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EVALUACIÓN DE LA EFICACIA IN VITRO DE LA ASOCIACIÓN

ANTIMICROBIANA NEOMICINA SULFATO/BACITRACINA ZINC POR EL
TABLERO DE DAMAS

Presentation · September 2014

DOI: 10.13140/RG.2.2.11486.84806

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Maria Laura Marchetti Andrea Buchamer

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Nora Mestorino
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EVALUACIÓN DE LA EFICACIA IN VITRO DE LA ASOCIACIÓN ANTIMICROBIANA

NEOMICINA SULFATO/BACITRACINA ZINC POR EL TABLERO DE DAMAS

Marchetti, ML1; Puigdevall, T2; Vedovato, V1; Buchamer, A1; Pracca, G.1; Mestorino, N.1
1
Laboratorio de estudios Farmacológicos y Toxicológicos (LEFyT), Facultad de Ciencias Veterinarias,
UNLP. Calle 60 y 118, s/n, 1900. La Plata. 2Área Microbiología. FCV- UBA
Buenos Aires, Argentina. noram@fcv.unlp.edu.ar

La determinación de la susceptibilidad antimicrobiana in vitro constituye una de las funciones más

importantes de los laboratorios de Microbiología. Esta actividad permite monitorear los niveles de
resistencia de los microorganismos a los antimicrobianos para instaurar las políticas terapéuticas
adecuadas y evaluar el desarrollo futuro de los nuevos fármacos.1Al igual que los procedimientos
para evaluar la susceptibilidad individual de los fármacos, existen pruebas para determinar el efecto
de sus combinaciones, como es el tablero de damas o checkerboard.2
El presente trabajo tuvo como objetivo, evaluar la eficacia del tratamiento antimicrobiano combinado
de la asociación neomicina sulfato/bacitracina zinc (NEO/BACI) mediante pruebas de sinergismo in
vitro frente a Staphylococcus spp, E.coli, Pseudomonas spp, Streptococcus spp. y Proteus spp.
aislados de mascotas portadoras de infecciones clínicas.
El universo de trabajo estuvo constituido por 35 aislamientos microbianos clínicos obtenidos a partir
de perros y gatos (Staphylococcus spp. -N10-, Pseudomonas spp. –N9-, E. coli –N4-, Streptococcus
sp. -N5- y Proteus sp. –N6-). Para el control de calidad se utilizaron cepas de referencia de S. aureus
(ATCC 29213), E. coli (ATCC 25922) y P. aeruginosa (ATCC 27853) según lo establecido por el
CLSI 3-4-5 El aislamiento y la identificación microbiana se realizaron por los métodos convencionales
de diagnóstico.6 El sinergismo in vitro se evaluó por el tablero de damas en placas de microtitulación
según lo establecido por el CLSI.5 Para preparar las soluciones patrones de los antimicrobianos se
emplearon polvos de calidad y potencia conocida con una concentración equivalente a 5120 µg/mL,
según el CLSI.7 Las pruebas se efectuaron por duplicado y las concentraciones de antibiótico
evaluadas frente a todos los aislamientos estuvieron dentro del rango de 0.17 a 176 µg/mL de BACI y
de 0.125 a 128 µg/mL de NEO.
La interpretación de los resultados se realizó a través del cálculo del índice de concentración
fraccionaria inhibitoria (ΣCFI), descrito a continuación:

Índice CFI de NEO =

Índice CFI de BACI =

Índice general de CFI (ΣCFI) = CFI de NEO + CFI de BACI

Se consideró sinergismo (S) cuando Σ CFI fue ≤ 0,5; Sinergismo parcial o bajo: (SP) Si 0,5 < Σ CFI <
1; Indiferencia o adición: (I) Si 1 ≤ ΣCFI < 2; Antagonismo: (A) cuando ΣCFI ≥ 2. Se construyeron
tablas y figuras para mostrar los resultados del sinergismo in vitro según las combinaciones y los
microorganismos investigados.
La combinación neomicina/bacitracina demostró efecto sinérgico in vitro (Tabla 1). Se puede inferir
una alta probabilidad de eficacia clínica, independiente del patrón de susceptibilidad del
microorganismo aún frente a cepas con sensibilidad disminuída a alguno de los 2 antimicrobianos
utilizados. Este procedimiento puede constituir una valiosa herramienta para orientar la terapéutica
en pacientes con infecciones ocasionadas por microorganismos resistentes. A través del presente
estudio se demostró que la asociación neomicina sulfato/bacitracina zinc, presenta muy buena

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actividad frente a infecciones ocasionadas por Staphylococcus spp., E.coli, Proteus spp.,
Pseudomonas spp. y Streptococcus spp.

Referencias Bibliográficas:
1. Andrews JM. The development of the BSAC standardized method of disc diffusion testing. J Antimicrob
Chem. 2001;48 (Suppl S1):29-42.
2. Grzybowska W, Banaszczyk-Ru M, Wójcik A, Tyski S. Comparison of checkerboard and time-kill methods for
the analysis of two antibiotics combined. Med Dosw Mikrobiol. 2004; 56(4):391-403.
3. CLSI (2008) Clinical Laboratory Standards Institute.Performance Standards for Antimicrobial Disk and
Dilution Susceptibility Tests for Bacteria Isolated From Animals; Approved Standard, 3rd edn. CLSI
document M31-A3. CLSI, Wayne, USA.
4. CLSI (2009) Performance standards for antimicrobial susceptibility testing; nineteenth informational
supplement. CLSI document M100-S19. Wayne, Pennsylvania, USA: Clinical Laboratory Standard Institute.
5. CLSI.(2009) Methods for dilution antimicrobial susceptibility tests for bacteria that growth aerobically;
approved standard-eight edition. CLSI document M7-A8/. Wayne, Pennsylvania, USA.
6. Garcia Rodriguez JA, Cantón R, Garcial Sanches JE, Gomez Lus ML, Martinez Martinez L, Rodriguez Avial
C, et al. Métodos básicos para el estudio de la sensibilidad de los antimicrobianos. In: Picaso JJ, editor.
Procedimientos en microbiología clínica. Recomendaciones de la Sociedad Española de Enfermedades
Infecciosas y Microbiología Clínica. SEIMC. 1 ed ed. España: 2000
7. Clinical and Laboratory Standards Institute. Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing;
Sixteenth Informational Supplement. CLSI; 2006. (Document M100-S16).

Tabla 1. Índices de la concentración fraccionaria inhibitoria y disminución de la concentración mínima inhibitoria

de los antimicrobianos NEO/BACI en combinación

CIM DISMINUCIÓN DE
CIM
ATM RESULTADO LA CIM DE LOS
Microorganismo ATM COMBINACIÓN CIF Σ CIF
solo SINERGISMO ANTIMICROBIANOS
(µg/mL)
(µg/mL) COMBINADOS
S. aureus ATCC
29213
NEO 3.12 0.39 0.125 0.25 S 1/8
BACI ≥43.4 5.5 0.125 1/8
S. aureus spp.(n6) NEO 3.12 0.39 0.10 0.16 S 1/10
BACI ≥43.4 2.75 0.06 1/16
E. coli ATCC
25922 NEO 4 0.39 0.10 0.35 S 1/10.3
BACI ≥43.4 11 0.25 1/4
E. coli de campo
(n3)
NEO 8 0.78 0.10 0.16 S 1/10.3
BACI ≥43.4 2.75 0.06 1/16
Proteus spp. (n5) NEO 6 0.78 0.13 0.26 S 1/7.7
BACI ≥43.4 5.5 0.13 1/8
P. aeruginosa
ATCC 27853 NEO 32 4 0.13 0.25 S 1/8
BACI ≥43.4 5.5 0.13 1/8
Pseudomonas
spp.(n5)
NEO 32 2 0.06 0.19 S 1/16
BACI ≥43.4 5.5 0.13 1/8
Streptococcus
spp.(n3)
NEO 32 8 0.25 0.31 S 1/4
BACI ≥43.4 2.75 0.06 1/16

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