UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS

LABORATORIO CLÍNICO E HISTOTECNOLÓGICO
ASIGNATURA: HISTOTECNOLOGíA
2020-2020
GRUPO 2

TEMA: Almacenamiento de reactivos – Tinción

Tricrómica de Masson.

INTEGRANTES:

▪ PAÚL HARO
▪ MICHELLE PROAÑO
 TINCIÓN
TRICRÓMICA
DE MASSON Esta tinción es muy útil para poner de manifiesto las fibras de
colágeno, y el conectivo en general, en comparación con células
musculares o epiteliales.

Se emplea mucho en la diagnosis de procesos tumorales. Hay muchas

variantes de esta tinción adaptadas a las necesidades particulares de
cada laboratorio.

PROCEDIMIENTO DE TINCIÓN: https://vimeo.com/195673907

 CONTENIDO DEL KIT

Reactivo A: Hematoxilina sol. A (Weigert)........ 30 ml

Reactivo B: Hematoxilina sol. B (Weigert) ....... 30 ml
Reactivo C: Ácido pícrico sol. alcohólica........... 30 ml
Reactivo D: Escarlata de Biebrich sol. ............... 30 ml
Reactivo E: Ácido Fosfomolíbdico sol. ............... 30 ml
Reactivo F: Azul anilina sol .................................... 30 ml

ESTABILIDAD Y ALMACENAJE El Kit es estable durante 10

meses.
Almacenar el producto
entre +15 y + 25ºC
 REACTIVO A Y B: HEMATOXILINA DE WEIGERT Hematoxilina de Weigert o
hematoxilina férrica; se utiliza para
la tinción de núcleos cuando se
usa a continuación una sustancia
ácida.

La hematoxilina tiene que ser oxidada a

hemateína antes de ser usada como
colorante y combinada con un metal
 La hematoxilina se aplica junto con un que actuará como mordiente.
mordiente que contiene aluminio potásico o
aluminio amónico y por ello no se elimina en
la solución ácida posterior. La oxidación puede ser química o
por el oxígeno mediante el
envejecimiento de la solución
La hematoxilina y el mordiente se almacenan por Es el producto oxidado de la
separado y se aplican al tejido conjuntamente. El hematoxilina, la hemateína, la que
color resultante es negro o púrpura muy oscuro. Se realmente se adhiere a las
emplea en soluciones tricrómicas sustancias ácidas del tejido.
Fundamentalmente tiñe el núcleo.
Solución A (Hematoxilina)
Hematoxilina cristalizada
... 1 g
Etanol 960 ... 100 ml
Solución B (Cloruro de hierro)
Cloruro de hierro (III) ... 1.16 g
Ácido clorhídrico (25%) ... 1 ml
Agua destilada ... 99 ml
CONSEJOS
 Los dos componentes se almacenan por
separado y se unen cuando se va a realizar la
tinción. Se añade 100 ml de la solución A a
otros 100 ml de la solución B, y se mezcla la
solución resultante. El tiempo de tinción
depende de la técnica y tejido usado.
Tras la tinción con la solución de hematoxilina, y tras
lavar en agua corriente abundantemente (30 min),
se pueden incubar las secciones en hidrógeno
carbonato de sodio (bicarbonato de sodio) al 01 %
en agua destilada para que los núcleos adquieran
un color azulado..
El tiempo para conseguir el color deseado
depende de la coloración que queramos
conseguir, lo cual se puede controlar
mediante la observación de las secciones al
microscopio
REACTIVO C: ACIDO PÍCRICO
 Las sales del tipo picrato coagulan las
proteínas de los tejidos. Preserva bien
la estructura celular, no produce
retracciones cuando el tiempo de
fijación es óptimo, preserva bien
glucógeno y lípidos. Es un buen fijador
para tinciones generales puesto que
tiene efecto mordiente y favorece la
unión de los colorantes. Se suele usar
combinado con otros fijadores.
Ejemplos: Bouin.
El ácido pícrico o Trinitrofenol es, por lejos, uno de los productos
químicos más peligrosos en uso. Clasificado como un sólido
inflamable cuando el contenido de agua es superior al 30% el
agua y como explosivo clase A con un contenido de agua
menor al 30% , tiene algunas propiedades muy interesantes.

Es explosivo pero también sensible al golpe, calor y fricción. De

hecho, si 2 kg. caen desde una altura de 36 cm sobre ácido pícrico
sólido, la detonación ocurre con una velocidad y fuerza superior al
del trinitrotolueno (TNT)

El ácido pícrico es tóxico por todas las rutas de

exposición, también es irritante a la piel, y puede
producir productos tóxicos cuando se descompone
Prevención
 Las situaciones antes descritas pueden ser fácilmente
prevenidas estableciendo un inventario de todos los
productos químicos del laboratorio. El inventario debe
incluir identificación completa del producto, la cantidad
disponible, la fecha de vencimiento, cuando es
aplicable, y notas para cada producto.

Esta lista debe actualizarse regularmente y eliminar

los productos químicos vencidos según la
legislación ambiental vigente. La vida útil del ácido
pícrico puede extenderse agregando agua al
recipiente en forma periódica. Esto evita que el
producto se seque e inhibe la formación de
picratos.
 Algunos fabricantes recomiendan que el ácido pícrico se
elimine después de 2 años y propone las siguientes pautas del
almacenamiento:

• Guarde el producto en un lugar seco,

fresco, lejos de fuentes de calor o la llama
abierta.
• Aisle el producto de materiales
organicos y metales pesados.
• Inspeccione las botellas y agregue
agua cada 6 meses (si es necesario).
• Cada 3 meses agite suavemente,
mediante una rotación, las botellas para
distribuir agua.
REACTIVO D: Solución de Escarlata de Biebrich

 La fucsina escarlata, fucsina ácida, escarlata de Briebrich: Es una mezcla basada en la

fucsina, colorante de color magenta que se usa normalmente en tinciones tricrómicas para
teñir: citoplasma, queratina, fibras musculares, granulaciones acidófilas.

IDENTIFICACIÓN DEL PRODUCTO:

NOMBRE: Solución Escarlata de Biebrich
USO RECOMENDADO: Producto químico de laboratorio
uso analítico.
PROVEEDOR:
TELÉFONO DE EMERGENCIA:

INDICACIONES DE PELIGRO: Nocivo en caso de ingestión, nocivo por el contacto con la

piel, nocivo si se inhala.
CLASIFICACION DE PELIGRO: Cancerígeno
CLASE: Toxicidad aguda por vía oral, toxicidad aguda por vía cutánea, toxicidad aguda
por inhalación.
CATEGORIA DE PELIGRO: 4
  No comer, beber o fumar mientras se manipula este producto.
 Lavarse cuidadosamente después de la manipulación.
PREVENCIÓN  Usar guantes, ropa de protección y equipo de protección para ojos
y cara.
 Evitar respirar nieblas y vapores.
 Utilizar sólo al aire libre o en un lugar bien ventilado.

EN CASO DE INGESTIÓN:
Llamar a un centro de toxicología o a un médico si la persona se
encuentra mal. Enjuagarse la boca.

EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL: Llamar a un centro de

toxicología o a un médico si la persona se encuentra mal.
Medidas específicas.
Lavar con abundante agua y jabón.
Lavar la ropa contaminada antes de volverla a usar.

EN CASO DE INHALACIÓN: Llamar a un centro de toxicología o a

un médico si la persona se encuentra mal. Transportar la víctima
al aire libre.
 TEMPERATURA DE ALMACENAJE: <40°C
MANEJO Y PERIODO DE CADUCIDAD: 2 años en condiciones adecuadas de
ALMACENAMIENTO almacenamiento.
SENSIBILIDAD ESPECIAL: Ninguna conocida.

 Almacénese en un lugar fresco y seco.

 Permita el flujo de aire alrededor de los contenedores y evite chispas o
fuentes de ignición.
 No coma, beba o fume cuando esté utilizando este producto.
 No se transporte ni almacene junto a productos alimenticios, ropa o
forrajes.
 Manténgase fuera del alcance de los niños, mujeres embarazadas, en
lactancia y animales domésticos.
 Lávese las manos después de utilizar el producto y antes de consumir
alimentos. No almacene en casas habitación.
 No use el producto sin el equipo de protección adecuado.
 Los menores de 18 años no deben manejar este producto. Al final de la
jornada de trabajo báñese y póngase ropa limpia.
 REACTIVO E: Ácido Fosfomolíbdico
 Es un compuesto químico de color amarillo verdoso que se disuelve libremente en agua y
disolventes orgánicos polares como el etanol . Se utiliza como colorante en histología para
teñir muestras, actúa como un mordiente para unir el tinte al tejido o que, alternativamente, se
une al tejido bloqueándolo para las moléculas del tinte.

IDENTIFICACIÓN DEL PRODUCTO:

NOMBRE: Ácido Fosfomolíbdico o Ácido Molíbdofosfórico.
FAMILIA QUÍMICA: Ácidos Inorgánicos.
USO RECOMENDADO: Producto químico de laboratorio
uso analítico.
PROVEEDOR:
TELÉFONO DE EMERGENCIA:

PELIGROS PARA LA SALUD:

ADVERTENCIA
H315: Corrosión/irritación cutánea -
P210: Mantener alejado de fuentes de calor.
Categoría 2 - Provoca irritación cutánea.
P220: Mantener o almacenar alejado de la
H319: Daño/irritación ocular grave -
ropa/materiales combustibles.
Categoría 1 - Provoca irritación ocular
P221: Tomar todas las precauciones necesarias
grave.
para no mezclar con materias combustibles.
H335: Toxicidad sistémica específica de
P260: No respirar el polvo o la niebla.
órganos blanco (exposición única) -
P264: Lavarse la piel concienzudamente tras la
Categoría 3 - Puede irritar las vías
manipulación.
respiratorias.
  Leer instrucciones y precauciones antes de manipular el producto.
Conservar únicamente en el recipiente original. Lavarse después de la
PREVENCIÓN

manipulación.
 No respirar humos/gases/nieblas/vapores/aerosoles.
 Utilizar sólo al aire libre o en un lugar ventilado.
 Usar guantes/ropa protectora/equipo de protección para los ojos/la cara.

CONTACTO CON LA PIEL: Lave la piel inmediatamente con agua

abundante por lo menos 15 minutos. Quítese la ropa y
zapatos contaminados. Busque atención médica. Lave la ropa antes de
usarla nuevamente. Limpie los zapatos completamente antes de usarlos
de nuevo.

INHALACIÓN: Si se inhalará, retirarse al aire fresco. Si la persona no respira, dar respiración artificial. Si la
respiración fuera difícil, dar oxígeno. Busque atención médica.

CONTACTO CON LOS OJOS: Lave los ojos inmediatamente con abundante agua, por lo menos 15 minutos,
elevando los párpados superior e inferior ocasionalmente. Busque atención médica.

INGESTIÓN: Si se ingiere, dar a beber grandes cantidades de agua o leche. Puede ocurrir vómito espontáneo,
pero NO LO INDUZCA. Si ocurre vómito, mantenga la cabeza más abajo que las caderas para evitar la
aspiración a los pulmones. Nunca administre nada por la boca a una persona inconsciente .
 MANEJO Y TEMPERATURA DE ALMACENAJE: 15 - 25 °C.
ALMACENAMIENTO: Mantener el envase cerrado herméticamente.
ALMACENAMIENTO Consérvese únicamente en el recipiente de origen, en lugar fresco
y ventilado. Mantenga fuera de la luz solar directa, lejos del calor y
materiales incompatibles.

 MANIPULACIÓN:
 Utilizar un equipo de protección, según corresponda. Evitar el
contacto en la piel, ojos y la ropa.
 Lavarse las manos a fondo después de manipular el producto.
 No comer, beber y fumar durante la utilización del producto.
 Quitarse la ropa y el equipo de protección personal contaminados al
abandonar el área de trabajo o al ingresar a áreas destinadas al
consumo de alimentos.
 Manipule los envases vacíos con cuidado porque los residuos son
tóxicos.
REACTIVO F: Azul de Anilina

 Es muy útil en tinciones tricrómicas para poner de manifiesto las fibras de

colágeno, y el conectivo en general.

IDENTIFICACIÓN DEL PRODUCTO:

NOMBRE: Azul de Anilina (Soluble en agua). PICTOGRAMAS DE
SINÓNIMOS: Azul agua I (FIAT), azul algodón, azul ópalo, PELIGROSIDAD:
azul Lyon, azul marino.
FAMILIA QUÍMICA: Colorantes e indicadores.
USO RECOMENDADO: Para usos de laboratorio, análisis,
investigación y química fina.
PROVEEDOR:
PALABRA DE ADVERTENCIA:
TELÉFONO DE EMERGENCIA:
Atención
INDICACIONES DE PELIGRO:
H315: Provoca irritación
cutánea.
H317: Puede provocar una
reacción alérgica en la piel.
H319: Provoca irritación ocular
grave.
  Evitar respirar el polvo/ el humo/ el gas/ la niebla/ los vapores/ el
aerosol.
PREVENCIÓN  Lavarse la piel concienzudamente después de la manipulación.
 No comer, beber o fumar mientras se manipula este No dispersar
en medio ambiente.
 Usar guantes/ ropa de protección/ equipo de protección para la
cara/ ojos.

EN CASO DE INGESTIÓN:
Llamar a un centro de toxicología/médico si la persona se
encuentra mal.
Enjuagarse la boca.

EN CASO DE CONTACTO CON LOS OJOS:

Enjuagar con agua cuidadosamente durante varios minutos.
Quitar las lentes de contacto, si lleva.
Seguir enjuagando.
Si persiste la irritación ocular: Consultar a un médico.
 MANEJO Y TEMPERATURA DE ALMACENAJE: Temperatura ambiente a 15 - 25
°C.
ALMACENAMIENTO ALMACENAMIENTO: Almacenar en un recipiente que sea
apropiado y proteja del daño físico. Mantenga fuera de la luz
solar directa, lejos del calor y materiales incompatibles. Mantener
el producto en su envase original.

 MANEJO:
 Utilizar un equipo de protección, según corresponda.
 Lavarse las manos a fondo después de manipular el producto.
 Manipule los envases vacíos con cuidado porque los residuos pueden
ser tóxicos.
 En caso de derrame, aísle el área y evite la entrada de personal
innecesario y no protegido.
 No elimine en los drenajes ni a cursos de agua o suelo.
 Contenga y recupere en cuanto sea posible, colóquelo en un
recipiente adecuado, etiquetado claramente para desechos
químicos.
ERRORES Y RECOMENDACIONES EN
LA TINCIÓN TRICRÓMICA DE
MASSON
 https://www.merckmillipore.com/INTERSHOP/web/WFS/Merck-CO-
Site/es_ES/-/COP/ShowDocument-File?ProductSKU=MDA_CHEM-
100485&DocumentId=200703.321.ProNet&DocumentType=PI&Langu
age=ES&Country=NF&Origin=PDP
BIBLIOGRAFÍA

ALPIZAR, M. (2015). ESCARLATA DE BIEBRICH. HOJA DE SEGURIDAD. SIFATEC.

RECUPERADO DE: HTTPS://SIFATEC.COM.MX/WP-
CONTENT/UPLOADS/2015/09/ESCARLATA-480-CE-ILOVEPDF-COMPRESSED.PDF
QUÍMICA SUASTES, SA. (2016). ÁCIDO FOSFOMOLÍBDICO. HOJA DE SEGURIDAD.
REACTIVOS MEYER. RECUPERADO DE:
HTTP://REACTIVOSMEYER.COM.MX/DATOS/PDF/REACTIVOS/HDS_0135.PDF
QUÍMICA SUASTES, SA. (2016). AZUL DE ANILINA. HOJA DE SEGURIDAD. REACTIVOS
MEYER. RECUPERADO DE:
HTTP://REACTIVOSMEYER.COM.MX/DATOS/PDF/REACTIVOS/HDS_0700.PDF