FACULTAD DE CIENCIAS BASICAS

PROGRAMA DE BIOLOGIA

ÍNDICE MITÓTICO Y CICLO CELULAR

En Meristemos Apicales de Allium cepa

TUTOR INTEGRANTES:
YOJANA PATRICIA OSCAR SOLERA COGOLLO
MANGONES JIMÉNEZ ANDREA CAROLINA MARTINEZ
Magíster en Gestión y Evaluación GUZMAN
Ambiental 29-05-2022
OBJETIVOS
 Adquirir habilidad en el reconocimiento morfológico de la interfase y fases de
la mitosis en células de cebolla (Allium cepa).
 Identificar el efecto de la colchicina sobre el índice mitótico de células
del meristemo radical de cebolla.

INTRODUCCIÓN
Uno de los postulados de la teoría celular nos dice que todas las células vienen de células
preexistentes. Por lo que las células se originan de otras células por división celular. La división
celular por mitosis es decisiva para el desarrollo de los organismos y su reproducción; aunado a
ello, es necesario que cada nueva célula sea genéticamente idéntica de la que proviene . La mitosis
es una secuencia continua de fases (profase, metafase, anafase, telofase y citocinesis) que
desarrolla una célula somática para multiplicarse. En organismos eucariotas, la división
celular por mitosis es un proceso complejo que requiere no sólo la replicación del material
genético de la célula madre y su posterior distribución a las células hijas, sino también, la
duplicación de todos los componentes intracelulares que serán necesarios para la
constitución de una nueva célula, La regulación del ciclo celular es decisiva para el
desarrollo normal de los organismos pluricelulares.

Fases del proceso mitótico

Interfase Profase Metafase Anafase Telofase

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El crecimiento en un organismo es cuidadosamente controlado regulando el ciclo celular.

En las plantas la mitosis se produce principalmente en los meristemos o zonas de
crecimiento de la planta que se encuentran fundamentalmente en los extremos de los tallos
y de las raíces. Estas regiones de crecimiento sirven para estudiar el ciclo celular porque en
cualquier momento se pueden encontrar células que están sufriendo mitosis. Para examinar
las células en la punta de una raíz de cebolla, un delgado corte de la raíz se coloca sobre un
portaobjeto y se tiñe para que los cromosomas sean visibles.
El ciclo celular está dividido en cuatro fases principales. La célula recién dividida por
mitosis comienza el estadio denominado G1 (Interface), donde la célula crece y aumenta
de tamaño. En los organismos diploides, las células contienen una cantidad diploide de
cromosomas (2n) con una copia heredada de cada progenitor. Cuando la célula ha
alcanzado cierto tamaño entra en la fase S (síntesis) que implica la duplicación del ADN
formándose una copia de cada cromosoma. Después de atravesar la fase G2 donde la célula
comprueba que se ha completado correctamente la replicación del ADN y se produce la
síntesis de los componentes necesarios para la mitosis, se inicia la llamada fase M (mitosis)
que concluye con el nacimiento de las dos células hijas.

Fases del ciclo celular

La fase M se divide en varias etapas. Durante el periodo de profase los cromosomas se

condensan gracias a la mayor compactación ADN. Durante la metafase las cromátides
hermanas Producidas la replicación del ADN en la fase S se alinean en el centro de la
permaneciendo adheridas a la altura del centrómero y de múltiples

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En la anafase, las cromátides hermanas se separan y se desplazan hacia polos opuestos del
huso mitótico, con lo que una de las dos cromátides hermanas se distribuye a cada célula
hija. Finalmente, en la telofase los cromosomas segregados se des condensan y se produce
la división física del citoplasma en dos células hijas, proceso denominado citocinesis. La
membrana que envuelve a los cromosomas desaparece dando lugar a masas de cromatina.
Después de la división las células regresan a la fase G1 y el ciclo celular se completa. Si las
condiciones ambientales no son adecuadas para la entrada en el ciclo nuevamente, la célula
entra en un periodo de quiescencia en el que puede permanecer
PROCEDIMIENTO largo tiempo.
MATERIALES Y REACTIVOS
1.1. Obtención De  Microscopio
Material Biologico
 Metanol - ácido acético (3:1)
Colocar un bulbo de Allium cepa en  Portaobjetos
un recipiente con agua hasta que las
raices alcancen 2 a 6 cm  HCI 10% (20 ml)
 Laminillas cubreobjetos
 Aceto-orceína
 Caja de Petri
1.2. Fijación
 Aceite de inmersión
Corte las raices y en una caja Petri  Papel absorbente
adicione HCl al 10% por 8 min y lave
4 o 5 veces con agua destilada  Meristemos de
raíces de cebolla (Allium
cepa) *
1.3. Coloración 1.5. La preparación
Adicone Aceto-Orceina que cubra presentará el aspecto de una dispersión
toda la muestra por 20 minutos de células en diferentes estadios de
división celular. Pueden verse los
cromosomas coloreados por la
1.4. Observación orceína de color morado.
Corte 3 mm del extremo de cada raíz
teñida, aplaste cuidadosamente entre 1.6. Observe al microscopio con el
el porta y cubre objetos. Observe en objetivo de menor aumento y ubique el
40x identificando las fases de la material. Luego Observe con el objetivo
mitosis de mayor aumento e identifique
cuidadosamente cada una de las fases de
la mitosis; a medida que las vaya
IM=Número de células en mitosis x 100 Número de células observadas
identificando esquematice sus
observaciones.

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1.7. Calcule el índice mitótico (IM) contando aproximadamente 300 células. Para esto
mueva varias veces el campo visual y cuente en cada ocasión el número de células en
interfase y en mitosis hasta completar el número indicado, utilizando el objetito de
40x
1.8. Calcule los índices de las fases profásico (IP),
metafásico (IM), anafásico (IA) y telofásico (IT), de acuerdo
con la siguiente fórmula.
IM de la fase = Número de células en cada fase mitótica x 100
Número de células mitosis

RESULTADOS Y ANALISIS
Entendiendo que el meristemo radicular se encuentra en una posición
subterminal de la raíz, protegido en su avance a través de la tierra
por la cofia o caliptra. En los meristemos apicales de las raíces se
forman 5 tipos de tejidos: epidermis, estela (vasos y periciclo), tejido
fundamental (córtex y endodermis), la caliptra, y el centro
quiescente. Como las células de las plantas no se mueven, cada
célula meristemática inicial genera una fila de descendientes
que empuja a la raíz hacia el abajo.
, Las células meristemáticas presentan un núcleo grande de
cromatina condensada y una pared celular primaria delgada
que les permite dividirse continuamente por mitosis siguiendo
una asincronía uniforme, es decir, son constantes los
porcentajes de células que se encuentran en cada fase de la
división mitótica donde la célula completa la replicación y
reparación del material genético (división nuclear) en la fase S,
procede a separar y repartir dicho material en las células hijas
(mitosis) y por último la división citoplasmática (citocinesis).
Luego de realizar la metodología propuesta en esta práctica en la
preparación y observación de las muestras de tejido meristemático Figura 1. Esquema de la formación de los principales
de la zona apical para identificación de las fases mitóticas y
cambios morfológicos celulares en Allium cepa se obtuvieron los
siguientes resultados:
Las fases mitóticas comienzan con el final de la interfase que se caracteriza por presentar una
cromatina entremezclada y des compactada. Seguidamente ocurre la

tal. Estas micrografías muestran las etapas de la mitosis en células de raíz de cebolla, vistas con el microscopio óptico. (imágen

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Profase
Se observa el núcleo centrado como una entidad independiente
y fácilmente distinguible, con largas fibras de cromatina que
empiezan a condensarse en cromosomas. visibles al
microscopio óptico como estructuras individuales y plegadas
para evitar enredarse durante la distribución de ADN
cromosómico en la división celular.
Mientras tanto los centrosomas (organizador) junto al núcleo
que permiten el ensamble de microtúbulos (aster) formando el
huso mitótico.

Prometafase
Fragmentación de membrana de la envuelta nuclear que permite
entrar a los microtúbulos del uso y unirse por el cinetocoro en el
centrómero de los cromosomas. Desplazándolos gradualmente hacia
el centro de la célula
Se observa el núcleo espaciado con membrana difusa y en su interior
cromosomas individuales acompañados del nucleolo

Metafase
(20min) cromosomas en máximo grado de condensación,
alineados y centrados en la placa metafásica comienzan a ser
arrastrados hacia los polos opuestos de la célula
Se aprecia el uso mitótico unido al centro de los cromosomas
centrados

Anafase
las cromátides se separan abruptamente y comienzan a moverse hacia
los polos opuestos del uso huso (1µm/min)

Se observa un acortamiento del huso mitótico y las cromátides

divididas están más cerca de los polos opuestos

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Telofase
las cromátides han llegado ya a los polos del huso y este se desensambla y se la cromátide se desenrolla y descondensan (homogéneas)
Se forma el nucleolo y reaparece le envoltura nuclear, alrededor de los grupos de cromosomas hijos.
Se completa el proceso de mitosis y la célula experimenta la citocinesis (se divide en dos células hijas).

Observación de meristemos de cebolla en distintas fases de mitosis

IM= Número de células en mitosis x 100

Numero de células totales
IM=10 *100 = 6.90
145
Se realiza un conteo del total de células en el campo visual y se divide entre las células en
fases mitóticas para obtener el índice mitótico que describe el número de células que se
encuentran en proceso de división en una cierta cantidad de tejido (meristemático en este
caso)

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PREGUNTAS DE ACTIVIDAD COMPLEMENTARIA

1. ¿Cuál es el efecto de la colchicina sobre la mitosis en las células del meristemo de
las raíces de la cebolla?
La colchicina es una droga que se extrae del Colchicum hispanicum y cuyo efecto tiene
como consecuencia la despolimerización de la tubulina que forma las fibras del huso.
Al no formarse huso los cromosomas no se colocan en placa y siguen espiralizándose,
acortando su longitud, separándose más entre sí y facilitando su conteo. mientras más
se prolongue el tratamiento más se extenderán los efectos, alcanzando así
progresivamente distintas fases mitóticas.
2. ¿Cuál es objetivo del ciclo celular?, ¿Cuál es su importancia?
El ciclo celular es la base para la reproducción de los organismos. Su función no es
solamente originar nuevas células sino asegurar que el proceso se realice en forma
debida y con la regulación adecuada. Un ciclo celular típico se da en dos fases gigantes
que son: la interface que se divide en tres fases: G1, S y G2 y la mitosis que se divide
en profase, prometafase, metafase, anafase, telofase y citocinesis; En la Interface, en
G1 se produce la acumulación del ATP necesario para el proceso de división y el
incremento de tamaño celular; la fase S se caracteriza por la replicación del ADN
nuclear; finalmente, en G2, que es el tiempo que transcurre entre la fase S y el inicio de
la Mitosis, la célula se prepara para mitosis. (1, 2) Por último, el ciclo celular culmina
con la mitosis, donde se divide la cromatina duplicada de modo tal que cada célula hija
obtiene una copia del material genético o sea un cromosoma de cada tipo. El final de la
mitosis da cabida a un nuevo ciclo en G1 o puede que la célula entre en fase Go que
corresponde a un estado de reposo especial característico de algunas células, en el cual
puede permanecer por días, meses ya veces años. (1-3) Como todo proceso orgánico, el
ciclo celular está sujeto a regulación. Estas son realizadas en sitios específicos llamados
puntos de control o de chequeo, que pueden frenar o disparar diversos procesos que le
permiten a la célula proseguir con su ciclo normal de replicación del material genético,
crecimiento y división

Es de gran importancia para la célula ya que tiene como función la formación completa
de una nueva célula, impidiendo en lo posible la creación de células con múltiples
errores, lo cual le permite al organismo permanecer en un equilibrio constante,
previniendo así aquellos desórdenes que puedan perjudicar su salud; de esta manera,
todas las células están controladas por proteínas que no permiten que se presenten
situaciones desastrosas para un ser vivo.

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3. ¿Qué factores Influyen en el tiempo de duración del ciclo celular?

En general, la duración del ciclo celular es muy variable, en los organismos unicelulares
la duración está condicionada sobre todo por la disponibilidad de nutrientes y la
temperatura del medio, en los organismos pluricelulares las células tienen ciclos de
distinta duración en esta los tiempos del ciclo celular difieren incluso en células del
mismo tejido.
Los factores que influyen en la duración del ciclo celular son: el tamaño celular, el
contacto con otras células, la disponibilidad de nutrientes, la temperatura y la edad.

4. ¿Qué son cromosomas homólogos?

Cromosomas homólogos - Homologous chromosomes (sinónimo: homólogos) Los dos
cromosomas que constituyen una pareja cromosómica, uno heredado de la madre y el
otro del padre, y que contienen los mismos loci genéticos en idéntico orden.

5. ¿Qué es un cariotipo y qué utilidad tiene?

El cariotipo es el patrón cromosómico de una especie expresado a través de un
código, establecido por convenio, que describe las características de sus cromosomas.
El cariotipo es el conjunto de cromosomas en metafase de un individuo. El número de
cromosomas, y por tanto el cariotipo, es característico de cada especie.
El cariotipo permite la detección de anomalías numéricas y estructurales en la dotación
cromosómica de un individuo.

6. ¿Qué es dotación cromosómica haploide/diploide?

Haploide es un tipo de estructura celular que solamente tienen los gametos, es decir los
óvulos y los espermatozoides.
Una célula haploide significa que tiene la mitad de los cromosomas que el resto de
células somáticas que forman el organismo, las cuales son diploides. Mientras que una
célula diploide cuenta con el total de cromosomas por ejemplo los seres humanos
tenemos 46 cromosomas una célula diploide tiene 23 cromosomas. Esto se consigue
con el tipo de división celular llamado meiosis que sirve para que una vez que tenga
lugar la fecundación entre el ovulo y el espermatozoide, la dotación cromosómica
normal quede de nuevo reestablecida en el embrión que va a desarrollarse.

7. ¿Por qué los cromosomas se tiñen de morado?

Se ven los cromosomas teñidos de morado por la orceína. El aspecto reticulado, así
como el mayor tamaño de algunos núcleos corresponde a las células que se encontraban
en los procesos iniciales de la división mitótica.

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8. ¿Has observado el proceso de citocinesis? En caso afirmativo, descríbelo.

En la pasada practica de laboratorio si se

Placa Celular Pared celular original
observó el proceso de citocinesis en células
vegetales, concretamente en meristemos de la
zona apical de Allium cepa que tiene su inicio
con el fin de la ultima fase de la mitosis
(telofase).
Dado que las células vegetales están rodeadas
de una pared celular rígida, no pueden crear un
anillo contráctil en la superficie celular que
separe la célula en dos (como en células
animales). En su lugar, se dividen fabricando
una membrana plasmática y una pared celular
alrededor de los dos núcleos hijos.
La citocinesis en los vegetales se inicia durante
la anafase tardía o la telofase temprana, cuando Núcleos hijos
un grupo de pequeñas vesículas que proceden
del complejo de Golgi, se alinean a lo largo del LA CITOCINESIS Y LA FORMACIÓN DE LA
ecuador del huso. Estas vesículas, que contienen PLACA CELULAR EN UNA CÉLULA VEGETAL.
polisacáridos y glicoproteínas necesarias para la Esta micrografía electrónica muestra una célula
formación de la pared celular, son dirigidas al vegetal en la telofase tardía. Los núcleos hijos, con sus
ecuador del huso por el fragmoplasto, un grupo juegos de cromosomas, son parcialmente visibles como
un material oscuro en los extremos izquierdo y derecho
de microtúbulos paralelos derivados de los
de la micrografía, y la placa celular en formación, se
microtúbulos polares y que están observa como una línea de vesículas en la región media
orientados perpendicularmente a la dirección en de la célula. Los microtúbulos del fragmoplasto se
la que se va formando la nueva pared celular. orientan perpendicularmente a la placa celular.
Después de su llegada al ecuador, las
vesículas derivadas del complejo de Golgi se
fusionan
para formar un gran saco aplastado, denominado placa celular, que representa la pared
celular en proceso de formación. El contenido del saco se junta para formar la
parte no celulósica de la pared celular primaria, que se expande hacia fuera al mismo
tiempo que se forman microtúbulos y vesículas en los laterales de la placa celular que va
avanzando. Al final, la placa celular en expansión contacta con la pared celular original,
separándose de esta manera las células hijas entre sí. La nueva pared celular se completa
posteriormente mediante la deposición de microfibrillas de celulosa. Los plasmodesmos
que forman canales de continuidad entre los citoplasmas de las células vegetales
adyacentes también están presentes en la placa celular y en la nueva pared a medida que se
forman.

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Conclusiones
De la práctica anterior se pudo concluir que:
 El estudio citológico del ciclo celular se basó tradicionalmente en el análisis de la
mitosis, ya que éste es el momento en que se producen alteraciones morfológicas
de las células fácilmente apreciables.
 Mitosis es sinónimo de cariocinesis o división del núcleo y su punto de comienzo se
identifica al microscopio óptico por las transformaciones que sufre el núcleo en el
que empiezan a hacerse patentes los cromosomas.
 El final de la mitosis se produce al terminar la desespiralización de los cromosomas
que dejan así de ser visibles. Solapada con el final de la mitosis se produce la
división del citoplasma o citocinesis.
 El conjunto de la mitosis más la citocinesis es la división celular. Al finalizar
ésta comienza la interfase.
 Meristemo radicular de cebolla (Allium cepa) es obtenido el material biológico para
esta práctica
 Cerca del extremo apical de las raíces se encuentra un conjunto de células que
proliferando hacen que crezca la raíz. Es la zona meristemática cuyas células sufren
ciclos celulares continuos y en condiciones normales no tienen sincronización
alguna entre ellas.

Bibliografía

Wayne M. Becker, Lewis J. Kleinsmith y Jeff Hardin. PEARSON EDUCATION,

S.A., Madrid, 2007, EL MUNDO DE LA CÉLULA (pág. 629-639)

Megías, M. P. M. (2019). Tejidos vegetales. Meristemo primario radicular. Atlas de

Histología Vegetal y Animal. https://mmegias.webs.uvigo.es/1-vegetal/v-imagenes-

grandes/meristemo_primario.php#n

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