2) RESUMEN DE LA LECTURA MUERTE DE VENADOS: El estudio de un caso que

ilustra el uso de la química analítica para resolver un problema de toxicología.

La química analítica es un instrumento muy poderoso para la investigación ambiental. En este

recuadro se describe el estudio de un caso en el cual el análisis químico cuantitativo se utilizo
para determinar el agente responsable de la muerte de un gran numero de venados cola blanca
en una población de venados que habita en una reserva de vida silvestre de un parque
nacional en el área de Kentucky, estados unidos. Se empieza describiendo el problema y
posteriormente se muestra la manera en la que se utilizaron los pasos ilustrados, para resolver
el problema analítico. Este estudio del caso muestra la manera en la que se puede usar el
análisis químico en un contexto muy amplio como parte del sistema de control por
retroalimentación.

PROBLEMA
El incidente comenzó cuando un guardabosque encontró muerto a un venado cola blanca
cerca de un estanque en terrenos del área recreativa nacional de los lagos en el oeste de
Kentucky. El guardabosque y el químico inspeccionaron cuidadosamente el área donde el
cadáver de un venado había sido encontrado. Unos días después, el guardabosque encontró a
otros dos venados muertos en el área cercana. El químico fue llamado al sitio de las muertes,
donde el guardabosques subió el cuerpo de uno de los venados a la cajuela de un camión para
transportarlo al laboratorio de diagnostico veterinario. Los investigadores notaron que el
pasto que rodeaba a los postes de luz cercanos estaba marchito y descolorido. Especularon
que un herbicida había sido utilizado en el pasto. Un ingrediente común en los herbicidas es
el arsénico en una o varias formas químicas distintas que incluyen al trióxido de arsénico,
arsénico de sodio, metanoarsenato monosódico y metanoarsenato disódico. El ultimo
compuesto es la sal disódica de ácido metano arsénico, CH 3AsO (OH)2, el cual es altamente
soluble en agua y por lo tanto se usa como componente activo en muchos herbicidas. La
actividad herbicida del metanoarsenato disódico se debe a su alta reactividad con los grupos
sulfhídrilo (S-H) presentes en el aminoácido cisteína. Cuando las cisteínas en las enzimas
vegetales reaccionan con compuestos de arsénico, la función enzimática se inhibe y la planta
muere por casualidad. Desafortunadamente, en animales los compuestos de arsénico tienen
efectos químicos similares.

SELECCIÓN DE UN METODO
En este método, el arsénico se destila como arsina, AsH3, y posteriormente se determina su
concentración por métodos colorimétricos.

PROCESAMIENTO DE LAS MUESTRAS

Obtención de muestras representativas: De vuelta al laboratorio, se hizo la necropsia del
venado y se extrajeron sus riñones para analizarlos. Se escogieron los riñones porque el
supuesto agente patógeno (arsénico) se elimina rápidamente del animal a través del tracto
urinario.
Preparación de la muestra para el laboratorio: Cada riñón se cortó en pedazos y fue
homogeneizado en una licuadora de alta velocidad. Este paso sirvió para reducir el tamaño de
las muestras de tejido y para homogeneizar la muestra resultante.

Definición de las muestras replica: Tres muestras de 10 gramos de riñón de cada venado se
colocaron en un crisol de porcelana. Estas muestras sirvieron como replicas para el análisis.

DISOLUCION DE LAS MUESTRAS

Para obtener una disolución acuosa para el análisis, fue necesario convertir la matriz orgánica
de la muestra en dióxido de carbono y agua, para lo que se uso un proceso de incineración
seca. La incineración seca sirvió para liberar al analito de la muestra orgánica y convertirlo a
pentóxido de arsénico. La muestra sólida y seca dentro de cada crisol se disolvió en HCL
diluido, para convertir el As2O5 a H3AsO4 soluble.

ELIMINACION DE INTERFERENCIAS
El arsénico puede separarse de otras sustancias que pueden interferir en el análisis
convirtiéndolo a arsina, AsH3: un gas tóxico e incoloro que se forma cuando una disolución
de H3AsO3 se trata con zinc. Las disoluciones preparadas a partir de las muestras
provenientes del venado y del pasto se combinaron con Sn2+ y una pequeña cantidad del ion
yoduro para catalizar la reducción de H3AsO4 a H3AsO3 de acuerdo con la siguiente reacción:
H3AsO4 + SnCl2 + 2HCl → H3AsO3 + SnCl4 + H2O
La arsina este es un gas extremadamente toxico, incoloro y con un desagradable olor a ajo.
Los métodos analíticos que involucran la generación de arsina deben ser llevados a cabo con
mucha precaución y con una ventilación adecuada.
El H3AsO3 se convirtió entonces a AsH3 por la adición de zinc metálico, como se muestra a
continuación:
H3AsO3 + 3Zn + 6HCl → AsH3(g) + 3ZnCl2 +3H2O
la reacción completa se llevo a cabo en matraces equipados con un tapón acoplado a un tubo
de salida, de manera que la arsina pudiera ser recolectada en la disolución adsorbente. Este
arreglo aseguraba que las interferencias se quedaran en el matraz y que únicamente la arsina
fuera recolectada en contenedores transparentes especiales llamados cubetas.

MEDICION DE LA CANTIDAD DE ANALITO

La cantidad de arsénico en cada muestra se determinó midiendo la intensidad del rojo que
apareció en las cubetas, utilizando un instrumento llamado espectrofotómetro. Un
espectrofotómetro provee un número llamado absorbancia, la cual es directamente
proporcional a la intensidad del color. La intensidad del color es proporcional, a su vez, a la
concentración de la especie química responsable del color. Para usar la absorbancia con fines
analíticos, se debe generar una curva de calibración midiendo la absorbancia de varias
disoluciones que contienen concentraciones conocidas del analito.
CALCULO DE LA CONCENTRACION
las absorbancias de las disoluciones estándar que contienen concentraciones conocidas de
arsénico se grafican para producir una curva de calibración. La intensidad del color de cada
disolución se representa por su absorbancia, la cual se grafica en el eje vertical de la curva de
calibración. La concentración de arsénico en cada disolución estándar corresponde a las
líneas verticales en la cuadrícula de la curva de calibración, como se muestra. Esta curva se
usa entonces para determinar la concentración de las dos disoluciones de concentración
desconocida en la derecha. Primero se buscan las absorbancias de las disoluciones
desconocidas en el eje de absorbancia de la gráfica, para después buscar la concentración a la
que corresponden dichas absorbancias en el eje de las concentraciones. Las líneas que van de
las cubetas a la curva de calibración muestran que la concentración de arsénico en las dos
muestras provenientes de los venados era de 16 y 22 ppm, respectivamente. Los
investigadores concluyeron que la causa probable de la muerte de los venados fue la ingesta
de pasto envenenado.

ESTIMACION DE CONFIABILIDAD DE LOS DATOS

Se calculó el promedio de las absorbancias para cada disolución estándar de arsénico y para
las muestras provenientes de los venados. El promedio de absorbancia de las réplicas es una
medida más confiable de la concentración de arsénico que la de una sola medición. El análisis
de mínimos cuadrados de los datos estándares. Se usó para encontrar la mejor línea recta que
se ajusta a los puntos y se usó también para calcular las concentraciones de las muestras
desconocidas, así como sus incertidumbres estadísticas y los límites de confianza.

CONCLUSION
En este análisis, la formación de un compuesto altamente colorido producto de la reacción
sirvió tanto para confirmar la probable presencia de arsénico como para brindar una
estimación confiable de la concentración de este elemento en el venado y en el pasto.
Basándose sobre estos resultados, los investigadores recomendaron que se suspendiera el uso
de herbicidas con arsénico, para proteger a los venados y a otros animales que pudieran
ingerir plantas ahí.