Biotecnología Ambiental

Rogelio A. Ferreiro Medina

Apuntes de clase
Métodos directos:

Determinación de peso seco

El peso seco (contenido de sólidos) de las células bacterianas que se encuentran en una
suspensión se obtiene por el secado de un volumen en un horno a 105°C hasta peso constante.

Es útil para grandes volúmenes. La desventaja de este método es que componentes volátiles de la
célula pueden perderse por el secado y puede existir alguna degradación. La muestra seca puede
recobrar humedad durante el pesado, principalmente si el ambiente tiene una humedad relativa
alta.

Recuento de células totales

 Recuento directo mediante contadores electrónicos

Los contadores electrónicos diseñados para contar glóbulos rojos se pueden usar para este fin.
Esencialmente un contador electrónico consta de dos cámaras que están separadas por un
material que no conduce la corriente, en este material no conductor hay un orificio de un tamaño
similar al de las células a ser contadas.

Cada cámara contiene un electrodo, la suspensión de células a ser contadas se coloca en una de
las cámaras y se aplica presión para que las células pasen a la otra cámara a través del orificio,
cada vez que una célula pasa a través del orificio ocasiona un cambio en la conductividad eléctrica
que es registrado por un dispositivo electrónico y de esta manera el contador indica el número de
células en esa suspensión.

 Recuento directo al microscopio

Se determina directamente el número de células contándolas al microscopio con la ayuda de

cámaras especiales que albergan un volumen conocido de líquido (Hemocitómetros, Cámara de
Petroff- Hausser).

Método del recuento en placa

Es uno de los métodos más utilizados para determinar cuál es el número de microorganismos
viables en un medio líquido. Cuando la concentración es baja se procede a filtrar la muestra a
través de una membrana que será pasada al medio de cultivo, en una placa de Petri.

Métodos indirectos:

Medida de la turbidez
La turbidez se determina por la densidad óptica (DO) que puede ser expresada como Absorbancia,
% de Transmitancia o Unidades Klett (UK).