ESPECIACIÓN DE ARSÉNICO EN ARROZ POR CROMATOGRAFÍA LIQUIDA DE

INTERCAMBIO ANIONICO ACOPLADA A GENERACIÓN DE HIDRURO Y

FLUORESCENCIA ATÓMICA (HPLC-HG-AFS).

INTRODUCCIÓN

La aparición de arsénico en los alimentos ha recibido preocupación en todo el

mundo durante los últimos años debido a su toxicidad y efectos adversos para
la salud. Se sabe que es carcinógeno humano y puede causar piel y cáncer de
vejiga. El arsénico inorgánico (arsenito y arseniato) se encuentran comúnmente
en agua subterránea y también se encuentran como las especies
predominantes en algunos alimentos como el arroz.Se requiere un monitoreo
confiable de los niveles de arsénico inorgánico en las muestras de alimentos
para evaluar su impacto en la salud humana.

Se desarrolló un método de extracción simple para la extracción de especies

de arsénico en arroz que resultó ser el más adecuado debido a especies de
arsénico tales como As (III), As (V), DMA y MMA permanecer intacto en los
medios. En esta nota de aplicación, el análisis de especiación de los anteriores
la especie mencionada se basó en una cromatografía líquida de intercambio
aniónico acoplada con hidruro generación de espectrometría de fluorescencia
atómica. Un material de referencia (harina de arroz NIST SRM 1568a) fue
utilizado para la cuantificación y especiación. Las recuperaciones de arsénico
inorgánico y DMA fueron encontrado para ser casi el 100%.

PREPARACIÓN DE LA MUESTRA

Se extrajo una muestra molida (0,5-1,0 g) con 15 ml de ácido nítrico 0,28 M. La

mezcla se dejó reposar durante 2 horas a 90ºC en un vial de vidrio tapado de
25 ml. El extracto se diluyó al volumen con agua desionizada y el sobrenadante
se filtró a través de un filtro de jeringa de nailon de 0,45 μm antes del análisis
mediante HPLC-HG-AFS. Todas las muestras se analizaron usando HPLC de
intercambio aniónico acoplado con espectrometría de fluorescencia atómica de
generación de hidruros usando el sistema PSA Millennium Excalibur.

El instrumento utilizó 0.7% de NaBH4 en 0.1m de NaOH como solución

reductora y 10% v / v de HCl como reactivo en blanco. La fase móvil utilizada
para la separación es 20 mM de tampón NaH2PO4 - Na2HPO4 de pH 6,2.

ESPECIACIÓN DE ARSÉNICO

El método analítico de especiación implica el acoplamiento de un sistema IC

comercialmente disponible con un PSA Millennium Excalibur. El software
SAMS se usó para controlar Millennium Excalibur, así como para la
recopilación de datos. La configuración del método utilizada para Millennium
Excalibur se describe en la figura 1.

Figura 1. Configuración de métodos del sistema Millennium Excalibur.

Figura 2.Diagrama esquemático del sistema HPLC-HG-AFS para la

especiación de arsénico.

La Figura 2. muestra un diagrama esquemático del sistema. Se inyectaron 200

microlitros de solución de muestra en una columna de intercambio aniónico
fuerte. Se usó un programa isocrático para separar la especie. A medida que la
especie eluye de la columna, se mezclan con una corriente de ácido clorhídrico
y NaBH4 / NaOH para formar hidruros volátiles que se eliminan del separador
de gas líquido en una corriente de argón. Esta corriente fluye a través de una
membrana PermapureTM para eliminar la humedad y luego al detector. Aquí
una llama de difusión de hidrógeno, alimentada por el exceso de hidrógeno
producido en la etapa de generación de hidruro, convierte los hidruros en
átomos de arsénico de estado fundamental libres. Luego, estos átomos son
excitados por una lámpara de cátodo hueco de descarga potenciada con
arsénico, y luego emiten fluorescencia. La fluorescencia fue detectada por un
tubo fotomultiplicador. La separación y detección de cuatro especies de
arsénico se lleva a cabo en menos de 10 minutos.
En el NIST 1568a solo se encontraron especies inorgánicas y de DMA. La
Figura 3 muestra inyecciones de muestras superpuestas con estándares
combinados de arsénico de 10 ng ml-1. Las especies en muestras reales se
identifican en función de sus tiempos de retención. La precisión para las dos
especies se encontró por debajo del 5% de RSD, y los límites de detección
para As (V) y DMA están por debajo de 0.1 ng ml-1. Las condiciones
cromatográficas y químicas se resumen en la Tabla 2. Los resultados de la
especiación con arsénico también se muestran en la Tabla 1. En general, el
valor total de arsénico inorgánico es suficiente para fines de evaluación de la
salud y el riesgo.

Tabla 1. Resultados de la especiación con arsénico en muestras de arroz (ng

g-1).
Figura 3. Cromatograma de 10 ng ml-1 de patrones combinados de arsénico y
extracto de arroz.

CONCLUSIONES

Una de las principales ventajas de la fluorescencia atómica es la sensibilidad y

el alcance lineal que ofrece. Estos hechos, junto con la facilidad con la que se
puede acoplar a un sistema IC, significa que es un método simple, confiable y
de bajo costo para llevar a cabo la especiación con arsénico. El costo de
funcionamiento del sistema y las inversiones de capital es significativamente
menor en comparación con el uso de ICP-MS. La separación de cuatro
especies de Arsénico en el arroz se puede llevar a cabo muy rápidamente con
la separación de la línea base. El AFS se puede usar con otros métodos de
extracción y estos están en desarrollo continuo en PSA. Para obtener más
información sobre este método y las extracciones requeridas, contáctese con P
S Analytical.