27/06/2018

Relación dosis-respuesta y
clasificación de los efectos tóxicos

Dra. Natalia Guiñazú

2018

Relación Dosis-Respuesta
• La relación dosis-efecto es la relación entre la
dosis y el efecto.
• Un incremento de la dosis puede incrementar
la intensidad de un efecto o su gravedad.
• Puede obtenerse una curva de dosis-efecto a
nivel de organismo, de célula o molécula
blanco.

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Relación Dosis-Respuesta
• Una curva de dosis-respuesta es una representación
gráfica de la correlación entre una serie de dosis,
consideradas como la variable independiente y por lo
tanto representadas en el eje x de coordenadas, y el
efecto observado, considerado como la variable
dependiente y graficado en el eje y.
• La relación dosis-respuesta refiere a las características de
la exposición y el espectro de los efectos.
• Gradual. Efecto continuo a lo largo de un intervalo de dosis
• Cuantal: El efecto en poblaciones que refiere a un todo o nada (vivas
vs muertas)

Gradual

La relación entre el efecto y

la dosis se caracteriza por
una incremento en la
magnitud de la respuesta
en relación con la dosis.
Figura- Relación de la
inhibición de 2 enzimas
blanco de plaguicidas OP
presentes en la dieta

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Cuantal
• La relación dosis-respuesta es la relación entre
la dosis y el porcentaje de individuos que
presentan un determinado efecto. Al
incrementarse la dosis lo normal es que
aumente el número de individuos que
muestran el efecto.

Relación Dosis-Respuesta
• En poblaciones, la curva de dosis-respuesta
tiene una forma sigmoidea. Hay por lo general
un intervalo de dosis bajas en el que no se
detecta respuesta alguna; al aumentar la
dosis, la respuesta sigue una curva ascendente
que normalmente llega a una meseta cuando
la respuesta es del 100 %.

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Dosis-respuesta

• Tienen una distribución

normal o gaussiana, una
distribución de frecuencia
normal. Significa que en
una población normal la
media +/- 1SD abarca el
68.3% de la población,
mientras que la media +/-
2SD abarca el 95.5% y
media +/- 3 SD el 99.7%

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Definiciones
• Efecto dosis respuesta, es la relación entre una dosis administrada
con un efecto en particular

• Dosis: a cantidad de sustancia expresado en unidades de volumen o

peso por unidad de toma, que se administrará de una vez.
– Dosis oral : cantidad consumida (mg)/kg de peso corporal

• Dosis de exposición, que es la concentración en el medio del

contaminante que se expone durante un determinado período de
tiempo (en el ámbito de la higiene industrial, normalmente ocho
horas).

• Dosis absorbida o retenida (llamada también carga corporal en

higiene industrial), que es la cantidad presente en el cuerpo en un
determinado momento durante la exposición o después de ella.

Definiciones
• Dosis umbral: es un nivel de la dosis por debajo del cual no hay
ningún efecto observable.

• DL50: Dosis Letal 50, dosis que produce una mortalidad del 50 %
en una población animal. A mayor DL50, menor toxicidad aguda.
Se obtiene de la curva dosis respuesta.

• Dosis Efectiva 50 (DE50), es la dosis que produce en el 50 % de los

animales un efecto específico no letal.

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Dosis Tóxica
• Todas las sustancias químicas conocidas tienen el
potencial de ocasionar lesiones o la muerte si se
encuentran en la cantidad suficiente.

• ¿Cómo comparamos el nivel de toxicidad de

sustancias distintas?
• PARAMETRO TOXICOLÓGICO- DOSIS LETAL 50 (LD50 O DL50)
• Es la cantidad de sustancia que se necesita para causar la
muerte del 50% de los animales tratados (agudo)

Clasificación de sustancias según su

toxicidad

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Fig. 3 Mean +/− SD of log-transformed rat LD 50 values (left y -axis) and mean LD 50 (right y -axis) for 62 eligible chemicals
ordered by increasing mean LD 50 values.

Sebastian Hoffmann , Agnieszka Kinsner-Ovaskainen , Pilar Prieto , Inge Mangelsdorf , Christian Bieler , Thomas Co...

Acute oral toxicity: Variability, reliability, relevance and interspecies comparison of rodent LD50 data from
literature surveyed for the ACuteTox project
Regulatory Toxicology and Pharmacology Volume 58, Issue 3 2010 395 - 407

http://dx.doi.org/10.1016/j.yrtph.2010.08.004

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Índices de Toxicidad

• Indican los límites tolerables de exposición y

hacen referencia a las concentraciones máximas
permisibles
• Indican la peligrosidad de los tóxicos

• Parámetros de toxicidad
• Índices de toxicidad
• Límites tolerables de exposición
• Concentraciones máximas permisibles

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• Índices de toxicidad para dosis repetidas (toxicidad

subcrónica y crónica):

– En el caso de dosis repetidas el parámetro utilizado es el

NOAEL (No observed adverse effect level) o "dosis sin
efecto adverso" que podríamos definir como la dosis
máxima diaria (expresada en mg/kg/día) que no produce
efectos adversos observables en el animal considerado.
– Otro índices es el LOAEL (Lowest observed adverse effect
level), que se define como la dosis más baja capaz de
producir efectos adversos.

• La NOAEL debe ser, por definición, una de las dosis

experimentales probadas.

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LIMITES TOLERABLES DE EXPOSICION

• Los índices de toxicidad permiten establecer:

– La dosis de una sustancia (mg/kg/día) a la cual ,
puede estar expuesta una persona, durante toda la
vida, sin que resulte perjudicial para la salud.
– Se estiman a partir de los valores experimentales de
NOAEL y LOAEL.

– Límites tolerable de exposición

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• DDA:
– Dosis diaria admisible “la dosis de una sustancia que puede ser ingerida
diariamente por un individuo durante toda su vida sin riesgo apreciable
para su salud“ (mg/Kg/dia), es la NOAEL dividido 100.

• TDI:
– Tolerable Daily Intake o "ingesta diaria tolerable, (OMS)

• RfD:
– Dosis de referencia que emplea la EPA (Environmental Protection Agency,
USA) para contaminantes en general.
• crónica por vía oral (RfD co)
• crónica por vía inhalatoria (RfD ci)
• subcrónica por vía oral (RfD co)
• dosis de referencia para el desarrollo (RfD d)

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Índices de toxicidad sustancias cancerígenas

• No se pueden aplicar los mismos criterios a la hora de establecer
valores de referencia (límites tolerables de exposición y
concentraciones máximas permisibles).

• Los cancerígenos genotóxicos, llamados así por actuar directamente

sobre el material genético, se considera que no hay dosis libre de
riesgo y por lo tanto cualquier dosis, por mínima que sea, puede tener
consecuencias a largo plazo sobre la salud del consumidor (tolerancia
cero).

• el factor de pendiente (CSF, Cancer Slope Factor) es un índice de

toxicidad que relaciona la dosis con la respuesta genotóxica.
Corresponde al riesgo por unidad de dosis (expresada en mg/kg día).

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TOXICODINÁMICA- RESPUESTA TÓXICA

Es el estudio de las alteraciones que produce el agente toxico, y hace

referencia a los mecanismos de interacción molecular del agente
parental o sus metabolitos.

Se caracteriza por la presencia, en sitios específicos, del agente tóxico

o de su producto de biotransformación.
Al interactuar con moléculas orgánicas producen alteraciones
bioquímicas, morfológicas y funcionales que caracterizan el proceso
de toxicidad.

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Respuesta Tóxica

• Toxicidad:
– La capacidad de producir daño, o la toxicidad, es una
propiedad intrínseca de la sustancia

– Interrupción de la homeostasis de una célula que

lleva a una alteración funcional permanente/muerte

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Respuesta Tóxica

• Eventos que siguen a la

exposición de una célula a una
sustancia tóxica

+ Tóxico

– EVENTOS PRIMARIOS
– SECUNDARIOS
– TERCIARIOS
Células

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Respuesta Tóxica: eventos moleculares y celulares

• EVENTOS PRIMARIOS
» Peroxidación de lípidos
» Unión covalente
» Cambios en los grupos Tiol celulares
» Inhibición de enzimas
» Isquemia

• EVENTOS SECUNDARIOS
» Cambios en membrana
» Cambios en el citoesqueleto
» Daño mitocondrial/ inhibición de la función
» Cambios en el ATP
» Alteración en la concentración de Calcio
» Daños al ADN
» Estímulo de apoptosis
» Daño al rétículo endoplásmico

• EVENTOS TERCIARIOS
» Esteatosis y cambio graso
» Degeneración hidrópica
» Blebbing
» Apoptosis
» Necrosis
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Respuesta Tóxica:

 EVENTOS PRIMARIOS
 Es la primera reacción que produce el toxico parental (que no necesita
ser metabolizado) o los metabolitos reactivos tóxicos (producto de la
biotransformación), que ejercen la acción primaria

• EVENTOS SECUNDARIOS
– Como consecuencia de la alteracion primaria ocurren modificaciones
celulares que afectan distintas compartimientos o estructuras
celulares

• EVENTOS TERCIARIOS
 Cambios celulares observables que pueden ser reversibles o
irreversibles, los cuales llevan a la muerte celular.

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Respuesta Tóxica:
eventos terciarios-apoptosis-necrosis-autofagia

• La apoptosis es la muerte celular programada

• Ocurre como un proceso normal, fisiológico en el organismo

• Puede ser inducida por sustancias tóxicas

• Se activan endonucleasas que clivan el ADN en fragementos de

180 pb

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Respuesta Tóxica:
eventos terciario-apoptosis/necrosis

• Apoptosis

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• Necrosis es la muerte de la célula por una daño severo

• Incluye cambios degenerativos como la hidrólisis de

componentes celulares y la desnaturalización de
proteínas

• Se caracteriza por swelling de mitocondrias y RE,

aparición de vacuolas, y la acumulación de fluidos

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Respuesta Tóxica:
eventos terciario-apoptosis/necrosis

 Alcohol consumption may contribute to the death of liver cells (hepatocytes) by

apoptosis and necrosis through numerous mechanisms. Of these two processes,
apoptosis occurs at all stages of alcoholic liver disease whereas necrosis generally is
found in advanced stages (i.e., alcoholic hepatitis and cirrhosis). 33

Autofagia
• Es un proceso esencial en la adaptación al
ayuno y a las condiciones ambientales
cambiantes, a la remodelación celular
durante el desarrollo y acumulación de
orgánulos alterados hipergeneradores de
especies reactivas de oxígeno (ROS) en las
células en envejecimiento.
• Es un mecanismo de supervivencia
recientemente descubierto

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• En mamíferos, la autofagia es un evento

constitutivo que regula crecimiento celular,
desarrollo y homeostasis.
• Está implicado en fenómenos de muerte
celular. Estos fenómenos han sido
denominados "procesos de muerte tipo II" (no
apoptótica).

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Clasificación de los efectos tóxicos

• Efecto: es el cambio biológico

producido por la exposición a un factor
externo químico, físico o biológico.

Gradual
• MEDICIÓN Cuantal

• PERMANENCIA Reversibles
Irreversibles

Efectos tóxicos, clases y clasificación

 Alergia Química: Es una reacción adversa inmunológica a
una sustancia que resulta luego de una previa
sensibilización con la misma sustancia.

 Reacciones Idiosincrásicas: Reactividad anormal de origen

genético, frente a una sustancia química

 Toxicidad aguda y crónica (irritante vs carcinógeno)

 Efectos Reversibles e Irreversibles: Depende de la lesión que

produzca, y la capacidad del órgano de regenerarse (Hígado
diferente SNC). Lo efectos teratogénicos y cancerígenos son
considerados irreversibles.

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Efectos tóxicos

• Efectos Locales y Sistémicos: locales son los

efectos que ocurren en el sitio de primer contacto
entre el tóxico y la persona (cáusticos e
irritantes).

– Efectos sistémicos: requieren de la absorción y

distribución del tóxico, desde el punto de contacto
(Tetraetilo de plomo , (CH3CH2)4 Pb), se usa como
antidetonante, efectos en el CNS y corazón)

Efectos según la duración de la

exposición
• Humanos:
• Agudas: Derivadas de un episodio único

• Subcrónicas: Repetidas durante varias semanas o meses

• Crónicas: Repetidas durante varios meses

o años

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CLASIFICACIÓN DE EFECTOS

• TIPO DE EFECTO
 Carcinogénico
 Tóxico para el
desarrollo
 Hepatotóxico
 Neurotóxico
 Inmunotóxico
 Nefrotóxico

• Carcinogenicidad es la capacidad de inducir

neoplasias malignas. Consideramos carcinógenos
a aquellos agentes físicos, químicos o biológicos
capaces de aumentar la frecuencia de aparición
de neoplasias malignas, ya sea directamente o a
través de un metabolito electrofílico
(alquilante)
• Muchos carcinógenos químicos no son
intrínsecamente carcinógenos, sino que
requieren una activación metabólica para
expresar su potencial carcinogénico.

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Carcinógeno genotóxico

• Carcinógeno genotóxico es aquel agente que interacciona con los

genes produciendo una mutación.

• Mutagenicidad es la capacidad de inducir mutaciones. En este

grupo se incluyen agentes como la radiación, los agentes químicos y
muchos carcinógenos.

• Una mutación es cualquier cambio heredable en el material

genético, ya sea la transformación química de un gen individual
(mutación genética o puntual), que altera la función de dicho
gen, la reorganización, ganancia o pérdida de una parte de un
cromosoma, que puede ser microscópicamente visible (mutación
cromosómica), o el cambio en el número de cromosomas de un
genoma (mutación genómica).

• La mutación puede darse tanto en células germinales,

heredada por las generaciones siguientes del organismo,
como somáticas, perpetuada en un linaje celular por división
celular.
• Puede generar lesiones microscópicas y macroscópicas

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Clasificación de carcinógenos
Genotóxicos endógenos
• Los carcinógenos endógenos son especies reactivas del oxigeno y entre
ellos: radicales hidroxilo (OH*), oxigeno (O2), peróxido de hidrógeno
(H2O2), especies peroxidadas (R*2) y especies alkoxiladas (RO*),
productos del metabolismo celular principalmente.

Genotoxicos exógenos
• Son compuestos que incrementan la oxidación del ADN, agentes que
inducen peroxisomas, benceno, arsénico, estradiol, nitrosaminas,
bromuro potasio y radiaciones ultravioletas e ionizantes.

No genotóxicos o epigenéticos
• Compuestos químicos que actúan por mecanismos que no incluyen la
modificación directa del ADN, aunque se produzcan células inestables
genéticamente como son las de los tumores. Pueden inducir
alteraciones hormonales, o en el metabolismo

Carcinógenos exógenos
• benceno
• nitrosaminas,
• bromuro de potasio
• radiaciones ultravioletas (UVA y UVB)
• Radiciones ionizantes (rayos X).
• Muchas sustancias inorgánicas, particularmente hierro, cromo, cobalto (II) y sales de
níquel en presencia de H2O2 producen la oxidación de las bases del ADN.
• Por otro lado, la exposición a la polución de los ambientes urbanos produce
también altos niveles de ADN oxidado.
• La exposición a altos niveles de agentes contaminantes como el ozono, materia
particulada, aldehídos, metales y óxidos de nitrógeno incrementa también los
niveles de 8-oxo-dG.
• La luz UVB (290-320 nm) produce mutaciones en el ADN y como consecuencia
tumores de piel.
• La luz UVA (320-400 nm) es menos carcinógena y produce mayormente oxidación
del ADN mediante la activación fotodinámica de especies reactivas del oxígeno.

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Agentes alquilantes
• El término agente alquilante (AA) fue definido por Ross desde un punto de
vista biológico de la siguiente forma: “Compuesto capaz de reemplazar un
átomo de hidrógeno por un grupo alquilo en condiciones fisiológicas
(pH=7,4; T=37ºC, en disolución acuosa)”

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Agentes alquilantes
• Directos Son independientes de la activación. Pertenecen a este
grupo especies tan dispares como epóxidos, nitrosoureas, sulfonatos,
sultonas, haloéteres y algunas lactonas.

• Indirectos requieren metabolización previa para dar lugar a la

especie alquilante; entre ellos se encuentran hidrocarburos, pigmentos
azo, aminas aromáticas y dialquilnitrosaminas

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• Los agentes alquilantes monofuncionales contienen un

único sitio reactivo, sólo pueden reaccionar con los ácidos
nucleicos en una posición formando aducto covalente.
• Los agentes polifuncionales, después de formar aducto
con una de las posiciones reactivas, pueden reaccionar
con el ácido nucleico a través de otra posición, dando lugar a
entrecruzamiento intrahebra o interhebras

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P53 es una proteína que regula la

muerte, cuando se acumula la célula
muere

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Bcl-2 es otra proteína que previene la

muerte de la célula por apoptosis

Carcinógenos no genotóxicos:
Alteraciones en proteínas reguladoras
del balance ciclo/muerte celular

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Etapas de la carcinogénesis

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Iniciación
• 1. El producto reacciona con el ADN para
producir una mutación.
• 2. Está involucrado el metabolismo del
carcinógeno, el sistema de reparación del ADN
y la proliferación celular.
• 3. la iniciación es irreversible pero la célula de
inicio no es una célula cancerosa y no es
necesario que lo sea.

Promoción
• Estos agentes no actúan directamente sobre el ADN y
generalmente no requieren metabolismo para su acción.
• La sacarina es un agente promotor de carcinogénesis de
vejiga y el fenobarbital lo es para la hepatocarcinogénesis.
• Es reversible por fenómenos de apoptosis y es
susceptible a factores fisiológicos
• La promoción muestra una relación entre dosis y respuesta.
• Altera el ciclo celular en células preneoplásicas, parámetro
que se opone a la mitosis de muerte celular programada, la
ya citada apoptosis, son varios los genes que están
involucrados comprendidos en este proceso.

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Progresión
• los tumores adquieren la habilidad para
invadir y establecer metástasis distantes
• están caracterizados por la inestabilidad
cromosómica y mutaciones en oncogenes y
genes supresores de tumores
• las mutaciones podrían reflejar una selección
de células dispuestas para el crecimiento
neoplásico y pueden incrementar la
inestabilidad cromosómica.

• Neoplasia significa crecimiento nuevo

• Características de los tumores:
• Células transformadas
• Falta de respuesta al control celular
• No obedecen señales regulatorias del crecimiemto

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