UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE HONDURAS

FACULTAD DE CIENCIAS

ESCUELA DE MICROBIOLOGÍA

CARACTERIZACIÓN DE LA RESISTENCIA FENOTÍPICA A LOS ANTIMICROBIANOS

EN AISLAMIENTOS BACTERIANOS DE PRIORIDAD SANITARIA INTERNACIONAL
EN HOSPITALES DE HONDURAS, 2014 - 2020

PRESENTADO POR:

NOMBRE DEL TESISTA

INFORME TÉCNICO SEMESTRE 1 (NOVIEMBRE 2019 - MAYO 2020)

ASESORES:

INGRESE NOMBRE DEL ASESOR UNAH

INGRESE NOMBRE DEL ASESOR HOSPITAL

CIUDAD UNIVERSITARIA, TEGUCIGALPA, MAYO 2020

 INFORME TÉCNICO

SEMESTRAL

INTRODUCCION
La era antibiótica, emprendida en 1940, revolucionó para siempre el campo de las
enfermedades infecciosas dejando atrás la etapa pre-antibiótica, iniciada hace
más de 2500 años en China. Desafortunadamente, la evolución en la producción
de antimicrobianos se ha acompañado de un incremento marcado de la
resistencia de bacterias, lo cual se ha vuelto un problema grave a nivel de la salud
publica Alexander Fleming, al recibir el Premio Nobel de Medicina en 1945,
advirtió sobre el fenómeno de la resistencia cuando expresó "Llegará un momento
en que la penicilina podrá ser comprada por cualquiera en los negocios.
Lamentablemente, el ser humano no concientizó esta alerta y pronto aparecieron
los primeros aislamientos resistentes como parte a la evolución natural de las
bacterias en su adaptación al medio ambiente. Las mutaciones y el intercambio
horizontal de genes son propiedades universales de las bacterias, la frecuencia de
mutaciones que originan resistencia a antibióticos varía según el antibiótico y la
bacteria, la prevalencia local y global de resistencia depende de la diseminación
local y global de ciertos clones resistentes con especial capacidad. Las infecciones
causadas por bacterias resistentes se asocian a mayor morbilidad, mortalidad y
coste del tratamiento que las causadas por bacterias sensibles de la misma
especie. La resistencia de las bacterias a los antibióticos es un problema que se
ha complicado día tras día, más en los últimos años, desde el inicio de la era de
los antibióticos y a medida se han ido creando nuevos antimicrobianos para
combatir estos microorganismos.

Abstract

Antibiotics in the clinic have been of great importance and help in medicine against
different infectious diseases for many years, but as time has passed a serious
problem such as bacterial resistance has become a serious problem to worldwide
in public health, which greatly affects the effectiveness of treatments against
different infections, bacteria have the ability to produce different mechanisms of
resistance to different drugs which can occur naturally in bacteria or due to
mutations due to the misuse of different drugs, new antimicrobials have been
created but at the same time these microorganisms have presented different
modifications, both in their structure and in their genetics, which favors them for
resistance to these new drugs, bacterial resistance has been increasing every day
due to the lack of awareness of the population, the lack of Information on the
inappropriate use of different drugs, the free sale of these and the incorrect
treatment of bacterial infections. This is more and more worrisome every day, since
it greatly affects the adequate treatment of these microorganisms and puts the
population's health at risk. It needs many advances to raise awareness among the
population and to reduce bacterial resistance by a percentage. There has been a
need to create new conventional therapies that could be directed at the host or the
bacteria, but this would imply a high economic cost in public health, which is why
many of them are still under investigation, although the different antimicrobials.

Palabras Clave: Resistencia, antibióticos, Betalactamasas, salud pública,

mutaciones.

MARCO TEORICO

Los antimicrobianos son medicamentos utilizados para prevenir en algunos casos

y para tratar las infecciones bacterianas y otros agentes biológicos [ CITATION
Mig17 \l 3082 ] .La era antibiótica, emprendida en 1940, revolucionó para siempre el
campo de las enfermedades infecciosas dejando atrás la etapa pre-antibiótica,
iniciada hace más de 2500 años en China. Desafortunadamente, la evolución en la
producción de antimicrobianos se ha acompañado de un incremento marcado de
la resistencia de bacterias, hongos, parásitos, incluso virus, a diferentes familias
de estos. Alexander Fleming, desde que recibió el Premio Nobel de Medicina en el
año 1945, advirtió sobre el fenómeno de la resistencia cuando expresó "Llegará un
momento en que la penicilina podrá ser comprada por cualquiera en los negocios. [
CITATION Dia17 \l 3082 ].Lamentablemente, el ser humano no concientizó esta alerta
y muy pronto aparecieron los primeros aislamientos resistentes como parte de la
evolución natural de las bacterias en su adaptación al medio ambiente. Este
fenómeno se aceleró con el tiempo por el uso inadecuado de antibióticos en
diferentes ecosistemas [ CITATION Dia17 \l 3082 ]. Los antibióticos han salvado
millones de vidas, pero además han supuesto una revolución en la medicina, Sin
embargo, desde hace ya no pocos años, una amenaza creciente deteriora la
eficacia de estos fármacos: la resistencia bacteriana a los antibióticos en
patógenos bacterianos humanos existía antes del uso de estos fármacos por el
hombre y su prevalencia era baja. [ CITATION Jua14 \l 3082 ] Los estudios realizados
con bacterias obtenidas en los años previos al descubrimiento de los antibióticos o
con bacterias de poblaciones humanas que no habían tenido acceso a ellos lo
demuestran.[ CITATION Jua14 \l 3082 ] Que desde el uso masivo de los antibióticos se
ha constatado a nivel mundial un aumento muy importante de la prevalencia a la
resistencia. Al poco de introducirse la penicilina en la práctica clínica la gran
mayoría de las cepas de Staphylococcus aureus eran sensibles, actualmente lo
son menos del 5-10%, de hecho, si el Penicillium que permitió a Fleming descubrir
la penicilina hubiese contaminado muchos de los cultivos actuales de S. aureus,
es más que dudoso que la hubiese descubierto. En los años 60, la aparición del
Staphylococcus resistente a la meticilina y Pseudomonas resistentes a
gentamicina confirman la gravedad de la resistencia antimicrobiana [ CITATION
Dia17 \l 3082 ]. Cuando se introdujo en la clínica la cefotaxima a principios de la
década de los ochenta del siglo xx todas la cepas de Escherichia coli y Klebsiella
pneumoniae eran sensibles; hoy son resistentes el 13 y el 16%, respectivamente,
de los aislamientos[ CITATION Jua14 \l 3082 ] Las infecciones causadas por bacterias
resistentes se asocian a una mayor morbilidad , mortalidad y coste del tratamiento
que las causadas por bacterias sensibles de la misma especie. En un trabajo de
infecciones por Klebsiella pneumoniae uno de los factores de riesgo de
mortalidad estadísticamente significativo en el análisis univariable era la
resistencia de la cepa a carbapenemas. [ CITATION Jua14 \l 3082 ] . Es preocupante el
elevado porcentaje de resistencia a la vancomicina en Enterococcus faecium, una
bacteria ya naturalmente multirresistente, en la que además empieza aparecer
resistencia a la daptomicina y al linezolid. La Organización Mundial de la Salud
ha informado un aumento del 50% de los casos de tuberculosis multirresistente
en África entre 2005 y 2012 [ CITATION Jua14 \l 3082 ].Las infecciones causadas por
bacterias resistentes se asocian a una mayor morbilidad, mortalidad y coste del
tratamiento que las causadas por bacterias sensibles de la misma especie. Las
mutaciones y el intercambio horizontal de genes son propiedades universales de
las bacterias, han ocurrido durante millones de años como parte de la evolución.
La frecuencia de mutaciones que originan resistencia a antibióticos varía según el
antibiótico y la bacteria, la prevalencia local y global de resistencia depende de la
diseminación local y global de ciertos clones resistentes con especial capacidad,
en comparación con otros, para colonizar diversos ecosistemas y persistir en ellos.
[ CITATION Jua14 \l 3082 ] La resistencia de las bacterias a los antibióticos es un
problema que se ha complicado día tras día, más aun en los últimos años, desde
el inicio de la era de los antibióticos y a medida que se han ido creando
nuevos antimicrobianos para combatir estos microorganismos, al mismo tiempo
estos han ido presentando diferentes tipos de modificaciones y/o adaptaciones,
tanto genéticas como en su estructura, que los han ido haciendo resistentes a los
mismos [ CITATION Ger16 \l 3082 ] Las bacterias pueden presentar resistencia a
los antibióticos como resultado de mutaciones cromosomales e intercambio de
material genético de otras bacterias o fagos, La resistencia bacteriana puede ser
natural o intrínseca y adquirida.
  La resistencia natural o intrínseca: es una propiedad específica de las
bacterias, su aparición es anterior al uso de los antibióticos y tiene la
característica de ser inherente a una especie en particular.

 La resistencia adquirida: es un verdadero cambio en la composición

genética de la bacteria y constituye un verdadero problema en la clínica.
(4)

TRANSFERENCIA HORIZONTAL DE GENES

La transferencia horizontal de genes es el traspaso de información genética entre

bacterias, proceso diferente a la replicación. Permite variabilidad genética y
evolución bacteriana, generando la capacidad de adaptarse a las variaciones del
medio. Las bacterias utilizan diversas vías para transferir información genética
como: conjugación, transducción y transformación. [ CITATION Cla091 \l 3082 ]

Figura 1. Transferencia horizontal de genes. Se requiere material genético por

conjugación, Transducción y Transformación. Además, se producen deleciones y
mutaciones genéticas que optimizan los procesos bacterianos. [ CITATION Cla091 \l
3082 ]
 1. Transformación

La bacteria capta ADN exógeno desnudo y lo incorpora en su genoma a través de

fenómenos de recombinación. Es un proceso que solo se da in vivo en algunas
bacterias de la misma especie, por lo que se cree que el ADN debe presentar
cierta homología para que ocurra el proceso. [ CITATION Sus16 \l 3082 ]

2. Transducción

En este caso la transferencia del material genético entre una bacteria y otra ocurre
a través de un fago o virus que infecta a bacterias. Es el mecanismo de
transmisión de la resistencia en el caso de las penicilinasas en algunas cepas de
Staphylococcus. Dentro de la resistencia a los antibióticos, existe la posibilidad de
que esta sea cruzada. De esta forma, una bacteria, siendo resistente a un
determinado compuesto, podría serlo a otro de la misma o incluso de otra familia
de antibióticos. El caso más común es el de los aminoglucósidos. [ CITATION Sus16 \l
3082 ]

3. Conjugación

En este mecanismo se produce una transferencia de material genético entre dos

bacterias a través de los denominados Pili sexuales, túbulos de proteínas que
ponen en contacto ambas células. En las células donantes se encuentran los
plásmidos conjugativos, que contienen secuencias que codifican los citados Pili
sexuales. Es la principal vía de transmisión de resistencias presente en los
microorganismos, ya que muchos plásmidos R son, además, conjugativos.
[ CITATION Cla091 \l 3082 ][ CITATION Sus16 \l 3082 ]

Cuatro principales mecanismos de resistencia desarrollados por las

bacterias son:

1) Enzimas hidrolíticas: Es el mecanismo más común de resistencia

adquirida y está determinado en gran medida por la producción de
enzimas que hidrolizan al antimicrobiano. [ CITATION Ger16 \l 3082 ] Las
Betalactamasas: son enzimas que hidrolizan la unión peptídica endocíclica del
anillo betalactámico. La producción de beta-lactamasas es el mecanismo más
frecuente de resistencia antibiótica. Existen continuas mutaciones que producen
expresión de betalactamasas de espectro extendido (BLEE), manifestándose
como resistencia a cefalosporinas de 3 a generación (ceftriaxona)[ CITATION Cla091 \l
3082 ].

2) Modificación del sitio activo: La modificación de un aminoácido genera un

blanco diferente y así disminuye la afinidad de unión por el antimicrobiano. Hay
dos tipos de modificación del sitio activo:

 Modificación de PBP: El PBP (penicillin-binding-protein) es un complejo

enzimático que permite la síntesis del peptidoglicano, un compuesto de la
pared celular en bacterias, principalmente en Gram positivas, si se produce
mutación del sitio de unión al antimicrobiano como los beta-lactámicos,
éstos no pueden actuar y se genera resistencia a ellos.

 Modificación ribosomal: Los genes erm A y erm B producen modificación

del sitio activo del ribosoma, mediante metilación. Este mecanismo es
importante en la resistencia a macrólidos en S. pneumoniae y S. pyogenes.[
CITATION Cla091 \l 3082 ]

3) Disminución de la permeabilidad de la pared celular al ingreso del

antimicrobiano: El cambio en el diámetro y/o número de porinas pueden bloquear
el ingreso del antimicrobiano a la bacteria.

Porinas: Existe disminución de la expresión de porinas lo que disminuye la

susceptibilidad a betalactámicos y fluoroquinolonas en Pseudomonas". [ CITATION
Cla091 \l 3082 ]

4) Bombas de eflujo: Este mecanismo es capaz de eliminar varios tipos o familias

de antibióticos, por lo que también se ha denominado bombas de expulsión activa
multidroga. Este mecanismo ocurre de forma activa, gracias a la energía de
protones, derivada del potencial electroquímico a uno y otro lado de la membrana
citoplasmática, o por un sistema relacionado con el ATP [ CITATION Gon02 \l 3082 ].
Los genes involucrados son MefA {Streptococcus pneumoniae), NorA
(Staphylococcus aureus) y Mex
{Pseudomonas aeruginosa). Estos
genes explican la resistencia a
macrólidos en estos patógenos y
a fluoroquinolonas. Para combatir este
tipo de resistencia se encuentran en
estudio la asociación de
inhibidores de bombas de eflujo
junto con el antimicrobiano.
[ CITATION Cla091 \l 3082 ][ CITATION Gon02 \l 3082 ]

Figura 2. Mecanismos de Resistencia Antimicrobiana [ CITATION

Cla091 \l 3082 ]

Resistencia a los antibacterianos en América Latina

La resistencia a los fármacos antibacterianos tiene particular importancia en

América Latina, la capacidad de las bacterias de eludir la acción antibacteriana es
inagotable, al igual que las posibilidades de que surjan mutaciones o nuevos
mecanismos de transferencia de resistencia. [ CITATION Jos12 \l 3082 ]

BACTERIAS GRAM POSITIVAS

Las bacterias grampositivas que producen infecciones humanas frecuentes son,
en su mayoría, cocos: Estafilococos, Estreptococos (incluidos Neumococos) y
Enterococos, tanto en el medio comunitario como en el nosocomial el primer lugar
entre los agentes causantes de bacteriemias lo ocupan los Estafilococos
coagulasa negativos (en su mayoría cepas de Staphylococcus epidermidis),
seguidos por las cepas de Staphylococcus aureus y, con menor frecuencia en
América Latina, enterococos, que son un problema grave en los Estados Unidos
por el aumento de la prevalencia de cepas de Enterococcus faecium resistente a
vancomicina.[ CITATION Jos12 \l 3082 ]

En la actualidad todos los aislados de S. aureus de origen hospitalario y más de

85% de los de origen comunitario son resistentes a la penicilina. Esto se debe a la
adquisición de genes que codifican enzimas que inactivan la penicilina e impiden
al agente antibacteriano bloquear la síntesis de la pared celular, al no poder unirse
a las proteínas ligadoras de penicilina (PBP) que dirigen el entrecruzamiento de
los componentes (glúcidos y péptidos) de la pared celular.

En 1960, aparecieron los aislados de S. aureus resistentes a meticilina (SARM).

La resistencia a meticilina se debe a la expresión de un gen cromosómico
denominado mecA que codifica la síntesis de una proteína ligadora de penicilina
llamada PBP2a, que no se encuentra en aislamientos de estafilococos sensibles a
la meticilina, es capaz de reemplazar en sus funciones a otras PBP y tiene poca
afinidad a todos los antibióticos betalactámicos.[ CITATION Jos12 \l 3082 ]

Tras el surgimiento de cepas resistente a meticilina se incorporaron nuevos

antimicrobianos para el tratamiento de infecciones por cepas de Staphylococcus
aureus, como la vancomicina y teicoplanina, además de ellas se ha incorporado
linezolid, que es un antibiótico totalmente sintético confeccionado a medida para
estas infecciones.[ CITATION Jos12 \l 3082 ]

Las cepas de Streptococcus pyogenes (Grupo A de Lancefield) mantienen

sensibilidad total a la penicilina. En cambio, la eficacia de macrólidos y azálidos se
ve perjudicada por los mecanismos de resistencia a macrólidos-lincosamida-
estreptogramina b (MLSB) constitutiva o inducible y por eflujo, lo que dificulta su
uso empírico.[ CITATION Jos12 \l 3082 ]

RESISTENCIA DE BACILOS GRAMNEGATIVOS

La resistencia de las bacterias gramnegativas de importancia clínica a los

antibacterianos se presenta fundamentalmente en la familia Entobacteriaceae y en
bacilos gramnegativos no fermentadores (BGNNF). [ CITATION Jos12 \l 3082 ]

Bacilos Gram Negativos No Fermentadores

En el medio hospitalario de Latinoamérica, el mayor problema de resistencia es

ocasionado por las infecciones por bacilos gramnegativos no fermentadores, las
especies más problemáticas, por su resistencia extrema, son Acinetobacter spp. y
Pseudomonas aeruginosa. Ambas son multirresistentes, aunque tienen diferencias
notables en su virulencia.

Especies de Acinetobacter son inmóviles, poseen limitados factores de

adherencia, tienen una pobre dotación de exotoxinas y el lípido A de su LPS
(endotoxina) de la membrana externa no es tan agresivo. [ CITATION Jos12 \l 3082 ]

Las cepas de P. aeruginosa son muy móviles, lo cual favorece su capacidad de

invadir el tracto respiratorio y las vías urinarias, produce exotoxinas citotóxicas, es
sumamente adherente y forma biopelículas densas. [ CITATION Jos12 \l 3082 ]

Enterobacteriaceae

En esta familia, las especies Escherichia coli y Proteus mirabilis son las más
frecuentes como causa de infecciones urinarias, tanto en la comunidad como en el
hospital. Las cepas de Klebsiella spp. y Enterobacter spp. son agentes etiológicos
importantes en casos de neumonía, y todas las enterobacterias están implicadas
en infecciones intraabdominales y bacteriemias. La resistencia a betalactámicos
puede ocurrir por impermeabilidad, alteración de las PBP, eflujo y producción de
betalactamasas.

LA RESISTENCIA EN LOS PRINCIPALES GRUPOS DE ANTIBACTERIANOS

 Resistencia a Betalactámicos

La familia de los betalactámicos es una de las familias de antimicrobianos más

numerosa y más utilizada en la práctica clínica. A lo largo de los años, se han ido
incorporando nuevas moléculas con mayor actividad frente a los bacilos Gram-
negativos, capaces de superar las resistencias adquiridas por los antimicrobianos. [
CITATION Gil191 \l 3082 ]

La hidrólisis de betalactámicos por medio de enzimas betalactamasas, es el

mecanismo de resistencia más común para esta clase de antibióticos en bacterias
Gram-negativas, los genes que codifican estas enzimas pueden encontrarse en el
cromosoma bacteriano o en plásmidos y se producen de manera constitutiva o
inducible. Estos antibióticos, entre ellos Penicilina, Cefalosporinas y
Carbapenemes, son utilizados como tratamiento de primera elección en gran
cantidad de infecciones, por lo que la detección de estas enzimas tiene un gran
impacto clínico en la selección de la terapia a utilizar. [ CITATION Gil191 \l 3082 ]

Tipos de betalactamasas

De todas las betalactamasas descritas hasta el momento, cabe destacar, por su

interés e implicaciones clínicas:

1. BETALACTAMASAS DE ESPECTRO EXTENDIDO (BLEE)

En las bacterias gramnegativas el mecanismo de resistencia a los betalactámicos

más común e importante es la producción de betalactamasas, enzimas capaces
de hidrolizar el anillo betalactámico inactivando los antibióticos. Un grupo
importante de estas enzimas son las BLEE. [ CITATION Emi111 \l 3082 ] Las ß-
lactamasas de espectro extendido (BLEE) son enzimas que fenotípicamente se
caracterizan por conferir resistencia a penicilinas y cefalosporinas, incluyendo las
de tercera y cuarta generación. Son en su mayoría producidas por enterobacterias
especialmente frecuentes en Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli. [ CITATION
DrD101 \l 3082 ]

Las BLEE tienen la capacidad de hidrolizar las oximinocefalosporinas como

ceftriaxona (CRO), cefotaxima (CTX), ceftazidima (CAZ) y el aztreonam (ATM),
quedando sensibles frente a las cefamicinas (cefoxitin, cefotetam) y carbapenems
(imipenem, meropenem, ertapenem) [ CITATION Liz101 \l 3082 ]

Detección de cepas con fenotipo BLEE

se utiliza el método de doble disco colocando en el antibiograma los discos de

amoxicilina/ácido clavulánico (AMC) (20/10 μg) en el centro de una placa de Petri
con agar Mueller Hinton y alrededor, a 25 mm de distancia, discos de CAZ (30 μg/
dL), CTX (30 μg) y FEP (30 μg). La presencia de BLEE se manifestó por el efecto
sinérgico del inhibidor y los discos –efecto de huevo, cola de pez o balón de futbol
americano de cefalosporinas de tercera generación (cefotaxime y ceftazidima)
próximos a un disco de amoxicilina-clavulánico. [ CITATION Liz101 \l 3082 ]
 FIGURA 3: Detección de cepas con fenotipo BLEE [ CITATION Liz101
\l 3082 ]

2. BETALACTAMASAS TIPO AmpC.

Las AmpC son serin-betalactamasas, presentes de forma natural en diversas

enterobacterias y en bacilos gramnegativos no fermentadores
como Pseudomonas aeruginosa y Acinetobacter baumannii. Estas enzimas son
capaces de resistir la inhibición por ácido clavulánico, sulbactam y
tazobactam. Las betalactamasas AmpC están asociadas a elevada mortalidad y, a
nivel de laboratorio, con falsos reportes de susceptibilidad antimicrobiana. Por lo
tanto, es de vital importancia su investigación de rutina en los laboratorios de
microbiología.

Sistema de expresión y represión del gen ampC

Para comprender la diferencia entre betalactamasas AmpC inducibles y

constitutivas, es necesario conocer el mecanismo de expresión y represión del gen
que codifica a estas enzimas (gen ampC). Las bacterias que poseen el gen ampC,
tienen un complejo sistema molecular regulador de la expresión del mismo, el cual
está íntimamente relacionado con el reciclaje del péptidoglicano. El proceso se
inicia cuando los productos de degradación de la pared 1,6 anhidromuropéptidos
(1,6 amp), ingresan al citoplasma bacteriano a través de una permeasa
transmembrana denominada AmpG (codificada por el gen ampG). Estos productos
de degradación 1,6 amp, actúan como molécula señal (promotores o inductores)
del activador transcripcional AmpR (codificado por el gen ampR). Cuando el AmpR
se une a los 1,6 amp se induce la expresión del gen ampC y de esta manera, se
produce la enzima AmpC, la cual ejercerá su efecto hidrolítico sobre los
betalactámicos para los cuales tiene acción.

Las cepas salvajes productoras de AmpC, lo hacen a bajos niveles (o niveles

basales), gracias al sistema represor, por consiguiente, mutaciones asociadas a
los genes ampR y ampD, resultan en la hiperproducción de AmpC, un término que
se ha denominado derrepresión.[ CITATION Dia111 \l 3082 ]

Método de detección fenotípica de betalactamasas AmpC

Método de aproximación de discos: Propuesto por Sanders y Sanders, es

aplicable a betalactamasas AmpC inducibles. La técnica consiste en realizar un
antibiograma convencional, para luego colocar un disco de cefoxitina o cualquier
otro antimicrobiano inductor a una distancia de 27mm centro-centro de un disco de
cefamandol, ceftazidima, ceftriazona o cefotaxima. El microorganismo producirá
una betalactamasa inducible si se observa un halo de inhibición truncado del
antimicrobiano sustrato, testigo o revelador[ CITATION Dia111 \l 3082 ]

Figura 4: Detección
de cepas con fenotipo AmpC[ CITATION Dia111 \l 3082 ]

3. BETALACTAMASAS TIPO CARBAPENEMASAS

Las Carbapenemasas son enzimas capaces de hidrolizar los antibióticos
Carbapenémicos. La producción de estas enzimas parece ser la causa más
ampliamente distribuida de resistencia a carbapenémicos ya que su distribución en
distintas especies bacterianas es extensa, Las Carbapenemasas se clasifican en
cuatro clases moleculares[CITATION MAN17 \l 3082 ]:

 la clase A: Se subdividen en tres grupos, las que son codificadas

cromosómicamente e inhibidas por Ácido Clavulánico (IMI, NMC-A y SME)
halladas en Enterobacter cloacae y Serratia marcescens; las que son
codificadas plasmidicamente denominadas KPC y encontradas en bacterias
pertenecientes a la familia Enterobacteriaceae, y finalmente las
pertenecientes a las enzimas tipo GES identificadas en
Enterobacteriaceae y P. aeruginosa.[ CITATION MAN17 \l 3082 ]

 Las enzimas clase B: son las Carbapenemasas clínicamente más

importantes y son las llamadas Metalo-b-lactamasas (MBL), la mayoría
pertenecen a la serie IMP y VIM. Estas enzimas han sido reportadas
mundialmente y son capaces de hidrolizar todos los betalactámicos con la
excepción del Aztreonam. Las enzimas Metalo-b-lactamasa tipo Nueva
Delhi (NDM-1) son las últimas Carbapenemasas en ser reconocidas y
desde el 2008 han sido reportadas en varias partes del mundo
principalmente en aquellos pacientes que han tenido vínculos
epidemiológicos con el subcontinente Indio donde este mecanismo se
encuentra ampliamente distribuido en los centros hospitalarios. [ CITATION
MAN17 \l 3082 ]

 la clase D de las Carbapenemasas: son penicilinasas que pueden

hidrolizar oxacilina y cloxacilina, esta clase es pobremente inhibida por
ácido clavulánico o EDTA, comprometen la eficacia de Imipenem y
Meropenem y su reporte ha ido en aumento sobre todo en Acinetobacter
baumannii.[ CITATION MAN17 \l 3082 ]
 Resistencia a Quinolonas:

Las quinolonas son un grupo de antimicrobianos sintéticos de amplio espectro,

cuyo "blanco" es la síntesis del ADN. Se han utilizado ampliamente para el
tratamiento de infecciones intra y extrahospitalarias. Sin embargo, se
han usado indiscriminadamente en el campo de la agricultura y en el
procesamiento de alimentos, lo que hace que el incremento de resistencia a
quinolonas sea un problema cada vez más frecuente asociado a la constante
exposición de diversos microorganismos.

Mecanismos de resistencia

La resistencia puede alcanzarse mediante tres mecanismos no

exclusivos:

• A través de mutaciones cromosómicas en genes codificantes, al reducir

las concentraciones intracito-plásmicas de quinolonas y por genes de
resistencia a quinolonas mediados por plásmidos (PMQR, por sus siglas
en inglés).

• Las mutaciones cromosómicas afectan las regiones determinantes de

resistencia a quinolonas (QRDR, por sus siglas en inglés) de ADN girasa
(GyrA y GyrB) y topoisomerasa IV (ParC y ParE) 3. Se dan por errores de
transcripción durante la replicación cromosómica y ocurren en rangos
tan altos como 1 en 10 6 a 109 en bacterias silvestres34. Las mutaciones en
gyrA, el gen que codifica las subunidades A de ADN girasa, conforman el
mecanismo que con mayor frecuencia se encuentra involucrado en la
resistencia a quinolonas entre las bacterias gramnegativas35.

• La reducción de la concentración intracelular de quinolonas se da

principalmente por dos mecanismos; pasivamente, mediante reducción
de la permeabilidad por "downregulation" de proteínas extra-
membranales que forman canales y activamente, mediante
sobreexpresión de sistemas de eflujo multidroga pertenecientes a la
superfamilia de división de resistencia-nodulación (DRN), AcrAB-TolC36.
Estos últimos reducen la acumulación de quinolonas en el citoplasma,
proporcionando el tiempo suficiente para que la bacteria se adapte y
adquiera resistencia.
 La tasa de crecimiento de la resistencia bacteriana supera a la creación de nuevos
antibióticos, lo cual ha dado como resultado la necesidad imperante del desarrollo
de terapias alternas a los antibióticos convencionales, ya sean dirigidos al
patógeno o al huésped, el desarrollo exitoso de estos métodos terapéuticos y
profilácticos supone un alto gasto para el sistema de salud, pero representa
una inversión necesaria, en dinero y tiempo, con el objetivo de emprender y
mantener la lucha contra la resistencia microbiana. Muchas de estas terapias
siguen aún en investigación, otras son de uso preventivo, motivo por el cual los
antibióticos convencionales aún son necesitados
Se considera de mucha importancia analizar los avances médicos sobre diferentes
opciones terapéuticas no convencionales para lograr el control de infecciones
bacterianas, con el fin de combatir la resistencia microbiana a los antibióticos entre
estas terapias encontramos:
Péptidos antimicrobianos (PAM)
Es una amplia familia de péptidos con actividad antimicrobiana producidos por
diversos organismos, desde bacterias hasta vertebrados. En la actualidad, este
grupo de péptidos se considera una alternativa terapéutica prometedora por su
eficacia, seguridad e importante diversidad estructural y funcional que genera un
bajo nivel de resistencia bacteriana (10). Sin embargo, los PAM pueden ser
susceptibles a la expulsión de los mismos a través de bombas de eflujo y a la
degradación por proteasas (3) lo que podría influir sobre su biodisponibilidad; pero
permite un efecto local en los objetivos bacterianos (18) sin formar compuestos
secundarios con efectos tóxicos a la salud.

RESULTADOS, ANALISIS E INTERPRETACION DE RESULTADOS DEL MES

DE ENERO – MAYO DEL 2020 DEL HOSPITAL ESCUELA

1 AISLAMIENTOS DEL MES DE ENERO-MAYO DEL 2020

se realizaron 187 aislamientos en los meses de Enero-Mayo del 2020
correspondiendo un 54 % a Escherichia coli y un 19% a Klebsiella spp.
Tabla 1: Frecuencia de agente aislados en los meses de ENERO-MAYO del 2020
en pacientes del Hospital Escuela.

AGENTE ENERO FEBRER MARZ ABRI MAY Total %

AISLADO O O L O
 Acinetobacter 2 3 1 2 8 4%
baumannii
Enterococcus 1 1 2 1%
spp.
Escherichia coli 49 14 24 7 7 101 54%
Klebsiella spp. 13 4 13 5 35 19%
Proteus spp. 2 3 5 3%
Pseudomonas 9 1 4 14 7%
aeruginosa
Staphylococcus 8 3 5 5 1 22 12%
aureus
Total general 84 22 52 19 10 187 100%

1.1 MECANISMOS DE RESISTENCIA PRESENTES EN MES DE ENERO -MAYO

DEL 2020

De los 187 aislamientos del periodo de Enero-Mayo del 2020 un 54%

correspondieron a cepas de Escherichia coli productoras de beta-lactamasas de
espectro extendido BLEE.

Tabla 2: Frecuencia de Mecanismos de resistencia en el periodo Enero-Mayo

2020 en pacientes del Hospital Escuela.
CEPAS AMP BLE CARBAPENEMAS MLSB- MLSB- SARM - Tot %
AISLADAS C E AS CONSTITUTIV INDUCIBL OXACILINA al
O E RESISTENT
E
Acinetobacter 5 3 8 4%
baumannii
Enterococcus 1 1 2 1%
spp.
Escherichia 1 99 1 101 54%
coli
Klebsiella 3 32 35 19%
spp.
Proteus spp. 5 5 3%
Pseudomona 14 14 7%
s aeruginosa
Staphylococc 9 3 10 22 12%
us aureus
Total general 23 137 4 9 4 10 187 100
%

Etiquet AMPC B CARBAP MLSB - MLSB SARM - Tot

as de L ENEMAS CONST - OXACILIN al
fila E AS ITUTIV INDU A gen
E O CIBL RESISTEN eral
E TE
1-3 2 2 1%
MESES
4 9 2 11 6%
MESES
-5
AÑOS
6 - 18 1 6 1 5 13 7%
AÑOS
MAYO 18 10 3 6 3 4 140 75%
RES 6
DE 18
AÑOS
MENO 3 1 4 2%
S DE 1
MES
(en 1 13 1 1 1 17 9%
blanco)
Total 23 13 4 9 4 10 187 100
genera 7 %
l

Etique AMPC B CARBAP MLSB - MLSB SARM - Tota

tas de L ENEMAS CONSTI - OXACILIN l
fila E AS TUTIVO INDU A gen
E CIBLE RESISTEN eral
TE
F 10 86 2 2 1 1 102 55
%
M 13 50 2 7 3 9 84 45
%
(en 1 1 1
blanco %
)
Total 23 13 4 9 4 10 187 10
gener 7 0
al %