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Introducción: la detección del género Corynebacterium en flujo vaginal representa un reto para el es-
tudio de su posible papel patogénico en el tracto genital femenino. La coloración de Gram es la técnica
recomendada para la detección de corinebacterias en muestras clínicas; no obstante, algunas carac-
terísticas biológicas de estas bacterias dificultan la identificación por medio de esta. Objetivo: evaluar
el desempeño de la coloración de Albert para la identificación de Corynebacterium spp. en muestras
de flujo vaginal. Materiales y métodos: se evaluó la tinción de Albert como prueba diagnóstica para
la identificación de Corynebacterium spp. en 451 flujos vaginales en comparación de la coloración de
Gram. Se calculó la sensibilidad, la especificidad, los valores predictivos, las razones de verosimilitud y el
índice J de Youden con el software Epidat 3.1. Resultados: la coloración de Albert presentó sensibilidad
y especificidad de 61,5% y 74,6%, respectivamente, valor predictivo positivo de 78,3%, valor predictivo
negativo de 56,5%, razón de verosimilitud positiva de 2,4 y negativa de 0,5 y un Índice de Youden de 0,4.
Conclusiones: la tinción de Albert no mostró un mejor rendimiento que la coloración de Gram en la iden-
tificación del género Corynebacterium en muestras de flujo vaginal. Por lo tanto, se recomienda el uso en
conjunto de las coloraciones de Gram y Albert para la identificación de corinebacterias en flujo vaginal.
Palabras claves: Corynebacterium, difteroides, coloración y etiquetado, tinción para gránulos metacro-
máticos, coloración de Gram, excreción vaginal.
1
Bacterióloga y laboratorista clínica, especialista en Microbiología Clínica. Bacterióloga, IPS Incorpore, Institución
Universitaria Colegio Mayor de Antioquia.
2
Microbióloga y Bioanalista, especialista en Microbiología Clínica, candidata a PhD en Ciencias Básicas Biomédicas.
Profesora Facultad de Medicina, Universidad Cooperativa de Colombia-sede Medellín, y Facultad Ciencias de la Salud,
Institución Universitaria Colegio Mayor de Antioquia. Grupo de Investigación Infettare, Facultad de Medicina, Universidad
Cooperativa de Colombia-sede Medellín y Grupo de Investigación Biociencias, Facultad Ciencias de la Salud, Institución
Universitaria Colegio Mayor de Antioquia. Medellín, Colombia. Correspondencia: Calle 50 N.° 40-74, 4º piso. Teléfono: 57
4 4446065 ext.4965 – 4236. Correo electrónico: ana.ossag@campusucc.edu.co, ana.ossa@colmayor.edu.co
3
Bacterióloga y Laboratorista Clínico, especialista y MSc en Microbiología Clínica. Profesora Facultad Ciencias de la
Salud, Institución Universitaria Colegio Mayor de Antioquia. Medellín, Colombia.
4
Bacterióloga y Laboratorista Clínico, especialista y MSc en Epidemiología. Profesora Facultad Ciencias de la Salud,
Institución Universitaria Colegio Mayor de Antioquia. Grupo de Investigación Biociencias, Facultad Ciencias de la
Salud, Institución Universitaria Colegio Mayor de Antioquia. Medellín, Colombia.
5
Bacterióloga y Laboratorista Clínico, MSc en Biología. Profesora Facultad de Medicina, Universidad Cooperativa de
Colombia sede Medellín. Grupo de Investigación Infettare, Facultad de Medicina, Universidad Cooperativa de Colom-
bia sede Medellín. Medellín, Colombia.
Conflicto de intereses: los autores declaran que no tienen conflicto de intereses
Medicina & Laboratorio 2017; 23: 179-186
Módulo 19 (Investigación), número 56. Editora Médica Colombiana S.A. 2017©
Recibido el 04 de abril de 2017; aceptado el 23 de abril de 2017
L
urogenital, Corynebacterium macginleyi y
as especies de Corynebacterium di- Corynebacterium pseudodiphtheriticum de
ferentes a Corynebacterium diphthe- orina[9] y Corynebacterium minutissimum y
riae, conocidas como difteroides o corine- Corynebacterium amycolatum del tracto ge-
bacterias, son reconocidas por ser bacilos nitourinario [12]. En nuestro medio también
Gram positivos, pleomórficos, inmóviles, se han podido evidenciar corinebacterias en
no endosporados, productores de catalasa flujo vaginal tanto de pacientes con sinto-
y formadores de gránulos metacromáticos; matología clínica [13] como en mujeres de
algunos aerobios exclusivos y en su mayo- la población general [14].
ría anaerobios facultativos [1,2]. Este géne-
ro bacteriano ha sido considerado desde En la actualidad, los laboratorios de micro-
mucho tiempo atrás parte de la microbiota biología especializados utilizan varias técni-
humana saprófita de la piel y las mucosas; cas para la identificación de Corynebacterium
no obstante, existen evidencias de su papel spp., algunas de estas basadas en la identifi-
patogénico en pacientes inmunosuprimidos cación fenotípica, como el API Cory 2.0, el API
[3,4], con dispositivos protésicos [5] y con 50 CH plus, el API 20E (BioMérieux, Marcy-
estancias prolongadas en hospitales, en los l’Étoile, Francia) y el RapIDTM CB PLUS System
que produce infecciones como linfadenitis (Thermo Scientific, Massachusetts, Estados
granulomatosa, neumonitis, faringitis, infec- Unidos), en la secuenciación del gen rpoB o
ciones de la piel, endocarditis y prostatitis, del gen del ARN ribosomal 16s, o en el perfil
entre otros [6-9]. Además, se ha sugerido proteico de cada especie a través de la téc-
un rol patogénico de diferentes especies de nica de desorción/ionización mediante láser
corinebacterias en el sistema genitourinario asistida por matriz (MALDI-TOF; del inglés,
de individuos inmunocompetentes; incluso, Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization-
en algunas situaciones han sido asociadas Time-Of-Flight), entre otros [15-19].
a infecciones tanto en hombres como mu-
jeres, como es el caso de las especies Co- A pesar de que estas pruebas tienen una
rynebacterium riegelii y Corynebacterium alta sensibilidad y especificidad requieren
urealyticum, y han sido implicadas en com- de equipos especializados con altos cos-
plicaciones del embarazo (Corynebacterium tos para los laboratorios de primer nivel,
aurimucosum) [9], aborto espontáneo (Co- lo que hace que su uso esté limitado a los
rynebacterium nigricans) [10] y vaginitis en laboratorios de referencia o investigación
una paciente preadolescente (Corynebacte- y, prácticamente, solo para la identificación
rium amycolatum) [11]. de Corynebacterium diphtheriae, la cual, de
manera clásica, ha sido considerada la es-
Por otro lado, hay especies que han sido ais- pecie de este género de mayor importancia
ladas del sistema genitourinario o sus fluidos clínica. De otro lado, la tinción de Gram ha
corporales sin certeza sobre su patogenici- sido recomendada para la detección de co-
dad como Corynebacterium freneyi de se- rinebacterias en fluidos corporales y tejidos
men y tracto genital femenino, Corynebac- [20]; no obstante, la identificación con esta
manera independiente por dos observado- medio de edad de 26 años (desviación es-
res distintos. Para garantizar la confiabilidad tándar=10, mediana=22, rango intercuar-
del diagnóstico se estandarizaron ambas tin- tílico=19-29). La mayoría de las mujeres
ciones con la cepa Corynebacterium urealyti- pertenecían a los estratos socioeconómicos
cum, identificada con el código 43044 y ob- 2, 3 y 4. La estratificación socioeconómica
tenida del Centro de Biorecursos ATCC (del de la población en Colombia se hace sobre
inglés, American Type Culture Cell). Esta mis- los inmuebles residenciales y comprende
ma cepa se usó como control en los ensayos. desde el estrato 1 al 6, siendo 1 el estrato
económico más bajo y 6 el estrato económi-
Análisis estadístico co más alto [28].
Tabla 1. Identificación de Corynebacterium spp. sino una variedad de patrones que generan
con las tinciones de Gram y Albert (n=451) confusión durante la identificación de estos
Tinción Gram microorganismos por el personal de labora-
Coloración Albert Total
Positiva Negativa torio, aun en aquellos de larga trayectoria
Positiva 166 46 212 en el área.
Negativa 104 135 239
Total 270 181 451 Debido a estas dificultades que se presen-
tan en el uso de la tinción de Gram y a la
evidencia del potencial patogénico en el
Tabla 2. Evaluación de la tinción de Albert
para el diagnóstico de Corynebacterium spp. tracto genitourinario femenino de las es-
Intervalo de pecies de Corynebacterium [10,12], en este
Parámetro Valor confianza estudio se evaluó la validez de coloración de
del 95%
Albert para la identificación de estas bacte-
Sensibilidad (%) 61,5 55,5 - 67,5
Especificidad (%) 74,6 68,0 - 81,2 rias como una posible opción para la opti-
Valor predictivo positivo (%) 78,3 72,5 - 84,1 mización de su diagnóstico. La sensibilidad
Valor predictivo negativo (%) 56,5 50,0 - 63,0 de la coloración de Albert fue baja (61,5%),
Razón de verosimilitud 2,4 1,9 - 3,2 lo que indica que no detecta correctamente
positiva
Razón de verosimilitud todos los casos positivos para Corynebacte-
negativa 0,5 0,4 - 0,6
rium spp. determinados al Gram, aunque
Eficiencia 66,7 62,3 - 70,9
mostró un valor de especificidad mejor
Índice de Youden 0,4
Índice Kappa 0,33
(74,6%), indicativo de que detecta correct-
amente las muestras negativas para Cory-
nebacterium spp. Por su parte, se encontró,
ción Americana de Microbiología recomien- en una buena proporción, que un resultado
da para la identificación de Corynebacterium positivo por esta prueba confirma que en
spp. la coloración de Gram [20]; sin embargo, efecto hay infección por la bacteria (valor
hasta nuestro conocimiento no se cuenta a predictivo positivo=78,3%), pero que un re-
la fecha con estudios que hayan evaluado sultado negativo no descarta que la mujer
su rendimiento para el diagnóstico de estas esté realmente infectada (valor predictivo
bacterias. negativo=56,5%), por lo que su validez fue
deficiente.
Es reconocido que la identificación de las co-
rinebacterias utilizando la tinción de Gram Aunque los resultados de este estudio arro-
se ve afectada por el pleomorfismo entre las jaron un 25,4% de falsos positivos en la co-
diferentes especies [20], la irregularidad en loración de Albert, es posible que estos no
la captación de la tinción, que puede estar correspondan exclusivamente a fallas del
relacionada con la composición bioquímica método, sino que por el contrario sean co-
de la bacteria (p. ej. la concentración de áci- rinebacterias que fueron detectadas por la
dos micólicos) [29-31], la presencia de poros coloración de Albert y no por el Gram, dado
[32], su estadio de vida [33], la temperatura que esta última tinción no permite la iden-
de crecimiento y la disposición de nutrien- tificación de los gránulos metacromáticos
tes en el medio en el que se encuentre [34]; que colorea específicamente el Albert [21] y
lo que lleva a que no haya un solo patrón que son característicos de este género bac-
morfológico y de reacción tintorial al Gram, teriano [9]. Estos gránulos, generalmente
Corynebacterium spp. y factores asociados en mujeres del Va- 28. República de Colombia, Departamento Administrativo Na-
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Introduction: The detection of Corynebacterium genus in vaginal discharge represents a challenge for
the study of its possible pathogenic role in the female genital tract. Gram’s stain is recommended for
corynebacteria detection in clinical samples, however, some biological characteristics of these bacteria
difficult their identification by this technique. Objetive: to evaluate Albert’s stain performans to identify
Corynebacterium spp. in vaginal discharge. Materials and methods: Albert’s stain was evaluated as
a diagnostic test for the identification of Corynebacterium spp. in 451 vaginal swabs in comparison to
Gram’s stain. Sensitivity, specificity, predictive values, likelihood ratio, as well as Youden’s J index were
calculated using Epidat software 3.1 version. Results: Albert’s stain had a sensitivity and specificity of
61.5% and 74.6%, respectively, positive predictive value of 78.3 %, negative predictive value of 56.5
%, positive likelihood ratio of 2.4 and negative likelihood ratio of 0.5, as well as Youden index of 0.4.
Conclusions: Albert’s stain did not show better performance than Gram’s stain for identification of
corynebacteria in vaginal swabs. Thereforeit is recommended the concomitant use of the Gram and
Albert stains for the identification of corynebacteria in vaginal discharge.
Keywords: Corynebacterium, diphtheroids, staining and labeling, metachromatic granules stain,
Gram’s stain, vaginal discharge.