Las Rutas metabólicas para

carbohidratos

METABOLISMO MICROBIANO
 Definición de METABOLISMO
• Son las reacciones que ocurren en una célula
con tres funciones precisas:
• 1) Extracción y almacenamiento de energía
• 2)Transformación de moléculas exógenas en
material constitutivo de células.
• 3)Ensamblaje de estos precursores.
El catabolismo y anabolismo están relacionados
 Procesos metabólicos
se distinguen 3 tipos
• Metabolismo energético: transforma e
intercambia energía
• Metabolismo intermediario: Degradación y
síntesis (Productos reactivos)
• Metabolismo de macromoléculas:
DNARNA Proteínas. (reproducción)
• En el metabolismo intermediario podemos
dividirlo en fases: catabolismo y anabolismo.
 El metabolismo ayuda a obtener
energía a la célula
• Las bacterias obtienen su energía por
cualquiera de los tres caminos:
• 1) Fosforilación a nivel de sustrato
• 2) Fosoforilación oxidativa
• 3) Fotofosforilación.

• La energía obtenida se encuentra en la

molécula de ATP
 El metabolismo intermediario
• Comprende todas las reacciones que dan lugar
a la formación de metabolitos o
intermediarios
• El metabolismo se conduce a través de rutas
o vías metabólicas
• Una vía metabólica es una serie de
reacciones enzimáticas conservativas que
generan productos específicos
 MAPA METABÓLICO

TODAS LAS RUTAS

ESTÁN RELACIONADAS!!
 Características que debe cumplir una vía
metabólica
1) Las vías metabólicas son irreversibles, debido a las
reacciones exergónicas. Aún cuando las reacciones se
dan cerca del equilibrio, una reacción exergónica
ayuda a continuar con la vía
2) Cada vía metabólica tiene una etapa obligada
3) Todas las vías metabólicas están reguladas
Hay un paso limitante de la velocidad que ejerce control
sobre el flujo metabólico.
4) En eucariotes, las vías metabólicas se desarrollan en
lugares específicos (compartamentalizadas)
 Principales reacciones de una vía
metabólica

• 1) reacciones de transferencia de grupo

• 2) Oxidaciones y reducciones
• 3) Eliminaciones, isomerizaciones y
reordenaciones
• 4) Formación o ruptura de enlaces C-C
 Metabolismo microbiano

Puede clasificarse de acuerdo a :

1) Según la fuente de carbono que utilizan
2)Según la forma en la que obtienen los
equivalentes reductores para reacciones
biosintéticas
3)Según la fuente de energía que utilicen
 Fuente de carbono y de energía
hacen la diferencia.
Según la fuente de carbono:
-Heterótrofos: materia orgánica
-Autótrofos: CO2
- Mixiótrofo : bacterias con metabolismo energético
litótrofo pero requieren sustancias orgánicas como
nutrientes
Según la fuente de energía:
- Quimiótrofos : oxidación de un compuesto químico
- Fotótrofos : la fuente de energía es la Luz
.
• Según el punto de vista biosintético (manera
en que obtienen equivalentes reductores
para la conservación de energía )
• Litótrofo: aquellas que sólo requieren de
sustancias inorgánicas sencillas. Los
equivalentes reductores se obtienen de
compuestos inorgánicos (SH2, SO3, NH3, Fe,
etc
• Organótrofos Equivalentes reductores se
obtienen de compuestos orgánicos ( hidratos
de carbono, hidrocarburos, lípidos etc.)
Respiración aerobia, respiración
anaerobia y fermentación
• Reflejan el uso diferente de los posibles aceptores de
electrones en el metabolismo energético:
• O2 : respiración aerobia
• NO3-, SO42- o fumarato : respiración anaerobia
• Intermediarios metabólicos (piruvato, lactato, acetato):
fermentación.
 METABOLISMO HETEROTRÓFICO
• La heterotrofía está relacionada con el
rompimiento de moléculas orgánicas para
obtener energía.
• Esta energía generalmente se almacena en
forma de ATP y NADH+
• La formación de compuestos de alta energía
proceden de las reacciones catabólicas donde
ocurren reacciones redox.
 IMPORTANCIA.
• Bacterias heterotrofas crecen sobre glucosa y
sales minerales.
• Otros compuestos orgánicos diferentes a
glucosa también son utilizados por las
bacterias.
• El metabolismo central puede utilizar
reacciones que le permiten invertirlo, la
mayoría de estos componentes son
convertidos a intermediarios del metabolismo
central
 Hidrólisis de polímeros
La fuente de c de organismos heterórofos puede provenir de diferentes
fuentes e incorporarse al metabolismo
• Almidones  hidrolasas glucosa
• Celulosa  glucanasas  glucosa
• Otros polisacáridos hemicelulosa, pectina y quitina.
• Hidrólisis de disacáridos (celobiosa, maltosa sacarosa)
• Acidos grasos.  beta oxidación
• Hidrocarburos mono(di)oxigenasas ac. grasos
• Acetato acetil CoACAT.
• Malonato malonilCoA acetil CoA
• Alcoholes y cetonas ac grasos
• Peptona y extracto de carne: Aminoácidos y péptidos
cetoácidos
• Ácidos nucleicos urea, malonato.
 RUTAS PARA CARBOHIDRATOS
• Las más importantes para la utilización
de la glucosa son:
• 1)GLUCÓLISIS o Ruta de EMHP
• 2) Ruta de Pentosas (HMP).
• 3) Ruta de ED.
• 4) Ruta Fosfocetolasa (heteroláctica) o de
Warburg-Dickens (WD).
 VÍA GLUCOLÍTICA
• SE DIVIDE EN DOS ETAPAS: LA PRIMERA ES
PREPARATIVA, NO SE LIBERA ENERGÍA.LA
SEGUNDA OCURREN REACCIONES DE OXIDO
REDUCCIÓN Y SE LIBERA ENERGÍA.
• EL ATP SE PRODUCE POR FOSFORILACIÓN A
NIVEL DE SUSTRATO
• En Fermentación hay una tercera etapa donde
ocurren reacciones de oxido-reducción y se
generan los productos finales de fermentación
 Vía de las pentosas
• Es una ruta multifuncional para la
degradación de hexosas, pentosas y otros
hidratos de carbono.
• Para bacterias fermentadoras heterolácticas
es la principal fuente productora de energía
(ruta de la fosfocetolasa)
• La mayoría de los organismos utilizan esta vía
como fuente de NADPH y de pentosas para la
síntesis de nucleótidos.
 La vía de Entner Doudoroff
• Es la ruta principal para degradación de
glucosa en bacterias aerobias estrictas como
Nisseria y Pseudomonas

• Al igual que en la ruta de las pentosas, sólo

se produce una molécula de ATP por
molécula de glucosa degradada.
 Destino de los productos de las
rutas de carbohidratos.
• Fermentación
• Ciclo de los ácidos
tricarboxilicos (CAT)
• Respiración
Los azúcares
GLUCOSA= AZUCAR REDUCTOR
Carbohidrato preferido
por las células

La forma
Azúcares reductores son aquellos azúcares
abierta y
que poseen su grupo carbonilo (grupo
cerrada están
funcional) intacto, y que a través del mismo
en equilibrio
pueden reaccionar como reductores con otras
moléculas

Pueden reducir al Cu++ o al

Ferrocianuro de potasio

OH hemiacetalico
Al oxidarse pueden formar gluconatos
 Métodos para medir azúcares.
• Debido a que contienen un OH libre,
pueden medirse por su reducción
• Reacción de Fehling. Reacción redox en la
que el grupo aldehido (reductor) es oxidado
a un ácido por el Cu2+
• Fenol Sulfúrico
• Antrona
• DNS ácido 3,5 dinitrosalicílico.
 Método de antrona
• LOS ACIDOS CONCENTRADOS ORIGINAN UNA
DESHIDRATACION DE LOS MONOSACARIDOS PARA RENDIR
FURFURALES
• QUE SON DERIVADOS ALDEHIDICOS DEL FURANO, POR
EJEMPLO:
• LA D- GLUCOSA CON ACIDO CLORHIDRICO CONCENTRADO
(HCl) PRODUCE 5-HIDROXI-METIL FURFURAL.
• ESTOS PRODUCTOS SE COMBINAN LUEGO CON ANTRONA
PARA DAR UN COMPLEJO COLOREADO
 El método del ac. Dinitrosalicílico
• El método del ácido 3,5-dinitrosalicílico
(DNS), se basa en la reducción del DNS (de
color amarillo) por la glucosa u otro azúcar
reductor al ácido 3-amino-5-nitrosalicílico
(de color rojo ladrillo) , cuya presencia puede
detectarse por lectura de la Absorbencia en
la zona de 540-570 nm.
Reacción del DNS
Los monosacáridos como precursores
de moléculas importantes
Precursores biosintéticos del metabolismo
de la glucosa
ESQUELETO C RUTA PRECURSOR PARA
GLUCOSA 6-P EMP POLISACÁRIDOS
FRUCTOSA 6P EMP MUREINA
RIBOSA 5P HMP ÁC. NUCLÉICOS
ERITROSA 4P HMP AMINO ACIDOS
TRIOSA P EMP LÍPIDOS
3-P GLICERATO EMP AMINO ÁCIDOS
FOSFOENOL EMP AMINOÁCIDOS
PIRUVATO
PIRUVATO EMP AMINOÁCIDOS
 La glucólisis
• Formada por diez reacciones enzimáticas
• Se lleva a cabo en el citoplasma de todos los
procariontes y eucariontes.
• La ruta genera dos moléculas de ATP por
molécula de glucosa degradada.
• Produce sustratos para rutas metabólicas
subsecuentes (piruvato).
• Reacción global:
• Glucosa+ 2ADP+2Pi+ 2NAD+ 2 piruvato +
2ATP+ 2NADH+ 2H+
La ruta glucolítica y tipos de reacciones que ocurren
 Estrategia
• Se puede estructurar en 2 etapas:
• 1. Pasar de Glucosa a Fructosa-1,6-difosfato.
• 2. Pasar de Fructosa-1,6-difosfato a
dihidroxiacetona y gliceraldehido.
• La primera fase es una fase de alteración
química para dejar la molécula útil para la
célula.
REACCIONES DE LA GLUCÓLISIS.
Fase preparatoria. Primera reacción
Segunda reacción: Isomerización
 Fosfofructocinasa I. Control de la
glucólisis

La fosfofructocinasa es la principal enzima

Reguladora de la glucólisis.
Es inhibida por ATP y citrato
Es activada por fructosa 2,6 difosfato
 Inhibidores de la PFK-1
• Cuando la célula se ha nutrido, hay
concentraciones elevadas de ATP y ácido
cítrico. Estas reconocen sitios alostéricos en la
PFK-1 que ocasionan menor afinidad por la
fructosa 6-P. Hay inhibición de la enzima.
• Estimuladores: durante ayuno hay altas
concentraciones de ADP, AMP y de fructosa
2,6 difosfato. Esto incrementa la actividad de
la PFK1.
 La Fosfofructocinasa 2.
• Es la enzima que produce la fructosa 2,6 diFosfato, el
activador mas fuerte de la PFK1: induce la degradación
de la glucosa.
• Tiene acción de cinasa y fosfatasa, lo que le permite
regular la glucólisis y gluconeogénesis en eucariotes.
• Actividad quinasa: fructosa-6-fosfato + ATP
fructosa-2,6-bisfosfato + ADP
• Actividad fosfatasa:
• fructosa-2,6-bisfosfato + H2O fructosa-6-
fosfato + fosfato
 Reacción de la aldolasa Mecanismo a través de una
base de Schiff (mamíferos).Bacterias estabilizan por
uinión al Zn++

Una base de schiff es un grupo funcional

que contiene un enlace doble carbono-notrógeno
Primer producto

R3 es un arilo o alquilo
que hace mas estable la imina
Tipos de aldolasas
• Clase I presente en
animales y plantas.
Forman bases de
schiff con el grupo
amino de una lisina.
En humanos hay la
Aldo A,B, C.
• Clase II. No hay base
de Schiff. Se
estabilizan por iones
Reacción de isomerización
Correspondencia de carbones
Correspondencia hasta el piruvato

4y3
1
5y2
2

3 6y1

Gliceraldehído 3P
El gliceraldehido continúa en la ruta oxidativa
y es tomado por la Gliceraldehido 3-P DH
Ocurre una reacción de oxidación y otra de fosforilación
Inhibición por iodoacetato de la
gliceraldehido 3-P DH
Primera fosforilación a nivel de fosfato
Reacción de la mutasa
Papel del 2-fosfoglicerato
La enolasa. Fosfopiruvato hidratasa
Producción de PEP

Es una metalo- enzima. Requiere Mg+2

 Las enolasa se inhibe con fluoruro

La inhibición fluoruro se debe a la formación de

Un complejo iónico del flúor con el Mg2+ y el PO4

Se acumula 2-P glicerato y 3 Pglicerato

 La piruvato cinasa. Última reacción.
Segunda fosforilación a nivel sustrato
El piruvato es un cetoácido que se
encuentra en forma enol y ceto
 Inhibidores de la glucólisis
• Yodoacetato (I-CH2-COONa) inhibe a la
gliceraldehido 3P-Deshidrogenasa.
Se acumula fructosa 1,6 diP .
• Arsenito (ato) de sodio. Inhibe a la Glic 3-P DH,
lo toma en lugar del fosfato. El producto es
inestable (glicerato1-arseno3P) y no se
hidroliza enzimáticamente
• Ion Fluoruro (F-). Inhibe a la Enolasa.
• 2- Deoxiglucosa No es sustrato de HQ
ENZIMAS GENE FUNCIÓN
1. HEXOCINASA hk1 Fosforilaciòn de la glucosa
También fosforila fructosa
Utilizando ATP constitutivas
2.FOSFOGLUCOISOMER pgi Isomerizaciòn de G-6-P a F-6-
ASA P
3.FOSFOFRUCTO pfkA Fosoforilación de F-6-P a Inducibles
CINASA F1,6,BiP, (FBP)Utilizando ATP
4.FRUCTOSA1,6 fbaA Ruptura de FBP a GA3-P y
DiFOSFATO ALDOLASA DHAP
5.TRIOSAFOSFATO tpi Interconvierte DHAP y GA-3P
ISOMERASA (tim)
6.GLICERALDEHIDO 3P gap Oxida GA3P a 1,3 diP glicerato
DESHIDROGENASA utilizando NAD+ y Pi
7.FOSFOGLICERATO pgk Genera ATP de ADP. Primera
CINASA fosforilaciòn a nivel de sustrato
8. 3-P GLICERATO pgm Utiliza 2,3 difosfoglicerato
MUTASA para convertir 3P-glicerato a
2P- glicerato
9. ENOLASA eno Enolización del 2Pglicerato en
un enlace de alta energía en el
PEP.
10. PIRUVATO CINASA pykA; Genera ATP de ADP, segunda
pykF fosforilaciòn a nivel sustrato
 La regulación de la glucólisis
• Las velocidades de las enzimas que catalizan
reacciones en el equilibrio o próximas a él (ΔG0'~0),
se regulan por las concentraciones relativas de los
sustratos y los productos.
• En las reacciones que transcurren fuera del
equilibrio (ΔG0' -) los cambios en la concentración de
los sustratos no ejercen efecto alguno sobre la
velocidad de la reacción
• Flujo de metabolitos de una reación: J = vf - vr
• - En el equilibrio: J = 0 (vf = vr )
- Fuera del equilibrio: vf >> vr por lo que J = vf
 La regulación ocurre en sitios
limitados por la enzima

Las flechas naranjas indican reacciones

Exergónicas. En estos puntos los sustratos
No están en equilibrio con los productos
debido a que la reacción es muy lenta.
Los sustratos tienden a acumularse

En las reacciones endergónicas (flechas azules),

los sustratos y productos están en equilibrio

En un estado estacionario , todas las reacciones en la

secuencia ocurren a la misma velocidad lo cual es
determinado por el paso limitante del flujo.
 El flujo de la glucólisis
1)El flujo de una vía metabólica en estado estacionario es
constante y está determinado por la velocidad de la(s)
reacción(es) que transcurren fuera del equilibrio, también
llamadas reacciones limitantes de la velocidad de la ruta
metabólica.
2) Será necesario incrementar (o disminuir) enormemente la
velocidad de cualquier enzima de una reacción fuera del
equilibrio para poder modificar el flujo de la reacción. Esto
se logra mediante interaciones alostéricas.
3) El flujo de una vía metabólica está determinado por la
velocidad de la(s) reacción(es) que transcurre(n) fuera del
equilibrio (=reaciones limitantes)
 Para comprender cuáles son los puntos de regulación,
debemos repasar la energética de toda la vía glucolítica.

ΔG0' ΔG
Reación Enzima
(kcal/mol) (kcal/mol)

1 Hexoquinasa o Glucoquinasa - 4.0 - 8.0

2 Fosfoglucoisomerasa + 0.4 - 0.6

3 Fosfofructoquinasa-1 - 3.3 - 5.3

4 Fructosa-1,6-bis-fosfato aldolasa + 5.7 - 0.3

5 Triosa-fosfato isomerasa + 1.8 + 0.6

6 Gliceraldehído-3-fosfato deshidrogenasa + 1.5 - 0.4

7 Fosfoglicerato quinasa - 4.5 + 0.3

8 Fosfoglicerato mutasa + 1.06 + 0.2
9 Enolasa + 0.4 - 0.8
10 Piruvato quinasa - 7.5 - 4.03
 Las enzimas reguladoras
• Existen tres puntos de regulación:
hexoquinasa, fosfofructoquinasa-1 (el punto
más importante) y piruvato quinasa.
• El mecanismo consiste en las interacciones
alostéricas de ciertos compuestos, que
actúan como moduladores (externos o
internos) sobre las quinasas.
 La Hexocinasa
• Es el primer paso de la glucólisis ; G grande y
negativo.
• Hexokinase (y glucokinase) actuan para fosforilar la
glucosa y mantenerla dentro de la célula
• La Km para la glucosa es de 0.1 mM; la célula
contiene 4 mM de glucosa
• La hexokinase esta normalmente activa!
• La Glucokinase (Kmglucose = 10 mM)sólo actúa cuando
la célula esta enriquecida con glucosa
• Hexokinase es regulada –alostericamente por
producto glucose-6-P – pero no es la mas importante
para la regulación.
 La fosfofructocinasa (PFK-1)
La PFK es el paso limitante de la glucolisis!
• Cataliza la segunda reacción regulatoria de
la glucólsis.
• Es un paso limitante y presenta un valor
negativo muy grande de ΔG que significa
que la PFK es altamente regulatoria
• ATP inhibe, AMP invierte la inhibición
• Citrato es también un inhibidor alostérico
• fructose-2,6-bisphosphato es un activador
alosterico
• PFK incrementa su actividad cuando el
estado energético es bajo
• PFK decrementa su actividad cuando el
estatus energético es alto
 Pyruvato Cinasa
Se produce ATP del PEP a Piruvato

Reacción con un ∆G negativo -

regulación!
• Alostericamente activada por AMP,
F-1-6-bisP
• Alostericamente inhibida por ATP y
acetyl-CoA
• El piruvato adquiere un equilibrio
ceto-enol. que lo hace reactivo
Control de las enzimas reguladoras
• Hexocinasa: Se modula por producto, la glucosa 6-P.
• Fosfofructocinasa: se modula alostericamente por
ATP y PEP (inhibe) y ADP y GDP(activa) en bacterias.
En levaduras se inhibe por citrato y ATP. En general, la
carga energética (EC) regula a esta enzima. En células
eucariotas, la fructosa 2,6 diP es el mayor modulador
positivo de la PFK. Esta molécula se forma de la
fosforilación de fructosa 6P por acción de la PFK2, y se
degrada por la acción de la 2,6, bifosfatasa de
fructosa.
• Piruvato cinasa: Se inhibe con ATP y alanina; se activa
con Fructosa 1,6 diP. Esta clase de regulación es
conocida como activación por precursor
 Regulación global
• Regulación global se presenta por:
• Por Proteína A de control por catabolito
(CspA) activa la transcripción de genes para
enzimas glucolíticas y por CsrA (proteína A
reguladora para almacenaje de carbon) que
reprime los genes para gluconeogenesis
 IMPORTANCIA DE LA FOSFOFRUCTOCINASA
La reacción crítica de la PFK-1 puede invertirse por la acción de la
Enzima gluconeogénica Fructosa Bifosfatasa.
 Reacciones irreversibles de la
glucólisis. Como revertirlas
• Tres enzimas catalizan las reacciones irreversibles
de la glucólisis:
• Hexocinasa
• Fosfo Fructo cinasa (PFK1)
• Piruvato cinasa.
• Las mas importantes de revertir son las dos
últimas. La inversión de la glucólisis ayuda al
microorganismo a tener glucosa-6P.
• La inversión de la glucólisis representa la
gluconeogenesis
 Como revertir la glucólisis?
• Para revertirla se requiere sobrepasar las reacciones
exergónicas que controlan la ruta:
• 1) La reacción de la fosfofructocinasa (PFK1) es
invertida por la Fructosa1,6 bifosfatasa, enzima de
la gluconeogénesis:
Fructosa 1,6 bifosafato +H2Ofructosa 6 Fosafato + Pi

PFK1
Glucosa - Fructosa 6P  Fructosa 1,6 diP
Fructosa 1,6 diFosfatasa
 Las otras reacciones para revertir
reacciones irreversibles.
• Producción de PEP y Piruvato por reacciones
anapleróticas del CK.
1) Piruvato +ATPPEP+AMP+Pi
enzima: PEP sintetasa
2) Piruvatao +ATP +>Pi  PEP+AMP +PP
enzima: Piruvato dikinasa
3) Oxaloacetato +ATP PEP +CO2+ ADP
enzima; PEP carboxicinasa.
4). Malato+NAD+H+ piruvato +NADH +H +
CO2 enzima : enzima málica.
 Ruta EMP modificada.
Algunos procariotes al igual
que eucariotes metabolizan la
glucosa a través de
Una ruta modificada de EMP
conocida como la derivación
del metilglioxal,
que se presenta en
condiciones de Pi limitadas.

1: Metilglioxal sintasa
2.Glioxalasa
3.Lactato oxidasa

En E coli la DHAP puede

Metabolizarse vía metilglioxal
Para dar piruvato.
 Piruvato es central para la
producción de otras moléculas
• El Piruvato es el producto final de la ruta
glucolítica.
• Es un cetoácido que produce lactato
(fermentación), acetil CoA y alanina
• Durante fermentación, es un aceptor final de
electrones.
• Piruvato puede utilizarse tanto en vías
aeróbeas como anaeróbeas.
 EL PIRUVATO EN CONDICIONES
ANAEROBICAS ES UN ACEPTOR
TERMINAL DE ELECTRONES

ESTO REGENERA AL NAD+

Y PERMITE QUE EL PROCRESO
CONTINÚE INDEFINIDAMENTE

ESTO SUCEDE EN BACTERIAS

Y ANIMALES
 PERO TAMBIEN PRODUCE ETANOL
Las levaduras fermentan glucosa
a etanol y CO2 en un proceso de
dos pasos:
1. Descarboxilación
2. Reducción

La descarboxilasa utiliza TPP

(tiamin Pirofosfato o vit B1)
El TPP ayuda a otras enzimas
GLUCOLISIS

EL NAD/NADH QUE SE PRODUCE

DURANTE LA GLUCÓLISIS
 Importancia del NAD/NADH+ H+
• Es el poder oxidante en la glucólisis
• Se considera un compuesto de alta energía:
Anaerobiosis: el NAD+ se regenera cuando el
1)piruvato lactato (fermentación
homoláctica),
• 2) en levaduras : piruvato etanol
• En aerobiosis la oxidación del NADH+ ocurre
en la mitocondria (cadena transp electrones) y
produce 3 ATP
Reoxidación del NADH en bacterias
• Respiración oxidativa
• Fermentación:
NADH +H +B:  NAD+ + BH2
• Reacción de Hidrogenasa
NADH +H+  H2 + NAD+

Si la reoxidación del NADH no ocurre, la

glucólisis se detiene!!
 RUTAS ALTERNATIVAS

Ruta de las pentosas (HMP) Entner

Doudoroff y Fosfocetolasa
 Necesidad de la ruta de las
Hexosas Monofosfato o Pentosas
Cuando E coli crece con glucosa como única
fuente de C y energía, metaboliza cerca del
72% del sustrato en la ruta EMP, y el resto
entra a la ruta de las pentosas o Hexosas
monofosfato, debido a que la glucólisis no
cumple con todos los requerimientos para
biosíntesis.
La ruta de la HMP proporciona pentosa-5P,
eritrosa 4P y NADPH
 Importancia del NADPH
• El NADPH es utilizado para suplir poder
reductor en procesos biosintéticos.
• El NADP+ producido es sólo reducido por la
Isocitrato deshidrogenasa (CAT) cuando la
glucosa es metabolizado a través de la
glucólisis y el CAT.
• El NADH es poco utilizado en reacciones
biosintéticas !!!. (es mejor para catabolismo)
• La mayoría del NADPH necesario para
biosíntesis viene de la ruta de pentosas
 Distribución de la ruta de las
pentosas
• Presente en muchas bacterias y en la mayoría
de los eucariontes
• Puede ser simultánea a la ruta de EMP
• Funciona en condiciones aeróbeas y
anaeróbeas
• Tiene importancia en el catabolismo y
anabolismo.
• Se divide en dos fases: una fase oxidativa y otra
no oxidativa
 La ruta de las Pentosas en tres pasos
• 1) Oxidación de la glu6-P en el C-1 para liberar
CO2.El producto de la primera etapa es la
Ribulosa 5P (o RuMP). (fase oxidativa)
• 2) Reacciones de Isomerización. Conversión a
Ribosa5P y Xilulosa 5P (fase no oxidativa)
• 3) Rearreglo de azúcares. (fase no oxidativa)
• Transcetolasa (TK)= transferencia de 2C de
una cetosa aldosa
• Transaldolasa (TA)= transferencia de 3C de una
cetosa aldosa
La ruta de las pentosas
1ª etapa

2ª etapa
1. Hexocinasa
2. Glucosa 6-P DH
3. Lactonasa
4. 6-P gluconato DH
5. Ribulosa 5-P
epimerasa
6. Ribosa 5-P
isomerasa
7. Trnascetolasa
8. Transaldolasa

3ª etapa
 Fructosa 6P
3-P gliceraldehido

transferencia: glicólisis glicólisis

cetosaaldosa

Siempre el donador será

Una cetosa y el aceptor
Sedohetulosa 7P
una Aldosa
Ribosa 5P
Eritrosa 4P

+ Xilulosa 5 P
+

Ribulosa 5P
3-P gliceraldehido
Xilulosa 5P
Fructosa 6P

glicólisis glicólisis
 Enzimas de la ruta de las pentosas.
Primera etapa: Segunda Etapa Tercera etapa

1. Hexocinasa 5. Ribulosa5P- 7. Transcetolasa

2. Glucosa 6-P DH Epimerasa
3. Lactonasa 8. Transaldolasa
4. 6-P gluconato 6. Ribosa 5-P
DH Isomerasa Productos:
Producto: Productos: Xilulosa 5-P Gliceraldehido 3-P
Ribulosa 5-P Ribosa 5 P Fructosa 6P

Reacción global:
3Glu 6P + 6 NADP+ + 3 H2O  6NADPH + 6H++ 3 CO2 + 2 F6P + GA3P
 Funciones de la ruta de las pentosas

• Produce poder reductor para biosíntesis (NADPH+)

• La Ribosa 5-P es el precusor para la síntesis de los
nucleótidos.
• La eritrosa 4P es precursor de aminoácidos
aromáticos
• Es la mayor ruta para microorganismos que no
poseen actividades glucolítica.
• Esta ruta produce fructosa 6-P y gliceraldehido 3P
• Es empleado para la oxidación completa de azúcares
cuando no hay un CAT funcional (fermentación)
 Ruta oxidativa de las pentosas
Se presenta en organismos que carecen
de una ruta EMP o ED.
Se forma un ciclo oxidativo utilizando la ruta HMP
para producir G3P que se incorpora a
la segunda parte de la
Glucólisis, pero la fructosa se
vuelve a utilizar por la acción
de la isomerasa que recicla
Para dar glucosa 6P
y alimentar de nuevo
el ciclo. Esto ocurre en
organismos que no tienen
un CAT funcional.
P ej. Gluconobacter posee un
CAT incompleto y
utiliza esta ruta cíclica

En la etapa 3 se produce sedoheptulosa 4 P y E-4P (precursores de aa aromáticos)

 Regulación de la ruta de HMP
• La glucosa 6P DH y la 6Pgluconato DH son las
que regulan la ruta debido a que son inhibidas
por la acumulación de NADPH y NADH
glu6P 6Pgluconato3-ceto6 PgluconatoRuMP
• glu6PDH lactonasa 6PgluconatoDH

• La Lactonasa es la única enzima irreversible

pero no controla la ruta como las anteriores.
Ruta de Entner Doudoroff

utilizada por bacterias G-

 RUTA DE ENTNER DOUDOROF

6PGluconato
Dehidratasa

Glucosa + ATP
Glu6PDH

Es la ruta glucolítica
Que utilizan algunas
KDPG
Bacterias G(-) aerobias ALDOLASA

Inicialmente fue descubierta

En Pseudomonas saccharophila
por Entner Doudoroff y es la principal
ruta glicolítica en bacterias que
No tienen EMP Las dos enzimas nuevas son:
Zymomonas y Acetobacter utilizan 6-P gluconato deshidratasa y KDPG aldolasa
exclusivamente esta ruta.
Bacterias que utilizan Entner
Doudoroff
Organismo EMP ED
Ralstonia eutropha _ +
Pseudomona _ +
saccharophila
Rhizobium japonicum _ +
Thiobacillus ferrooxidans _ +
Xantomonas phaseoli _ +
Halobacterium _ +
saccharoborum
Clostridium aceticum _ +
 RUTA DE ENTNER DOUDOROFF
Enzima clave :
3. KDPG aldolasa
cataliza el
rompimiento del 2-
ceto-3desoxi
fosfogluconato
(KDPG)

Enzimas:
1. Glucosa 6P DH
2. 6Pgluconato DeHidratasa
3. 3ceto,2-deoxy-6Pgluconato aldolasa
4. Enzimas comunes de EMP
 Rendimiento energético
Se generan 2 moles de ATP pero se gasta 1 en la fosforilación
de la glucosa = 1 mol ATP Neto

KDPG Ac Pirúvico + glic 3-P

2 ATP
Acetaldehido + CO2 ac.Pirúvico

NADH
Etanol acetaldehído +CO2

NADH
El piruvato se descarboxila Etanol
Para dar acetaldehido + CO2 y
Se convierte en Etanol !!!
Se producen 2 moles de etanol
Tiene bajo rendimiento energético
En Zimomonas mobilis
Se producen 2 moles de
Etanol de manera fermentativa
 LA PRODUCCIÓN DE ETANOL POR ED

Zimmomonas mobilis
 Papel fisiológico de la ruta de ED
• Los ácidos aldónicos como el gluconato son
nutrientes importantes en la naturaleza.
• Cuando E coli se transfiere de glucosa
gluconato se inducen 3 Enzimas:
A) Gluconocinasa: Gluconato 6 P gluconato
B) 6-P gluconato Deshidratasa: 6P gluconato
KDPG
C) KDPG aldolasa: KDPG Piruvato + PGAL
Ruta Modificada de ED en Arqueas
Enzimas:
1. Glucosa deshidrogenasa o
glucosa ferredoxin oxidoreductasa
2. Gluconato DesHidratasa
3. 2 ceto-3-desoxigluconato cinasa
4. 2 ceto- 3 –desoxi 6 Pgluconato aldolasa
5. 2 ceto-3 desoxi gluconato aldolasa
6. Gliceraldehido-ferredoxin-Oxidoreductasa
7. Glicerato cinasa

Arqueas como
Sulfolobus,
Thermoplasma y
Thermoproteus
metabolizan
la glucosa a G3P y 2-
Pglicerato
sin fosforilación de la
glucosa entrando
directamente a la ruta ED Halobacterium saccarovorum Sulfolobus y Thermoproteus
Fermentaciones lácticas
LA RUTA DE LA FOSFOCETOLASA
 Fermentación de la glucosa por
bacterias LAB
• Las bacterias ácido lácticas (LAB) pueden
fermentar la glucosa a través de:
1) Ruta Homofermentativa: el único producto es
el lactato (EMP).
2) Ruta Heterofermentativa: producen lactato,
acetato y etanol.(Ruta de la fosfocetolasa).
Empleadas por bifidobacterias.
 Reacciones de la ruta de la fosfocetolasa
La PK tiene un grupo prostético de Tiamin Pirofosfato
(TPP) que sostiene el acetil fosfato

Complejo del
glicoaldehido

PK

Enzimas: 1) hexocinasa;2) glucosa 6P DH

9
3) 6PgluconatoDH;4)Ribul5P epimerasa ;
5) Fosfocetolasa; 6) P-transacetilasa ;
7)Acetaldehido DH ; 8)Alcohol DH;
9) enzimas EMP y lactato DH
 Las fosfocetolasas de Bifidobacterias
• Bifidobacterium bifidum tiene dos
fosfocetolasas: una es activa sobre fructosa 6p
y la otra sobre Xilulosa 5 P y fermenta la
glucosa de manera diferente a Leuconostoc
mesenteroides.
• Se producen 2 moles de lactato y 3 moles de
acetato
• La fructosa6P-PK rompe la fructosa a eritrosa
4P y acetil P. las TK y TA rearreglan esta eritrosa
y una segunda molécula de fructosa para que
se formen dos moléculas de Xilulosa 5 P
En
bifidobacterias
hay dos
fosfocetolasas:

1)Fructosa 6P
fosfocetolasa
2)Xilulosa 5P
fosfocetolasa
Experimentos de distribución isotópica
• Se utiliza C-14.Se puede marcar C-1 o 6 de la
glucosa o el C-3 y 4 para hacer el
seguimiento hacia otras rutas.
• En condiciones fermentativas, si la glucosa
esta marcada en C-3 y 4 la marca aparece:
• Por EMP: aparece en el CO2
• Por Fosfocetolasa: en el lactato y etanol
• Por ED: 1 de CO2 y otra de etanol.
• Ejercicio: Hacer las reacciones que conducen
a la distribución isotópica
 Análisis de la degradación de glucosa
En E coli a través de respirometría
CO2 liberado de 3,4 por EMP
CO2 liberado si es C1 CO2 liberado en el TCA
La respirometría es otro método
para determinar las rutas
Glucolíticas utilizando glucosa C14
Con estos experimentos se puede
saber que ruta está ocurriendo y que
proporción de la glucosa se está
metabolizando por esa ruta

Glicolisis en Bacillus subtilis y Xantomonas

a través de respirometría

C-1 sale primero como CO2 por ED

HMP o PK
EMP
Por EMP y ED el carboxilo del
Piruvato se convierte a CO2
EMP convierte el C3 y 4 al carboxilo
del piruvato
Pero el C1 y 4 se transforman en
carboxilos cuando es ED
Determinación de la ruta
Del análisis de las enzimas claves y de experimentos con trazadores radiactivos.

Por ejemplo si el
extracto crudo tiene
actividad de
6P gluconato DH y
KDPG aldosa pero
no FFK , el organismo
posee la ruta ED.

Origen del Carboxilo del piruvato y formación del acetil CoA y CO2