FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

PROCESO PLAN CURRICULAR

TAREAS DE ANÁLISIS DE ALIMENTOS I
Código: FCQ-P05-F05; Versión: 01; Fecha: 15 de enero de 2017

Asignatura: Análisis de alimentos II NOTA:

Número de tarea: 09
Fecha de envió: 29/08/2022 Fecha de entrega: 04/09/2022
Nombre: Grijalva Chávez Karen Denisse

U4. BEBIDAS ALCOHOLICAS

- Escoja un tipo de bebida alcohólica y de acuerdo a las normas INEN que correspondan
señale los análisis que deben realizarse.

ALCOHOL, FRACCIÓN VOLUMÉTRICA NTE INEN 340

Esta norma describe el método para determinar el contenido de alcohol etílico en bebidas
alcohólicas destiladas, cocteles, bebidas alcohólicas mixtas, aperitivos y licores. El
contenido de alcohol etílico es la relación entre el volumen del alcohol etílico (etanol)
contenido en una mezcla hidroalcohólica, medido a temperatura de 20 °C y el volumen total
de la mezcla medido a la misma temperatura, expresado en fracción volumétrica (%). El
método consiste en efectuar una destilación simple de la bebida alcohólica y determinar en
el destilado el contenido de alcohol etílico a partir de la lectura dada por un alcoholímetro.
(INEN, 2016)

METANOL NTE INEN 2014

El metanol contenido en la muestra es oxidado a metanal (formaldehído) por acción del
permanganato de potasio en presencia de ácido fosfórico. El metanal reacciona en un medio
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ácido en un medio ácido con ácido cromotrópico, formando un compuesto de color púrpura.
La absorbancia de la solución púrpura obtenida se determina a 575 nm. (INEN, 2015)

FURFURAL NTE INEN 2014

Esta norma tiene por objeto establecer el método para determinar el contenido de furfural
en bebidas alcohólicas. Determinar el contenido de furfural mediante el uso de
espectrofotómetro. Utilizando una curva de calibración previamente preparada. (INEN, 1978)

ALCOHOLES SUPERIORES NTE INEN 2014

Esta norma tiene por objeto establecer el método para determinar el contenido de alcoholes
superiores en bebidas alcohólicas. Determinar contenido de alcoholes superiores mediante
la espectrofotometría. (INEN, 1978)

- Indique 3 metodologías de cuantificación de metanol.

CROMATOGRAFÍA DE GASES
La GC, en concreto, se considera un método preciso y fiable para determinar componentes
volátiles de bajo peso molecular y se ha utilizado ampliamente en laboratorios forenses y de
investigación. Lo más destacado de esta técnica es su capacidad para la separación y
cuantificación eficientes de analitos presentes en matrices complejas.Sin embargo, tienen la
desventaja de requerir un procesamiento extenso y lento de las muestras recuperadas de
los bioprocesos. Estas muestras a menudo tienden a ser demasiado complejas o contienen
componentes que son dañinos para ser inyectados en el instrumento analítico. La mayoría
de los P. pastorisla fermentación se realiza en medio de sal basal (BSM) o en medio de
glicerol/metanol mínimo tamponado (BMG/BMM). El medio de crecimiento a menudo se
complementa con metanol a través de la alimentación exponencial para garantizar la
disponibilidad suficiente del sustrato para la inducción de la proteína. Las muestras
recuperadas de dicho proceso incluyen varios metabolitos que se secretan en los medios,
lo que puede interferir con el análisis cromatográfico. Por lo tanto, el paso de procesamiento
es crucial para optimizar el paso de cuantificación, así como para prolongar la vida útil de la
columna. Para compuestos específicos, un paso adicional, como la derivatización, ayuda a
aumentar la volatilidad y el rendimiento cromatográfico. Esta técnica se puede utilizar para
el análisis de compuestos tales como alcoholes, ácidos, y aminas que son difíciles de
analizar debido a la presencia de hidrógeno reactivo. Un inconveniente importante del uso
de esta técnica son los posibles errores que surgen de la conversión química incompleta del
analito. Además, una conversión química a menudo implica reactivos que son caros (Joseph,
Akkermans & Van Impe, 2022)

ESPECTROSCOPÍA UV- VISIBLE

La quimiometría es fundamental cuando se pretende estimar la concentración de cualquier
especie química, como el metanol, de forma indirecta a partir de espectros. Se utilizan
métodos de calibración como: la Regresión por Componentes Principales (PCR), la
Regresión por Mínimos Cuadrados Principales (PLS), Máquinas de Soporte Vectorial para
Regresión. (SVR) y técnicas de minería de datos en general. En las industrias roneras la
determinación de metanol es engorrosa e imprecisa pues no se cuenta con cromatógrafo de
gases y es por eso que un modelo multivariante elaborado a partir de espectros ultravioleta
visible (UV-Visible) sería de gran utilidad, ya que si existen espectrofotómetros en estos
centros y el uso del modelo multivariante da la posibilidad de estimar la concentración de
metanol de forma rápida. (Zayas, Lorenzo, Fragoso & Scott, 2017)

MÉTODO ENZIMATICO PARA LA CUANTIFICACIÓN DE METANOL

En los métodos enzimáticos de análisis de metanol solo o en combinación con etanol, la
alcohol oxidasa se usa generalmente para convertir los alcoholes en sus aldehídos
correspondientes. La reacción requiere oxígeno y hidrógeno produce peróxido. El
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formaldehído es más reactivo que el acetaldehído y puede determinarse química o

enzimáticamente con un grado relativamente alto de especificidad. Métodos químicos que
tienen aplicado para determinar el formaldehído incluyen su condensación con acetil
acetona y amoníaco, un enzimático procedimiento se basa en la oxidación de formaldehído
a fórmico ácido por la acción de formaldehído deshidrogenasa en presencia de NAD+. El
NADH producido se puede medir directamente por absorbancia a 340 nm, fluorescencia a
460 nm excitado a 340 nm o indirectamente, por ejemplo, después de la reducción
dependiente de NADH de una sal de tetrazolio a formazán coloreado o después de la
reducción de oxígeno a peróxido, que luego se determina por fluorometría. Varios kits de
prueba están disponibles comercialmente para evaluar cualitativamente la presencia o
ausencia de metanol . En un esfuerzo por desarrollar una versión de fluorescencia del
ensayo cuantitativo de metanol, consideramos como reacción indicadora la reducción de
resazurina azul a rojo, altamente fluorescente esorufina por NADH. Esta reacción, mediada
por diáforas monitorea continuamente las actividades de NAD+ deshidrogenasas
dependientes. Luego adelante, las reacciones se realizaron como base de un método para
estimar la concentración de formaldehído Los sistemas de diáforas-resazurina desarrollados
hasta ahora para el análisis de sustratos emplea principalmente la enzima de mamíferos o
el de la bacteria Clostridium Kluivert. Nuestro nuevo ensayo de metanol descrito aquí es
cinético en su naturaleza, combina las reacciones enzimáticas y utiliza otra bacteria enzima,
FerB, que ha demostrado una actividad específica superior frente a la resazurina (Kučera &
Sedláček, 2017).

BIBLIOGRAFÍA:
− INEN. (2016). Normalización - buzón de normas. Obtenido de BEBIDAS ALCOHÓLICAS.
VODKA NTE INEN 345. REQUISITOS:
https://www.normalizacion.gob.ec/buzon/normas/nte_inen_369-5.pdf
− INEN. (2015). Normalización - Buzón de normas. Obtenido de BEBIDAS ALCOHÓLICAS.
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https://www.normalizacion.gob.ec/buzon/normas/nte_inen_347-1.pdf
− INEN. (1978). Instituto Ecuatoriano de Normalización. Obtenido de BEBIDAS
ALCOHOLICAS DETERMINACION DE FURFURAL :
https://www.normalizacion.gob.ec/buzon/normas/nte_inen_344.pdf
− NTE INEN. (1978). Instituto Ecuatoriano de Normalización. Obtenido de BEBIDAS
ALCOHOLICAS DETERMINACION DE ALCOHOLES SUPERIORES:
https://www.normalizacion.gob.ec/buzon/normas/nte_inen_345.pdf
− INEN. (2016). Normalización - buzón de normas. Obtenido de BEBIDAS ALCOHÓLICAS.
DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO DE ALCOHOL ETÍLICO. MÉTODO DEL
ALCOHOLÍMETRO DE VIDRIO. REQUISITOS:
https://www.normalizacion.gob.ec/buzon/normas/nte_inen_340-2.pdf
− Joseph, J. A., Akkermans, S., & Van Impe, J. F. (2022). Processing Method for the
Quantification of Methanol and Ethanol from Bioreactor Samples Using Gas
Chromatography–Flame Ionization Detection. ACS omega, 7(28), 24121-24133.
− Kučera, I., & Sedláček, V. (2017). An enzymatic method for methanol quantification in
methanol/ethanol mixtures with a microtiter plate fluorometer. Food Analytical Methods,
10(5), 1301-1307.
− Zayas-Ruiz, E. P., Lorenzo-Izquierdo, M., Fragoso-Concepción, F. O., & Scott-del Sol, D. D.
(2017). Modelos de calibración multivariada para la determinación de metanol en rones
cubanos a partir de espectroscopía UV-visible. ICIDCA. Sobre los Derivados de la Caña de
Azúcar, 51(3), 46-49.