Agua, Ph y

amortiguadores

Blgo. Carlos Enrique Cubas Zúñiga M. Sc.

ccubasz@unp.edu.pe
Agua
El agua es la sustancia más abundante en los sistemas vivos y constituye el 70% o más del peso de la mayoría de
organismos. Los primeros organismos vivos aparecieron en torno al
agua.
1. Interacciones débiles en sistemas acuosos

Los enlaces de hidrógeno entre las moléculas de agua proporcionan las fuerzas cohesivas que hacen del
agua un líquido a temperatura ambiente y un sólido cristalino (hielo) con una disposición muy ordenada de
moléculas a temperaturas frías.

Las biomoléculas polares se disuelven fácilmente en agua porque pueden reemplazar las interacciones
agua-agua con interacciones agua-soluto más favorables desde el punto de vista energético. Por el
contrario, las biomoléculas apolares son poco solubles en agua porque interfieren con las interacciones
agua-agua, pero no pueden formar interacciones agua-soluto. En soluciones acuosas, las moléculas
apolares tienden a agruparse.

Los enlaces de hidrógeno y las interacciones iónicas, hidrófobas (en griego, "temerosas del agua") y de
van der Waals son individualmente débiles, pero en conjunto tienen una influencia muy significativa en
las estructuras tridimensionales de proteínas, ácidos nucleicos, polisacáridos y lípidos de membrana. .
La unión de hidrógeno le da al agua sus propiedades inusuales

El agua tiene un punto de fusión, un punto de ebullición y un calor de vaporización más altos que la mayoría de los
otros solventes comunes. Estas propiedades inusuales son consecuencia de las atracciones entre moléculas de
agua adyacentes que dan al agua líquida una gran cohesión interna.

Cuadro 01. Punto de fusión, punto de ebullición y calor de vaporización de algunos disolventes comunes
El núcleo de oxígeno atrae electrones con más fuerza que el núcleo de hidrógeno (un protón); es
decir, el oxígeno es más electronegativo.
El casi tetraédrico La disposición de los orbitales alrededor del átomo de oxígeno permite que cada molécula de
agua forme enlaces de hidrógeno con hasta cuatro moléculas de agua vecinas. En liquido agua a temperatura
ambiente y presión atmosférica, sin embargo, las moléculas de agua están desorganizadas y en movimiento
continuo, de modo que cada molécula forma enlaces de hidrógeno con un promedio de solo 3.4 otras moléculas. Soy
amable, Por otro lado, cada molécula de agua está fija en el espacio y forma enlaces de hidrógeno con un complemento
completo de cuatro otras moléculas de agua para producir una estructura reticular regular.

H 2 O (sólido) → H 2 O (líquido) ΔH = +5,9 kJ / mol

H 2 O (líquido) → H 2 O (gas) ΔH = +44.0 kJ / mol

ΔG = ΔH - TΔS
El agua forma enlaces de hidrógeno con solutos polares

Los enlaces de hidrógeno no son exclusivos del agua. Se forman fácilmente entre un átomo
electronegativo (el aceptor de hidrógeno, generalmente oxígeno o nitrógeno) y un átomo de hidrógeno
unido covalentemente a otro átomo electronegativo (el donante de hidrógeno) en la misma u otra
molécula.
El agua interactúa electrostáticamente con los solutos cargados

El agua es un solvente polar. Disuelve fácilmente la mayoría de las biomoléculas, que generalmente son
compuestos cargados o polares; compuestos que se disuelven fácilmente en agua son hidrofílico Griego,
"amante del agua"). Por el contrario, los disolventes no polares como el cloroformo y el benceno son malos
disolventes para las biomoléculas polares, pero disuelven fácilmente las que son hidrofóbico —Moléculas no
polares como lípidos y ceras.
El agua disuelve sales como el NaCl hidratando y estabilizando los iones Na + y Cl-, debilitando las
interacciones electrostáticas entre ellos y contrarrestando así su tendencia a asociarse en una red
cristalina.
Los gases no polares son poco solubles en agua

Las moléculas de los gases de importancia biológica CO 2, O 2, y N 2 son no polares. La naturaleza no

polar de estos gases y la disminución de la entropía
cuando entran en solución se combinan para hacerlos muy poco solubles en agua. Algunos organismos
tienen "proteínas transportadoras" solubles en agua (hemoglobina y
mioglobina, por ejemplo) que facilitan el transporte de O 2.
Los compuestos no polares provocan cambios energéticamente desfavorables en la estructura del agua

Cuando se mezcla agua con benceno o hexano, se forman dos fases; ningún líquido es soluble en el
otro. Los compuestos no polares como el benceno y el hexano son hidrófobos: no pueden
experimentar interacciones energéticamente favorables con las moléculas de agua e interfieren con
los enlaces de hidrógeno entre las moléculas de agua.
El cambio de energía libre para disolver un soluto apolar en agua es desfavorable: ΔG = ΔH - TΔS,
donde ΔH tiene un valor positivo, ΔS tiene un valor negativo y ΔG es positivo.

Cuando un anfipático El compuesto se

mezcla con agua, el polar, hidrofílico
región interactúa
favorablemente con el agua y tiende a
disolverse, pero la región hidrófoba no polar
tiende a evitar el contacto con el agua.
Anfipático
compuestos en agua
solución. La energía
ganado al liberar
agua inmovilizada
moléculas estabiliza el
micela.
Las fuerzas que mantienen unidas las regiones no polares de las moléculas se llaman Interacciones
hidrofóbicas. La fuerza de las interacciones hidrófobas no se debe a ninguna atracción intrínseca
entre restos no polares. Más bien, es el resultado de que el sistema logra la mayor estabilidad
termodinámica al minimizar el número de moléculas de agua ordenadas necesarias para rodear las
porciones hidrófobas de las moléculas de soluto.

La liberación de agua ordenada favorece la

formación de un complejo enzima-sustrato.
Mientras separar, ambos

fuerza de la enzima y el sustrato

moléculas de agua vecinas en una capa
ordenada.

La unión del sustrato a la enzima libera parte del

agua ordenada y el aumento resultante en la
entropía proporciona un impulso termodinámico.

hacia formación de el
complejo enzima-sustrato
Las interacciones de Van Der Waals son atracciones interatómicas débiles

Cuando dos átomos sin carga se acercan mucho, las nubes de electrones que las rodean se influyen
entre sí. Las variaciones aleatorias en las posiciones de los electrones alrededor de un núcleo
pueden crear un dipolo eléctrico transitorio, que induce un dipolo eléctrico opuesto transitorio en el
átomo cercano. Los dos dipolos se atraen débilmente entre sí, acercando los dos núcleos. Estas
atracciones débiles se llaman Interacciones de van der Waals. A medida que los dos núcleos se
acercan, sus nubes de electrones comienzan a repelerse entre sí.
Las interacciones débiles son cruciales para la estructura y función macromolecular

Las interacciones no covalentes que hemos descrito (enlaces de hidrógeno e interacciones iónicas, hidrófobas
y de van der Waals) son mucho más débiles que los enlaces covalentes. Se requiere una entrada de
aproximadamente 350 kJ de energía para romper un mol de (6 x 10 23) Enlaces simples C — C, y
aproximadamente 410 kJ para romper un mol de enlaces C — H, pero tan solo 4 kJ es suficiente para romper
un mol de interacciones típicas de van der Waals.
Las macromoléculas como las proteínas, el ADN y el ARN contienen tantos sitios de posibles enlaces
de hidrógeno o interacciones iónicas, van der Waals o hidrófobas que el efecto acumulativo de las
muchas pequeñas fuerzas de unión puede ser enorme.
Cadena de agua en el citocromo f. La proteína tiene un hemo unido, su
ión de hierro facilita el flujo de electrones durante la fotosíntesis. El flujo de
electrones está acoplado al movimiento de los protones a través de la
membrana, lo que probablemente implica "saltos de protones" en esta
cadena de moléculas de agua unidas.
Los solutos afectan las propiedades coligativas de las soluciones acuosas

Los solutos de todo tipo alteran determinadas propiedades físicas del disolvente, el agua: su presión de
vapor, punto de ebullición, punto de fusión (punto de congelación) y presión osmótica. Estos se llaman propiedades
coligativas ( coligativo que significa "unidos"), porque el efecto de los solutos en las cuatro propiedades
tiene la misma base: la concentración de agua es menor en las soluciones que en el agua pura.

Las moléculas de agua tienden a moverse de un región de mayor concentración de agua a una
de menor concentración de agua, de acuerdo con la tendencia natural de un sistema a
desordenarse.

Cuando dos soluciones acuosas diferentes están separadas por un membrana semipermeable ( uno
que permite el paso de agua pero no moléculas de soluto), las moléculas de agua que se difunden desde
la región de mayor concentración de agua a la región de menor concentración de agua producen presión
osmótica
Presión osmótica, π , medida como la fuerza necesaria para resistir el movimiento del agua, se
aproxima mediante la ecuación de van't Hoff:

π = icRT

en el cual R es la constante del gas y T es la temperatura absoluta. El símbolo yo es el factor de van't

Hoff, que es una medida del grado en que el soluto se disocia en dos o más especies iónicas. El
termino ic es el
osmolaridad de la solución, el producto del factor de van't Hoff yo y la concentración molar del
soluto C.
EJEMPLO RESUELTO 01

Fuerza osmótica de un orgánulo I

 EJEMPLO RESUELTO 02

Fuerza osmótica de un orgánulo II

Supongamos que decidimos usar una solución de un polisacárido, digamos glucógeno, para equilibrar la
fuerza osmótica de los lisosomas (descrito en el Ejemplo resuelto
01). Suponiendo un polímero lineal de 100 unidades de glucosa, calcule la cantidad de este polímero
necesaria para lograr la misma fuerza osmótica que la sacarosa.
solución en el Ejemplo resuelto 01. La M r del polímero de glucosa es ~ 18.000 y, como la sacarosa, no se
ioniza en solución.

O, cuando se tienen en cuenta cifras significativas,

C glucógeno = 5 kg / L, una concentración absurdamente alta. Las células del hígado

y los músculos almacenan carbohidratos no tan

azúcares de bajo peso molecular tales como glucosa o sacarosa

pero como el polímero de alto peso molecular glucógeno. Esto
permite que la célula contenga una gran masa de glucógeno con un
efecto mínimo sobre la osmolaridad del citosol.
2. Ionización de agua, ácidos débiles y bases débiles

Aunque muchas de las propiedades solventes del agua se pueden explicar en términos
de la H descargada 2 O molécula, el pequeño grado de ionización del agua a iones de hidrógeno (H +)
e iones de hidróxido (OH-) también debe tomarse en
cuenta. Como todas las reacciones reversibles, la ionización del agua se puede describir mediante una
constante de equilibrio.

Cuando los ácidos débiles se disuelven en agua, aportan H + por ionización; las bases débiles
consumen H + al protonarse. Estos procesos también se rigen por constantes de equilibrio.
El agua pura está ligeramente ionizada

Las moléculas de agua tienen una ligera tendencia a sufrir una ionización reversible para producir un ión de
hidrógeno (un protón) y un ión de hidróxido, dando el equilibrio.

H 2 O ⇌ H ++ OH- (1)

Aunque comúnmente mostramos el producto de disociación del agua como H1, los protones libres no
existen en solución; Los iones de hidrógeno formados en el agua son
inmediatamente hidratado para formar iones de hidronio H 3 O +).
los ionización de agua puede ser
Medido por sus eléctrico
conductividad; puro agua lleva
corriente eléctrica como H 3 O + migra hacia el cátodo
y OH- hacia el
ánodo.

El movimiento de los iones hidronio e hidróxido en el

campo eléctrico es extremadamente rápido en
comparación con el de otros iones como Na +, K + y
Cl-.
La posición de equilibrio de cualquier reacción química está dada por su
constante de equilibrio, K eq a veces expresado simplemente como K). Para la reacción
generalizada.

A + B ⇌ C + D (2)

la constante de equilibrio K eq se puede definir en términos de las concentraciones de reactivos (A y B)

y productos (C y D) en equilibrio:
La ionización del agua se expresa mediante una constante de equilibrio

El grado de ionización del agua en equilibrio es pequeño; a 25 ° C solo alrededor

dos de cada 109 las moléculas en agua pura se ionizan en cualquier instante. La constante de
equilibrio para la ionización reversible del agua es:

(3)
En agua pura a 25 ° C, la concentración de agua es 55,5 M —Gramos de H 2 O en 1 L dividido por su
gramo de peso molecular: (1,000 g / L) / (18.015 g / mol) —y
es esencialmente constante en relación con las concentraciones muy bajas de H + y OH-, es decir, 1 x
10- 7 M. En consecuencia, podemos sustituir 55,5 M en la expresión constante de equilibrio para
producir.

Al reorganizar, esto se convierte en (55,5 M)

(Keq) = [H +] [OH-] = Kw (4)

donde Kw designa el producto (55,5 M) (Keq), el producto iónico del agua

a 25 ° C.
El valor de Keq, determinado por mediciones de conductividad eléctrica de agua pura, es 1.8
x 10- dieciséis M a 25 ° C. Sustituyendo este valor por Keq en la ecuación re da el valor del producto iónico del agua:

Kw = [H +] [OH-] = (55,5 M) (1,8 x 10- dieciséis M) = 1.0 x 10- 14 METRO

Por tanto, el producto [H +] [OH-] en soluciones acuosas a 25 ° C siempre es igual a 1 x 10- 14 METRO 2. Cuando
hay concentraciones exactamente iguales de H + y OH-, como en el agua pura, la solución se dice
vencer pH neutro. A este pH, la concentración de H + y OH- se puede calcular a partir del producto iónico del agua de la siguiente
manera:

Kw = [H +] [OH-] = [H +] 2 = [ OH-] 2

Resolver para [H +] da

[H +] = [OH-] = 10- 7 METRO

EJEMPLO RESUELTO 03

Cálculo de [H +]
EJEMPLO RESUELTO 04

Cálculo de [H +]
La escala de pH designa las concentraciones de H + y OH-

El producto iónico del agua, Kw, es la base de la escala PH. Es un medio conveniente de designar la
concentración de H + (y por lo tanto de OH-) en cualquier solución acuosa en el rango entre 1.0 M H
+ y 1.0 M OH-. El término pH se define por la expresión.

El símbolo p denota "logaritmo negativo de". Para una solución precisamente neutra a 25 ° C, en la que la
concentración de iones de hidrógeno es 1.0 x 10- 7 M, el pH se puede calcular de la siguiente manera:
La escala de pH.

El pH de
algo acuoso
fluidos.
Los ácidos y bases débiles tienen constantes características de disociación ácida

Los ácidos clorhídrico, sulfúrico y nítrico, comúnmente llamados ácidos fuertes, están completamente ionizados
en soluciones acuosas diluidas; las bases fuertes NaOH y KOH también están completamente ionizadas.

De mayor interés para los bioquímicos es el comportamiento de los ácidos y bases débiles, aquellos que no
están completamente ionizados cuando se disuelven en agua. Estos son ubicuos en los sistemas biológicos y
juegan un papel importante en el metabolismo y su regulación. El comportamiento de las soluciones acuosas de
ácidos y bases débiles se comprende mejor si primero definimos algunos términos.
Los ácidos pueden definirse como donantes de protones y las bases como aceptores de protones.

Cuando un donante de protones como el ácido acético (CH 3 COOH) pierde un protón, se convierte en el
correspondiente aceptor de protones, en este caso el anión acetato
(CH 3 ARRULLO-). Un donante de protones y su correspondiente aceptor de protones forman un par conjugado

ácido-base, relacionado por la reacción reversible

CH 3 COOH ⇌ CH 3 COO- + H + HA ⇌ A- +

H+

para cual
Las constantes de equilibrio para las reacciones de ionización
generalmente se llaman constantes de ionización o constantes
de disociación ácida, a menudo designado Ka.

Cuanto más fuerte es la tendencia a disociar un

protón, más fuerte es el ácido y más bajo es su pKa.
Las curvas de titulación revelan el pKa de los ácidos débiles

La titulación se utiliza para determinar la cantidad de ácido en una solución determinada. Un volumen medido del ácido se titula con una
solución de una base fuerte, generalmente hidróxido de sodio (NaOH), de concentración conocida. El NaOH se agrega en pequeños
incrementos hasta que el ácido se consume (neutraliza), según se determina con un colorante indicador o un medidor de pH.

Un gráfico de pH frente a la cantidad de NaOH añadido (un curva de titulación), revela el pKa del ácido débil. Considere la titulación
de una solución 0.1 M de ácido acético con 0.1 M NaOH a 25 ° C.

H 2 O ⇌ H + + OH- (5)

HAc ⇌ H + + Ac- (6)

Los equilibrios deben ajustarse simultáneamente a sus constantes de equilibrio

características, que son, respectivamente,

Kw = [H +] [OH-] = 1.0 x 10- 14 METRO 2 (7)

(8)
3. Amortiguación contra cambios de pH en sistemas biológicos

Casi todos los procesos biológicos dependen del pH; un pequeño cambio en el pH produce un gran cambio
en la velocidad del proceso. Esto es cierto no solo para las muchas reacciones en las que el ión H +
participa directamente, sino también para aquellas reacciones en las que no hay un papel aparente para los
iones H +.

Como señalamos anteriormente, las interacciones iónicas están entre las fuerzas que estabilizan una molécula de
proteína y permiten que una enzima reconozca y se una a su sustrato.

Las células y los organismos mantienen un pH citosólico específico y constante, normalmente cercano a 7,
manteniendo las biomoléculas en su estado iónico óptimo. En organismos multicelulares, el pH de los fluidos
extracelulares también está estrictamente regulado. La constancia del pH se logra principalmente mediante
tampones biológicos: mezclas de ácidos débiles y sus bases conjugadas.
Los tampones son mezclas de ácidos débiles y sus bases conjugadas

Amortiguadores son sistemas acuosos que tienden a resistir los cambios de pH cuando se agregan pequeñas
cantidades de ácido (H +) o base (OH-). Un sistema tampón consta de un ácido débil (el donante de protones) y su
base conjugada (el aceptor de protones).

El amortiguamiento resulta de dos equilibrios de

reacción reversibles que ocurren en un
solución de casi igual
concentraciones de un donante de protones y su aceptor
de protones conjugado.

Siempre que se agrega H + u OH- a un tampón, el

resultado es un pequeño cambio en la relación de las
concentraciones relativas del ácido débil y su anión y,
por lo tanto, un pequeño cambio en el pH.

El par ácido acético-acetato como sistema tampón.

La ecuación de Henderson-Hasselbalch relaciona el pH, el pKa y la concentración de tampón

La forma de la curva de titulación de cualquier ácido débil se describe mediante la ecuación de

Henderson-Hasselbalch, que es importante para comprender la acción amortiguadora y el equilibrio ácido-base en
la sangre y los tejidos de los vertebrados.

Para la ionización de un ácido débil HA, la ecuación de Henderson-Hasselbalch se puede derivar de la siguiente manera:

(9)
Ácidos o bases débiles Buffer de células y tejidos contra cambios de pH

Los fluidos intracelulares y extracelulares de organismos multicelulares tienen un pH característico y

casi constante.

La primera línea de defensa del organismo contra los cambios en el pH interno la proporcionan los
sistemas tampón.

El citoplasma de la mayoría de las células contiene altas concentraciones de proteínas, y estas

proteínas contienen muchos aminoácidos con grupos funcionales que son ácidos o bases débiles.
Los nucleótidos como el ATP, así como muchos metabolitos de bajo peso molecular, contienen grupos ionizables
que pueden aportar poder tampón al citoplasma.

Dos tampones biológicos especialmente importantes son los sistemas de fosfato y bicarbonato. El sistema tampón
de fosfato, que actúa en el citoplasma de todas las células,
consta de H 2 CORREOS-
4 como donante de protones y HPO 2 - 4 como aceptor de protones:

El sistema tampón de fosfato es máximamente eficaz a un pH cercano a su pKa de 6,86

y así tiende a resistir pH cambios en el rango entre aproximadamente 5.9 y 7.9.

Por tanto, es un amortiguador eficaz en fluidos biológicos; en los mamíferos, por ejemplo, los fluidos extracelulares y la
mayoría de los compartimentos citoplásmicos tienen una pH en el rango de 6,9 a 7,4.
 EJEMPLO RESUELTO 05

Ionización de histidina

Calcule la fracción de histidina que tiene su cadena lateral de

imidazol protonada a pH 7.3. Los valores de pKa para histidina son
pK1 = 1.8, pK2 (imidazol) = 6.0 y pK3 = 9.2

Ionización de histidina.
EJEMPLO RESUELTO 06 Molaridad = moles de soluto / Volumen de solución (L)

Tampones de fosfato
★ Molaridad = moles de soluto / Volumen de solución (L)

★ (C1) (V1) = (C2) (V2)

★ pH + pOH = 14

El pH óptimo de algunas enzimas.

4. Agua como reactivo

El agua no es solo el solvente en el que ocurren las reacciones químicas de las células vivas; muy a
menudo es un participante directo en esas reacciones. La formación de ATP a partir de ADP y fosfato
inorgánico es un ejemplo de reacción de condensación en el que se eliminan los elementos del
agua. El reverso de esta reacción, la escisión acompañada de la adición de los elementos del agua,
es una reacción de hidrólisis.
Reacciones de hidrólisis también son responsables de la despolimerización enzimática de
proteínas, carbohidratos y ácidos nucleicos. Reacciones de hidrólisis, catalizadas por enzimas
llamadas hidrolasas, son casi invariablemente
exergónico; al producir dos moléculas a partir de una, conducen a un aumento en la aleatoriedad
del sistema.

los formación de polímeros celulares de sus subunidades por simple inversión de la hidrólisis (es
decir, por reacciones de condensación) sería endergónico y por lo tanto no ocurre.

El agua y el dióxido de carbono son los productos finales de la oxidación de combustibles como la glucosa.

El CO2 producido por la oxidación de la glucosa.

es convertido en

eritrocitos a los más solubles

HCO -
3
5. La aptitud del medio acuoso para los organismos vivos

Los organismos se han adaptado eficazmente a su entorno acuoso y han desarrollado medios para
explotar las propiedades inusuales del agua.
los alto calor específico de agua (la energía térmica necesaria para elevar la temperatura de 1 g de
agua en 1 ° C) es útil para las células y los organismos porque permite que el agua actúe como un " tampón
de calor, ”Mantener la temperatura de un organismo relativamente constante a medida que fluctúa la
temperatura del entorno y se genera calor como un subproducto del metabolismo.
Además, algunos vertebrados aprovechan el alto calor de vaporización del agua utilizando (perdiendo así) el
exceso de calor corporal para evaporar el sudor.
Las plantas aprovechan el alto grado de cohesión interna del agua líquida, debido a los enlaces de
hidrógeno, como medio de transporte de nutrientes disueltos desde las raíces hasta las hojas durante
el proceso de transpiración.
Incluso la densidad del hielo, menor que la del agua líquida, tiene importantes consecuencias biológicas
en los ciclos de vida de los organismos acuáticos.
Lo más fundamental para todos los organismos vivos es el hecho de que muchas propiedades físicas y
biológicas de las macromoléculas celulares, en particular las proteínas y los ácidos nucleicos, se derivan
de su interacciones con moléculas de agua del medio circundante.