Eduardo González 181474

Métodos de rompimiento celular

El rompimiento celular es una operación unitaria de gran importancia industrial. Algunos
de los productos biotecnológicos producidos a escala industrial son extracelulares y no
requieren ser extraídos de la célula. Cuando el producto de interés es intracelular una
vez realiza da la cosecha de células una operación necesaria para la liberación del
producto es el rompimiento de la célula misma.
Para estudiar la estructura y/o función de un orgánulo celular determinado, lo primero
que hay que hacer es purificarlo, es decir, separarlo del resto de los orgánelos
celulares. Para ello es necesario romper la membrana plasmática. El rompimiento
celular se realiza para obtener productos que se encuentran en el interior de las
células. La técnica de RC seleccionada determina el tamaño de los desechos y la
influencia que tendrán en las operaciones que se utilicen para su separación. A este
proceso se le denomina homogeneización y la disolución resultante es un homogenado
celular o extracto crudo. A partir del extracto crudo, combinando diversas técnicas de
separación como la centrifugación y la cromatografía, se puede purificar el orgánulo o
la macromolécula deseada.
Existen varios métodos para romper la membrana plasmática y su eficacia relativa
depende del tipo de célula que se está investigando.
La selección de una técnica depende de las características del producto. Como
resistencia a:
• Medios alcalinos
• Solventes
• Detergentes
• Enzimas
• Temperatura
• Esfuerzo de corte
También hay que tomar en cuenta para la selección de un método de ruptura celular:
• Naturaleza del producto intracelular
• Escala de la operación
• Velocidad
• Estabilidad del producto
• Pureza del producto
• Costo del método
Existen diversos tipos de mecanismos de ruptura o rompimiento celular, de los cuales
se clasifican en métodos físicos, químicos y biológicos.
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Métodos físicos: Los métodos mecánicos implican someter a las células a una

deformación en fase sólida o líquida. Estos pueden ser Métodos a pequeña escala,
como la ultrasonificación, el molido con abrasivos, homogeneizadores, etc. Al igual que
métodos a gran escala, como los homogeneizadores a alta presión y los molinos de
perlas.

Técnicas Principio Estrés sobre Costo Ejemplo

el producto
Homogenizador Las células Moderado Moderado Rompimiento
de cuchillos son rotas en de tejidos y
un mezclador células
animales
Homogenizador Las células Fuerte Moderado Tratamiento a
de alta presión son forzadas a gran escala de
pasar a través suspensión de
de un células.
pequeño
orificio,
produciendo
su ruptura por
esfuerzo de
corte
Molienda Las células moderado Barato
son rotas por
medio de una
molienda con
abrasivos
Molino de perlas Las células Fuerte Caro Rompimiento a
son trituradas gran escala
con perlas de para
acero o vidrio suspensiones
de células y
células de
plantas.
Ultrasonificació Las células Fuerte Caro Rompimiento
n son quebradas de
en una suspensiones
cavidad de células en
ultrasónica pequeña
escala.
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Métodos químicos
Dentro de los químicos se encuentra: El choque osmótico, la dilución lipídica, la digestión enzimática y el
tratamiento alcalino.

Técnicas principio Estrés sobre costo Ejemplo

el producto
Solubilización Detergentes Suave Moderado/caro
solubilizan la
membrana
Choque osmótico Ruptura osmótica Suave Barato Ruptura de
de la membrana glóbulos rojos
Disolución Solventes Moderado Barato Rompimiento
lipídica orgánicos actúan de levaduras
sobre la pared con tolueno
celular
desestabilizándola
Digestión Rompiendo por la Suave Caro Micrococcus
enzimática digestión de la lysodeikticus
pared celular Tratado con
lisozima
Tratamiento La saponificación Fuerte Barato
alcalino de los lípidos
solubiliza la
membrana
Permeabilización Permeabilizan la suave Caro Tratamiento
enzimática membrana de M.
ocasionando la lysodeikticus
ruptura de la con lisozima
célula

Métodos biológicos:
Estos métodos no son muy empleados debido a que son muy costosos.
En estos están presentes:
• Enzimas que digieren la pared celular
• Fagos
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• Agentes inhibidores de pared celular