ESCUELA SUPERIOR POLITÉCNICA DE CHIMBORAZO

FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA DE CIENCIAS QUÍMICAS
INGENIERÍA EN BIOTECNOLOGÍA AMBIENTAL
BIOTECNOLOGÍA AMBIENTAL

PRÁCTICA. - PREPARACIÓN DE MICELIO

1. DATOS GENERALES DEL ESTUDIANTE

NOMBRE Y APELLIDO CODIGO

Basantes Guevara Jhosselyn Thalía 2660
Berrones Yaulema Jenny María 2603
Oñate Pacheco Cinthya Paola 2845
Proaño Amaguayo Adriana Guadalupe 2624
Quinga Ramón Berenice 2886
Sasintuña Bombón Juan Carlos 2706
N° de Laboratorio 1
FECHA DE REALIZACIÓN FECHA DE ENTREGA
15/06/2020 21/06/2020

2. INTRODUCCIÓN
PLEUROTUS OSTREATUS

El cultivo de Pleurotos spp., comúnmente conocidos como

hongos ostra u orellanas, fue realizado por primera vez en el
mundo a principios del siglo pasado y se ha incrementado en
las últimas cinco décadas, alcanzando el 14,2% de la
producción total de hongos comestibles en el mundo, siendo
China el principal productor con el 86,8% de la producción
mundial. (Chang, 1997)
Este hongo puede crecer en una temperatura entre 0 y 35 °C, con temperatura óptima de
30 °C, y en un rango de pH entre 5,5 y 6,5. (Zadrazil, 1974)
Los hongos Pleurotos spp. Pueden crecer con relaciones C/N entre 30 y 300 (Sánchez,
2001). La relación C/N óptima del sustrato depende de la fase en la que se encuentra el
hongo, altas relaciones C/N favorecen el crecimiento micelial y bajas relaciones
favorecen el desarrollo de cuerpos fructíferos (Rajarathnam, 1986).
El contenido de humedad en el sustrato para el desarrollo de los hongos debe estar entre
el 50 y el 80%, la fructificación suele darse en condiciones normales cuando se tiene un
20% de oxígeno y una concentración de CO2 no mayor de 800 ppm en el ambiente que
circunda al hongo y la humedad relativa óptima para la fructificación de P. ostreatus es
de 85 a 90% (Sánchez, 2001).
Si bien la fase de incubación del hongo debe ser en la oscuridad, se ha demostrado que la
eficiencia biológica y el rendimiento de P. ostreatus cultivado sobre residuos de cacao
disminuyen entre un 68% y 63% respectivamente, cuando el hongo en su fase de
fructificación está expuesto a la luz en tiempos menores de 12 horas (Bermúdez, 2002).

El cultivo de Pleurotos spp., tiene un gran atractivo debido principalmente a:

• Producen proteínas de alta calidad sobre un sustrato que consiste en materiales

de desecho de carácter lignocelulósico, materiales producidos en gran cantidad en
la actividad agrícola
• El sustrato que queda después de la cosecha del hongo llamado compost agotado
puede ser usado como sustrato para hongos de otros géneros, como forraje para
ganado, como acondicionador del suelo o fertilizante y en biorremediación.
(Miles, 1995)
Aislamiento por medio de tejido
Este tipo de aislamiento es una de las formas más simples de
obtener una cepa. El hongo se corta longitudinalmente con una
navaja; con la ayuda de unas pinzas estériles y frías, se toman
fragmentos del micelio o carne del hongo y se colocan en cajas de
Petri con medio de cultivo. (Gaitán, Mata, Pérez & Salmones,
2004)
Mantenimiento y/o preservación de cepas

Para retardar el envejecimiento, la viabilidad y la pérdida de las características propias de

las cepas, es necesario preservarlas adecuadamente. Para ello, las cepas se deben transferir
periódicamente a nuevas cajas de Petri con medio de cultivo nutritivo. (Gaitán, Mata,
Pérez & Salmones, 2004)
Selección de substratos

Los hongos del género Pleurotos, toman los nutrientes necesarios para su alimentación de
los materiales sobre los que crecen. Tienen la capacidad de degradar celulosa y lignina
presentes en diversos esquilmos agrícolas (pajas, rastrojos), desechos agroindustriales
(bagazos de caña de azúcar, maguey tequilero, henequén, pulpa de café), y/o forestales
(aserrín y viruta de diversas maderas). (Gaitán, Mata, Pérez & Salmones, 2004)

Siembra y producción de las setas

Para la siembra del hongo se requiere una área cerrada, limpia, provista de una mesa o
superficie con cubierta de fácil lavado, desinfectada con una solución de alcohol
comercial de 96° diluido en agua. Las bolsas cerradas se colocan en incubación, sobre
estantes metálicos en un cuarto limpio, de preferencia obscuro y con temperatura
ambiental entre 25 a 28°C. El área de producción será de fácil limpieza, y con paredes de
preferencia lavables, de igual manera la estantería que se emplee. La primera cosecha
puede durar entre 1 a 3 días, posteriormente habrá un tiempo de receso de una a dos
semanas para que se produzca el siguiente corte, durante el cual es importante mantener
las condiciones ambientales adecuadas de temperatura, iluminación y humedad, para
evitar daños o contaminación de las muestras. (Gaitán, Mata, Pérez & Salmones, 2004)
Consumo o comercialización de setas

Una vez cosechados los hongos se pueden consumir,

comercializar en fresco o almacenar. Si el objetivo es la
comercialización en fresco, ésta debe realizarse
inmediatamente después de la cosecha, poniendo especial
atención en el empaque: elegir un
método que evite el maltrato ya que
este disminuye la calidad y con ello el
costo. Si se desea conservarlos por un
tiempo mayor, se pueden deshidratar por medio de aire caliente a una
temperatura de 35-45 °C, o bien poner en conserva. (salmuera,
vinagre, etc) (Gaitán, Mata, Pérez & Salmones, 2004)

3. OBJETIVOS
3.1 OBJETIVO GENERAL
Identificar los factores que influyen en el crecimiento óptimo de Pleurotus ostreatus.

4. CUESTIONARIO
¿CUÁLES SON LOS FACTORES QUE INFLUYEN EN LA SIEMBRA DE
PLEUROTUS?
TEMPERATURA
La temperatura, afecta al metabolismo de las células, para ello debe alcanzar una misma cepa en
desarrollo o varias cepas, para una temperatura optima de crecimiento micelio, su temperatura
óptima de fructificación en rangos altos de temperatura. (Bartnicki-garcia, S.1997)
EL PH
El Potencial de hidrogeno del medio del cultivo tiene una influencia directa sobre este, indica en
carácter iónico del medio e influye en proteína y membranas, también sobre la actividad de
enzimas que atacan directamente su metabolismo, el valor de ph es afectado por el crecimiento
del hongo. (Bartnicki-garcia, S.1997)
SUSTRATO
Un sustrato es conveniente dada la velocidad máxima de crecimiento de un hongo, su velocidad
puede variar de manera proporcional de acuerdo a la concentración de este. Pueden ser: Carbono,
Polímeros, azucares, lípidos, nitrógeno, relación C/N, minerales, vitaminas. (Bartnicki-garcia,
S.1997)
LA HUMEDAD EN EL SUSTRATO
La cantidad de humedad influye directamente sobre el desarrollo de los hongos, porque afecta
la disponibilidad de nutrientes, el contenido óptimo de humedad depende no solo de la especie
de hongo que se cultiva sino también del tipo de sustrato. (Bartnicki-garcia, S.1997)
LA HUMEDAD EN EL AIRE
Debe ser adecuada para la fructificación de las especies pleurotus, un alto contenido de humedad
del hongo es necesario. (Bartnicki-garcia, S.1997)
TAMAÑO DE PARTIICULA
Esta afecta al crecimiento y la fructificación porque se relaciona con la accesibilidad a los
nutrientes en el agua y al aire, por parte delas hifas del hongo. (Bartnicki-garcia, S.1997)
LA AIREACIÓN
El Oxigeno es un elemento de gran importancia para el crecieminto de los bastidiomicetos porque
son organismo aerobios. (Bartnicki-garcia, S.1997)
LA LUZ
No puede fructificar en oscuridad continua, exponer a longitudes de ondas inferiores a 600 nm,
sin embargo estas condiciones depende de las especies. (Bartnicki-garcia, S.1997)

¿CUAL ES LA FUNCION DE LA CAL Y COMO ACTUA EL SUSTRATO?

La cal en todos sus formatos y la dolomía calcinada son los productos alcalinos más
efectivos y de menor coste en el tratamiento de aguas de consumo, así como aguas
residuales y de lodos. De hecho, la mayoría de la cal que se produce se destina a mejorar
la calidad del agua que consumimos las personas y las que utilizan las industrias. En este
sentido, la cal permite ablandar el agua, purificarla, eliminar su turbiedad, neutralizar la
acidez, eliminar impurezas, también para reducir el sabor, olor y color del agua al eliminar
la materia en suspensión y, por tanto, la turbiedad de esta. Además, se elimina el
manganeso, los fluoruros y los taninos orgánicos del agua, así como la anteriormente
mencionada sílice. (Mendoza Leonardo, AO. (2001))
SUSTRATO: Los horticultores pueden experimentar ocasionalmente problemas de pH
alto en su sustrato, que causan clorosis férrica en las petunias y la calibrachoa, o de pH
bajo, que causan toxicidad por hierro-manganeso en geranios y caléndulas. A veces, los
horticultores ajustan la cantidad de cal del sustrato para ayudar a contrarrestar el bajo pH,
pero un mejor enfoque es el de determinar por qué ocurren estos problemas. (Mendoza
Leonardo, AO. (2001).)
¿POR QUÉ SE RECOMIENDA UTILIZAR PDA Y NO EL EXTRACTO DE
MALTA O SABORAUD?

El Agar Extracto de Malta se utiliza para el aislamiento, cultivo y enumeración de

levaduras y mohos en alimentos ya que contiene una alta concentración de maltosa y otros
sacáridos como fuente de energía. La dextrina y la glicerina son las fuentes de carbono, y
la peptona es una fuente de nitrógeno. (Thom, 2020) El pH 5.6 del Agar Extracto de Malta
es óptimo para el crecimiento de levaduras y mohos, mientras que restringe el crecimiento
de otras bacterias. Por otro lado, el Medio de cultivo Agar de Dextrosa y Papa (PDA) por
sus siglas en inglés, tiene la infusión de papa como fuente de almidones y la dextrosa son
la base para el crecimiento de hongos y levaduras, el bajo pH (3.5) evita el crecimiento
de las bacterias. (DIBICO, 2020). Para el crecimiento de Pleurotus se han citado rangos
de pH óptimo es ácido, el cual suele variar entre cepas y especies. El pH del medio de
cultivo donde crece un hongo tiene una influencia directa sobre éste porque incide sobre
el carácter iónico del medio e influye directamente sobre las proteínas de la membrana y
sobre la actividad de las enzimas ligadas a la pared celular, es decir que afecta su
metabolismo: si el pH del sustrato donde crece un hongo no es adecuado, aunque las
condiciones de temperatura y nutrientes sean óptimas, el crecimiento se verá afectado
(PILAR, 2010)

5. ANÁLISIS

En el cultivo de Pleurotus Spp es necesario tener en cuenta algunos factores

fisicoquímicos y biológicos que condicionan el óptimo desarrollo. La temperatura afecta
el metabolismo de las células y en la capacidad enzimática del organismo, el Pleurotus
es un género de hongo cuyo micelio puede crecer en un rango amplio de temperaturas. El
tipo de sustrato está en relación directa con las necesidades de crecimiento del hongo,
este hongo no necesita una descomposición previa de sustrato. Otra factora importante es
la incidencia de luz donde el Pleurotus ostreatus no puede dar fruto en la oscuridad
continua. Para esto, debe exponerse a longitudes de onda inferiores a 600 nm, pero la
sensibilidad de la cantidad y calidad de la luz depende de las especies, El contenido de
humedad afecta la disponibilidad de nutrientes en el sustrato y la disponibilidad de
oxígeno, es decir el agua ocupa espacios que pueden ser ocupados por el aire y esto a
niveles excesivos, se convierte en una restricción para la respiración delo de hongos. La
cal es utilizada para neutralizar el bajo pH. El medio del cultivo PDA es el óptimo debido
a que existen estudios en los cuales se indica que los rangos de pH óptimo para el
crecimiento del hongo son ácidos, el cual suele variar entre cepas y especies y este medio
de cultivo tiene un pH de 3,5.
6. CONCLUSIÓN

De acuerdo al cultivo de la especie estudiada se establece que existen diversos factores

que intervienen en el desarrollo del crecimiento de los cuales hay que destacar
requerimientos nutricionales y el tratamiento adecuado del sustrato; el primero de ellos
define la importancia de un sustrato rico en carbohidratos que pueden ser utilizados para
el crecimiento y maduración del Pleurotus ostreatus, en el segundo aspecto relacionado
de igual manera con el sustrato es necesario el uso de sustancias como la cal que influye
en el ajuste del pH del medio en el que se desarrolla dicha especie; de este modo se
controla los posibles efectos adversos que repercutiría en el desarrollo del P. ostreatus.
BIBLIOGRAFIA
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