Realizar el aislamiento del glucógeno en una muestra de hígado y calcular la cantidad de
glucógeno presente en ese tejido.
Específicos
[1]. Utilizar la metodología experimental para la extracción de glucógeno a partir de tejido
animal y realizar su determinación cualitativa. [2]. Describir el proceso de extracción del glucógeno en la muestra de hígado [3]. Destacar la importancia del glucógeno presente en los tejidos animales
Marco teórico
Los seres vivos almacenan carbohidratos en forma de polisacáridos, siendo el glucógeno el
carbohidrato de reserva de la célula animal. El glucógeno está formado por unidades monoméricas de glucosa unidas por enlaces glucosídicos α-(1,4), cuando se unen aproximadamente entre 8-12 residuos, ocurren puntos de ramificación donde se establecen enlaces α-(1,6).
Posterior a la ingesta de alimentos ricos en carbohidratos, la concentración de glucosa sanguínea
aumenta, favoreciendo la liberación de insulina en el páncreas y con ello la síntesis del glucógeno (glucogénesis o glucogenogénesis), el cual es almacenado en el citosol de las células del tejido hepático y muscular. La glucogénesis requiere la activación de glucosa, siendo ésta transformada en glucosa-6-fosfato por la enzima hexocinasa (tejido muscular) o glucocinasa (tejido hepático), posteriormente la fosfoglucomutasa cataliza la conversión reversible de la glucosa-6-fosfato a glucosa-1-fosfato. La glucosa-1-fosfato en presencia de UTP genera UDP-glucosa en una reacción catalizada por la enzima UDP-glucosa pirofosforilasa. Seguidamente la enzima glucógeno sintetasa cataliza la transferencia del grupo glucosilo de la UDP-glucosa a los extremos no reductores del glucógeno y finalmente la enzima ramificante (amilo-α-1,41,6 glucosil transferasa) origina los enlaces α-(1,6) creando las ramificaciones de la molécula.
La degradación del glucógeno o glucogenólisis se presenta cuando la concentración de glucosa
sanguínea disminuye como consecuencia de la restricción de alimentos y se ve acentuada si adicionalmente el organismo se somete a una actividad física prolongada. A continuación, se presenta de forma esquemática, las reacciones bioquímicas que se suceden durante la glucogenólisis. El glucógeno hepático constituye una reserva importante en la reposición de unidades de glucosa para mantener la concentración sanguínea dentro del rango fisiológico para cada especie (norglicemia) en períodos de restricción de alimentos. De esta manera, el hígado puede contener un gran porcentaje de glucógeno después de una ingesta rica en glucosa, representando hasta un 10 % de su peso húmedo. Sin embargo, después de 12-18 horas de ayuno, el hígado sufre una depleción significativa de glucógeno. El glucógeno muscular disminuye de manera significativa sólo después de un ejercicio vigoroso prolongado y rara vez se encuentra por encima del 2% de su peso húmedo. La regulación del metabolismo del glucógeno está influenciada por un equilibrio entre las enzimas que participan en la glucogénesis o glucogenogénesis y en la glucogenólisis, las cuales a su vez están bajo el control hormonal de la insulina y glucagón o adrenalina, respectivamente.