Se han propuesto diversos métodos para la producción de Trichoderma sp a
través de la fermentación, el método más promisorio ha sido el de la fermentación sólida, pues permite un crecimiento acelerado del microorganismo en cortos periodos de tiempo, causando de esta manera una alta concentración de conidios por gramo de sustrato y resultados de alta calidad, por otra parte la fermentación líquida facilita la obtención del microorganismo representado en micelio y clamidosporas por lo que no es apto para sobrevivir en condiciones adversas. Es por esto que se concluye que la técnica de fermentación sólida demuestra ser una alternativa viable para producción industrial y artesanal [ CITATION Cha06 \l 9226 ]. Estudios realizados en Francia por P. Bonnarme y colaboradores demostraron la capacidad de Trichoderma sp. En la producción de 6- pentil - a - pirona (6PP). este estudio fue desarrollado a partir del aislamiento de 108 cepas de Trichoderma sp. De diferentes fuentes naturales, las cepas se mantuvieron en medio de agar dextrosa de papa (PDA), luego de 4 días de incubación a 25°C se almacenan a 4°C hasta su uso. Posterior al aislamiento se prepara el inoculo y se cultivan las cepas, se toman diferentes análisis biológicos y se concluye que una de las cepas demuestra buena capacidad en la producción de 6- pentil - a - pirona (6PP) a partir de diversos aceites vegetales comerciales[ CITATION PBo97 \l 9226 ]. Se evaluó el comportamiento de 6PP producido por Trichoderma harzianum en sistemas de dos fases acuosas (PEG fosfato), bajo diversas condiciones de operación: peso molecular de PEG, concentración de PEG, concentración de fosfato, relación de volumen de las fases, etcétera. Se encontraron las condiciones de operación (PEG 1450, relación de volumen menor a 0.3, concentración de los compuestos menor a 15%) bajo las cuales 6PP y Trichoderma harzianum se concentran en fases opuestas. Es importante resaltar que dichas condiciones permiten disminuir el efecto de inhibición de 6PP sobre el microorganismo porque a medida que el aroma se produce, se concentra en una fase (fase extractiva) opuesta a la fase (fase fermentativa) en la cual se concentra Trichoderma harzianum. En general, los sistemas evaluados en este estudio permitieron concentrar más del 85% de biomasa en la fase fermentativa y más del 75% de 6PP en la fase extractiva. El uso de sistemas de dos fases acuosas para la recuperación de compuestos no proteicos y, en particular, para la recuperación de aromas fue por primera vez investigado y reportado como resultado de este estudio. Las condiciones de operación del proceso de recuperación del aroma obtenidas a nivel laboratorio (15 50 mL) fueron aplicadas a niveles de fermentación de hasta 7 litros, y como resultado se obtuvo un aumento en la productividad del sistema cercano al 25%. Los resultados obtenidos han demostrado la factibilidad técnica del proceso. Es claro que los resultados de este proyecto permiten descubrir el potencial de aplicación de los sistemas de extracción de dos fases acuosas para la recuperación de productos biotecnológicos y, en particular, aromas. En conclusión, el uso de la técnica no convencional de extracción que explota los sistemas de dos fases acuosas presenta una alternativa tecnológica para la recuperación de aromas de fermentación miceliares (hongos) que evita los problemas de toxicidad presentes en ciertos sistemas de fermentación. En particular, se demostró el potencial técnico de recuperar 6PP producido por Trichoderma harzianum como una alternativa a los sistemas de extracción evaluados y reportados hasta el momento. El uso de esta técnica de extracción potencialmente puede reducir los problemas de toxicidad presentes en ciertos sistemas de fermentación. Como resultado del presente estudio, la aplicación de sistemas de dos fases acuosas para la recuperación de aromas (6PP) fue por primera vez reportada a la comunidad científica.[ CITATION Mar99 \l 9226 ] La producción de 6-PP por T. viride EMCC-107 en SSF sobre caña de azúcar. El bagazo después de 5 dias de fermentación fue mayor (3,62 mg) que lo reportado en estudios previos utilizando el mismo sustrato y condiciones de fermentación. La identificación de los saturados “γ” y Lactonas δ-saturadas acompañadas de producción de 6-PP confirmada, los cambios en el perfil del aroma durante el período de inducción (12 dias). La variación en el nivel de bagazo de caña de azúcar influyó en los volátiles donde existió crecimiento de la producción como se evidencia en la tabla1. La correlación positiva entre el nivel de producción de bagazo de caña de azúcar y biomasa se atribuyó a el contenido total de azúcar que actúa como fuente de carbono y energía. En general usando bagazo de caña de azúcar como sustrato sólido en SSF para alto 6-PP. La producción de T. viride EMCC-107 tiene un efecto económico y ambiental. [ CITATION Hod14 \l 9226 ] Tabla 1. Compuestos volátiles producidos por T.viride EMCC-107 cultivado en bagazo de caña de azúcar durante 12 dias de fermentación.
Compuestos RI Tiempo de fermentación (12 días) Descripción