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FACULTAD INGENIERIA
INGENIERIA AGROINDUSTRIAL
SANTIAGO DE CALI
2013
1
ELABORACIÓN DE UN BIOINSECTICIDA A PARTIR DE HONGOS
ENTOMOPATOGENOS (METHARIZUM ANISOPLAE Y THICODERMA
LIGNORUM) PARA EL CONTROL DE LA MOSCA BLANCA (BEMESIA
TABACI) EN CULTIVO DEL TOMATE (LYCOPERSICON ESCULENTUM).
ASESOR
RAUL ALBERTO CUERVO MULET
BIOLOGO.
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Nota de aceptación:
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Presidente del jurado.
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Jurado.
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Jurado.
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Jurado.
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DEDICATORIA.
A Dios, por darme la oportunidad de vivir, por estar conmigo en cada paso que doy,
por darme fuerzas para seguir adelante y no desfallecer en los problemas que se
presentaban, enseñándome a sobrellevar las adversidades sin perder nunca la
esperanza, por fortalecer mi corazón e iluminar mi mente, por haber puesto en mi
camino a aquellas personas que han sido mi soporte y compañía.
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AGRADECIMIENTOS.
.
A mis padres Claudia E. Gómez y Carlos A. Mateus que me acompañaron en esta
larga aventura que significo mi titulo profesional, por ayudarme con los recursos
necesarios para estudiar. Me han dado todo lo que soy como persona, mis valores,
mis principios, mi carácter, mi empeño, mi perseverancia, mi coraje para conseguir
mis objetivos.
A mi hermano Carlos M. Mateus por estar siempre presente. A Luis F. Parra por su
incondicionalidad y ayuda, quien hasta el día de hoy sigue dándome animo para
terminar este proceso.
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TABLA DE CONTENIDO.
1. INTRODUCCIÓN. ............................................................................................. 12
2. ANTECEDENTES. ............................................................................................ 14
4. JUSTIFICACIÓN. .............................................................................................. 17
5. OBJETIVOS. ...................................................................................................... 19
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7. MARCO CONTEXTUAL. ................................................................................. 37
11. BIBLIOGRAFÍA............................................................................................. 53
12. ANEXOS.............................................................................................................. 56
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LISTA DE TABLAS Y GRAFICOS.
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GRAFICO 3: DESCRIPCÓN DEL ESTADO DE DESARROLLO SECUNDARIO
DE LA MOSCA BLANCA.
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RESÚMEN.
Las moscas blancas se han convertido en uno de los grupos de plagas de mayor
importancia económica y más difícil control en el mundo durante las dos últimas
décadas. Con el objetivo de evaluar estas alternativas de protección biológica al
cultivo contra el ataque de este complejo mosca blanca, se compararon 4
tratamientos, los cuales fueron: T1. Plántulas de tomate en semillero, expuesto al
Hongo entomopatogeno M. Anisoplae, T2. Plántulas de tomate en semillero expuesto
al Hongo entomopatogeno T. Lignorum, T3. Plántulas de tomate en semillero
expuesto a M. Anisoplae y T.lignorum (50% de esporas de cada uno), T4. Plántulas
de tomate sembrado en semilleros sin ningún tratamiento (Testigo). De acuerdo a los
resultados obtenidos en este experimento las plantas que fueron sometidos a la
mezcla de M. Anisoplae y T. lignorum fue el tratamiento que presentó mayor
incidencia contra el insecto.
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ABSTRACT.
Whiteflies have become one of the groups most economically important pests and
harder to control the world during the last two decades. In order to evaluate these
alternatives to growing biological protection against this attack whitefly complex, we
compared 4 treatments, which were: T1. Seedlings of tomato seedlings, exposed to
the entomopathogenic fungus M. Anisoplae, T2. Seedling tomato seedlings exposed
to entomopathogenic fungus T. Lignorum, T3. Seedling tomato seedlings exposed to
M. Anisoplae and T.lignorum (spores 50% each), T4. Tomato seedlings planted in
seedbeds without any treatment (control). According to the results obtained in this
experiment, plants were subjected to the mixture M. Anisoplae and T. lignorum was
the treatment had a higher incidence and severity of insect.
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1. INTRODUCCIÓN.
Un análisis realizado por, Gerling, a. (s.f) en los Estados Unidos concluyo que “B.
tabaci ha causado pérdidas anualmente por más de US $ 500 millones en la
producción agrícola de USA, durante los últimos 15 años” (p. 134). No obstante, a
las pérdidas per se debe sumarse el aumento en los costos de producción, debidos
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sobre todo al uso de insecticidas, según Rendón, f.; Cardona, c.; bueno, j. M. (2001),
un diagnóstico realizado en Colombia reveló que los productores hacen 12 o más
aplicaciones de insecticidas, con 32 diferentes ingredientes activos (40% de
organofosforados, 11% de carbamatos, 12% de piretroides y 29% de insecticidas de
nueva generación). Así mismo, el 46% de los agricultores encuestados abandonó su
cultivo alguna vez, por las pérdidas, y cerca del 40% tuvo pérdidas de 50-
100%.(p.39)
Rendón, f.; & otros (2001), afirman que “B. tabaci ha demostrado en algunas zonas
ser resistente a varios de los insecticidas usados para su control”(p.41), es así como
el control biológico se presenta como una de las alternativas más promisorias dentro
de los programas de Manejo Integrado de Plagas (MIP), soportados por los éxitos
hasta ahora logrados y en el avance en conocimiento básico sobre los tres principales
grupos de enemigos naturales: parasitoides, depredadores y hongos
entomopatógenos.
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2. ANTECEDENTES.
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diferentes estrategias de manejo de la mosca blanca, siendo la del control químico la
herramienta más utilizada y en ocasiones la única. En ataques severos se ha llegado a
frecuencias de aplicación muy altas, de hasta 11 ó 12 aplicaciones, generalmente en
mezclas, durante un periodo vegetativo de apenas 80 a 90 días (p.126).
Para Botto, E., Ceriani, S., López, E., Saini, V., Cédola, G., Segade & Viscarret,
M (2001), aparte del riesgo ambiental y de salud humana, el uso inadecuado de
plaguicidas químicos ha acarreado un gran problema, que es el desarrollo de
resistencia de la mosca blanca a los insecticidas. Los biotipos A y B de B tabaci han
mostrado resistencia a una amplia gama de insecticidas tradicionales como los
organoclorados, organofosforados, carbamatos y piretroides, así como insecticidas
más novedosos como reguladores de crecimientos y nicotinoides”1 En la actualidad
el cultivo se ve controlado por insecticidas contra la B Tabaci que lo único que han
ocasionado es la resistencia a productos de este orden, que no solo han ocasionado la
propagación de este insecto sino también la erosión del suelo y la perdida de insectos
benéficos en el cultivo. En la actualidad se ha tenido en cuenta el uso de
bioinsecticidas que frenan el desarrollo de este insecto que tantas perdidas anuales
ocasionan en todo el país.
Wraight, S.& otros (2000), argumentaron que los hongos Paecilomyces spp,
metharizum anisoplae y thicoderma lignorum, han sido reconocidos como agentes
de control biológico importantes para plagas de la familia Aleyrodidae, en cultivos
tanto en campo como en invernadero, atacando principalmente estados ninfales.
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3. DESCRIPCIÓN DEL PROBLEMA.
No. VARIABLES
1 Destrucción de la cosecha por plagas y enfermedades
2 Exceso de utilización de agroquímicos
3 Baja calidad del tomate
4 Incremento de precios en la comercialización
5 Altos costos de producción
6 Expansión de la frontera agrícola
FUENTE: Autoría Propia, 2013
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4. JUSTIFICACIÓN.
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Teniendo en cuenta el riesgo y la potencial amenaza que la mosca blanca representa
para la estabilidad económica de este renglón comercial en nuestro país y del resto de
países implicados, aunado la escasas alternativas de control de la plaga, las cuales
son de baja eficiencia y alta toxicidad, por su naturaleza química, se hace
imprescindible la generación de este nuevo bioinsecticida que permita crear por fin
un producto biológico, que controle la mosca blanca, y permita al cultivador cumplir
con todos los requerimiento biológicos de la agricultura orgánico (libre de químicos),
siendo esto una de las exigencias de los TLC´s firmados por nuestro país con
numerosos países del mundo, entre ellos Estados Unidos, Corea, y países de
Centroamérica y Europa.
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5. OBJETIVOS.
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6. MARCO DE REFERENCIA.
Para el óptimo desarrollo del proyecto resulta muy importante el tratar acerca de los
protagonistas de este estudio como lo son los bioinsecticidas, las plagas y el cultivo
de tomate quien notoriamente demanda de productos eficientes y que a su vez
reduzcan los impactos negativos al medio ambiente que se presentan generalmente
en la erradicación de plagas.
A partir del tercer tercio del siglo XX y comienzos del siglo XXI y debido a los
problemas de toxicidad inespecíficos de los insecticidas sintéticos se comienzan a
desarrollar productos menos tóxicos y más específicos. El término bioinsecticida se
suele utilizar para los productos utilizados en el control de plagas principalmente de
la agricultura cuyo origen es procedente de algún organismo vivo.
Espinel, c.; Torres, l.; González, v.; Cotes, a. (2006), afirmaron que los
bioinsecticidas por lo general son bacterias o mezclas de ellos o de metabolitos
provenientes de ellas, pero también hay productos derivados de hongos, como
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pueden ser las Trichoderma spp y Ampelomyces quisqualis (un organismo utilizado
en el control del mildiu en la vid). Bacillus subtilis también es utilizado en el control
de ciertos patógenos de las plantas. También hay ejemplo de control de hierbas y
roedores mediante bioinsecticidas.
Hay autores como Faria, M.; Wraight, S. (2001), que definen a los bioinsecticidas
como cualquier pesticida de origen biológico organismos vivos o sustancias
sintetizadas por ellos. Según esto se incluirían como insecticidas organismos vivos,
como hongos, bacterias, virus etc. y compuestos obtenidos de las plantas y utilizados
directamente o extraídos mediante infusiones, extracciones u otros sistemas.
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6.2 GENERALIDADES DEL TOMATE
El origen de esta hortaliza tiene lugar en la región andina que abarca desde el sur de
Colombia hasta el norte de Chile, aunque el lugar donde se domesticó fue México,
durante el siglo XVI, en este lugar, eran consumidos tomates de distintas formas y
con distintos tamaños y ya, en aquellos momentos, habían sido transportados a
lugares como España e Italia, en donde tenían la función de un alimento, y Alemania,
donde sólo eran utilizados en las farmacias hasta los comienzos del siglo XIX.
Más adelante, el tomate fue difundido a los países de Oriente Medio y África por los
españoles y los portugueses, a diferentes países asiáticos, y, desde Europa, a Canadá
y Estados Unidos.
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rendimiento de 25,856 toneladas por hectáreas. Con relación al año 2010– 2009 el
área sembrada disminuyo en 5,4%, mientras que la producción se incremento en
6,4%. En la actualidad hay sembradas más de 17.000 hectáreas de tomate y se
estima que el 20% de esta se produce bajo cubierta. Datos que se pueden observar en
el Cuadro 2.
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Producción de tomate en el Valle del Cauca: Según el informe del departamento
nacional de planeación DANE (2012), en el año 2011, la dinámica del PIB para el
departamento del Valle del Cauca indica que creció en un 7,4%, ligeramente por
debajo del promedio nacional (7,5 %). Su crecimiento promedio ha sido de 4,4% en
los últimos ocho años, siendo el 2007 el de mayor expansión.
La actividad productiva del departamento del Valle del Cauca muestra que el sector
agropecuario es pujante y dinámico, razón por lo cual en la Agenda Interna para la
Productividad y Competitividad, le apuesta a desarrollar y articular el clúster de las
hortalizas, basado en productos como el ají, el pimentón, el zapallo y el tomate. En
la cuadro 3 se puede analizar el comportamiento del área sembrada y su producción
en tomate en el Valle del Cauca.
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6.2.1 ASPECTOS GENERALES DEL TOMATE (LYCOPERSICON
ESCULENTUM).
Reino: Vegetal
Subreino: Embryophyta
División: Tracheophyta
Subdivisión: Dterosida
Clase: Angiosperma
Subclase: Dicotyedonea
Orden: Tubiflorales
Familia: Solanácea.
Nombre científico: Lycopersicon esculentum
Es el vegetal más popular y más cultivado. Se cultiva en la mayor parte del mundo
con una gran producción mundial, es originario de la América tropical y su fruta, sus
plantas son suculentas, anuales la producción mundial de tomate anual alcanza los
19 millones de toneladas, siendo China y U.S.A los mayores productores; como lo
informa el fondo de agricultura Colombiana [FINAGRO] (2002) Colombia tiene el
33.9% de la oferta mundial de las hortalizas. La mayor parte de la producción
mundial se destina a abastecer la demanda interna de los países productores. El 50%
de la producción mundial es tomate en fresco, las salsas (35 %) y los encurtidos (15
%), en Colombia la producción del tomate se encuentra en Boyaca, Santander, Norte
de Santander Cundinamarca, Valle del cauca y Cauca.
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6.2.3 TEMPERATURA.
6.2.4 HUMEDAD.
6.2.5 LUMINOSIDAD.
El tomate se caracteriza por la gran diversidad de usos que posee, debido a que es
un alimento con enormes cualidades nutritivas. Compuesto por un 90 por ciento de
agua, vitaminas (B1, B2, B5 y C), y minerales (potasio y magnesio), este fruto
contiene, además, un alto nivel de carotinoides, pigmento que le proporciona el color
rojo tan característico. “El tomate es un importante depurador de nuestro organismo.
Activa la circulación y el funcionamiento de los riñones y regula, a la vez, el tránsito
intestinal, propiedad que lo convierte en un alimento muy indicado para aquellos que
sufren estreñimiento.
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Por su elevado contenido en hierro, este fruto es un alimento muy aconsejable para
incorporar en la dieta de las personas que padecen estados de anemia. Es también un
estupendo tónico para nuestro sistema nervioso, también se consumo en fresco, como
alimento crudo, aderezo en guisos y sopas y en salsa.
Son muchas las especies de insectos que se pueden encontrar asociadas al tomate,
hecho verificado por Guarín, M. (2002) , en Colombia se han registrado cerca de 85
plagas en fríjol: 76 insectos, ácaros, miriápodo, cucarrones, comedores de vainas,
mosca blanca y afidos. De éstos, solamente diez alcanzan el nivel de plaga de
importancia económica
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6.3 GENERALIDADES DE LA MOSCA BLANCA
Reconocida por investigadores y agricultores a fines del siglo XIX, la mosca blanca
ha sido limitante en la agricultura mundial desde 1970; inicialmente en cultivos bajo
invernadero, es hoy uno de los problemas fitosanitarios más importantes del mundo
REINO: Animalia
PHYLLUM: Arthrópoda
CLASE: Insecta
ORDEN: Homóptera
FAMILIA: Aleyrodidae
GÉNERO: Bemisia
ESPECIE: Bemisia tabaci
NOMBRE COMUN: Mosca Blanca
Para Borror, D.J., Triplehorn, C.A., & Johnson, N.F. (1992), las moscas blancas son
insectos diminutos de 2 a 3mm de longitud que se asemejan a pequeñas polillas. Los
adultos de ambos sexos son alados y las alas están cubiertas con un polvillo blanco.
Las moscas blancas pertenecen al orden Homóptera, suborden Sternorhincha, familia
Aleyrodidae, que se divide en 2 subfamilias: Aleurodicinae y Aleyrodinae. La
subfamilia Aleurodicinae, es la más primitiva, sus individuos se caracterizan por la
presencia de secreciones de cera en forma de filamentos dorsales o algodonosas.Los
adultos son grandes, con tres o cuatro venas en las alas, se alimentan succionando
savia elaborada de árboles y arbustos.
Landis, D.A., S.D. Wratten, and G.M. Gurr. (2000), argumentaron que la subfamilia
Aleyrodinae es la más evolucionada, sus ninfas se caracterizan por presentar
secreciones largas y dorsales, de color transparente, amarillo o negro y se alimentan
principalmente de plantas herbáceas. La familia Aleyrodidae, cuenta con 126 géneros
que comprenden 1156 especies y es la más ampliamente distribuida (P.175)
28
6.3.2 MORFOLOGÍA Y CICLO DE VIDA DE LA MOSCA BLANCA.
Los adultos, revestidos de una secreción cérea pulverulenta blanca, tienen los ojos de
color rojo oscuro, con dos grupos de omatidios unidos en el centro por uno o dos de
ellos, miden cerca de 1 mm de longitud y las hembras son algo más grandes que los
machos. En reposo las alas se pliegan sobre el dorso formando una especie de tejado
casi rectangular y mantienen los lados paralelos. Por lo general, sobre todo en los
machos, las alas quedan levemente separadas en la línea media del dorso. Los huevos
son elípticos, asimétricos. Flint, M.L. & Dreistadt, S.H. (1998) la hembra deposita
preferentemente los huevos en el envés de las hojas, unidos a ellas mediante un
pedicelo que es insertado en el tejido hospedero, aunque en algunos cultivos prefiere
el haz. Los huevos se disponen de forma aislada, en grupos irregulares o en
semicírculos, los cuales hace a modo de abanico con su abdomen sin moverse del
sitio, pues no abandona su actividad de comer mientras los pone. Pueden o no estar
recubiertos por una secreción cerosa blanca.
El estado ninfal dura aproximadamente un mes. Las ninfas son ovaladas, aplanadas,
de color blanco amarillento y translúcido, la parte dorsal es lisa, plana o levemente
convexa con hasta seis pares de setas. La forma varía según la planta hospedera,
aunque por lo general son elípticas más anchas en la parte medio anterior, si la ninfa
se desarrolla sobre hojas glabras o desnudas, pero si las hojas son pubescentes, las
ninfas tienen una forma elíptica-alargada y convexa medio dorsalmente. Durante los
tres primeros estadios, la ninfa se alimentará succionando jugo de la planta de tal
forma que, en caso de que esta se secase o muriese, ella también moriría. En el
primer estadio se mueve unos pocos milímetros para buscar su propio lugar y clava
su aparato bucal en el tejido de la planta. El segundo estadio es típico por la cremosa
transparencia y por el desarrollo de patas y antenas rudimentarias. En el tercer
estadio aumenta el tamaño y sigue presentando una transparente cremosidad. En el
cuarto y último estadio no es necesaria la ingesta de alimento, adquiere un color
verde amarillento, empieza a abultarse y se hacen visibles dos ojos rojos.
Transcurridas las cuatro semanas emerge el adulto de la pseudopupa.
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El tiempo de desarrollo de la mosca blanca depende principalmente de la
temperatura, de la planta hospedera y de la humedad. Algunos investigadores han
estudiado la duración del desarrollo de huevo a insecto adulto a diferentes
temperaturas. En algodón el ciclo suele ser de dos a tres semanas en verano. El
tiempo necesario para el desarrollo es menor según aumentan las temperaturas. El
desarrollo del insecto es óptimo a temperaturas altas (unos 30-33º C). Por encima de
33º C el ritmo de desarrollo decrece rápidamente de nuevo. No sólo es importante el
tipo de planta hospedera, sino también la calidad nutricional del cultivo. Situaciones
de estrés tales como una baja intensidad luminosa, altas temperaturas y extrema
humedad, pueden influir sobre el desarrollo directa o indirectamente.
Cardona & otros(2001), constataron que la B Tabaci, es sin duda la especie de mayor
importancia, debido a que ataca a 200 cultivos; transmite más de 150 virus y tiene la
capacidad de generar biotipos muy agresivos. Entre los cultivos más afectados por
esta plaga están yuca, papa, fríjol, tomate, ají, berenjena, calabacín, pepino,
algodón, lechuga, uva, zapallo, col y melón. (p. 75)
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del tomate (TYMV), Virus del enrollamiento de la hoja de tomate (TLCV), Virus
chino del tomate (CdTV), Virus del mosaico dorado del tomate (TGMV), Virus
enano del tomate (TYDV), Virus del enrollamiento de la hoja del chile (LCChV),
Virus del mosaico francés del fríjol (YMFBV), Virus del moteado del tomate
(TMOV), De todas estas virosis, la primera es en la actualidad, la más extendida y
perjudicial, al afectar el completo desarrollo de las plantas afectadas, pruebas
desarrolladas por Hilje, L. (1996).
Los adultos de mosca blanca son frecuentemente observados sobre el envés de las
hojas apicales (Fig.1a), donde se alimentan de los fluidos de la planta y ovipositan
(Fig.2a). La miel excretada es un sustrato para el desarrollo de un hongo llamado
“fumagina” (Fig.3ª), el cual interfiere con la fotosíntesis (Fig.4a). La combinación
del daño causado por la alimentación directa de la sabia y la baja tasa de fotosíntesis,
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reduce el rendimiento del cultivo, dependiendo de la duración del ataque; como se
puede observar inmediatamente en la figura 1.
Fig. 1a Fig. 2ª
Fig. 3a Fig. 4ª
Fuente: Biología y manejo de la mosca blanca Trialeurodes vaporariorum, en habichuela y frijol
32
En la investigación realizada por Cardona, C., Vasquez, I, Rodriguez, J, & Tapia, X.,
(2005), el primer estado huevo se fija al envés de la hoja por medio de un pedicelo.
El huevo es liso, alargado, la parte superior termina en punta y la parte inferior es
redondeada. Los huevos son inicialmente blancos (Fig.1a), luego toman un color
amarillo (Fig. 2b) y finalmente se tornan café oscuro cuando están próximos a
eclosión (Fig.3c). La mosca blanca pone los huevos en forma individual o en grupos
(fig. 4d). En la figura 2 se pueden apreciar los distintos estadios por los que atraviesa
el huevo de la mosca blanca antes de llegar hacer ninfa.
Como se puede observar en la Figura 3. , Cardona, C., & otros (2005), la ninfa recién
emerge del huevo se mueve para localizar el sitio de alimentación (Fig 1a); es el
único estado inmaduro que hace este movimiento y se le conoce como “crawler” o
gateador. De allí en adelante la ninfa es sésil. La duración promedio del primer instar
es de tres días. En el segundo estado está se dedica exclusivamente a comer para
ganar peso(Fig. 2ª)., en el tercer instar la ninfa se localiza en el envés de la hoja se
pueden observar pequeñas manchas oculares de color rojo(Fig. 3 a), la pupa se fija a
la hoja por medio de unos hilos de cera que le permiten mayor agarre (Fig. 4ª), las
moscas adultas emergen en horas del día y se mueven poco en la noche, las hembras
son de mayor tamaño que los machos y estas ya esta aptas para procrear.(Fig. 5ª).
33
GRAFICO 3. Descripción del estado de desarrollo secundario de la mosca blanca
(Cardona, C & otros, 2001), el control cultural tiene como finalidad hacer menos
favorable el ambiente para la plaga de tal manera que se afectan su capacidad de
reproducción y dispersión. Es bien sabido que una de las claves para el control de la
mosca blanca es negar al insecto el continuo crecimiento de las poblaciones. (p.35)
34
Según el vademécum agrícola EDIFARM (2009), las características de los
ingredientes en estudio de los insecticidas usados para el control de la B tabaci son
las siguientes: Imidacloprid, es un insecticida de acción sistémica y de contacto, por
su alta sistemia y residualidad dentro de la planta, Imidacloprid puede usarse en
tratamientos al follaje, al suelo en el sistema de riego gracias a sus características del
modo de acción acropetal (hacia arriba) de esta forma protege los puntos de
crecimiento de las plantas. El i.a es un neurotransmisor tóxico, que es semejante y
actúa como la acetilcolina (neurotransmisor natural) permitiendo la transmisión de
estímulos nerviosos igual que la acetilcolina, ocupando su lugar. Este grupo no
inhibe la colinesterasa como lo hacen OP´S y Carbamatos.
35
ovipostura simultanea, por lo que los huevos son inmaduros e infértiles, además
salen con todo el aparato ovipostor, por lo que las hembras adultas mueren.
En el caso del tomate y del geminivirus que afecta a este cultivo en América Central
y del Sur, hasta ahora no se ha detectado resistencia natural. Todas las variedades de
tomate comerciales mas comúnmente utilizadas son susceptibles a este geminivirus.
Varios experimentos realizados en Venezuela y Costa Rica han demostrado que la
susceptibilidad de las plantas de tomate al geminivirus disminuye a medida que las
plantas maduran fisiológicamente. Durante las primeras cinco semanas, las plantas
son extremadamente sensibles a la infección viral. Ello no significa que las plantas
adquieran tolerancia, puesto que bajo una fuerte presión de infección las plantas se
pueden infectar. Otra observación importante es la forma como el geminivirus afecta
el crecimiento y el rendimiento de las plantas de tomate. En experimentos de
invernadero, se comprobó que la producción (cantidad y calidad de frutos) es
seriamente afectada si las plantas se infectan durante las primeras siete semanas
después de su germinación, moderadamente en la 8a y 9a semanas y apenas
levemente después de la 9a semana de desarrollo (6, 7, 8,10).
36
7. MARCO CONTEXTUAL.
7.1.1 LOCALIZACIÓN.
Se utilizó como semilla de tomate chonto santa cruz, marca Fercon, cuyo periodo
vegetativo es de 85 días y tierra neutra marca Fercon debido a la calidad que
presente su Ph neutro y la cantidad de minerales que esta posee.
Las moscas blancas B. Tabaci fueron obtenidas por una persona externa a la
universidad, para el fomento a las investigaciones con productos biológicos.
37
Amiri B, I.L., Butt TM. (1999), realizaron un estudio del cual lograron destacar que
los hongos experimentales fueron obtenidos en el laboratorio de investigaciones y
crecidos en el laboratorio de biología de la Universidad San Buenaventura Cali. “M.
anisopliae es un hongo imperfecto que pertenece a la subdivisión Deuteromycotina,
clase Hyphomycetes, caracterizado por la formación de micelio septado con
producción de conidias de aproximadamente 0.5 a 0.8 micras de diámetro o formas
de reproducción asexual, en conidióforos que nacen a partir de hifas ramificadas.
Este hongo se encuentra en la naturaleza, en rastrojos de cultivos, estiércol, en el
suelo, las plantas, etc., logra buen desarrollo en lugares frescos, húmedos y con poco
sol. M. anisopliae ataca naturalmente más de 300 especies de insectos de diversos
órdenes. El proceso infectivo que lleva al insecto atacado por el hongo a morir se
cumple en tres etapas: La primera de germinación de esporas y penetración de hifas
al cuerpo del hospedero dura de 3 a 4 días. La penetración del hongo al hospedero
ocurre a través de la cutícula o por vía oral. La segunda etapa es la invasión de los
tejidos por parte del micelio del hongo hasta causar la muerte del insecto, dura de 2 a
3 días. Los síntomas de la enfermedad en el insecto son la pérdida de sensibilidad,
incoordinación de movimientos y parálisis. Cuando el insecto muere, se momifica.
Finalmente sigue la tercera etapa, la esporulación y el inicio de un nuevo ciclo. El
micelio del hongo se observa primero en las articulaciones y partes blandas de los
insectos y en días posteriores se incrementa a todo el cuerpo hasta finalmente
cubrirlo (p. 487).
Según estudios adelantados por Solis,. H., (1998), T.lignorum, es un hongo saprofito,
antagonista de patógenos vegetales que se encuentra presente en la mayoría de los
suelos. Activa el crecimiento radicular de las plantas, es capaz de colonizar y crecer
en las raíces a medida que éstas se desarrollan y aumenta la resistencia del cultivo
frente al ataque de posibles patógenos. El uso de T. lignorum, es fácil, pues puede
añadirse directamente a las semillas o al suelo, semilleros, trasplantes, bandejas y
plantas, empleando cualquier método convencional. El hongo tiene excelentes
propiedades para el control biológico, siendo especialmente efectivo contra
Rhizoctonia spp, Fusarium spp, Pythium spp, Botrytis spp, Alternaria spp,
Phytophthora spp, Rosellinia spp, Armillaria spp y Sclerotium spp, entre otras
(p.135).
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8. MÉTODOLOGIA.
Los inóculos de las cepas fúngicas fueron introducidos en los medios estériles y se
colocaron a incubación a una temperatura aproximada de 28 Grados Centígrados
durante un periodo de 8 días. En este periodo fueron tomadas muestras para
determinar la máxima esporulación fúngica y la determinación del tiempo requerido
para lograr aproximadamente una concentración final de esporas de 5x10 9
esporas/ml. Este es el número de esporas requerido según los reportes existentes en
la bibliografía para el desarrollo de una buena formulación.
39
CUADRO 4 Esporulación inicial de hongos en prueba
40
Formulación 3 (Tratamiento 3): Correspondiente a 5x109 esporas/ml de Trichoderma
lignorum disueltas en 100 ml de agua destilada estéril, 100 ml de tritón X-100, 50 ml
de agentes conservantes, 50 ml de un atrayente no natural y 700 ml de agua destilada
estéril.
T1 6 25 Control
T2 6 25 M Anisopliae
T3 6 25 T. Lignorum
T4 6 25 M. Anisoplae + T
Lignorum
41
Como se puede observar de la tabla anteriormente mencionada cada tratamiento
poseía un ingrediente activo diferente. De otro lado el tratamiento control solo estaba
compuesto por la formulación pero no poseía esporas fúngicas de ninguna clase de
hongo entomopatógeno.
A B
42
Figura 1: (A) Distribución plantas de tomate usadas para el experimento, (B)
Encierro de Mallas el cual contenía las 25 moscas adentro y las plantas de tomate.
(C) Rociadores utilizados para liberar las formulaciones experimentales sobre las
plantas de tomate.
43
9. RESULTADOS.
Fuente: http://www.google.com.co/
44
CUADRO 6 Número de esporas Vs días de los hongos entomopatógenos
empleados.
45
9.3 EVALUACION EFECTIVIDAD DE LAS FORMULACIONES
Control 25 25 25 25 24 24 24 1
M. Anisoplae 25 22 19 19 18 16 15 9
T. Lignorum 25 24 21 18 17 17 16 8
M. Anisoplae + t. 18
25 23 18 15 12 10 6
Lignorum
Del cuadro anteriormente mostrado se puede apreciar que aunque todos los
tratamientos partieron de 25 moscas inicialmente estas fueron muriéndose con el
paso de los días. Se debe hacer notar que la variación más pronunciada corresponde a
la mezcla de esporas fúngicas de los hongos M.anisopliae y T.lignorum. Al contrario
el tratamiento uno (1) correspondiente al tratamiento control fue donde menos
mortalidad de insectos se pudo apreciar, esto es lo esperado si se tiene en cuenta que
el tratamiento control no poseía esporas fúngicas. El insecto muerto del tratamiento
uno fue llevado y estudiado en el laboratorio y no se observaron hifas fúngicas por lo
cual se presume que se debió a una muerte natural no correspondiente a una
formulación con hongos entomopatogenos específica.
Los insectos (Mosca Blanca) encontrados muertos en los encierros de mallas poseían
el desarrollo de hifas que provocaban la muerte al insecto por lo cual se puede
determinar que la causa de la muerte fue el hongo entomopatógeno presentes en estas
formulaciones. (ver figura 3).
46
FIGURA 3 Presencia de hifas de hongos filamentosos causante de la muerte de la
mosca en los tratamiento que poseían esporas fúngicas.
47
alguno de los siete (7) días que duro la experimentación. Los huevos de estos
insectos son claramente observables a simple vista en las hojas de la planta (ver
figura 4)
48
FIGURA 5 Moscas de B.Tabacci encontradas muertas con micelio fúngico
alrededor.
49
efecto o acción de ellas aumenta provocando una mayor mortalidad en la población
de moscas (B.tabacci)
50
10. CONCLUSIONES.
51
solo a nivel de laboratorio y se hace indispensable seguir con los estudios
para llevarlo a campo y determinar si la efectividad de esta formulación
aumenta, disminuye o sigue igual a diferentes condiciones climatológicas y
bióticas.
52
11. BIBLIOGRAFÍA
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12. ANEXOS
56
57