedades de maíz tolerantes a algunos grupos
de estos herbicidas; la tolerancia al herbicida en este último caso, resultó de una mutación
inducida a la enzima ALS, evitando de esta manera que las imidazolinonas se liguen a la enzima
(AGBIOS, 2002).
Figura 5. Maíz tolerante a herbicida

2.2.4. Métodos de Extracción de cadenas de ADN en laboratorio
La extracción y purificación de ácidos nucleicos constituye la primera etapa de la mayoría de
los estudios de biología molecular y de todas las técnicas de recombinación de ADN. En este
caso, los métodos de extracción permiten obtener ácidos nucleicos purificados a partir de
diversas fuentes para después realizar análisis específicos de modificaciones genéticas mediante
la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). La calidad y la pureza de los ácidos nucleicos son
dos de los elementos más importantes en ese tipo de análisis. Si se desea obtener ácidos
nucleicos muy purificados, que no contengan contaminantes inhibidores, es preciso aplicar
métodos de extracción adecuados.
Dada la gran variedad de métodos de extracción y purificación de ácidos nucleicos existentes,
la elección de la técnica más adecuada suele efectuarse conforme a los criterios siguientes:
 Acido nucleica diana;
 Organismo fuente;

Mayta B.
 Material inicial (tejido, hoja, semilla, material transformado, etc.);

 Resultados deseados (rendimiento, pureza, tiempo que requiere la purificación);
 Uso posterior (PCR, clonación, etiquetado, transferencia, RT-PCR, síntesis de
 ADNc, etc.).
 Extracción y Purificación de ADN 4
 Análisis de la Presencia de Organismos Genéticamente Modificados en Muestras de
Alimentos.
A continuación, se recogen los principios de algunos de los métodos de extracción y
purificación de ácidos nucleicos que más se emplean en la actualidad
Fast ID Genomic DNA:
En tubos de 15 mL se mezclaron 2 g de la muestra y 6 mL de solución de lisis, se
homogeneizó y se agregaron 30 μL de proteinasa K, se homogeneizó con vortex, se incubó 1 h a
65 °C y centrifugó 5 min a 4500 g. Un mL de sobrenadante, por duplicado, se transfirió a un
tubo de 2 mL y se agregó un volumen igual de cloroformo, se agitó en vortex y se centrifugó 5
min a 9391 g. De la fase acuosa se transfirieron 900 μL a tubos de 2 mL, se agregó un volumen
igual de solución de unión y se agitó en vortex. La mezcla se centrifugó 3 min a 9391 g, el
sobrenadante se pasó a través de una columna de unión de ADN colocada en el sistema de vacío
para columnas de unión a ADN. En el mismo equipo se lavaron las columnas con 800 μL de
solución de lavado y se realizaron tres lavados con 800 μL de etanol al 75 %; la última
centrifugación se realizó a 9391 g por 3 min. La columna se transfirió a microtubos de 1.6 mL y
se agregaron 50 μL de amortiguador 1X TE, se incubó 5 min a 65 °C, se centrifugó 3 min a
9391 g y se repitió una vez el procedimiento con 50 μL de amortiguador 1X TE, para obtener un
volumen final de 100 μL de amortiguador 1X TE con ADN en suspensión. La extracción de
ADN
Centrifugación
La centrifugación selectiva constituye un método de purificación eficaz. Así, por ejemplo, la
ultracentrifugación en gradientes autogenerados de CsCl con fuerzas g elevadas se lleva
empleando mucho tiempo para purificar plásmidos. La centrifugación suele asociarse a otros
métodos, como la cromatografía de columna centrifugada, en cuyo caso se combina la

Mayta B.
permeación sobre gel y la centrifugación para separar el ADN o ARN de contaminantes más
pequeños (sales, nucleótidos, etc.), intercambiar tampones o seleccionar según el tamaño.
Algunos procedimientos combinan la adsorción selectiva en matriz cromatográfica (véase el
apartado anterior «Cromatografía») y la elución por centrifugación para purificar de forma
selectiva un tipo de ácido nucleico.
Método de calentamiento
La pata fue homogeneizada de forma manual en nitrógeno líquido y 50 µL de agua destilada.
Se incubó a 93 °C durante 15 min. Se realizó una centrifugación a 8 000 g por 10 min y el
sobrenadante se conservó a - 20 °C.
Método del acetato de potasio:
La pata fue homogeneizada de forma manual en 100 µL de tampón de lisis (NaCl 0,1 M;
sacarosa 0,2 M; EDTA 50 mM; tris-HCl 100 mM pH 8,25; SDS 0,05 %). La suspensión se
incubó durante 30 min a 65 °C. Los ácidos nucleicos se extrajeron adicionando 14 µL de acetato
de potasio 8 M incubándose en hielo durante 15 min, seguido de una centrifugación a 8
000 g durante 10 min a 4 ºC donde se colectó la fase acuosa. El ADN se precipitó a - 20 ºC
durante 30 min en presencia de 2 volúmenes de etanol absoluto que contenía acetato de sodio 0,3
M. Posteriormente, se centrifugó la mezcla a 10 000 g durante 20 min y el precipitado se lavó
con etanol (70 %). Después de secar a temperatura ambiente, el ADN se disolvió en 50 µL de
tampón TE. El ARN restante se eliminó con RNAsa H (Boehringer Mannheim), la suspensión se
incubó a 37 ºC durante 1 h. Después de extraer con igual volumen de cloroformo-alcohol
isoamílico (24:1), la fase acuosa se conservó a - 20 °C.
Método de extracción y purificación con CTAB
El protocolo del método del bromuro de cetil-trimetil amonio (CTAB) fue elaborado por
Murray y Thompson en 1980 (Murray y Thompson, 1980) y publicado posteriormente, en 1987,
por Wagner y sus colaboradores (Wagner et al., 1987). El método es adecuado para extraer y
purificar ADN de vegetales y alimentos derivados de vegetales y está especialmente indicado
para eliminar los polisacáridos y los compuestos polifenólicos, que, de otro modo, alterarían la
pureza del ADN y, por tanto, su calidad. Este procedimiento se ha aplicado con frecuencia en
genética molecular de los vegetales y ha sido probado en ensayos de validación para detectar
OGM

Mayta B.
2.2.5. Método casero de extracción de cadenas de ADN.

Las plantas poseen tres tipos de ADN: el nuclear, el mitocondrial y el cloroplástico. Además,
la mayoría de las plantas presentan poliploidia, esto es, la condición de algunas células u
organismos de poseer más de un conjunto de cromosomas.
Por ejemplo, los seres humanos tenemos dos pares de 23 cromosomas (23 x 2 = 46
cromosomas en total), es decir, somos diploides. Mientras que las plantas pueden ser triploides
(3 conjuntos de cromosomas), tetraploides (4 veces la cantidad de cromosomas) o más.
Las fresas cultivadas (Fragaria x ananassa) maduras son un material excelente para extraer
ADN. Son fáciles de triturar y contienen enzimas, llamadas pectinasas y celulasas, que ayudan a
romper las paredes celulares. Además, las fresas son octoploides (7 cromosomas x 8 = 56
cromosomas), es decir, tienen ocho copias de cada cromosoma, lo cual proporciona más ADN
que la banana o el kiwi.
El kiwi tiene 29 cromosomas y es tetraploide. La banana o plátano tiene 11 cromosomas y la

mayoría es triploide. Pero también se puede hacer este experimento con cebollas, lentejas u otro
vegetal.
Ruptura de tejidos, paredes y membranas celulares
Mediante fricción con el mortero o por el licuado del material, se rompen las uniones entre
las células y la pared celular. Esta homogeneización facilita el efecto de lisis o ruptura que ayuda
a liberar el material genético.
El jabón o detergente líquido ayuda a romper las membranas celulares, que están compuestas por
lípidos. Las moléculas de detergente ayudan a romper las membranas celulares y liberar el ADN
del núcleo.
Eliminación de proteínas y lípidos

Mayta B.
Los componentes no solubles como el material fibroso y las proteínas se separan del ADN por
filtración.
Precipitación del ADN
Figura 6. El ADN se muestra como unas hebras blanquecinas entre el etanol y la solución
acuosa.
Después que son eliminados los lípidos y las proteínas, los grupos fosfato del ADN están
cargados negativamente y son polares. El ADN se disuelve en soluciones acuosas, pero es
insoluble en alcohol.
La adición de etanol y altas concentraciones de iones sodio que se unen a los grupos fosfato,
reduce las fuerzas repulsivas entre las cadenas y permite que el ADN se pliegue sobre si mismo
haciéndolo insoluble. De esta forma precipita y forma una malla filamentosa blanquecina que
contienen proteínas y otros materiales.

Mayta B.
Capítulo 3. Método
1Tipo de Investigación
El presente trabajo de investigación presenta al método científico experimental como

herramienta para generar conocimiento científico a través de la comprobación empírica de
fenómenos y hechos.
En el método científico utilizamos, a partir, de una observación la relación existente entre la
hipótesis de nuestro tema de investigación y el experimento a ser desarrollado.
2Operacionalización de variables
Para poder organizar y plantear el proceso de la investigación y la técnica que permita validar
nuestro objetivo general utilizaremos a la prueba y ensayo experimental como herramienta de
valoración.
Variable Tipo Escala Medida Indicadores
Tiempo Científico Nominal  10 minutos Positivo o
Experimental  20 minutos negativo
 24 horas
Soluto Científico Nominal  Muestra Positivo o
Experimental  Agua negativo
destilada
Solvente Científico Nominal  Jabón Positivo o
Experimental liquido negativo
Temperatura Científico Nominal  60° Positivo o
Experimental  5° negativo
Muestra Científico Ordinal  Maíz Positivo o
Experimental triturado negativo
 Plátano
Triturado
 Frutilla

Mayta B.
licuada
3Técnicas de Investigación
3.3.1. Materiales
Material Función
Materia vegetal triturada Expandir la superficie de estudio
Mortero, batidora, licuadora Triturar la materia estudiada
Gasa o algodón Manejo del material
Tasas con medida Cálculos exactos de proporciones
Frasco de cristal Portadores del material estudiado
Agua destilada o mineral Solvente universal
Jabón o detergente liquido Romper la membrana plasmática
Sal fina de mesa Establecer puentes de hidrogeno con H2O
Papel filtro o colador Separa los contenidos de la mezcla
Etanol Precipitar el ADN
3.3.2. Procedimiento
Primer paso
Se debe elaborar una solución de sal con jabón líquido añadirla a 100ml de agua, las
proporciones las siguientes: 10ml de jabón líquido lavaplatos, 13gr de sal de cocina o
bicarbonato de sodio.
Añadimos todos los ingredientes en un recipiente cristalino de manera muy pausada y
calmada para evitar la espuma que podría generar el jabón líquido.
Segundo paso
Se prepara el material a ser estudiado, primero se corta a la materia vegetal en pequeños
trozos para posteriormente proceder a triturar al mismo en el mortero, la licuadora o la batidora.
Tercer paso
Ya con la muestra totalmente triturada se procede a verter la solución salina-jabonosa (paso),
mientras se realiza esta acción se continua con la trituración de manera suave y pausada.

Mayta B.
Esto se realiza con el fin de romper la membrana plasmática y la pared celular, así todos los
organelos del citoplasma, incluido el núcleo, quedaran expuestos en la solución salina-jabonosa.
Cuarto paso
Se procede a, por medio del colador, separar el grueso de nuestro caldo celular para
posteriormente con la ayuda de una gasa o algodón seguir con la filtración, hasta conseguir unos
50ml de contenido, se pasa dicho contenido a un vaso cristalino.
Este caldo celular se vuelva a colar y se filtra para poder extraer los sólidos, las proteínas y los
lípidos a la solución acuosa del ADN.
Quinto paso
Sobre el caldo celular ya filtrado, comenzamos a verter de forma pausada y por medio de las
paredes del vaso cristalino, unos 100-150 ml de etanol frio, se deja reposar por un lapso de
10min, 20min y 24 horas para observar los resultados.
Con un palo de madera se pueden separar a las cadenas de ADN, que quedan suspendidas en el
caldo celular.
4Cronograma de actividades por realizar
ACTIVIDADES ABRIL MAYO JUNIO

FASE 1ra FASE 2da FASE 3ra FASE
SEMANAS 1 2 3 4 1 2 3 4 5 1 2 3 4
Revisión bibliográfica

Mayta B.
Planteamiento del problema

Objetivos
Justificación
Presentación del borrador
Marco teórico
Conclusiones y resultados
Revisión y corrección del trabajo
final
Transcripción y entrega del trabajo
final
Presentación de APA
Envió al sistema

Mayta B.
Capítulo 4. Resultados y Discusión
El experimento arrojo resultados muy positivos, se pudo extraer cadenas de ADN y ARN, no
solo del maíz sino también de diversos alimentos naturales. La experimentación se realizó con
materiales que se encuentran en cualquier hogar, jabón líquido, sal y cualquier tipo de alimento.
Lamentablemente se observa que la purificación no es posible con el presente método, se
observan cadenas de ADN, pero también cadenas de ARN, una mezcla de ácidos nucleótidos.
Al no contar con laboratorios es muy difícil el poder observar si fácticamente tenemos
cadenas de ADN y ARN, la bibliografía existente respecto al tema señala que, la metodología
casera para la extracción de cadenas de ácidos nucleótidos es un buen método de extracción en el
cual se pueden apreciar dichas cadenas.

Mayta B.
Capítulo 5. Conclusiones
La extracción de ADN con material cotidiano es una propuesta práctica que permite
desarrollar una estrategia didáctica interdisciplinar ya que, como se ha mostrado en el presente
trabajo, comprender por qué y cómo se puede extraer ADN de un organismo implica relacionar
conceptos explicados por varias disciplinas científicas.
Esta actividad permite poner en práctica conceptos básicos de Química, Física y Biología
mostrando la naturaleza interdisciplinar de la ciencia, al mismo tiempo que constituye una
oportunidad para transmitir de manera transversal el conocimiento científico, desde sus
fundamentos científicos hasta los recientes desarrollos biotecnológicos, su impacto social y sus
implicaciones éticas.

Mayta B.
Referencias
Raffino María Estela. (2021) Conceptos de Organismos Gneticamente Modificados. (1ra Ed).
Argentina: Editorial Repositorio Cepal
Raffino María Estela. (2021) Conceptos de Organismos Gneticamente Modificados. (1ra Ed).
Argentina: Editorial Repositorio Cepal Ceccarelli Eduardo
Alberts, B., D. Bray, K. Hopkin, et al. (2006) Introducción a la biología celular, Buenos Aires,
Panamericana. Editorial Exploradora
Curtis, H. y N. Sue Barnes (2000): Biología, Buenos Aires, Panamericana, Editorial

Exploradora.
Izquierdo Rojo, Marta (2001): Ingeniería genética y transferencia génica, Madrid, Pirámide,
Editorial Exploradora.
Lodish, H., J. Darnel, A. Berk, et al. (2005): Biología celular y molecular, Buenos Aires,
Panamericana, Editorial Exploradora.
Parekh, S. R. (2004.): The GMO Handbook, Humana Press, Totowa, Editorial Exploradora

Mayta B.
Apéndice
Plátano
Figura
Figura
Figura

Mayta B.
Figura 1 Figura Figura

Figura
Figura
Figura
Maíz
Figura
Figura
Figura
Figura

Mayta B.
Figura
Figura

Mayta B.
Figura

Mayta B.
Figura
Figura

Mayta B.
Figura
Figura Figura

Mayta B.
Figura


Apa de Biologia Molecular, Paralelo E.

Cargado por

Información del documento

Título original

Derechos de autor

Formatos disponibles

Compartir este documento

Compartir o incrustar documentos

Opciones para compartir

¿Le pareció útil este documento?

¿Este contenido es inapropiado?

Copyright:

Formatos disponibles

Apa de Biologia Molecular, Paralelo E.

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

FICHA DE IDENTIFICACIÓN DE TRABAJO DE INVESTIGACIÓN

Título Extracción casera de la cadena de ADN del Maíz para la detección de

Nombres y Apellidos Código de estudiantes

Carrera Bioquímica y farmacia

Los organismos genéticamente modificados tienen una enorme preponderancia en los

Lamentablemente debido a la coyuntura actual es imposible el acceder a un laboratorio para

Palabras clave: ADN, OGMs, Maíz genéticamente modificado

Asignatura: Biología molecular y genética

Key words: DNA, GMOs, Genetically modified corn

Asignatura: Biología molecular y genética

Asignatura: Biología molecular y genética

Tabla 1 Operacionalización de variables…………………………………………………..…25

Asignatura: Biología molecular y genética

Figura 1. Cadena de ácido desoxirribonucleico………………………………………………..11

Asignatura: Biología molecular y genética

Asignatura: Biología molecular y genética

Capítulo 1. Planteamiento del Problema

1Formulación del Problema

 Identificar las características de los organismos genéticamente modificados.

Asignatura: Biología molecular y genética

Asignatura: Biología molecular y genética

Capítulo 2. Marco Teórico

2.1 Área de estudio/campo de investigación

El área de estudio fue realizada mediante la recopilación de datos e información de recursos

2.2 Desarrollo del marco teórico

2.2.1 Ácido Desoxirribonucleico

Al realizar la hidrolisis completa de los ácidos nucleicos, se obtienen tres tipos de

Asignatura: Biología molecular y genética

Figura 1 Cadena de ácido desoxirribonucleico

Proporciones de las bases nitrogenadas

Asignatura: Biología molecular y genética

 La proporción de Adenina (A) es igual a la de Timina (T). A = T. La relación entre

Asignatura: Biología molecular y genética

Mediante esta técnica de difracción de rayos X se obtuvieron los siguientes resultados:

Asignatura: Biología molecular y genética

Tipos de organismos genéticamente modificados

Asignatura: Biología molecular y genética

Figura 2. Muestra de la siembra de hongos en un agar glucosado de Sabouraud

Maria Raffin investigadora de Argentina 2021, manifiesta además que los

Asignatura: Biología molecular y genética

Figura.3. Muestra de la extracción del genoma de ratas en laboratorio

Según María Raffin 2021, las plantas genéticamente modificadas suelen ser cultivos

Figura 4. Extracción del gen de beta - caroteno

2.2.3. Maíz genéticamente modificado

Asignatura: Biología molecular y genética

El cultivo de maíz genéticamente modificado se ha incrementado sustancialmente desde su

Asignatura: Biología molecular y genética

Asignatura: Biología molecular y genética

Figura 5. Maíz tolerante a herbicida

Asignatura: Biología molecular y genética

 Material inicial (tejido, hoja, semilla, material transformado, etc.);

Asignatura: Biología molecular y genética

Asignatura: Biología molecular y genética

2.2.5. Método casero de extracción de cadenas de ADN.

El kiwi tiene 29 cromosomas y es tetraploide. La banana o plátano tiene 11 cromosomas y la

Ruptura de tejidos, paredes y membranas celulares

Eliminación de proteínas y lípidos

Asignatura: Biología molecular y genética

Precipitación del ADN

Asignatura: Biología molecular y genética

El presente trabajo de investigación presenta al método científico experimental como

Asignatura: Biología molecular y genética

Asignatura: Biología molecular y genética