GUIA DE LABORATORIO DE MICOLOGIA

Código FLA-23 v.00

Francisco Rodríguez Rincón, M.Sc., Ph.D.
francrincon@unipamplona.edu.co
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PRÁCTICA DESCRIPCION E IDENTIFICACION DE Fusarium

Fusarium spp. (Descrito por Link ex Gray en 1821)

Clasificación taxonómica del anamorfo (Realice la clasificación de los teleomorfos)

Reino: Fungi
Phylum: Deuteromycota
Clase: Deuteromycetes
Orden: Moniliales
Familia: Moniliaceae
Género: Fusarium

Fusarium es un género de hongos filamentosos de distribución universal, ubicuos en el

suelo y plantas y con gran importancia económica ya que son habituales
fitopatógenos. Debido a su capacidad de crecer a 37°C, son considerados
oportunistas. En ocasiones causan infecciones en pacientes normales (queratitis,
onicomicosis, etc.). Sin embargo, cada vez se describen más infecciones graves en los
pacientes inmunodeprimidos, de ahí que su importancia haya crecido
exponencialmente. Algunas de sus especies producen toxinas que afectan al hombre y
animales. De las más de 100 especies de Fusarium descritas, sólo 12 de ellas pueden
considerarse patógenas para el humano, entre ellas destacan F. solani, F. oxysporum
y F. verticilloides, en orden decreciente de frecuencia

Las infecciones por el género Fusarium se incluyen dentro de las hialohifomicosis, esto
es, las causadas por hongos oportunistas que presentan hifas hialinas septadas. Su
amplia distribución se atribuye a su capacidad para crecer en gran número de
substratos y a su eficaz mecanismo de dispersión; el viento y la lluvia juegan un
importante papel en su diseminación. Se ha demostrado que el aire puede llevar las
esporas hasta 400 km de distancia.

En 1973 se describe la primera infección diseminada en un paciente con leucemia

aguda. Desde entonces se han descrito muchos casos, especialmente en pacientes
con alteraciones de la respuesta inmune, diabéticos, quemados, con heridas abiertas y
contaminadas con tierra, con trastornos inmunológicos o con tratamiento
inmunosupresor. Se han detectado concentraciones elevadas de anticuerpos frente a
polisacáridos extracelulares en los sujetos sanos, lo que sugiere que existe un
contacto frecuente con el hongo. Al igual que ocurre con el genero Aspergillus, es
probable que este contacto se produzca por inhalación de las esporas, que se
encuentran de forma habitual en el aire.

Si se cultivan en condiciones estándar de luz, temperatura y substrato, las

características macroscópicas son útiles para la descripción de las especies, pero no
para su diferenciación. La morfología y la pigmentación de la colonia y la ausencia o
presencia de esporodoquia, esclerotia o estroma en diferentes medios son una
sustancial ayuda.
En medios habituales las colonias presentan un crecimiento rápido, que suele ocupar
toda la placa (8-9 cm de Ø en 1 semana). El color que desarrollan depende de la
especie y puede ser blanquecino, crema, anaranjado, rosa, rojizo, púrpura, etc. Estas

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coloraciones también pueden variar según los diferentes medios de cultivo. El micelio
aéreo suele ser abundante y de aspecto algodonoso. La velocidad de crecimiento, la
morfología y la pigmentación de la colonia son datos importantes para la identificación.
Los medios de cultivo utilizados habitualmente y que se encuentran disponibles en el
mercado son:
 Agar extracto de malta (MEA). Se pueden valoran aspectos morfológicos
macroscópicos y microscópicos. Se consigue una buena esporulación. l
 Agar patata dextrosa (APD). Es un medio útil para valorar el aspecto
morfológico y la coloración de la colonia. Su alto contenido en carbohidratos
condiciona un mayor crecimiento, en detrimento de la esporulación que suele
retrasarse hasta un mes. Las conidias pueden ser atípicas. l
 Agar harina de avena (OA). Se utiliza para valorar la velocidad de crecimiento,
el color, el aspecto de la colonia y las características microscópicas. l
 Otros medios de cultivo como agar clavel (CLA), medio con KCl, agar arena,
agar nutriente sintético (SNA), medio de Komada, etc., se suelen utilizar en
laboratorios especializados. La temperatura habitual de incubación de estos
hongos es entre 25 y 28 ºC.
 La formación de conidias puede estimularse incubando los diferentes medios
bajo luz negra (300-400 nm) y también alternando luz y temperatura (25 ºC
día/20 ºC noche).

Características microscópicas

Se observan hifas septadas hialinas, conidióforos, fiálides, macroconidias y

microconidias. Además de estos elementos, también producen clamidosporas las
siguientes especies: Fusarium chlamydosporum, Fusarium napiforme, Fusarium
oxysporum, Fusarium semitectum, Fusarium solani, y Fusarium sporotrichoides.

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 Las fiálides son cilíndricas, con un pequeño collarete, solitarias o producidas

en un sistema ramificado y compacto. Se observan monofiálides y polifiálides
(en cabezas o en cadenas).
 Las macroconidias (3-8 x 11-70 µm) son producidas en las fiálides sobre
conidióforos ramificados o no ramificados. Ellas tienen 2 o más células, de
pared gruesa, lisa, de forma cilíndrica o en hoz. Las macroconidias tienen una
célula basal distintiva y la del extremo distal terminada en punta. Ellas se
acumulan en bolas o balsas.
 Las microconidias (2-4 x4-8 µm), estan formadas a lo largo de conidióforos
cortos y sencillos. Son unicelulares (ocasionalmente tienen 2 o 3 células), lisas,
hialinas, ovoides a cilíndricas y arregladas en bolas (ocasionalmente en
cadenas).
 Las clamidosporas cuando estan presentes están dispersas, en pares,
grupos o cadenas. Son de pared gruesa, hialinas, intercalares o terminales.
 Mesoconidias. Son otro tipo de conidias que tienen forma y tamaño similar a
las macroconidias pero les falta la célula basal en forma de pie. Pueden ser
rectas. Se producen siempre en polifiálides y son individuales. Nunca forman
masas mucosas.
 Esporodoquia. Es una masa de conidióforos cortos y estrechamente
ramificados que nacen directamente de una maraña de hifas. Se producen más
frecuentemente en la naturaleza que en los cultivos de laboratorio.
 Esclerotia. Es una masa de células dura (difícil de aplastar entre porta y cubre)
e inactiva bajo condiciones ambientales desfavorables.
 Estroma. Es una estructura vegetativa compacta dentro de la que se
desarrollan cuerpos de fructificación.

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Spore morphology characters used in the identification of Fusarium species. Drawings are idealized and
not necessarily to the same scale.
A-D: Macroconidial shapes.
A. Typical Fusarium macroconidium. Apical cell on left, basal cell on right.
B. Slender, straight, almost needle-like macroconidium, e.g., F. avenaceum.
C. Macroconidium with dorsiventral curvature, e.g., F. equiseti.
D. Macroconidium with the dorsal side more curved than the ventral, e.g., F. crookwellense.
E-H: Macroconidial apical cell shapes. E. Blunt, e.g., F. culmorum. F. Papillate, e.g., F. sambucinum.
G. Hooked, e.g., F. lateritium.
H. Tapering, e.g., F. equiseti.
IL: Macroconidial basal cell shapes. I. Foot-shaped, e.g., F. crookwellense. J. Elongated foot shape, e.g.,
F. longipes.
K. Distinctly notched, e.g., F. avenaceum.
L. Barely notched, e.g., F. solani.
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M-T: Microconidial spore shapes.

M. Oval. N. Two-celled oval.
O. Three-celled oval.
P. Reniform.
Q. Obovoid with a truncate base.
R. Pyriform.
S. Napiform.
T. Globose.
U-X: Phialide morphology.
U. Monophialides, e.g., F. solani.
V. Monophialides, e.g., F. oxysporum.
W. Polyphialides, e.g., F. polyphialidicum.
X. Polyphialdes, e.g., F. semitectum.
Y-Z: Microconidial chains.
Y. Short chains, e.g., F. nygamai.
Z. Long chains, e.g., F. verticillioides

OBJETIVOS:
Describir las características macroscópicas y microscópicas de algunas especies del
género.

MATERIALES:
 Cultivos de diferentes aislados
 Azul de lactofenol
 mechero
 pipetas Pasteur
 microscopio con objetivos 5x, 10x, 40x, 100x
 *bolsas plásticas
 *cubreobjetos y portaobjetos
 *Cinta pegante transparente
 *Cinta de enmascarar
 *asas recta y redonda
 *Lápiz para marcar en vidrio
 *Solución para desinfectar mesones y trapo o toallas de papel
 *Guantes desechables, cofia y tapabocas
*Material aportado por los estudiantes
PROCEDIMIENTO:
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Leer el procedimiento, luego desarrollar el taller y entregarlo antes de final de clase en

la plataforma Microsoft Teams.

A. Realizar la descripción macroscópica de las colonias suministradas según guía

de la Practica 1 de descripción de hongos. Para la descripción macroscópica,
observar la colonia del hongo y anotar las características consideradas a
continuación:

1. Forma: circular, irregular, filamentosa, rizoidal.

2. Elevación: plana y extendida, elevada y limitada, convexa o umbilicada.
3. Textura: algodonosa, pulverulenta, granular, vellosa, aterciopelada, mucosa, cremosa, etc.
4. Aspecto: brillante o húmeda, opaca o seca.
5. Superficie de la colonia: lisa, plegada, sectorizada, cerebriforme, con surcos radiales.
6. Color por el anverso y por el reverso: asignar color, tonalidad y códigos Hex y RGB según tabla de colores
HTML. https://htmlcolorcodes.com/es/nombres-de-los-colores/
7. Margen o Bordes: liso (entero o neto), regulares, irregulares (ondulado, lobado), desflecado
8. Exopigmento: puede estar presente o no. Si está presente, se deberá definir el color, tonalidad, codigo,
observándose también el reverso de la colonia.

B. Observar y realizar la descripción microscópica de estructuras fúngicas

1. Realizar montaje frescos siguiendo la guía de la practica 1

2. Observar al microscopio en aumentos 5X, 10X, 40X, 100X.
3. Tomar microfotografías, realizar un dibujo y describir las estructuras
correspondientes siguiendo la guía de la practica 1.

C. Identificar presuntivamente la especie descrita:

Las características macroscopicas y microscopicas, tales como, el color de la colonia,
longitud y forma de la macroconidia, el número, forma y arreglo de la microconidia, y
ausencia o presencia de clamidosporas son rasgos diagnósticos para la diferenciación
de las especies.

Ir al siguiente enlace, abrir el documento y a partir de la pagina 36 iniciar la

identificación de la sección taxonómica y la especie dentro de la sección:

https://www.researchgate.net/publication/321344925_FUSARIUM_IN_EGYPT_WITH_
DICHOTOMOUS_KEYS_FOR_IDENTIFICATION_OF_SPECIES_Contributions_to_the
_genus_Fusarium_in_Egypt_with_dichotomous_keys_for_identification_of_species
Métodos moleculares, tales como la secuenciación del gen 28S rRNA, son usados
para una identificación rápida de especies y de cepas.

D. Haga el análisis y la síntesis de la siguiente lectura que debera preparar para el

parcial N° 2.
Emira Garcés De Granada; Martha Orozco De Amézquita; Gloria Rocío Bautista;
Hernando Valencia. Departamento De Biología, Facultad De Ciencias, Universidad
Nacional De Colombia. Fusarium oxysporum el hongo que nos falta conocer. Acta
Biológica Colombiana, Vol. 6 No. 1, 2001, pp 7-25.