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TEMA:

COMPARACIN DEL CRECIMIENTO DEL HONGO Pleurotus ostreatus. EN LOS MEDIOS DE


CULTIVO DE AGAR PAPA DEXTROSA Y AGAR SUERO DE LECHE

ASESOR:

Ms.C. JULIO CSAR ARELLANO BARRAGN

FACULTAD:

CIENCIAS BIOLGICAS

ESCUELA:

CIENCIAS BIOLGICAS

INTEGRANTES:

MORENO SNCHEZ, MARJORIE


PREZ ALCNTARA, SEBASTIAN
PUCLIA VARGAS, DAJAIRA
RUMAY SALDAA, DIANA
VILLAMIL RODRIGUEZ, ALISON
COMPARACION DEL CRECIMIENTO DEL HONGO Pleurotus ostreatus. EN LOS MEDIOS DE
CULTIVO DE AGAR PAPA DEXTROSA Y AGAR SUERO DE LECHE

RESUMEN

Se llev acabo la evaluacin del cultivo del Pleurotus ostreatus para determinar el mejor medio
de cultivo sobre el cul este hongo genere un ptimo crecimiento.

Los medios de cultivo utilizados fueron el Agar suero de leche y Agar papa dextrosa, estos
medios fueron colocados en placas Petri previamente esterilizados para el posterior sembrado
del micelio del hongo.

Para la evaluacin del crecimiento se tomaron medidas del dimetro en diferentes fechas,
teniendo como resultado una mayor expansin en el Agar papa dextrosa; sin embargo por la
variacin de factores ambientales (temperatura, humedad) se present agentes
contaminantes perjudicando el desarrollo del hongo en diversas formas.

ABSTRACT

The evaluation of the culture of Pleurotus ostreatus was carried out to determine the best
culture medium on which this fungus generates an optimum growth.

The culture media used were whey agar and potato dextrose Agar, these media were placed
in Petri dishes previously sterilized for the subsequent planting of the mycelium of the fungus.

For growth evaluation, diameter measurements were taken at different dates, resulting in a
greater expansion in potato dextrose Agar; However due to the variation of environmental
factors (temperature, humidity), pollutants were present, damaging the development of the
fungus in various forms.

INTRODUCCION

Los hongos se dividen en tres grandes grupos. Los saprfitos que se alimentan de materia
orgnica muerta; los parsitos que se alimentan de materia orgnica viva y los simbiontes
(micorrzicos), que subsisten slo en relacin simbitica con algunos miembros que
pertenecen al reino vegetal.

Su reproduccin es sexual o asexual. En la reproduccin sexual existen dos clases,


Ascomycetes y Basidiomycetes, siendo esta ltima la ms desarrollada, producen sus esporas
en estructuras conocidas como basidios, los cuales se encuentran en organismos fructferos
altamente organizados llamados basidiocarpos (1)
En el hongo hay que diferenciar dos partes fundamentales: el cuerpo vegetativo y el cuerpo
reproductor (figura 1). El cuerpo vegetativo, que se encuentra bajo tierra, est formado por
unos filamentos llamados hifas, que pueden ser unicelulares (con una sucesin de ncleos), y
pluricelulares. El conjunto de todas las hifas es el micelio. l es el que se encarga de absorber
las substancias minerales del suelo para alimento del hongo. El micelio en realidad es el hongo,
ya que la seta (a la que vulgarmente se llama hongo), es su aparato reproductor (2).

Figura 1. Partes del hongo ostra (Pleurotus ostreatus) (Mendivil, 2013)

En la actualidad la biotecnologa se ha convertido en una verdadera alternativa para la


obtencin de alimentos para el consumo humano, por la posibilidad de obtener grandes
cantidades en pequeas reas mediante tcnicas sencillas, a bajo costo, en cortos periodos
de tiempo y empleando residuos de agroindustria como sustrato para su cultivo, la produccin
de hongos comestibles, es un claro ejemplo de cmo la biotecnologa es una alternativa real
para la obtencin de alimentos (3).

Los hongos comestibles poseen un alto contenido de protenas de un excelente sabor.


Actualmente se tienen registrados cerca de 14000 especies de hongos distribuidos en todo el
mundo, de los cuales ms de 3000 son considerados comestibles por presentar un gran
potencial biotecnolgico debido a su capacidad de producir enzimas y frmacos , siendo tiles
en los campos de :medicina , agroindustrial , entre otros

El cultivo de Pleurotus ostreatus fue iniciado en Colombia hacia 1990 en el Laboratorio de


Microbiologa de la Universidad de Antioquia por el microbilogo Fabio Pineda, con la asesora
del miclogo Gastn Guzmn (4). A principios de los aos 90 el Pleurotus ostreatus ocupaba
el segundo puesto entre los hongos ms cultivados en el mundo; 5 aos despus, el 24% de la
produccin de hongos comestibles en el mundo corresponda a Pleurotus ostreatus y otras
especies relacionadas. Segn Miles y Shang en 1997, la produccin total de Pleurotus sp. en la
ltima dcada del siglo XX fue mayor a 250.000 toneladas.

El vocablo latino Pleurotus(pie descalzo), se refiere al crecimiento del estpite(pie) con


respecto al sombrero , mientras que la palabra latina ostreatus , se refiere a la forma del
sombrero en s , que se asemeja al bivalvo del mismo nombre (5).

El Pleurotus ostreatus se encuentra clasificado taxonmicamente de la siguiente manera:

REINO: Fungi
SUBREINO: Fungi Superior
DIVISION: Basidiomycota
SUBDIVISION: Basisdiomycotina
CLASE: Himenomycetes
ORDEN: Agaricales
FAMILIA: Tricholomataceae
GENERO: Pleurotus
ESPECIE: Ostreatus

Antiguamente los hongos fueron utilizados para la alimentacin, la medicina y ritos religiosos
y en diversas culturas como la Veda; Griega; Escocia, etc.(6)

En el Per existen evidencias de su consumo contemporneo al desarrollo de la cultura Moche


(7). Las representaciones iconogrficos, en esos tiempos se les denominaba callampo o paco
y se les utilizaba como producto alimenticio .Actualmente son consumidos por la poblacin
nativa de las zonas donde crecen en forma silvestre (Cuzco, Puno; Hunuco; etc.), pero dado
que aparece en las pocas de lluvia el consumo es poco continuo y pocas cantidades.

Este hongo se desarrolla en naturaleza preferiblemente sobre residuos de material leoso o


rico fibra como troncos, ramas y bagazos. El Pleurotus ostreatus es un hongo saprofito o
parasito dbil, descomponedor del grupo de la pobredumbre blanca que crece de forma
natural en arboles como aliso, balso y arce, principalmente en los valles de los ros.

El micelio de este hongo puede crecer en una temperatura entre 0 y 35 C, con temperatura
ptima de 30 C, y en un rango de pH entre 5,5 y 6,5 y se ha observado que despus de
cosechar los cuerpos fructferos de P. ostreatus, en los materiales usados como sustratos las
cantidades finales de hemicelulosa, celulosa y lignina se han reducido en un 80% sugiriendo
que todos los materiales que contienen estos compuestos, pobres en nitrgeno pueden ser
usados como sustratos para Pleurotus sp.

El cultivo de los hongos del gnero Pleurotus sp., tiene un gran atractivo debido
principalmente a:

Producen protenas de alta calidad sobre un sustrato que consiste en materiales de


desecho de carcter lignocelulosico, materiales producidos en gran cantidad en la
actividad agrcola. A pesar de que la calidad de las protenas de los hongos no es tan
alta como la protena animal, se considera que la produccin de sta es ms eficiente
en trminos de costos, espacio y tiempo.

El sustrato que queda despus de la cosecha del hongo llamado compost agotado,
puede ser usado como sustrato para hongos de otros gneros, como forraje para
ganado, como acondicionador del suelo o fertilizante y en biorremediacin.
Presencia de componentes medicinales en los hongos

En cuanto a caractersticas alimenticias de los hongos del gnero Pleurotus sp. se destaca su
sabor, altas cantidades de protena, fibra diettica, carbohidratos, minerales (fsforo, hierro,
calcio), vitaminas (riboflavina, tiamina, cido ascrbico y niacina), cido linoleico, as como
bajas concentraciones de grasas(8)

En cuanto a la capacidad biorremediadora de hongos del gnero Pleurotus spp., se ha


reportado la habilidad de cepas de Pleurotus pulmonarius para biotransformar herbicidas
como la atrazina e insecticidas como el endosulfan (9). Con respecto a los efectos benficos
medicinales de P. ostreatus es conocida su actividad anticancergena, efectos
inmunomodulatorios, antivirales, antibiticos, antiinflamatorios y disminucin en los niveles
de colesterol.
Tabla 1. Contenido Nutricional del hongo comestible Pleurotus ostreatus

SUSTANCIA %
Agua 92.20
Materia seca 7.80
Ceniza 9.50
Grasa 1.00
Protena bruta 39.00
Fibra 7.50
Fibra cruda 1.40
Nitrgeno total 2.40
Calcio 33mg/100g
Fosforo 1.34mg/100g
Potasio 3793mg/100g
Hierro 15.20mg/100g
cido ascrbico. Vit. C 90-144mg/100g
Tiamina. Vit. B1 1.16-480mg/100g
Niacina. Vit. B5 46-108.7mg/100g
cido Flico 65mg/100g
Fuente: Romero y Colaboradores 2008

Las observaciones de su crecimiento rural , en diferentes zonas de acuerdo a las condiciones


ambientales y sus necesidades nutricionales como el carbono (C) , azufre(S), nitrgeno(N),
potasio(K),etc. Nos lleva a realizar el proyecto del cultivo del hongo Pleurotus ostreatus de
manera artificial a base de dos medios de cultivo que son: Agar suero de leche (ASL) y Agar
papa dextrosa (PDA).

El agar papa dextrosa, es un medio utilizado para el cultivo y recuento de hongos y levaduras
en productos lcteos, bebidas embotelladas y alimentos(10).Que pueden ser suplementados
con cidos o antibiticos , los cuales pueden inhibir el crecimiento de ciertos agentes
bacterianos .La base es la infusin de papa, nutricionalmente rica como fuente de almidones
,estimula la esporulacin de mohos y la produccin de pigmentos en algunos
dermatofitos(11).Adems de la infusin de papa se adiciona la dextrosa que fomentan el
crecimiento de los hongos .Adicionalmente se le incorpora un agente solidificante que sera el
agar. Este medio tiene que estar en un pH de 3.5 (acido) para evitar el crecimiento de
bacterias.

El agar suero de leche a comparacin del PDA, est compuesto de suero lctico que contiene
94% de agua, protenas y grasas de la leche, el suero de leches es considerado un desecho
orgnico difcil de tratar y eliminar, aparte de este suero tambin se le agrega el agar que al
igual que al PDA le servir como agente solidificante (12).

PROBLEMA
Entre el ASL y el PDA Cul ser el medio de cultivo ms adecuado para el crecimiento de
Pleurotus Ostreatus?

HIPOTESIS
Se estima que el ser el PDA, es el medio de cultivo especfico para el crecimiento de hongos
y levaduras, por sus caractersticas nutricionales a comparacin con el suero de leche que es
un residuo no especfico para el desarrollo del hongo.

MATERIALES Y METODOS
El presente trabajo estudi la produccin del Pleurotus Ostreatus el cul se observ su
crecimiento y desarrollo sobre dos medios de cultivo que son el Agar papa dextrosa (PDA) y
Agar suero de leche (ASL).

LOCALIZACION
El proceso experimental se realiz en el laboratorio de bioqumica general, que cuenta con los
requisitos para la realizacin del proyecto. La obtencin de instrumentos y materiales
necesarios fue autofinanciado.

OBTENCION DE MEDIO DE CULTIVO


Los materiales a obtener son la papa y la leche fresca que se adquiri en el mercado mayorista
de la ciudad de Trujillo.
OBTENCION DE LA SEMILLA Y MICELIO
Para una buena inoculacin se utiliz el micelio por ser una forma ms rpida para su
crecimiento .Se tom un pequeo fragmento de micelio que se utilizaron es el ASL Y PDA,
donde se puso sobre una placa Petri hasta que el fragmento de micelio crezca

COMPOSICIN DEL AGAR PAPA DEXTROSA (PDA)


Se mezcl adecuadamente cada material en la misma proporcin de la tabla N1.
MATERIALES CANTIDAD
Caldo de papa 50ml
Agar 0.75gr
Dextrosa 1.00gr

TABLA N1: Formulacin del medio de cultivo del PDA

PREPARACION DEL CALDO DE PAPA


Se pel y pic 200 gr de papa en cuadrados de aproximadamente de 1cm. Se puso a hervir en
un litro de agua, posteriormente se col y se reserv el caldo en un recipiente con 4 gotas de
cloroformo para su mantenimiento, se conserv en un refrigerador.

PREPARACIN DEL AGAR PAPA DEXTROSA (PDA)

Primero se desinfect el matraz a utilizar, para evitar que se contamine el sustrato.


Luego se aadi el caldo preparado de papa en el matraz.
Se hizo el pesado correcto de la dextrosa y el agar (de acuerdo a la cantidad de caldo que
se va a emplear).
Se mezcl todos los elementos en el matraz y se tap con algodn para proceder a
calentar.
Se calent agitando frecuentemente y permitiendo que hierva para disolver
completamente el medio.
Despus se puso a enfriar hasta que el contenido gelifique.
Una vez gelificado se puso a hervir otra vez para poder deshacerse de la mayora de
bacterias que podran estar en el ambiente externo del matraz y en el medio de cultivo.
COMPOSICIN DEL AGAR SUERO DE LECHE (ASL)
Se mezcl adecuadamente cada material en la misma proporcin de la tabla N2
MATERIALES MEDIDA
Suero de leche 50ml
Agar 0.75gr

TABLA N2: Formulacin del medio de cultivo del ASL

PREPARACIN DEL SUERO DE LECHE

Para formar el suero de leche se necesita la leche y la pastilla de cuajo que contiene
principalmente la enzima llamada rennina, tambin conocida como quimosina, utilizada en la
fabricacin de quesos, cuya funcin es separar la casena (el 80% aproximadamente del total
de protenas) de su fase lquida (agua, protenas del lactosuero y carbohidratos), llamado
suero.

Se mezcl la leche con la pastilla de cuajo y se dej reposar para homogenizar. Luego se
procede a colar la mezcla cuajada para obtener el suero.

PREPARACIN DEL AGAR SUERO DE LECHE

Se desinfect primero el matraz, luego se verti el suero de leche preparado


anteriormente al matraz

Posteriormente se le agreg el agar y se puso a calentar dejando que hierva y se


disuelva por completo.

Posteriormente se dejar enfriar a temperatura ambiente hasta gelificar.

Y al igual que en el PDA, una vez gelificado se pondr a hervir otra vez para poder
deshacerse de la mayora de bacterias que podran estar en el ambiente externo del
matraz y en el medio de cultivo.
RESULTADOS:

PRIMERA REPETICIN: Da de sembrado: 26-12-16

Humedad: entre 60-65%

Temperatura: 22 -24C

TABLA N3: Medidas del crecimiento del dimetro del PDA

N DE PLACA 28-12-16 30-12-16 02-01-17

1 0.4 mm 3.2 cm 6.6 cm

2 0.4 mm 4.0 cm 7.6 cm


3 0.3 mm 3.2 cm 6.4 cm

4 0.4 mm 3.1 cm 6.12 cm

TABLA N4: Medidas del crecimiento del dimetro del ASL

N DE PLACA 28-12-16 30-12-16 02-01-17

1 0.3 mm 1.4 cm contaminado

2 0.2 mm 1.4 cm 2.03 cm

3 0.4 mm 1.5 cm 2.26 cm

SEGUNDA REPETICIN: Da de sembrado: 05-01-17

Humedad: 65-70%

Temperatura: 26 -28C

TABLA N5: Medidas del crecimiento del dimetro del PDA

N DE PLACA 06-01-17 09-01-17

1 0.6 mm contaminado
2 0.4 mm contaminado

3 0.7 mm contaminado
TABLA N6: Medidas del crecimiento del dimetro del ASL

N DE PLACA 06-01-17 09-01-17


1 0.2 mm contaminado
2 0.3 mm contaminado
3 0.3 mm contaminado

TERCERA REPETICIN: Da de sembrado: 11-01-17

Humedad: entre 70-76%

Temperatura: 27 -28C

TABLA N7: Medidas del crecimiento del dimetro del PDA

N DE PLACA 13-01-17 16-01-17


1 2.3 cm contaminado
2 2.0 cm 6.73 cm
3 1.9 cm 6.97 cm (pequea
contaminacin amarillenta)

TABLA N8: Medidas del crecimiento del dimetro del ASL

N DE PLACA 13-01-17 16-01-17


1 1.07 cm 1.2 cm
2 1.1 cm 1.9 cm (presencia de esporas
contaminantes)
3 1.37 cm 1.05 cm (presencia de mancha
verdosa)
4 0.9 mm 1.07 cm

CUARTA REPETICIN: Da de sembrado: 18-01-17

Humedad: entre 75-80%

Temperatura: 28 -29C

TABLA N9: Medidas del crecimiento del dimetro del PDA

N DE PLACA 20-01-17 23-01-17 25-01-17 27-01-17

1 0.73 mm 1.76 cm 2.0 cm (presencia 2.13 cm (presencia


de bacilo) de bacilo)
2 1.1 cm 3.6 cm 4.07 cm (presencia 4.87 cm (presencia
de bacilo) de bacilo)
3 0.97 mm 1.6 cm 2.07 cm (presencia 2.4 cm (presencia
de bacilo) de bacilo)
TABLA N10: Medidas del crecimiento del dimetro del ASL

N DE PLACA 20-01-17 23-01-17 25-01-17 27-01-17

1 1.06 cm 1.57 cm 1.97 cm 2.3 cm

2 0.96 mm 1.2 cm 1.6 cm 1.9 cm

DISCUSIN

La temperatura y humedad registrada por el termmetro influenciaron en el


crecimiento del Pleurotus ostreatus, segn los datos tericos para un crecimiento
ptimo de este hongo se requiere de una temperatura de 30C. A diferencia de los
datos tericos, los datos obtenidos en el laboratorio mostraron una variacin en la
temperatura para su desarrollo.

En la primera repeticin la temperatura oscil entre 22 24C y con una humedad de


60 65%; en el PDA se observ un crecimiento mayor y constante mientras que en el
ASL su crecimiento fue constante pero menor al del PDA, adems de que una de las
placas se lleg a contaminar.

En la segunda repeticin la temperatura oscil entre 26 28C y con una humedad de


65 -70%, en este caso la contaminacin fue total y acelerada por la presencia de
agentes contaminantes en el ambiente por el alza de temperatura, sin embargo al
igual que la primera repeticin el crecimiento del PDA fue mayor que del ASL.

En la tercera repeticin la temperatura oscil entre 27 -28C y con una humedad de


70 -76%, el PDA sigue teniendo un crecimiento mayor al ASL. En este caso la
contaminacin no fue total como para impedir el desarrollo del Pleurotus ostreatus,
ya que se presentaban como pequeas manchas contaminantes.

En la cuarta repeticin la temperatura oscil entre 28 -29C y con una humedad de 75


-80%, en este caso el PDA tuvo una contaminacin en las tres placas a causa de un
bacilo desconocido el cul restringa un poco el crecimiento del hongo, ya que este no
dejo de crecer; en el caso del ASL su crecimiento fue constante pero demasiado lento
y sin presencia de contaminacin.
CONCLUSIN

La variacin del crecimiento del Pleurotus ostreatus entre los dos medios diferentes
(PDA y ASL), en donde el PDA tuvo el mayor crecimiento en todas las repeticiones, sin
embargo, con el alza de temperatura y de humedad se dio el ambiente propicio para
el desarrollo de agentes contaminantes, los cuales afectaron de diversas formas en el
crecimiento del hongo.
BIBLIOGRAFIA:

1. Rojas, E. A. (2004). Evaluacin de paja de trigo, triticum sativum; broza de encino,


Quercus sp. y rastrojo de maz, (Zea mays) para el cultivo del hongo comestible Pleurotas
ostreatus bajo condiciones artesanales en San Rafael la Independencia, Huehuetenango.
Tesis de grado. Universidad San Carlos de Guatemala. pp. 19.
2. Mendivil, J. (2013). Hongos en Aragn. Consultado el 18 de septiembre de 2013.
Disponible en lnea: http://www.pasapues.es/naturalezadearagon/hongos/index.php
3. SECRETARIA DE AGRICULTURA, GANADERIA, DESARROLLO RURAL PESCA Y
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Link:http://www.sagarpa.gob.mx/desarrolloRural/Documents/fichasaapt/Producci%C3
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ANEXOS:

PREPRACIN DEL AGAR PAPA DEXTROZA


PREPARACIN DEL AGAR SUERO DE LECHE
DISTRIBUCION DEL AGAR A LAS PLACAS PETRI
SEMBRADO DEL MICELIO A LAS PLACAS PETRI CON EL AGAR
RESULTADOS FINALES DEL CRECIMIENTO DEL Pleurotus ostreatus

PRIMERA REPETICIN

PDA:

ASL:
SEGUNDA REPETICIN

PDA:

ASL:

TERCERA REPETICIN

PDA:
ASL:
CUARTA REPETICIN

PDA:

ASL:

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