METODO 3510C

EXTRACCION LIQUIDO-LIQUIDO POR MEDIO DE EMBUDO DE SEPARACIÓN

1.0 ALCANCE Y APLICACIÒN

1.1 Este método describe un procedimiento para aislar compuestos orgánicos de muestras
acuosas. El método también describe técnicas de concentración adecuadas para preparar el
extracto para los métodos apropiados descritos en la sección 4.3 del capítulo 4.

1.2 Este método es aplicable al aislamiento, concentración y en preparación de orgánicos

insolubles en agua y ligeramente solubles en agua para una variedad de procedimientos
cromatográficos.

1.3 Este método esta restringido para su uso bajo la supervisión de analistas capacitados.
Cada analista debe demostrar la capacidad de generar resultados aceptables con este método.

2.0 RESUMEN DEL METODO

2.1 A un volumen medido de muestras, generalmente 1 litro, con un pH especifico (ver tabla
1), se le realiza una extracción con cloruro de metileno (diclorometano) usando embudo de
decantación.

2.2 El extracto obtenido se seca, se concentra (si es necesario), y si es necesario se cambia el

solvente de limpieza o determinativo por un solvente compatible con el método ( consultar
tabla 1 solventes de intercambio).

3.0 INTERFERENCIAS

3.1 Consulte el método 3500

3.2 Se ha demostrado la descomposición de algunos analitos bajo condiciones de extracción

básica. Los plaguicidas organoclorados pueden declorarse, los esteres de ftalato pueden
intercambiarse y los fenoles pueden reacción para formar tanatos. Estas reacciones aumentan
al aumentar el pH y son disminuidos por los tiempos de reacción más cortos disponibles en el
método 3510. Se prefiere el método 3510 sobre el método 3520 para el análisis de estas clases
de compuestos. sin embargo, la recuperación de fenoles puede optimizarse utilizando el
método 3520 y realizando la extracción inicial a un pH acido.
4.0 MATERIALES Y EQUIPOS

4.1 Embudo de separación de capacidad 2 litros, con llave de paso de politetrafluoroetileno

(PTFE), que es el mismo teflón.

4.2 Columna cromatográfica de secado pírex de 20 mm de diámetro interno, provista con

lana de vidrio pírex en el fondo y llave de paso teflonada (PTFE).

NOTA

Los discos de vidrio poroso son difíciles de descontaminar después de realizar extracciones con
extractos altamente contaminados. se pueden adquirir columnas sin discos poroso y utilizar
pequeñas almohadillas de lana de vidrio pírex para retener el adsorbente. Pre lave la
almohadilla de lana de vidrio con 50 ml de acetona y 50 ml de solvente de elución antes de
rellenar la columna con adsorbente.

4.3 EQUIPO KUDERNAN-DANES (K-D)

4.3.1 Un tubo concentrador de 10 mL graduado (equivalente a KONTES K- 570050-1025). Con

tapón de vidrio esmerilado para evitar evaporación de los volátiles del extracto.

4.3.2 Balón esmerilado de evaporación de 500 ml, ajustable al tubo concentrador con
abrazadera.

4.3.4 columna Snyder- macro de 3 bolas (equivalente a KONTES K-503000-0121).

4.3.5 columna Snyder – micro de 2 bolas (equivalente a KONTES K-503000-0121).

4.3.6 resortes de ½ pulgada (equivalente KONTES K-662750)

NOTA

Se recomienda el siguiente material de vidrio para la recuperación de solventes durante los

procedimientos de concentración que requieren el uso de KUDERNA-DANISH concentradores
y evaporadores. Puede ser necesaria la incorporación de este aparato por las regulaciones
estatales o municipales locales que gobiernan las emisiones al aire de volátiles orgánicos. La
EPA recomienda la incorporación de este tipo de recuperación sistema como método para
implementar un programa de reducción de emisiones. Solvente la recuperación es un medio
para cumplir con la minimización y la contaminación de residuos.
Iniciativas de prevención.

4.4 Sistema de recuperación de vapor de solvente (equivalente KONTES K-545000-1006 O K-

547300-0000) VIDRIO TRANSPARENTE 6614-30).

4.5 Esferas o perlas de vidrio para ebullición, de 10/40 tamaño de malla.

4.6 Baño de agua caliente con cubierta de anillo concéntrico, capaz de controlar la
temperatura ± 5 º c). se debe usar dentro de cabina extractora.

4.7 Viales de 2 ml con tapa rosca revestida en teflón.

4.8 Papel indicador de pH que incluya el rango de pH de extracción deseado.

4.9 Matraz Erlenmeyer de 250 ml

4.10 Jeringa 5 ml

4.11 Probeta graduada de 1 litro

5.0 REACTIVOS

5.1 Se utiliza productos químicos de grado reactivo en todas las pruebas a menos que se
indique lo contrario, se pretende que todos los reactivos se ajusten a las especificaciones del
comité de análisis de reactivos de la AMERICAN CHEMICAL SOCIETY, cuando dichas
especificaciones estén disponibles. Otros grados puede utilizarse, siempre que se compruebe
primero que el reactivo de pureza suficientemente alta para permitir su utilización sin
disminuir la precisión de la determinación. los reactivos deben almacenarse en vidrio para
prevenir la lixiviación de contaminantes de los envases de plástico.

5.2 Agua de reactivo libre de orgánicos (destilada o des ionizada): todas las referencias
respecto al agua en este método se refieren al agua de reactivo, des ionizada o destilada,
como se define en el capitulo uno.

5.3 SOLUCIUON DE HIDROXIDO DE SODIO NaOH (10N): disuelva 40 g de NaOH reactivo en

agua des ionizada y aforar a 100 ml. pueden usarse otras concentraciones de soluciones de
hidróxido para ajusta pH de la muestra, siempre y cuando el volumen agregado no cambie
apreciablemente (por ejemplo, < 1%) el total de volumen de la muestra.

5.4 SULFATO DE SODIO (GRANULAR, ANHIDRIDO) Na2SO4: purificar calentando a 400 º c

durante 4 horas en una bandeja poco profunda o limpiando previamente el sulfato de sodio
con cloruro de metileno. si el sulfato de sodio se limpia previamente con cloruro de metileno,
se debe analiza un blanco del método, demostrando que ahí no hay interferencia del sulfato
de sodio. Se puede utilizar otras concentraciones de soluciones acidas para ajusta el pH de la
muestra, siempre que el volumen agregado no cambie apreciablemente (por ejemplo, < 1%) el
total de volumen de la muestra.

5.5 Solución de Ácido Sulfúrico H2SO4 (1:1 v/v): Medir 50 mL de H2S04 diluirlo con 50 mL de
agua destilada o des ionizada.

5.6 solventes de extracción/intercambio: Todos los solventes deben ser de calidad pesticida o
equivalente.

5.6.1 Cloruro de metileno CH2Cl2, Punto de Ebullición 39 ºC

5.6.2 Hexano C6H14, Punto de Ebullición 68.7 ºC

5.6.3 2- Propanol CH3CH (OH) CH3, Punto de Ebullición 82.3 ºC

5.6.4 Ciclohexano C6H12, Punto de Ebullición 80.7 ºC

5.6.5 Acetonitrilo CH3CN, Punto de Ebullición 81.6 ºC

6.0 TOMA, CONSERVACIÒN Y MANEJO DE LA MUESTRA

Consulte el material introductorio de este capítulo, Analitos orgánicos, sección 4.1.

7.0 PROCEDIMIENTO

7.1 Con una probeta de 1 Litro, medir 1 litro de Muestra; alternativamente si se extraerá todo
el contenido de la botella de muestra, marque el nivel de muestra en el exterior de la botella.
Si se anticipan concentraciones altas del analíto, se puede tomar un volumen de muestra
menor y diluirlo a 1:1 con agua destilada, o las muestras se pueden recolectar en una botella
más pequeña de muestra y utilizar toda la muestra.

7.2 Pipetee 1.0 mL de la solución sustituta en cada muestra en la probeta y mezcle bien
(Consulte el método 3500 y el método determinativo que se utilizara para detalles sobre la
solución estándar sustituta y la solución de matriz)

7.2.1 Para la muestra en cada lote (ver capitulo uno) seleccionada para usarse como muestra
Matriz de adición, adicionar 1.0 mL del estándar de adición de matriz.

7.2.2 Si se va emplear el método 3640, Limpieza por penetración en gel, agregue el doble de
volumen de solución de adición sustituta y el patrón de adición de matriz, ya que la mitad del
extracto no se recuperar del GPC (Alternativamente utilice 1.0 mL de solución de adición y
concentrar el extracto final a la mitad del volumen normal, por ejemplo 0.5 mL en lugar de 1.0
mL).

7.3 Compruebe el pH de la muestra con papel de pH de amplio rango y ajuste el pH si es

necesario al pH indicado en la tabla 1, usando h2so4 (1:1) o NaOH (1:1). Se puede usar
concentraciones menores de soluciones acida o básica, siempre que no den como resultado
un cambio (< 1%)en el volumen de muestra extraída (véase las secciones 5.3 y 5.5 )

7.4 Transferir cuantitativamente la muestra de la probeta graduada al embudo de

decantación. Use 60 mL de cloruro de metileno (Diclorometano) para enjuagar la probeta y
transferir este enjuague al embudo de decantación. Si la muestra se transfirió directamente de
la botella de muestra, vuelva a llenar la botella con agua hasta la marca hecha en la sección 7.1
y medir el volumen de muestra que estaba en la botella.

7.5 Selle y agite vigorosamente el embudo de decantación durante 1-2 minutos con
ventilación periódica para liberar el exceso de presión. Alternativamente vierta el solvente de
intercambio en la parte superior de la columna de Snyder mientras el concentrado permanece
en el baño maría. En la sección 7.11.4.

NOTA

El cloruro de metileno crea una presión excesiva muy rápidamente, por lo tanto, iniciando la
ventilación debe realizarse inmediatamente después que se haya sellado el embudo de
decantación, y agitando vigorosamente. El embudo de separación debe ventilarse en una
campana o cabina de ventilación para evitar exposición del analista a vapores del solvente.

7.6 Deje que la capa orgánica se separe de la fase acuosa durante un mínimo de 10 minutos, si
la interfase de la emulsión entre capas es mas de un tercio del tamaño de la capa de
disolvente, el analista debe emplear técnicas mecánicas para terminar de realizar la separación
de fases. La optimización de la técnica depende de la muestra y puede incluir agitación,
filtración de la emulsión a través de lana de vidrio, centrifugación u otros métodos físicos.
Recoger el extracto de disolvente en un matraz Erlenmeyer. Si la emulsión no se puede romper
(recuperación de < 80% del cloruro de metileno, corregido por solubilidad en agua del cloruro
de metileno), transferir la muestra, el solvente y la emulsión a la cámara de extracción
continuo y proceda como se describe en el método 3520, Extracción Liquido-Liquido continuo.

7.7 Repetir la extracción dos veces más, utilizando porciones frescas de solvente (sección 7.2 a
7.5). Combine los 3 extractos de solvente.

7.8 Si se requiere un mayor ajuste en el pH y extracción, ajuste el pH de la fase acuosa al pH

deseado indicado en la Tabla 1. Extraer en serie tres veces con 60 mL de Cloruro de metileno
como se describe en la sección 7.2 hasta 7.5. Recolecté y combiné los extractos y etiquete los
combinados y extraiga adecuadamente.

7.9 Si se realiza un análisis de GC/MS (método 8270), los extractos acido/neutro y básico
pueden combinarse antes de la concentración. Sin embargo, en algunas situaciones, es
preferible el análisis de la concentración de los extractos acido/neutro y básico por separado
(por ejemplo, para fines regulatorios la presencia o ausencia de compuestos específicos
acido/neutro y básico a bajas concentraciones son determinados mediante análisis de
extractos separados).

7.10 Realice la concentración (si es necesario) utilizando la técnica KUDERNA-DANESA

(Secciones 7.11.1 a 7.11.6).

7.11 TECNICA K-D

7.11.1 Ensamble el equipo concentrador KUDERNA-DANISH (K-D) (SECCION 4.3) Conectando

un tubo concentrador a un matraz de evaporación de 500 mL.

7.11.2 Coloque el equipo de recuperación de vapor de disolvente (condensador y dispositivo

de recogida)(sección 4.4.) a la columna Snyder del aparato K-D siguiendo las instrucciones del
fabricante.
7.11.3 Seque el extracto pasándolo por una columna de secado que contenga unos 10 cm de
sulfato de sodio anhídrido. Recoger el extracto seco en un concentrador K-D. enjuague el
Erlenmeyer, que contenía el extracto solvente, con 20-30 mL de cloruro de metileno y
agréguelo a la columna para completar la transferencia cuantitativa.

7.11.4 Agregue uno o dos esferas de ebullición al matraz y coloque una columna de Snyder de
3 bolas. Humedezca previamente la columna de Snyder agregando aproximadamente 1 mL de
cloruro de metileno en la parte superior de la columna. Coloque el aparato de K-D en un baño
maría caliente (15-20 ºC por encima del punto de ebullición del solvente) de modo que el tubo
concentrador se sumerja parcialmente en el agua caliente y toda la superficie redondeada
inferior del matraz se baña con vapor caliente. Ajustar la posición vertical del aparato y la
temperatura del agua según sea necesario para completar la concentración en 10-20 minutos.
A la velocidad adecuada de destilación, las bolas de la columna trabajaran activamente, pero
las cámaras no se inundaran. Cuando el volumen aparente de liquido alcance 1 mL, retire el
aparato K-D del baño de agua y déjelo escurrir y enfriar durante al menos 10 minutos.

7.11.5 Si se requiere un intercambio de solvente (como se indica en la Tabla 1), retire

momentáneamente la columna de Snyder, agregue 50 mL del solvente de intercambio,
coloque nuevas esferas de cristal de calentamiento y vuelva a colocar la columna de Snyder.
Alternativamente, vierta el solvente de intercambio en la parte superior de la columna de
Snyder mientras el concentrado permanece en el baño maría en la sección 7.11.4. Concentre el
extracto, como esta descrito en la sección 7.11.4, elevar la temperatura del baño de agua, si es
necesario para mantener destilación adecuada.

7.11.6 Retire la columna Snyder y enjuague el matraz y sus juntas inferiores en el tubo
concentrador con 1-2 mL de cloruro de metileno o solvente de intercambio. Si cristales de
azufre son un problema, continúe con el Método 3660 para la limpieza. El extracto puede
concentrarse más utilizando la técnica descrita en la sección 7.12 o ajustando a 10.0 mL con el
ultimo solvente usado

7.12 Si se indica una concentración adicional en la Tabla 1, la técnica de columna micro-Snyder

(7.12.1) o la técnica de purga de nitrógeno (7.12.2) se utiliza para ajustar el extracto al
volumen final necesario.

7.12.1 Técnica de columna de micro-Snyder

Si se indica una concentración adicional en la Tabla 1, agregue esferas de cristal de

calentamiento al tubo concentrador y conecte una columna micro-Snyder de dos bolas.
Humedezca previamente la columna agregando 0.5 mL de cloruro de metileno o disolvente de
intercambio a la parte superior de la columna. Coloque el K-D en un baño caliente de modo
que el tubo concentrador se sumerja parcialmente en el agua caliente. Ajuste la posición
vertical del equipo y la temperatura del agua, según sea necesario para completar la
concentración en 5-10 minutos. A la velocidad adecuada de destilación. Las bolas de la
columna trabajara activamente, pero las cámaras no se inundaran. Cuando el volumen
aparente de liquido alcance los 0.5 mL, retire el equipo K-D del baño de agua y déjelo escurrir y
enfriar durante al menos 10 minutos. Retire la columna de Snyder, enjuague el matraz y sus
juntas en el tubo concentrador con 0.2 mL de cloruro de metileno o el disolvente de
intercambio y ajuste el volumen final como se indica en la Tabla 1, con disolvente.

7.12.2 TECNICA DE PURGA DE NITROGENO

7.12.2.1 Coloque el tubo concentrado en un baño tibio (35 ºC) y evapore el solvente hasta el
volumen final indicado en la Tabla 1, usando un chorro suave de Nitrógeno para limpiar y secar
(filtrado a través de una columna de carbón activado).

ADVERTENCIA: No se debe utilizar tubería de plástico nueva entre la trampa de carbón y la

muestra, ya que puede introducir contaminantes.

7.12.2.2 La pared interna del tubo debe enjuagarse varias veces con el cloruro de metileno o
disolvente apropiado durante la operación. Durante la evaporación, el tubo debe colocarse
para evitar la condensación de agua ( es decir, el nivel de disolvente debe ser por debajo del
nivel del baño maría). Bajo procedimientos normales, el extracto no debe dejarse secar.

ADVERTENCIA: Cuando el volumen de disolvente se reduce por debajo de 1 mL, los

analitos semivolátiles pueden perderse.

7.13 El extracto ahora se puede analizar para los analitos objetivo utilizando la técnica
determinativa apropiada (véase la sección 4.3 de este capítulo). Si el análisis del extracto no se
realiza inmediatamente, tapar el tubo concentrado y almacenar refrigerado. Si el extracto se
almacena durante 2 días, debe transferirse a un vial con un tapón de rosca revestida de teflón
y etiquetado adecuadamente.

8.0 CONTROL DE CALIDAD

8.1 Cualquier blanco de reactivo, picos de matriz o muestra replicada debe someterse
exactamente a los mismos procedimientos analíticos que se utilizan en las muestras reales.

8.2 Consulte el capitulo uno para conocer los procedimientos de control de calidad específicos
y el método 3500 para procedimientos de extracción y preparación de muestras.
9.0 RESULTADO DEL METODO

Consulte los métodos determinantes para obtener resultado del método.

10.0 REFERENCIAS

Ninguna