LABORATORIO DE ANALISIS INSTRUMENTAL

Dr. José Alfredo Cruz Monzón

jcruzm@unitru.edu.pe

Practica 6
Determinación espectrofotométrica de Nitritos
en agua
 DETERMINACION ESPECTROFOTOMETRICA DE NITRITOS EN AGUA
I. OBJETIVO:
- Cuantificar nitritos y nitratos en muestras de agua residual y suelo.
- Evaluar la recta de calibrado obtenida usando la espectrofotometría molecular

II. FUNDAMENTO TEORICO:

Los niveles de NO3- y NO2- en aguas naturales son un indicador importante de la calidad del
agua, pues ambos son agregados normalmente a través de fertilizantes. Los NO2- también se
forman durante la biodegradación de NO3-, nitrógeno amoniacal u otros compuestos orgánicos
nitrogenados y se utiliza como indicador de contaminación fecal en aguas naturales.

Los NO3- no se consideran en sí tóxicos, pero la ingesta de grandes cantidades produce un

efecto diurético. Por otra parte, los NO2- pueden producir compuestos cancerígenos, como son
las nitrosaminas, por su reacción con aminas secundarias o terciarias, además de
interaccionar con los glóbulos rojos de la sangre produciendo metahemoglobinemia que impide
el transporte de oxígeno al cuerpo generando la enfermedad de los llamados “niños azules”.

El nitrito (NO2-) se determina mediante la formación de un colorante azo de color

púrpura rojizo a pH entre 2,0 y 2,5.
III. MATERIALES Y REACTIVOS
1. Solución de Ácido Sulfanílico: Disolver 0,80 g de ácido sulfanílico en 28 mL de
CH3COOH glacial y diluir a 100 mL con agua destilada.

2. Solución de 1-Naftilamina: Disolver 0,50g de 1- naftilamina en 28 mL de CH3COOH

glacial y diluir a 100 mL con agua destilada

3. Solución de Acetato de Sodio: Disolver 14 g de CH3COONa en agua y diluir a 50 mL.

4. Solución madre de nitritos: Pesar con exactitud 0,1875 g de NaNO2 (g.r) y disolver con
agua destilada y llevar a fiola de 250 mL. Aforar a la marca. Esta solución es de 500
ppm NO2-

5. Solución de Trabajo: Tomar 0,50 mL de solución madre de nitrito y depositar en una

fiola de 250 mL. Aforar a la marca con agua destilada. Esta solución es de 1 ppm NO2-
IV. PROCEDIMIENTO:
Preparación de recta de calibración:
1. Tomar 05 fiolas volumétricas de 50 mL y colocar los volumenes adecuados (en μL), de
solución standard de tal manera que la concentración en las fiolas sean 0; 0,10; 0,15 ;
0,20 y 0,25 ppm NO2- .
2. Añadir agua destilada a c/u hasta aproximadamente 25 mL.
3. Agregar 2 mL de solución acetato de sodio, CH3COONa
4. Colocar 0,50 mL de la solución de ácido sulfanílico y dejar reposar 5 min.
5. Adicionar 0,50 mL de 1- Naftilamina y aforar a la marca con agua destilada.
6. Seleccione la longitud de onda óptima de operación, del instrumento. ( aprox. 540 nm)
7. Usando la fiola N°1 calibrar el instrumento a cero.
8. Proceder a leer la absorbancia de cada solución patrón.
9. Graficar la absorbancia obtenidas contra las concentraciones y verificar si cumple con la
Ley de Beer.
Preparación y medición de la muestra.
1. Colocar en una fiola de 50 mL una cantidad determinada de muestra (2,5 mL ), previamente
tratada.
2. Adicionar cada uno de los reactivos al igual que a los soluciones patrón.
3. Leer en el instrumento la absorbancia
4. Usando la recta de calibración determine la concentración de NO2-, para luego multiplicar
por el factor de dilución de la muestra.
5. Obtener las ppm NO2- presentes en el agua problema.

Para la presente marcha tenemos:

VI. CÁLCULOS:

1. Construir la recta de calibración para nitritos.

2. Determine la concentración de nitritos en muestra problema examen.

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Datos Experimentales:

1. Determinación de la masa teórica a tomar del reactivo NaNO2 para la preparación

teórica de 100 mL de una solución que sea de 600 ppm NO 2-

2. Determinación de [ ] real para un peso real tomado de 0,1022 g NaNO2

3. Preparación de 100 mL de solución de trabajo de 10 ppm NO2-:
C1 V1 = C2 V2

4. Determinación de [ ] real de solución de trabajo ajustando volumen a 1,50 mL

C1 V1 = C2 V2
5. Preparación teórica de las soluciones estándar para recta de calibrado de NO2 -usando
solución de trabajo real
Aplicando ecuación de dilución: C1 V1 = C2 V2

6. Determinación real de las concentraciones a los valores ajustados de volumen

7. Lecturas obtenidas en el espectrofotómetro para estándares y muestra

Volumen de muestra de agua tomada para análisis = 10 mL

Gracias